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1、2013年高考生物：微生物的應(yīng)用考點(diǎn)匯總 ?1．（2012北京理綜．5,6分）高中生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中，在接種時(shí)不進(jìn)? 行嚴(yán)格無(wú)菌操作對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果影響最大的一項(xiàng)是??? (??? ) ? A．將少許干酵母加入到新鮮的葡萄汁中? B．將毛霉菌液接種在切成小塊的鮮豆腐上 ? C．將轉(zhuǎn)基因植物葉片接種到無(wú)菌培養(yǎng)基上? D．將土壤浸出液涂布在無(wú)菌的選擇培養(yǎng)基上 ?2．（2012山東基本能力．55.1分）除了高溫加熱以外，其它滅菌? 方法還有??? (??? ) ? A．紫外線照射??? B．真空包裝? C．用保鮮膜密閉??? D．添加防腐劑 ? (1)在配制培養(yǎng)基時(shí)，要加入尿素和酚紅

2、指示劑，這是因?yàn)镠p含有①____，它能以尿素作為氮源；若有Hp，則菌落周圍會(huì)出現(xiàn)②??? 色環(huán)帶。 ? (2)下列對(duì)尿素溶液進(jìn)行滅菌的最適方法是③____滅菌。 ??? A．高壓蒸汽??? B．紫外燈照射C.70%酒精浸泡??? D．過濾? (3)步驟X表示④??? 。在無(wú)菌條件下操作時(shí)，先將菌液稀釋，然后將菌液⑤??? 一到培養(yǎng)基平面上。菌液稀釋的目的是為了獲得⑥____菌落。 ? (4)在培養(yǎng)時(shí)，需將培養(yǎng)皿倒置并放在⑦_(dá)___中。若不倒置培養(yǎng)，將導(dǎo)致⑧____。 ? (5)臨床上用“C呼氣試驗(yàn)檢測(cè)人體是否感染Hp，其基本原理是Hp能將“C標(biāo)記的⑨??? 分解為NH3和“CO2。

3、 4．[2012上海單科．（四）．10分]回答下列關(guān)于微生物和酶的? 問題。 (1)①過程稱為_____，②過程是為了____。 (2)I號(hào)培養(yǎng)基稱為____（按功能分）；該培養(yǎng)基? 中除了加入淀粉外，還需加入另一種重要的營(yíng)養(yǎng)成分? --O ?? A．瓊脂??? B．葡萄糖? C．硝酸銨? D．碳酸氫鈉 (3)-般對(duì)配制的培養(yǎng)基采用高壓滅菌，其中“高壓”是為了 ??? ——。 ??? 在高溫淀粉酶運(yùn)用到工業(yè)生產(chǎn)前，需對(duì)該酶的最佳溫度 范圍進(jìn)行測(cè)定。圖中的曲線①表示酶在各種溫度下酶活性相 對(duì)最高酶活性的百分比。將酶在不同溫度下保溫足夠長(zhǎng)的時(shí) 間，再在酶活性最高的

4、溫度下測(cè)其殘余酶活性，由此得到的數(shù) 據(jù)為酶的熱穩(wěn)定性數(shù)據(jù)，即圖中的曲線②。 ?(4)根據(jù)圖中的數(shù)據(jù)，判斷該酶使用的最佳溫度范圍是--0 A．40℃? - 50℃??? B．50℃? - 60℃ C．60℃? - 70℃??? D．70 ℃一80℃?? (5)據(jù)圖判斷下列敘述錯(cuò)誤的是_____。 ??? A．該酶只能在最佳溫度范圍內(nèi)測(cè)出活性B．曲線②35℃數(shù)據(jù)點(diǎn)是在80℃時(shí)測(cè)得的C．曲線①表明80℃ 是該酶活性最高的溫度D．曲線②表明該酶的熱穩(wěn)定性在70℃ 之后急劇下降5．（2011課標(biāo)，39 ,15分）有些細(xì)菌可分解原油，從而消除由原? 油泄漏造成的土壤污染。某同學(xué)欲從受原油污

