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恩諾沙星說(shuō)明書(簡(jiǎn)化版)

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1、恩諾沙星檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書 酶聯(lián)免疫法定量檢測(cè)恩諾沙星 產(chǎn)品簡(jiǎn)介 RIDASCREEN? Enrofloxacin/Quinolones(訂貨號(hào):R3113R)恩諾沙星檢測(cè)試劑盒, 采用競(jìng)爭(zhēng)性酶聯(lián)免疫法定量測(cè)定尿液、血清種的恩諾沙星藥物殘留。 試劑盒中含有酶聯(lián)免疫檢測(cè)所需的所有試劑,包括標(biāo)準(zhǔn)品。 試劑盒足夠進(jìn)行96次檢測(cè)(包括標(biāo)準(zhǔn)測(cè)定)。 定量分析需要使用微孔板酶標(biāo)儀。 檢測(cè)時(shí)間: 樣品制備(以10個(gè)樣品為例).................大約30 分鐘 檢測(cè)過(guò)程(孵育時(shí)間)....................大約1小時(shí)15分鐘 檢測(cè)限: 尿

2、液、血清.................................................5ppb 回收率: 80 - 110 % (與標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)應(yīng)) 特異性: RIDASCREEN? Enrofloxacin/Quinolones恩諾沙星檢測(cè)試劑盒的特異性根據(jù)與相關(guān)物質(zhì)的交叉反應(yīng)確定。 恩諾沙星 ........................................................... 100 % 諾氟沙星,麻保沙星,氧氟沙星...................... > 100 % 達(dá)氟沙星...........

3、.................................................... 67 % 環(huán)丙沙星............................................................... 41 % 沙氟沙星................................................................. 9 % 1. 用途 RIDASCREEN? Chinolone恩諾沙星檢測(cè)試劑盒采用了競(jìng)爭(zhēng)性酶聯(lián)免疫法定量測(cè)定雞蛋、牛肉、豬肉、羊肉、雞肉、火雞、魚和蝦中的恩諾沙星藥物殘留。 2

4、. 檢測(cè)原理 檢測(cè)的基礎(chǔ)是抗原抗體反應(yīng)。微孔板包被有針對(duì)氟喹諾酮抗體的捕獲抗體。加入標(biāo) 準(zhǔn)品、樣品溶液、恩諾沙星酶連接物及氟喹諾酮抗體。游離的氟喹諾酮與恩諾沙星 酶連接物競(jìng)爭(zhēng)氟喹諾酮抗體結(jié)合位點(diǎn)(競(jìng)爭(zhēng)性酶聯(lián)免疫分析),同時(shí)氟喹諾酮抗體 也與微孔板上固定的捕獲抗體結(jié)合。沒(méi)有結(jié)合的恩諾沙星酶連接物在洗滌步驟中被 除去。將底物/發(fā)色劑加入到孔中并且孵育。結(jié)合的酶連接物將無(wú)色的發(fā)色劑轉(zhuǎn)化為 藍(lán)色的產(chǎn)物。加入反應(yīng)終止液后使顏色由藍(lán)色轉(zhuǎn)變?yōu)辄S色。在 450 nm 處測(cè)量。吸 光度值與樣品中的氟喹諾酮濃度成反比。 3. 試劑盒組份 每一個(gè)盒中的試劑足夠進(jìn)行 96次檢測(cè)(包括標(biāo)準(zhǔn)測(cè)定),

5、盒中的組份如下: 1 x 96孔微孔板(12 條每條8孔) 包被有針對(duì)氟喹諾酮抗體的捕獲抗體 6 x 標(biāo)準(zhǔn)品 (每瓶 1.3 ml) 0 ppb(零標(biāo)準(zhǔn)品),0.5 ppb,1.5 ppb,3 ppb,6 ppb,18 ppb 恩諾沙星甲醇溶液 即用型 1 x 酶連接物(6 ml)...............................紅色瓶蓋 過(guò)氧化物酶標(biāo)記的恩諾沙星 即用型 1 x 氟喹諾酮抗體液(6 ml) ........................黑色瓶蓋 即用型 1 x 發(fā)色劑(10 ml)....................

