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1、高三生物二輪專題復習 題型增分練 四、加試非選擇題（32～33題）加試特訓1 生物技術實踐(A)新人教版 1．尿素是一種高濃度氮肥且長期施用沒有不良影響，但尿素只有通過土壤中某些細菌的分解作用，才能被植物吸收利用。某同學要分離出土壤中能分解尿素的細菌，并嘗試進行計數，培養(yǎng)基配方如下： K2HPO4 NaCl H2O 葡萄糖 尿素 酚紅 瓊脂 0.12 g 0.12 g 15 mL 0.025 g 2.0 g 0.25 mg 0.5 g (1)分解尿素的細菌都能合成________，該種細菌在生態(tài)平衡中起到______________的作用。 (2)根據培養(yǎng)基的

2、成分判斷，該同學能否分離出土壤中分解尿素的細菌？________(填“能”或“不能”)，原因是_______________________________________________________ ________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 (3)分離得到分解尿素的細菌后，如果要擴大培養(yǎng)，則應選擇________培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。培養(yǎng)一

3、段時間后，使用________對微生物細胞進行計數。計數過程中，下列哪種行為會影響計數的準確性________。 A．計數時直接從靜置培養(yǎng)的試管底部取培養(yǎng)液進行計數 B．如果方格內微生物細胞數量多于300個，培養(yǎng)液先稀釋后再計數 C．如果微生物細胞有粘連，要數出團塊中的每一個細胞 D．壓在方格線上的細胞只計左線和上線上的細胞數 答案　(1)脲酶　參與氮循環(huán)(或維持氮平衡)　(2)不能　瓊脂是未被純化的混合物，內含一定的含氮化合物，尿素不是唯一氮源，不能選擇出只以尿素為氮源的微生物　(3)液體　血細胞計數板　A 解析　分解尿素的細菌都能合成脲酶，因此可以選用以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基來

4、分離尿素分解菌，并且用瓊脂糖來代替瓊脂作為微生物培養(yǎng)基的固化劑，這樣就使培養(yǎng)基中只含有尿素這一種含氮化合物，有利于對這種細菌的篩選。(1)含有脲酶的細菌將尿素降解為氨作為其生長的氮源，從而也起到維持生物圈氮元素平衡的作用。(2)因為瓊脂是一種未被純化的混合物，內含一定量的含氮化合物，不利于目的菌的篩選，所以該培養(yǎng)基不能分離出分解尿素的細菌。(3)擴大培養(yǎng)需要使用液體培養(yǎng)基，微生物的計數可以采用涂布分離法或利用血細胞計數板進行顯微計數，結合后續(xù)選項可以看出本題采用的是后者。計數過程需要注意操作規(guī)范，如A選項所述的操作會影響計數的準確性，計數前應該把試管上下倒轉數次，使細菌分布均勻，再取培養(yǎng)液進行

5、計數。 2．某市葡萄種植基地為解決葡萄滯銷易腐爛問題，引進果酒、果醋生產線進行葡萄的深加工，獲得了較好的效益，其生產流程如圖所示，據圖回答： (1)在篩選菌種A時，需要在接種前用________________法對葡萄果汁進行滅菌。 (2)在純化菌種A時接種了5個平板，每個平板均接種了0.1 mL樣品并培養(yǎng)。其中乙平板的菌落分布如圖，純化菌種A的接種方法是____________，推測出現平板乙可能的操作失誤是________________。 (3)與微生物培養(yǎng)基相比，植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基常需添加生長素和____________。 (4)將葡萄加工成果汁時，為提高果汁的產量和品

6、質，應加入適量的______酶，該酶能破壞植物細胞的________(填細胞結構)。 答案　(1)高壓蒸汽滅菌　(2)涂布分離法　涂布不均勻(3)細胞分裂素　(4)果膠(果膠酶和纖維素)　細胞壁 解析　(1)培養(yǎng)基常用的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌法。(2)分析圖乙中培養(yǎng)基培養(yǎng)結果，培養(yǎng)基中的菌落沒有呈線形分布，可以推知采用的純化方法是涂布分離法；由于菌落有聚集現象，可以推知平板乙可能的操作失誤是涂布不均勻，導致菌落分布不均勻。(3)進行植物組織培養(yǎng)時，培養(yǎng)基中常常添加的植物激素有生長素和細胞分裂素。(4)果膠酶包括多聚半乳糖醛酸酶、果膠分解酶和果膠酯酶等，它們能催化果膠的分解，水解植物細胞壁，