5、染的土壤巾篩? 選出能高效降解原油的菌株。回答問題： ? (1)在篩選過程中，應(yīng)將土壤樣品稀釋液接種于以??? 為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上。從功能上講，該培養(yǎng)基屬于培養(yǎng)基。 ? (2)純化菌種時(shí)，為了得到單菌落，常采用的接種方法有兩種，即??? 和??? 。 ? (3)為了篩選出高效菌株，可比較單菌落周圍分解圈的大小，分解圈大說(shuō)明該菌株的降解能力??? 。 ? (4)通常情況下，在微生物培養(yǎng)過程中，實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌方法有灼燒滅菌、??? 和??? 。無(wú)菌技術(shù)要求實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈??? 附近進(jìn)行，以避免周圍環(huán)境中微生物的污染。 6．（2010山東理綜，34,8分）生物柴油是一種可再生的

6、清潔能? 源，其應(yīng)用在一定程度上能夠減緩人類對(duì)化石燃料的消耗。 ? 科學(xué)家發(fā)現(xiàn)，在微生物M產(chǎn)生的脂肪酶作用下，植物油與甲醇? 反應(yīng)能夠合成生物柴油（如下圖）。 ?(1)用于生產(chǎn)生物柴油的植物油不易揮發(fā)，宜選用??? 、方法從油料作物中提取。 (2)篩選產(chǎn)脂肪酶的微生物M時(shí)，選擇培養(yǎng)基中添加的植物油為微生物生長(zhǎng)提供_____，培養(yǎng)基滅菌采用的最適方法是___ 法。 (3)測(cè)定培養(yǎng)液中微生物數(shù)量，可選用??? 法直接計(jì)數(shù)；從微生物M分離提取的脂肪酶通常需要檢測(cè)____，以確定其應(yīng)用價(jià)值；為降低生物柴油生產(chǎn)成本，可利用技術(shù)使脂肪酶能夠重復(fù)使用。 (4)若需克隆脂肪酶基因，可應(yīng)用

7、耐熱DNA聚合酶催化的一技術(shù)。 7．（2009寧夏理綜．40 ,15分）(1)在大腸桿菌培養(yǎng)過程中，除考? 慮營(yíng)養(yǎng)條件外，還要考慮____、一??? 和滲透壓等條? 件。由于該細(xì)菌具有體積小、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、變異類型容易選擇、? ___? _、_? ___等優(yōu)點(diǎn)，因此常作為遺傳學(xué)研究的實(shí)驗(yàn)? 材料。 ? (2)在微生物培養(yǎng)操作過程中，為防止雜菌污染，需對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)器皿進(jìn)行??? （消毒、滅菌）；操作者的雙手需進(jìn)行清洗和??? ；靜止空氣中的細(xì)菌可用紫外線殺滅，其原因是紫外線能使蛋白質(zhì)變性，還能??? 。 ? (3)若用稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)大腸桿菌活菌的個(gè)數(shù)，要想使所得估計(jì)值更接近實(shí)際值，除應(yīng)嚴(yán)

8、格操作、多次重復(fù)外，還應(yīng)保證待測(cè)樣品稀釋的____。 ? (4)通常，對(duì)獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的形狀、大小等菌落特征對(duì)細(xì)菌進(jìn)行初步的??? 一。 ? (5)培養(yǎng)大腸桿菌時(shí)，在接種前需要檢測(cè)培養(yǎng)基是否被污染。 ??? 對(duì)于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測(cè)方法是____--O? (6)若用大腸桿菌進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，使用過的培養(yǎng)基及培養(yǎng)物必須經(jīng)過??? 處理后才能丟棄，以防止培養(yǎng)物的擴(kuò)散。 答案：1．C本題主要考查幾種常見生物學(xué)實(shí)驗(yàn)對(duì)無(wú)菌操作的要求。生產(chǎn)果? 酒和腐乳時(shí)對(duì)無(wú)菌的要求不是很高，接種不需要進(jìn)行嚴(yán)格的無(wú)菌操? 作；土壤浸出液中含有多種雜菌，所以利用選擇培養(yǎng)基篩選土壤浸出? 液中特定微生物時(shí)，不進(jìn)

