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1、
第四部分 淺嘗現代生物技術 實驗12 乳酸脫氫酶同工酶的分離
一、乳酸脫氫酶
1.簡稱:____
2.作用:在____________存在下,乳酸脫氫酶能使______產生________,具體反應式見下:
________________________________________________________________________。
答案:1.LDH
2.氧化型輔酶NAD+ 乳酸 丙酮酸 CH3-CHOH-COOH+NAD+LDH,CH3-CO-COOH+NADH+H+
(乳酸) (丙酮酸)
二、同工酶
1.概念:指能______
2、______,但其________________的一組酶。
2.實例:LDH有____種同工酶。
3.LDH同工酶:
結構特點:由____種亞基____和____以不同比例組成的________。
具體類型:______、______、______、______和M4。
存在特點:在動物的________________中,LDH各種同工酶的______不同。
答案:1.催化同一化學反應 酶蛋白的分子組成不同
2.5
3.2 L M 四聚體 H4 H3M H2M2 HM3 細胞分化及胚胎發(fā)育過程 比例
三、乳酸脫氫酶同工酶的分離實驗
1.實驗方法:__________
3、__法。
2.染色:
(1)方法:________法
(2)染色原理:在LDH的作用下,NAD+被還原為NADH,NADH將______和______傳遞給甲硫吩嗪(PMS),還原的甲硫吩嗪再將______和______傳遞給氯化氮藍四唑(NBT),還原的氮藍四唑呈____色,展現在電泳凝膠上。
3.實驗材料:牛的______,其余略。
4.實驗步驟:
制備________
↓
加樣
↓
________
↓
________
答案:1.聚丙烯酰胺電泳
2.(1)活性染色 (2)電子 H+ 電子 H+ 藍
3.血清
4.電泳凝膠板 電泳 染色
2