網(wǎng)織紅細胞檢測技術(shù)網(wǎng)織紅細胞檢測技術(shù) 及臨床應用及臨床應用 任燕歌任燕歌1優(yōu)秀課件概概 念念網(wǎng)織紅細胞（reticulocyte,Ret或Reti）界于晚幼紅細胞和成熟紅細胞之間的過渡階段細胞。因其胞質(zhì)中殘存的核糖核酸經(jīng)堿性染料活體染色后，呈現(xiàn)點狀或線網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，故名網(wǎng)織紅細胞。2優(yōu)秀課件單能單能干細干細胞胞原始原始紅細紅細胞胞早幼早幼紅細紅細胞胞中幼中幼紅細紅細胞胞晚幼晚幼紅細紅細胞胞網(wǎng)織網(wǎng)織紅細紅細胞胞成熟成熟紅細紅細胞胞多能多能干細干細胞胞紅細胞發(fā)育過程圖紅細胞發(fā)育過程圖3優(yōu)秀課件各種網(wǎng)織紅細胞4優(yōu)秀課件網(wǎng)織紅細胞檢測技術(shù)檢測技術(shù)5優(yōu)秀課件網(wǎng)織紅細胞計數(shù)方法 活體染色手工鏡檢活體染色手工鏡檢 血液自動分析儀法血液自動分析儀法 流式細胞術(shù)檢測法流式細胞術(shù)檢測法 6優(yōu)秀課件手工鏡檢法原理 活體染料的堿性著色基團（帶正電荷）可與網(wǎng)織紅細胞RNA的磷酸基（帶負電荷）結(jié)合，使RNA膠體間的負電荷減少而發(fā)生凝縮，形成有色的點狀、線狀甚至 連綴成網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，而血紅蛋白著色相對較淡。借此在光鏡下與成熟紅細胞相區(qū)別。7優(yōu)秀課件操作方法操作方法取干凈試管一只，加入10g/L煌焦油藍溶液23滴，然后加入等量的血液混勻后放置1520min，使紅細胞充分染色；取少許染色好的血液，在潔凈載玻片上推成薄而均勻的血膜，干燥后用瑞氏染液復染(也可不復染）；在顯微鏡低倍鏡下選擇細胞分布均勻著色清晰的部位，用油鏡在血片上計數(shù)至少1000個紅細胞分布區(qū)域內(nèi)的網(wǎng)織紅細胞再除以1000計算出網(wǎng)織紅細胞的百分率。同時進行紅細胞計數(shù)，可計算網(wǎng)織紅細胞的絕對值。8優(yōu)秀課件9優(yōu)秀課件活體染色圖10優(yōu)秀課件常用儀器檢測ADVIA120儀器 對Retc可提供6個參數(shù)，包括網(wǎng)織紅細胞總數(shù)（Retic#）、網(wǎng)織紅細胞百分比（Retic%）、網(wǎng)織紅細胞平均體積（MCVr）、單個網(wǎng)織紅細胞平均血紅蛋白濃度（CHCMr）、網(wǎng)織紅細胞分布寬度（RDWr）、單個網(wǎng)織紅細胞血紅蛋白含量（CHr）等其中意義最大的除了總數(shù)，百分比以外，最重要的網(wǎng)織紅細胞血紅蛋白含量（CHr）參數(shù)。最大的優(yōu)點之一是隨時可計數(shù)Retic,十分便利，而且計數(shù)的細胞多，故很準確。11優(yōu)秀課件檢測儀器12優(yōu)秀課件根據(jù)網(wǎng)織紅細胞發(fā)射熒光強弱來判別區(qū)分網(wǎng)織紅細胞成熟程度，不同成熟階段的網(wǎng)織紅細胞含有不同量的RNA，從而根據(jù)熒光強度而獲得低、中、高熒光強度網(wǎng)織紅細胞群。L MH13優(yōu)秀課件檢測技術(shù)流式細胞術(shù)（流式細胞術(shù)（flow cytometry）原理 RNA經(jīng)堿性熒光染料處理后，根據(jù)熒光強度反映細胞內(nèi)RNA含量，可將Reti分為高熒光強度網(wǎng)織紅細胞（HFR）、中等熒光強度網(wǎng)織紅細胞（MFR）和低熒光強度網(wǎng)織紅細胞（LFR）三部分。利用上述三個指標可計算網(wǎng)織紅細胞的成熟指數(shù)（reticulocyte materation index,RMI）。RMI對評價骨髓移植后造血功能恢復情況和EPO的療效，以及監(jiān)護放、化療對骨髓的抑制作用具有更高的敏感性。14優(yōu)秀課件檢測圖示檢測圖示網(wǎng)織紅細胞平面散射圖15優(yōu)秀課件方法學評價手工鏡檢法的優(yōu)點是便捷、成本低。目前仍為臨床實驗室的常規(guī)檢驗方法。但致命的缺點是影響因素多、重復性差，CV20%，以低Reti的標本尤為明顯。即使進行絕對值計算，也因Reti計數(shù)不準確、某些貧血網(wǎng)織紅細胞提前釋放而失去其可靠性。這些不足嚴重影響了該指標的臨床應用。須加強質(zhì)量控制，必要時對計數(shù)結(jié)果加以校正。