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1、第一章浮游植物的采集、計數與定量方法,浮游植物(Phytoplankon)又稱浮游藻類,是水中懸浮生活的若干種藻類的總稱。 浮游植物及其生產力是水生態(tài)系統的重要成員與重要功能之一,是魚類天然餌料的重要組成部分。由于浮游植物對環(huán)境的變化十分敏感,故在環(huán)境監(jiān)測中,也有重要作用。 我國淡水養(yǎng)殖的主要對象是鰱、鳙魚類,它們的天然餌料常以浮游植物為主。我們知道,不同類型的水體或同一水體的不同季節(jié),藻類的組成是不相同的,各種藻類的相對量在不斷地變化。這種變化是有一定的趨勢的,這以后要專題介紹。就鰱鳙而言,藻類又有易消化種類和不易消化種類之分,一般說來,硅藻門、金藻門、甲藻門中種類易于消化,而藍藻門、綠藻門
2、、裸藻門中的多數種類難于消化。因此,在魚類生長季節(jié),研究水中藻類組成和現存量(Standing crop),可為養(yǎng)殖魚類的合理投放提供重要的科學依據。同時為水生態(tài)研究及利用提供了有用的資料。 浮游植物的現存量,指的是某一瞬間單位水體中所存在的浮游植物的量。這個量有兩種表示方法,用數目單位表示成為密度,一般用萬個升為單位,五、六十年代用之;用重量單位(mg/L)表示的現存量稱為生物量(Biomass)。70年代以來被廣泛使用。,在以往的調查中,人們往往只注重浮游植物的種類或數量,對其生物量則重視不夠。其原因在于:1、浮游植物生物量測算繁瑣;2、對生物量與數量之間的本質差別認識不足。由于不同水體,
3、不同種類的藻類在個體上有很大差異,僅僅用數量就很難評價不同水體餌料生物的豐欠。這就要求,浮游植物的定量工作,必須以測算生物量為目標。 不同的調查方法,有時會得出不同的結果。關于浮游生物的采集、計數與定量方法采用下列方法。,一、采樣: 1 采水器:各種采水器均可,一般淺水(<10m)湖泊可用玻璃瓶采水器,深水 湖泊或水庫必須用顛倒采水器。北原式采水器或有機玻璃采水器。 2采樣點的選擇及采樣層次的確定 選擇采樣點的原則是,采樣點在平面上的分布要有代表性。一般要求湖心、庫心、江心必須采樣,有條件時采樣點可適當多設一些,如大的湖灣、庫灣、河流的上、中、下游水體的沿岸帶、淺水區(qū)等也要設點采集。 凡
4、水深不超過2米者,可于采樣點水下0.5m處采水,水深210米以內,應距底0.5米處另采一個樣,水深超過10米時。應于中層增采一個水樣。一般來說池塘、水庫、湖泊、河流的樣點及采水層次可總結如下:,池塘:樣點可設在距岸邊1m處。水深小于2m時采一中層水樣。若水深大于2m時,最好采上、中、下層水樣。 亞表層:水下20cm左右。 中 層:水體中間部分。 下 層:離底20cm左右。 水庫及河流:樣點可設在上、中、下游。 上游:設十個點(亞表層或中層) 中游:水在23米深時設一個點,采2個樣(上中層和中下層) 下游:設23個樣點。中心點3個樣(上、中、下層),兩測點各一個樣(中層) 湖泊:中心區(qū)設一點。進
5、水口和出水口也應設點。,3采樣量及采樣次數 每一個采樣點應采水1000ml。若系一般性調查,可將各層采的水等量混合,取1000ml混合水樣固定;或者分層采水,分別計數后取平均值。分層采水可以了解每一采樣點各層水中浮游植物的數量和種類。 采得水樣后立即加入1015ml魯哥氏液(Lugols solution)固定,魯哥氏液即將6克碘化鉀溶于20ml水中,待其完全溶解后,加入4克碘充分搖動,待碘全部溶解后定容到100ml即配成魯哥氏液。泥沙多時沉淀后再取水樣。 采樣次數可多可少。有條件時還可逐月采樣一次,一般情況可下及采樣一次,最低限度應在春季、夏季末、秋初各采樣一次。,,,,,,二、沉淀濃縮:
6、上述水樣,搖勻后倒入1000ml圓柱形沉淀器中沉淀24小時,沉淀器可用1000ml的瓶子代替。用虹吸管小心抽出上面不含藻類的“清液”。剩下3050ml沉淀物轉入50ml的定量瓶中;再用上述虹吸出來的“清液”少許沖洗三次沉淀器,沖洗液轉入定量瓶中。凡以碘液固定的水樣固定的水樣,瓶塞要擰緊。還要加入24的甲醛固定液(福爾馬林),即每100ml樣品需另加4ml福爾馬林,以利于長期保存。濃縮時切不可攪動底部,萬一動了應重新靜止沉淀,為不是漂浮水面的某些微小生物等進入虹吸管內,管口應始終低于水面,虹吸時流速流量不可過大,吸至澄清液13時,應控制流速,使其成滴緩慢留下為宜。 采水時,每瓶樣品必須貼上標簽,