9、行嚴(yán)格無(wú)菌操作也不會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果；植物? 組織培養(yǎng)技術(shù)成功的關(guān)鍵是無(wú)菌條件，若接種時(shí)不進(jìn)行嚴(yán)格無(wú)菌操作? 將可能導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗，故C項(xiàng)符合題意。 2．A此題考查滅菌的方法。滅菌是使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)? 外所有的微生物（包括芽孢和孢子）。本題中真空包裝、添加防腐劑、? 用保鮮膜密閉都起到了抑菌作用，紫外線照射使細(xì)菌的蛋白質(zhì)變性，? 核酸受破壞，是滅菌方法。 3．答案(1)脲酶紅? (2)D? (3)接種涂布單? (4)恒溫培養(yǎng)箱無(wú)法形成單菌落? (5)尿素? 解析此題考查微生物的分離與培養(yǎng)知識(shí)。(1)幽門螺桿菌(Hp)? 含有脲酶，能以尿素為氮源，在加入尿素和酚紅指示劑的培養(yǎng)基中培?

10、養(yǎng)Hp，由于尿素經(jīng)脲酶的降解可產(chǎn)生堿性的NH3，NH，能使培養(yǎng)基中? 的酚紅由紅黃色變成紅色，故菌落周圍會(huì)出現(xiàn)紅色環(huán)帶。(2)由于尿? 素加熱會(huì)分解，對(duì)尿素溶液進(jìn)行滅菌最好用C6玻璃砂漏斗過濾。 ? (3)微生物的分離和培養(yǎng)步驟是：配制培養(yǎng)基一滅菌、倒平板一接種? 一培養(yǎng)。為獲得單菌落，接種操作前應(yīng)先將菌液稀釋，然后將菌液涂? 布到培養(yǎng)基平面上即可。(4)微生物培養(yǎng)時(shí)需將培養(yǎng)皿倒置并放在? 恒溫培養(yǎng)箱中，若不倒置培養(yǎng)，則無(wú)法形成單菌落。(5)幽門螺桿菌? 能將“C標(biāo)記的尿素分解為NH3和14 CO：，故臨床上常用14C呼氣試驗(yàn)? 檢測(cè)人體內(nèi)幽門螺桿菌的存在。 4．答案(1)稀釋單個(gè)菌落的篩

11、選（或篩選）? (2)選擇培養(yǎng)基C? (3)殺死培養(yǎng)基中的細(xì)菌芽孢? (4)C? (5)A? 霉解析本題主要考查微生物培養(yǎng)及酶的相關(guān)知識(shí)。欲培養(yǎng)和分離? 嗜熱菌單個(gè)菌落可采用稀釋涂布平板法；①為稀釋過程，②為篩選過? 程；I號(hào)培養(yǎng)基為選擇培養(yǎng)基，加入硝酸銨的目的主要是補(bǔ)充氮元素；? 高溫滅菌的目的是殺死包括細(xì)菌芽孢等在內(nèi)的全部生物；據(jù)圖可知，? 工業(yè)生產(chǎn)中該酶的最佳溫度范圍為60qC -70C。 5．霉答案(1)原油選擇? (2)平板劃線法稀釋涂布平板法? (3)強(qiáng)? (4)干熱滅菌高壓蒸汽滅菌火焰? 霉解析(1)從受原油污染的土壤中篩選出能高效降解原油的菌株，? 使用的培養(yǎng)基應(yīng)是以原油為唯

12、一碳源的選擇培養(yǎng)基，通過控制碳源這? 種營(yíng)養(yǎng)成分，來(lái)促進(jìn)能高效降解原油的菌株的生長(zhǎng)，抑制其他微生物? 的生長(zhǎng)。(2)菌種純化培養(yǎng)時(shí)，常采用平板劃線法和稀釋涂布平板法? 接種。(3)當(dāng)固體培養(yǎng)基上長(zhǎng)出單菌落后，可通過比較菌落周圍分解? 圈的大小，來(lái)判斷菌株降解原油能力的大小。一般來(lái)說(shuō)，分解圈越大? 說(shuō)明該菌株的降解能力越強(qiáng)，反之則越弱。(4)實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)微生物的? 過程中，常用灼燒滅菌法對(duì)接種環(huán)、接種針、試管口、瓶口等進(jìn)行滅菌；? 用高壓蒸汽滅菌法對(duì)培養(yǎng)基、試管等進(jìn)行滅菌；用于熱滅菌法對(duì)玻璃? 器皿（吸管、培養(yǎng)皿）和金屬用具等進(jìn)行滅菌。實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈? 火焰旁進(jìn)行，因?yàn)榫凭珶艋鹧媾钥尚纬梢粋€(gè)無(wú)