7、從而使果汁變得澄清，提高產量和品質。 3．(xx·浙江模擬)如圖是“分離以尿素為氮源的微生物”實驗的基本流程，請回答下列問題： (1)該實驗培養(yǎng)基應該含有________(多選)。 A．尿素 B．氯化鈉 C．葡萄糖 D．瓊脂糖 (2)尿素溶液可用________________使之無菌。若要檢查B過程滅菌是否徹底，可以采用的方法是________________________________________________________________________ _____________________________________________________

8、___________________。 (3)圖中步驟C為________。相對于劃線分離法，過程D涂布分離法的優(yōu)點是________________________________________________________________________。 (4)如果菌落周圍出現________色環(huán)帶，說明該菌落能分泌脲酶。 答案　(1)ABCD　(2)G6玻璃砂漏斗過濾　將空白培養(yǎng)基放在適宜溫度下培養(yǎng)一段時間，觀察有無菌落出現(3)倒平板　單菌落更易分開　(4)紅 解析　(1)分解尿素的細菌是異養(yǎng)微生物，因此培養(yǎng)基中應該加入有機碳源，如葡萄糖；分離分解尿素的細菌培養(yǎng)基從功能

9、上分應屬于選擇培養(yǎng)基，應該以尿素為唯一氮源；從物理性質上分應屬于固體培養(yǎng)基，因此應加入凝固劑瓊脂糖。故選：ABCD。(2)尿素溶液可用G6玻璃砂漏斗過濾使之無菌。若要檢查B過程滅菌是否徹底，可以采用的方法是將空白培養(yǎng)基放在適宜溫度下培養(yǎng)一段時間，觀察有無菌落出現。(3)圖中步驟C為倒平板。相對于劃線分離法，過程D涂布分離法的優(yōu)點是單菌落更易分開。(4)如果菌落周圍出現紅色環(huán)帶，說明該菌落能分泌脲酶，脲酶分解尿素產生氨，使pH升高，酚紅指示劑顏色發(fā)生變化。 4．多環(huán)芳烴菲在染料、殺蟲劑等生產過程中被廣泛使用，是土壤、河水中常見的污染物之一。下圖表示科研人員從被石油污染的土壤中分離獲得能降解多環(huán)

10、芳烴菲的菌株Q的主要步驟。請回答： (1)步驟①→③的培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)液中加入多環(huán)芳烴菲作為唯一碳源，目的是__________________________。 (2)步驟①→③的培養(yǎng)過程中，需將錐形瓶放在搖床上振蕩，一方面使菌株與培養(yǎng)液充分接觸，提高營養(yǎng)物質的利用率；另一方面能__________________________。 (3)步驟④用劃線分離法純化菌株Q的過程中，在做第二次以及其后的劃線操作時，總是從上一次劃線的末端開始劃線，原因是__________________________。采用固體平板培養(yǎng)基培養(yǎng)細菌時要倒置培養(yǎng)的目的是___________________

11、_____________。 (4)接種環(huán)通過灼燒來滅菌，完成步驟④中劃線操作，共需灼燒接種環(huán)________(A.4　B．5　C．6　D．7)次。 (5)為了獲得分解多環(huán)芳烴菲能力更強的菌株，研究人員又對菌株Q進行了誘變處理，得到突變株K。為了比較兩種菌株降解多環(huán)芳烴菲的能力，設計了下列實驗，請補充實驗步驟： ①取9只錐形瓶均分成3組，編號A、B、C。 ②向9只錐形瓶中分別加入________________為唯一碳源的培養(yǎng)液。 ③向A、B、C 3組培養(yǎng)液中分別加入______________________________________________。 ④28℃恒溫培養(yǎng)3天

