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1、2022年高二生物 實(shí)驗(yàn)六 葉綠體中色素的提取和分離 人教版 Ⅰ 實(shí)驗(yàn)程序 一、實(shí)驗(yàn)原理 葉綠體中的色素能夠溶解在有機(jī)溶劑丙酮中，所以，可以通過(guò)研磨法用丙酮提取葉綠體中的色素(若無(wú)丙酮亦可用酒精代替)。 層析液（在60℃～90℃下分餾出來(lái)20份石油醚 + 2份丙酮 + 1份苯）是一種脂溶性很強(qiáng)的有機(jī)溶劑。葉綠體中的色素在層析液中的溶解度不同(溶解度高的隨層析液在濾紙上擴(kuò)散得快；溶解度低的隨層析液在濾紙上擴(kuò)散得慢。)，所以，可以用紙層析法分離出葉綠體中的色素。 二、目的要求 1.初步掌握提取和分離葉綠體中色素的方法。 2.探索葉綠體中有幾種色素。 三、重點(diǎn)與難點(diǎn) 重點(diǎn): 1

2、.初步掌握提取和分離葉綠體中色素的方法。 2.探索葉綠體中有幾種色素。 難點(diǎn): 1.該實(shí)驗(yàn)中應(yīng)注意的問(wèn)題。 2.培養(yǎng)學(xué)生獨(dú)立實(shí)驗(yàn)的能力,掌握探究實(shí)驗(yàn)的方法。 四、材料用具 新鮮的綠色葉片(如菠菜葉片)。 干燥的定性濾紙，燒杯(100mL)，研缽，小玻璃漏斗，尼龍布，毛細(xì)吸管，剪刀，小試管，培養(yǎng)皿蓋，藥勺，量筒(10mL)，天平。 丙酮，層析液，二氧化硅，碳酸鈣。 五、方法步驟 （1）提取綠色葉片中的色素：稱取5g綠色葉片，剪碎放入研缽中，向其中加入少許碳酸鈣和二氧化硅，再加5mL丙酮，進(jìn)行迅速充分研磨，將研磨液倒入漏斗中過(guò)濾出色素液。 （2）制備濾紙條: （3）色素分離

3、——紙層析法: （4）觀察實(shí)驗(yàn)結(jié)果: （5）整理、洗手 提取的關(guān)鍵：①葉片要新鮮濃綠；②研磨要迅速充分 分離的關(guān)鍵：①濾液細(xì)線要：細(xì)、齊、快、多；②濾液細(xì)線不能觸及層析液。 ☆用毛細(xì)吸管劃線時(shí)間長(zhǎng)易損傷紙纖維,效果欠佳,改用玻璃片印跡,效果好。 結(jié)論:葉綠體含有四種色素,胡蘿卜素在最上端,呈橙黃色；其次是葉黃素，呈黃色；中間是藍(lán)綠色的葉綠素a ；下端是黃綠色的葉綠素b。 口訣記憶：胡黃ab 注意:本實(shí)驗(yàn)丙酮加入3mL足夠，研磨液用杵棒推擠，即可擠出較濃的色素提取液，連同糊狀物直接倒入小燒杯，不需過(guò)濾，但擠出的研磨液仍可稱為“過(guò)濾液”。 Ⅱ 隨堂演練 1.通過(guò)紙層析分離葉綠體

4、色素，結(jié)果在濾紙條上出現(xiàn)四條色素帶，從上到下依次為( ) A.胡蘿卜素、葉黃素、葉綠素a、葉綠素b B.胡蘿卜素、葉綠素a、葉綠素b、葉黃素 C.葉綠素b、葉綠素a、葉黃素、胡蘿卜素 D.葉黃素、葉綠素a、葉綠素b、胡蘿卜素 2.下列關(guān)于“葉綠體色素提取和分離”的實(shí)驗(yàn)描述中，不屬于實(shí)驗(yàn)要求的是( ) A.提取高等植物葉綠體中的色素 B.用紙層析法分離色素 C.了解各種色素的吸收光譜 D.驗(yàn)證葉綠體中所含色素的種類 3.用紙層析法將色素進(jìn)行分離,在濾紙條上出現(xiàn)的最窄的一條色素帶的顏色是( ) A.黃色

5、 B.橙黃色 C.黃綠色 D.藍(lán)綠色 4.提取葉綠體中的色素時(shí)要加丙酮，其原因是( ) A.讓色素溶解 B.防止葉綠素被破壞 C.便于將葉片研磨成勻漿 D.促使葉綠體中色素分離 5.在葉綠體色素的提取和分離實(shí)驗(yàn)中，在濾紙條上擴(kuò)散速度最快的色素是( ) A.葉綠素a B.葉綠素b C.胡蘿卜素 D.葉黃素 6.綠色植物的光合作用中，葉綠素是( ) A.光合作用的原料 B.光合作用的產(chǎn)物 C.能量轉(zhuǎn)換器 D.