6、......棕色瓶蓋 (底物/發(fā)色劑溶液),紅色 含有四甲聯(lián)苯胺 1 x 反應(yīng)終止液(14 ml)...............................黃色瓶蓋 含1N的硫酸 1 x 洗滌緩沖液(鹽) 用于制作 10 mM的磷酸鹽緩沖液,pH 7.4 含有0.05 % Tween 20 4. 操作者應(yīng)該注意之事項(xiàng) 本試劑盒建議由經(jīng)過(guò)了培訓(xùn)的實(shí)驗(yàn)人員進(jìn)行操作使用。請(qǐng)嚴(yán)格按照說(shuō)明書的步驟和要求進(jìn)行檢測(cè)使用。 反應(yīng)終止液為1 N硫酸(R36/38,S2-26)。 5. 儲(chǔ)存條件 保存試劑盒于2-8°C,不要冷凍。 將不用的微孔板放進(jìn)原錫箔袋中并且與提供

7、的干燥劑一起重新密封儲(chǔ)存于 2-8℃ 條件下。 底物/發(fā)色劑對(duì)光敏感,因此要避免直接暴露在光線下。 對(duì)過(guò)了有效期(見(jiàn)試劑盒標(biāo)簽)的試劑盒不再提供任何質(zhì)量保證。 不能交叉使用不同批號(hào)的盒中試劑。 6. 試劑變質(zhì)的跡象 ? 紅色的底物/發(fā)色劑在使用前發(fā)現(xiàn)顏色變藍(lán) ? 零標(biāo)準(zhǔn)品的吸光度值小于0.6 (E450 nm < 0.6) 7. 樣品處理 7.1 尿液和血清 尿液、血清 — 取30ul尿樣/血清+270洗滌緩沖液混合后,取50ul進(jìn)行分析 稀釋倍數(shù)………………………………………….10 檢測(cè)限……………………………………………

8、5 ng/g (ppb) 定量檢測(cè)限…………………………………….. ..5 ng/g (ppb) 8. 檢測(cè)步驟 8.1. 檢測(cè)前的準(zhǔn)備 使用之前將所有試劑回溫至室溫(20-25°C)。 洗滌緩沖液是PBS-Tween緩沖液,為此試劑盒中提供了一袋洗滌緩沖液鹽(參見(jiàn)4.)。使用1 l 蒸餾水溶解一袋洗滌緩沖液鹽制得洗滌緩沖液。制備好的洗滌緩沖液可在2-8°C下保存大約4-6周時(shí)間。 或者: 用100 ml蒸餾水溶解袋中的洗滌緩沖液鹽,得到10倍的洗滌緩沖液鹽濃縮液,此溶液能在室溫(20-25°C)下儲(chǔ)存8-12周。使用時(shí),用9份蒸餾水溶解1份此濃縮液得到洗滌緩沖液。 8

9、.2. 檢測(cè)操作 檢測(cè)必須在室溫(20-25°C)條件下進(jìn)行! 仔細(xì)進(jìn)行洗板的操作非常重要。在使用中不要讓微孔出現(xiàn)干燥。 0. 將足夠標(biāo)準(zhǔn)品和樣品檢測(cè)所需數(shù)量的孔條插入微孔板架,均做兩個(gè)平行實(shí)驗(yàn), 記錄下標(biāo)準(zhǔn)品和樣品的位置。 1. 將 50 μl 標(biāo)準(zhǔn)品及處理好的樣品溶液加到相應(yīng)的微孔中。不同樣品或標(biāo)準(zhǔn)品的添加請(qǐng)換用新的移液頭。 2. 向每一個(gè)微孔中加入50 μl酶連接物溶液(紅色瓶蓋)。 3. 向每一個(gè)微孔中加入 50 μl 抗體溶液(黑色瓶蓋),充分混合,在室溫(20 - 25°C)條件下孵育 1小時(shí)。 4. 倒出孔中的液體,將微孔板架倒置在吸水紙上拍打(每輪拍打 3 次)以保證完全除去孔中的液體。加入 250 μl 洗滌緩沖液(參見(jiàn) 10.1.),再次倒掉微孔中液體。上述操作重復(fù)進(jìn)行兩遍。 5. 向每一個(gè)微孔中加入 100 μl 底物/發(fā)色劑(棕色瓶蓋),充分混合并在室溫 (20 - 25 °C)條件下暗處孵育 15分鐘。 6. 向每一個(gè)微孔中加入 100 μl 反應(yīng)終止液(黃色瓶蓋),充分混合。在加入反 應(yīng)終止液后30分鐘內(nèi)于450 nm處測(cè)量吸光度值。

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