12、后，測定錐形瓶中多環(huán)芳烴菲的降解率。 答案　(1)篩選出菌株Q　(2)增加培養(yǎng)液中的溶氧量　(3)線條末端細菌的數目比線條起始處少(或能使細菌的數目隨著劃線次數的增加而逐步減少，最終得到由單個細菌繁殖而來的菌落)　防止冷凝后形成水珠滴在培養(yǎng)基上污染培養(yǎng)基　(4)C　(5)②等量的多環(huán)芳烴菲?、鄣攘康臒o菌水、菌株Q菌液和突變株K菌液 5．回答下列關于微生物和酶的問題。 高溫淀粉酶在大規(guī)模工業(yè)生產中有很大的實用性。研究者從熱泉中篩選了高效產生高溫淀粉酶的嗜熱菌，其篩選過程如圖所示： (1)①過程稱為________，②過程是為了________________。 (2)Ⅰ號培養(yǎng)基

13、稱為________________(按功能分)；該培養(yǎng)基中除了加入淀粉外，還需加入另一種重要的營養(yǎng)成分____(A.瓊脂　B．葡萄糖　C．硝酸銨　D．碳酸氫鈉)。 (3)一般對配制的培養(yǎng)基采用高壓蒸汽滅菌，其中“高壓”是為了_____________________。在高溫淀粉酶運用到工業(yè)生產前，需對該酶作用的最佳溫度范圍進行測定。圖中的曲線①表示酶在各種溫度下酶活性相對最高酶活性的百分比。將酶在不同溫度下保溫足夠長的時間，再在酶活性最高的溫度下測其殘余酶活性，由此得到的數據為酶的熱穩(wěn)定性數據，即圖中的曲線②。 (4)根據圖中的數據，判斷該酶使用的最佳溫度范圍是________(A.

14、40～50 ℃　B．50～60 ℃　C．60～70 ℃D.70～80 ℃)。 (5)據圖判斷下列敘述錯誤的是________。 A．該酶只能在最佳溫度范圍內測出活性 B．曲線②35 ℃數據點是在80 ℃時測得的 C．曲線①表明80 ℃是該酶活性最高的溫度 D．曲線②表明該酶的熱穩(wěn)定性在70 ℃之后急劇下降 答案　(1)稀釋　分離純化嗜熱菌　(2)選擇培養(yǎng)基　C(3)殺死培養(yǎng)基中的細菌芽孢　(4)C　(5)A 6．(xx·臺州模擬)某研究小組欲用蘋果汁為原料，利用發(fā)酵瓶制作果酒和果醋，請分析回答： (1)將蘋果汁放入發(fā)酵瓶時，要預留約________的空間。為得到酒精和糖含量較高

15、的果酒，可在果汁中加入一定比例的________。若發(fā)酵瓶內持續(xù)無氣泡產生，則需加入更多的________，使發(fā)酵作用盡快發(fā)生。 (2)變酸的果酒表面有一層醋化醋桿菌形成的菌膜，若要在該菌膜中篩選出高表達量的醋化醋桿菌菌株，可通過獲得____________的方法來分離篩選。若要統計獲得菌種的數目，則常采用____________法。對獲得的優(yōu)質醋化醋桿菌菌種常用劃線法接種在固體培養(yǎng)基________上低溫保存。 (3)如圖是果酒和果醋的發(fā)酵裝置，關于果醋發(fā)酵敘述錯誤的是________。 A．發(fā)酵前，瓶內酒－水混合物的pH需調至7.0 B．發(fā)酵過程中，充氣口要適時適量充氣 C．

16、發(fā)酵過程中，排氣口排出醋酸發(fā)酵產生的CO2 D．發(fā)酵完成后，出料口的pH值不再減少 答案　(1)1/3　蔗糖　酵母菌　(2)單菌落　涂布分離　斜面　(3)C 解析　(1)將葡萄汁裝入發(fā)酵瓶時，要留大約1/3的空間，并封閉充氣口。為得到酒精和糖含量較高的果酒，可在果汁中加入一定比例的蔗糖。若發(fā)酵瓶內持續(xù)無氣泡產生，則需加入更多的酵母菌，使發(fā)酵作用盡快發(fā)生。(2)變酸的果酒表面有一層醋化醋桿菌形成的菌膜，若要在該菌膜中篩選高表達量的醋化醋桿菌菌株，可通過獲得單菌落的方法來分離篩選。接種微生物常用劃線分離法和涂布分離法，其中涂布分離法可以統計獲得菌種的數目。對獲得的優(yōu)質醋化醋桿菌菌種常用劃線法