6、氫的接受器 7.下列作用不屬于葉綠素的功能的是( ) A.吸收光能 B.利用光能使水分解 C.利用光能合成ATP D.固定和還原二氧化碳 8.觀察葉綠體色素的熒光現(xiàn)象,可將盛有葉綠體色素溶液的試管,讓光線照射。如果置葉綠體色素溶液于??????光下,則呈綠色;如置于?????光下,則溶液呈現(xiàn)紅色。 透射；反射 Ⅲ　課后作業(yè) 1、在圓形濾紙的中央，點(diǎn)上葉綠體色素的提取液進(jìn)行層析，隨著層析液從濾紙的中央向四周擴(kuò)散，形成四個(gè)色素環(huán)帶，排在最里圈的色素是( ) A.橙黃色 B.黃綠色 C.藍(lán)綠色 D.黃色 2、生物學(xué)家恩格曼將可見光通過(guò)三棱鏡后照射在絲狀綠藻上

7、，發(fā)現(xiàn)原來(lái)絲狀綠藻周圍均勻分布的好氧性細(xì)菌發(fā)生重新分布， 不同區(qū)域聚集著不同數(shù)量的細(xì)菌(如圖)，請(qǐng)分析回答: （1）細(xì)菌重新分布時(shí)，主要聚集在 光投射區(qū)的綠藻周圍。 （2）發(fā)生這種現(xiàn)象的原因是，綠藻細(xì)胞中的葉綠素主要吸收 光，進(jìn)行 作用，放出的 多，以滿足好氧型細(xì)菌的需要。 (1)紅光和藍(lán)紫 (2)紅光和藍(lán)紫 光合 氧氣 3、在做“葉綠體中色素的提取和分離”實(shí)驗(yàn)時(shí)，向研缽中加入SiO2的目的是 ，加入 CaC03的目的是 ；在盛有層析液的燒杯上蓋上培養(yǎng)皿蓋的目的是

8、 ，在濾紙條上擴(kuò)散速度最慢的色素帶是 ，其顏色是 。 了使研磨充分 防止在研磨過(guò)程中，葉綠素受到破壞 防止層析液揮發(fā)葉綠素b黃綠色 4、某同學(xué)在做“葉綠體中色素的提取分離”實(shí)驗(yàn)時(shí)，操作情況如下所述，結(jié)果實(shí)驗(yàn)失敗，請(qǐng)指出其錯(cuò)誤所在: （1）將5克新鮮完整的菠菜葉，放在研缽中，加入丙酮、石英砂、CaCO3以后，迅速研磨。 （2）用毛細(xì)吸管吸取少量濾液，沿鉛筆線處小心均勻地劃出一條濾液細(xì)線，并連續(xù)迅速地重復(fù)劃2～3次。 （3）把劃好細(xì)線的濾紙條插入層析液中，并不斷搖晃，以求加快色素在濾紙條上的擴(kuò)散。 （1）未去除粗葉脈和將葉剪碎，這

9、樣降低了葉綠素的提取率 （2）上一次濾夜細(xì)線未干燥，即進(jìn)行下一次劃線，使濾液線過(guò)粗或紙上色素量較低 （3）由于搖晃，層析液接觸液線，溶解了色素。 5、回答實(shí)驗(yàn)“葉綠體中色素的提取和分離”的下列問(wèn)題。 分別在A、B、C三個(gè)研缽中加2克剪碎的新鮮菠菜綠葉，并按下表所示添加試劑，經(jīng)研磨、過(guò)濾得到三種不同顏色的溶液，即：深綠色、黃綠色(或褐色)、幾乎無(wú)色。 處 理 A B C SiO2（少量） + + + CaCO3（少量） － + + 95%乙醇（10毫升） + － + 蒸餾水（ 10毫升） － + － 處

10、理 A B C SiO2（少量） + + + CaCO3（少量） － + + 95%乙醇（10毫升） + － + 蒸餾水（ 10毫升） － + － 注："+"表示加；"－"表示不加?！　? 試回答： （1）A處理得到的溶液顏色是　　　，原因是　　　　　　　 　　　　　。 （2）B處理得到的溶液顏色是　　　　　　，原因是　　　　　　　　 　　　　。 （3）C處理得到的溶液顏色是　　　　，原因是　　　　　　　　 　　　 　　。 （4）提取和分離葉綠體中色素的正確順序應(yīng)該是?。ā　。? A．進(jìn)行紙層析→制取濾液→

11、在濾紙條上畫線→將實(shí)驗(yàn)材料研磨 B．制取濾液→進(jìn)行紙層析→在濾紙條上畫線→制取濾液→再畫線 　 C．將實(shí)驗(yàn)材料剪碎、研磨→在濾紙條上畫線→制取濾液→進(jìn)行紙層析 D．將實(shí)驗(yàn)材料剪碎、研磨→制取濾液→在液紙條上畫線→進(jìn)行紙層析 （5）在葉綠體色素的分離實(shí)驗(yàn)中，要使色素帶清晰又整齊，應(yīng)采取的措施是　　　　。（寫序號(hào)） 　 ①定性濾紙要干燥?、诩羧V紙條一端兩角?、蹫V液細(xì)線畫細(xì)而直　 ④重復(fù)畫線?、萆w上培養(yǎng)皿蓋 （6）色素下行分離法也能將葉綠體中四種色素分離，具體做法如圖所示，在圓形濾紙上倒入少量色素濾液，隨后不間斷地倒入層析液，在玻璃管的底部用抽氣機(jī)不斷地抽氣。已知胡蘿卜素遇Al2O3 會(huì)呈紅色，其余色素遇Al2O3 不改變其原有的顏色，問(wèn)：最先進(jìn)入Al2O3 的色素帶呈　（　?。? A．橙黃色 　B．紅色　C．藍(lán)綠色　 D．黃綠色 （7）把葉綠體色素濾液放在自然光源和三棱鏡之間，從棱鏡的另一側(cè)觀察連續(xù)光譜中的明顯變暗的區(qū)域是?。ā　。? A．黃光和藍(lán)紫光區(qū)　B．綠光和紅光區(qū)　C．紅光和藍(lán)紫光區(qū)　D．黃光和綠光區(qū) (1)黃綠色(或褐色) 葉綠素不是很穩(wěn)定，容易被分解 (2)幾乎無(wú)色 色素不溶于水 (3)深綠色 CaCO3可以保護(hù)色素不被破壞(4)D (5)①②③④ (6)A (7)C