7、標簽上藥劑在采集的時間、地點、采水體積等,其他詳細內容應另行做好記錄,以備查對,避免錯誤。 濃縮的體積視浮游植物的多少而定。也可根據水的肥瘦確定濃縮體積。如下面的濃縮體積與水透明度(體現水的肥瘦)之間關系大致如下,僅供參考。 瘦中肥 透明度 1m50cm30cm 老水 特老水 <30cm <20cm 濃縮的標準是以每個視野里有十幾個藻類為宜。,1000ml 30 ml 50 ml 100 ml,不濃縮稀釋,三、計數方法 將濃縮沉淀后水樣充分搖勻后,立即用0.1ml吸量管吸出0.1ml樣品,注入0.1ml計數框內(計數框的表面積最好是20202),小心蓋上蓋玻片(22222),
8、在蓋蓋玻片時,要求計數框內沒有氣泡,樣品不溢出計數框。然后在1440或1640倍顯微鏡下計數。即在400600倍顯微鏡下計數。每瓶標本計數兩片取其平均值,每片大約計算50100個視野,但視野數可按浮游植物的多少而酌情增減,如平均每個視野不超過12個時,要數200個視野以上,如果平均每個視野有56個時要數100個視野,如果平均每個視野有十幾個時數50個視野就可以了。同一樣品的兩片計算結果和平均數之差如不大于其均數的15,其均數視為有效結果,否則還必須測第三篇,直至三片平均數與相近兩數之差不超過均數的15為止,這兩個相近值的平均數,即可視為計算結果。 在計數過程中,常碰到某些個體一部分在視野中,另
9、一部分在視野外,這時可規(guī)定出在視野上半圈者計數,出現在下半圈者不計數。數量最好用細胞表示,對不宜用細胞數表示的群體或絲狀體,可求出其平均細胞數。 計算時優(yōu)勢種類盡可能鑒別到屬,注意不要把浮游植物當作雜質而漏計。 計數時可按下列格式記錄,然后再進行整理計算。 視野數 種 類 第一片 第二片 正 小球藻 正正 正正 正 衣 藻 正 正 正正 小環(huán)藻 正 正,四、數量與生物量的計算: 1一升水中的浮游植物的數量(N)可用下列公式計算: 式中:Cs 計數框體積(2),一般為4002。 Fs 每個視野的面積(2),R2,視野半徑r可用臺微尺測出(一定倍數下)。
10、 Fn 計數過的視野數。 V 一升水樣經沉淀濃縮后的體積(ml) U 計數框的體積(ml)為0.1ml。 Pn 計數出的浮游植物個數。 如果計數框、顯微鏡固定不變,Fn、V、U也固定不變,公式中的( )可視為常數,此常數用K表示,則上述公式可簡化為:N=KPn。 Pn代表某種藻類的個數,計算結果N只表示一升水中這種藻類的數量;Pn若代表各種藻類的總數,計算結果N則表示一升水中浮游植物的總數。前者若求浮游植物數量將各計算結果相加即可。,2生物量一般按體積來換算。這是因為浮游植物個體積小,直接稱重較困難,且其細胞比重多接近于1??捎眯螒B(tài)相近似的幾何體積公式計算細胞體積。細胞體積的毫升數相當于
11、細胞重量的克數。這樣體積值(m-3)可直接換算為重量值(109m-3)可直接換算為重量值(109m-31毫克鮮藻重)。 下列體積公式,可供計算生物量時參考: 圓錐體:V=1/3R2h 圓柱體:V=R2h 球 體:V=4/3R3 橢圓體:V4/3ab2(a為長軸半徑,b為短軸半徑) 圓臺體:V1/3H( + ) 長方體與正方體abh或a3 硅藻細胞的計算通式:V殼面面積帶面平均高度 不規(guī)則性藻類可分可為幾個部分計算。,每種藻類至少隨機測量20個以上,求出這種藻類個體重的平均值,一般都制成附表供查找。此平均值乘上一升稅種該種藻類的數量,即得到一升水中這種藻類的生物量(mg/L)。 由于同一種類的細胞大小可能有較大的差別,同一屬內的差別就更大了,因此必須實測每次水樣中主要種類(即優(yōu)勢種)的細胞大小并計算平均重量,其他種類可以參考附表計算。 藻類的生物量可直接作為初級生產力的一種指標,根據幾次定期測算的現存量之差亦可估計出生產量。 定量結果應列出總生物量、各門生物量、優(yōu)勢種屬。在條件許可時還可以用較簡單的測定葉綠素法,來對照或代替生物量。但葉綠素法不能反映種類組成情況。,