13、菌環(huán)境，可防止微生物? 的污染。 6．裙答案(1)壓榨萃?。ㄗⅲ簝煽枕樞驘o(wú)先后）? (2)碳源高壓蒸汽滅菌? (3)顯微鏡直接計(jì)數(shù)酶活性（或：酶活力）固定化酶（或：固定化細(xì)? 胞）? (4) PCR（或：多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）? 醵解析(1)因?yàn)橹参镉筒灰讚]發(fā)，不能選用蒸餾法，可以用壓榨法、? 萃取法從油料作物中提取。(2)微生物的生長(zhǎng)需要水、碳源、氮源和? 無(wú)機(jī)鹽等，選擇培養(yǎng)基中添加的植物油為微生物生長(zhǎng)提供碳源。分析? 灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌等實(shí)驗(yàn)室常用滅菌方法的特點(diǎn)可? 知，培養(yǎng)基滅菌采用的最適方法是高壓蒸汽滅菌法。(3)測(cè)定培養(yǎng)液? 中微生物的數(shù)量，可選用顯微鏡直接

14、計(jì)數(shù)法直接計(jì)數(shù)。提取的脂肪酶? 在應(yīng)用于實(shí)驗(yàn)或生產(chǎn)之前，要先檢測(cè)其活性，以確定其應(yīng)用價(jià)值。固? 定化酶技術(shù)可以實(shí)現(xiàn)酶的反復(fù)利用，降低了生產(chǎn)成本。(4)在應(yīng)用? PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA片段時(shí)，DNA合成（延伸）時(shí)溫度要控制在72aC，? 需要具有較強(qiáng)的耐熱性的DNA聚合酶催化。 7．露答案(1)溫度酸堿度易培養(yǎng)生活周期短? (2)滅菌消毒損傷DNA的結(jié)構(gòu)? (3)比例合適? (4)鑒定（或分類）? (5)將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時(shí)間，觀察培養(yǎng)基? 上是否有菌落產(chǎn)生? (6)滅菌? 罐解析(1)大腸桿菌具有體積小、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、變異類型容易選擇、易? 培養(yǎng)、生活周期短等優(yōu)點(diǎn)，培養(yǎng)過程中

15、，除考慮營(yíng)養(yǎng)條件外，還要考慮? 溫度、酸堿度和滲透壓等條件。(2)滅菌是用強(qiáng)烈的理化因素殺死物? 體內(nèi)外所有的微生物，所以對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行滅菌；消毒是用較? 為溫和的物理或化學(xué)方法僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對(duì)人體有害? 的微生物，操作者的雙手需要進(jìn)行清洗和消毒，紫外線能使蛋白質(zhì)變? 性，還能損傷DNA的結(jié)構(gòu)。(3)稀釋涂布平板法是將菌液進(jìn)行一系列? 的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的? 表而，進(jìn)行培養(yǎng)，應(yīng)保證樣品稀釋的比例適合。(4)對(duì)獲得的純菌種? 還可以依據(jù)菌落的形狀、大小等菌落特征對(duì)細(xì)菌進(jìn)行初步的鑒定。 ? （5、培養(yǎng)大腸桿菌時(shí)，在接種前需要檢測(cè)培養(yǎng)基是否被污染。對(duì)于固? 體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測(cè)方法是將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放? 置適宜的時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生。(6)因?yàn)橛械拇竽c桿? 菌會(huì)釋放一種強(qiáng)烈的毒素，并可能導(dǎo)致腸管出現(xiàn)嚴(yán)重癥狀，使用過的? 培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過滅菌處理后才能丟棄，以防止培養(yǎng)物的? 擴(kuò)散。