17、接種在固體培養(yǎng)基斜面上低溫保存。(3)將酒－水混合物pH調至7.0有利于醋化醋桿菌生長與繁殖，縮短發(fā)酵時間，因此發(fā)酵前，瓶內酒－水混合物的pH需調至7.0，A正確；醋化醋桿菌是嗜氧菌，因此發(fā)酵過程中，充氣口要適時適量充氣，B正確；醋化醋桿菌發(fā)酵不會產生二氧化碳，發(fā)酵過程中，排氣口排出含氧量較少的空氣，C錯誤；發(fā)酵完成后，不會有醋酸再產生，因此出料口的pH值不再減少，D正確。 7．葡萄收獲的季節(jié)性較強，并且不易運輸，易造成積壓，腐爛變質。為了解決上述問題且滿足不同人群的需求，可以將其加工制作成果汁、果酒、果醋等。圖1是簡單的生產流程圖，結合所學知識回答下列問題： 圖1 (1)果膠酶的使

18、用過程①中，需要對酶的活性、酶的用量進行研究。在圖2甲、乙兩個曲線中，果膠酶活性受環(huán)境因素影響的變化曲線是________；乙曲線中縱軸還可以用_____________來表示。自變量X可以代表____________；自變量Y可以代表____________。 圖2 (2)果膠酶的最適用量是圖2中的____點對應的量。 (3)③→⑤過程中不用滅菌一般也不會受到雜菌的污染，原因是____________________ ________________________________________________________________________。 (4)果酒和果

19、醋的制作過程相比，從發(fā)酵條件來看，二者不同之處是____。 A．都需要氧氣 B．都不需要氧氣 C．前者需要氧氣，后者不需要氧氣 D．前者不需要氧氣，后者需要氧氣 答案　(1)甲　過濾得到的果汁體積　溫度、pH等　果膠酶的濃度(或用量)　(2)B　(3)培養(yǎng)液中缺氧環(huán)境及酵母菌產生的乙醇能抑制絕大多數細菌的生長繁殖　(4)D 解析　(1)果膠酶的活性受溫度、pH等條件的影響，每一種酶的最適pH和最適溫度是一定的。衡量實驗結果的指標有兩種，一個是果汁的量，另一個是果汁的澄清度。(2)果膠酶的最適用量是過濾得到果汁澄清度最高時對應的最小酶量，B點后酶量增加而澄清度不再增加，因此B點對應的

20、量為最適用量。(3)缺氧條件不利于大多數細菌的生存，同時乙醇有殺菌作用。(4)酒精發(fā)酵為厭氧發(fā)酵，醋酸發(fā)酵為需氧發(fā)酵。 8．請回答下列有關微生物培養(yǎng)、發(fā)酵過程中的相關問題： (1)在“分離以尿素為氮源的微生物”的實驗中，配制好的尿素固體培養(yǎng)基加上封口膜后用________________方法滅菌，冷卻后加入用G6玻璃砂漏斗過濾的尿素溶液。玻璃砂漏斗用后需用適宜濃度的________浸泡，再用________沖洗，干燥后保存。 (2)在“果汁中的果膠和果膠酶”實驗中，可以用________(A.50%的乙醇　B．70%的乙醇　C．90%的乙醇　D．95%的乙醇)鑒別果膠。果膠酶可以從黑曲霉

21、或________中提取，配制這些微生物的培養(yǎng)基時需要將pH調至________。 (3)在“用果汁制作果酒”實驗中，為了增加果酒的含糖量，可以在發(fā)酵瓶中加入一定量的________。 答案　(1)高壓蒸汽滅菌　HCl　蒸餾水　(2)D　蘋果青霉　中性偏酸　(3)蔗糖 解析　(1)培養(yǎng)基常用高壓蒸汽滅菌法滅菌。玻璃砂漏斗用后需用適宜濃度的HCl浸泡，再用蒸餾水沖洗，干燥后保存。(2)在“果汁中的果膠和果膠酶”實驗中，可以用95%的乙醇鑒別果膠。果膠酶可以從黑曲霉或蘋果青霉中提??；黑曲霉或蘋果青霉都屬于真菌，配制真菌的培養(yǎng)基時需要將pH調至中性偏酸。(3)在“用果汁制作果酒”實驗中，為了增加果酒的含糖量，可以在發(fā)酵瓶中加入一定量的蔗糖。