16優(yōu)秀課件方法學評價自動化儀器在許多方面具有標準化程序，試劑穩(wěn)定、反應時間一致，計數(shù)細胞量大、具有質(zhì)控和校準能力，因此在精密度和準確度上明顯優(yōu)于顯微鏡計數(shù)法。但儀器價格比較偏高，試劑成本和質(zhì)控成本大，影響到基層醫(yī)院、小型實驗室的使用期望及推廣。17優(yōu)秀課件臨床應用部分臨床應用部分18優(yōu)秀課件臨床參考范圍目前臨床上網(wǎng)織紅細胞的參考范圍為成人：0.8%2.0%,絕對值（2575）*109/L新生兒：2.0%6.0%網(wǎng)紅的總數(shù)或百分比對貧血貧血的臨床診斷及療效觀察非常有價值，是血液最常做的項目之一。19優(yōu)秀課件臨床意義網(wǎng)織紅細胞不僅僅是個計數(shù)參數(shù)問題，更有許多新的參數(shù)被引入臨床應用、科研和基礎(chǔ)研究。網(wǎng)織紅細胞的增加或減少直接反映了骨髓紅細胞的生成能力，主要用于對紅細胞減少性疾病、溶血性貧血、治療監(jiān)測或骨髓移植后骨髓造血功能的恢復、監(jiān)測放療和化療對骨髓造血功能的影響評估等方面。20優(yōu)秀課件網(wǎng)織紅細胞增高網(wǎng)織紅細胞增高提示骨髓造血功能旺盛見于各種增生性提示骨髓造血功能旺盛見于各種增生性貧血如缺鐵性貧血、巨幼細胞性貧血如缺鐵性貧血、巨幼細胞性 (缺乏葉缺乏葉酸、維生素酸、維生素B12)貧血、失血性貧血貧血、失血性貧血,尤以尤以 溶血性貧血時增加最為顯著溶血性貧血時增加最為顯著,常常10%。缺鐵性貧血及巨幼細胞性貧血在給予鐵劑、缺鐵性貧血及巨幼細胞性貧血在給予鐵劑、維生素維生素B12、葉酸治療之后、葉酸治療之后,可見網(wǎng)織紅細可見網(wǎng)織紅細胞明顯增加。胞明顯增加。21優(yōu)秀課件小細胞貧血單個網(wǎng)紅內(nèi)血紅蛋白含量（CHr）,小紅細胞比率（%Micro）/低色素紅細胞比率（%Hyp）即M/H對缺鐵性貧血是很好的指標。缺鐵性貧血缺鐵性貧血22優(yōu)秀課件缺鐵性貧血缺鐵性貧血23優(yōu)秀課件正細胞貧血網(wǎng)織紅細胞網(wǎng)織紅細胞增高增高正常或減低正?；驕p低急性出血急性出血溶血綜合征溶血綜合征骨髓衰減骨髓衰減慢性貧血慢性貧血24優(yōu)秀課件網(wǎng)織紅細胞減低網(wǎng)織紅細胞減低提示骨髓造血功能低下提示骨髓造血功能低下,常見于常見于 再生障礙性貧血再生障礙性貧血。絕對值低于絕對值低于5109/L可做為急性再生障礙性可做為急性再生障礙性 貧血的輔助診斷指標。此外，還貧血的輔助診斷指標。此外，還可見于骨髓浸潤性貧血如急性可見于骨髓浸潤性貧血如急性白血病等。25優(yōu)秀課件 圖2 骨髓浸潤性貧血 圖1 再障性貧血26優(yōu)秀課件大細胞貧血網(wǎng)織紅細胞網(wǎng)織紅細胞降低降低增高增高葉酸、葉酸、VitB12VitB12缺乏缺乏未經(jīng)治療的未經(jīng)治療的葉酸、葉酸、VitB12VitB12缺乏缺乏葉酸或葉酸或VitB12VitB12缺乏缺乏的急性失血的急性失血27優(yōu)秀課件網(wǎng)織紅細胞反應缺鐵性貧血或巨幼細胞貧血分別給予鐵劑、維生素B12或葉酸治療2-3d后，網(wǎng)織紅細胞計數(shù)值開始上升，7-10d達到最高(10%左右)；兩周以后逐漸降至正常水平，紅細胞、血紅蛋白開始升高。該過程表示貧血得到糾正。若網(wǎng)織紅細胞居高不下，提示尚未達到治療效果。28優(yōu)秀課件重要分析參數(shù)網(wǎng)織紅細胞血紅蛋白含量（CHr）BAYER ADVIA120 血液分析特有的測定參數(shù)之一，目前被認為具有診斷和療效觀察價值的新的網(wǎng)織紅測定參數(shù)。CHr已經(jīng)被FDA認可作為臨床報告參數(shù)，正常人CHr 28.0 pg/L29優(yōu)秀課件網(wǎng)織紅細胞成熟指數(shù)網(wǎng)織紅細胞成熟指數(shù)（RMI）計算參數(shù)計算公式：RMI=（MFR+HFR）/LFR 100%RMI對評價骨髓移植后造血功能恢復情況和EPO的療效，以及監(jiān)護放、化療對骨髓的抑制作用具有更高的敏感性。30優(yōu)秀課件臨床價值血液病的診斷和治療 網(wǎng)織紅細胞是尚未完全成熟的紅細胞，在周圍血液中的數(shù)值可反映骨髓紅細胞的生成功能，因而對血液病的診斷和治療反應的觀察均有其重要意義。放、化療監(jiān)測 機體接受放、化療后，如出現(xiàn)骨髓抑制，早期HFR和MFR降低，然后才檢測到網(wǎng)織紅細胞的降低。而停止放、化療，骨髓功能恢復后，又見上述指標依次上升?？芍笇R床醫(yī)師適時調(diào)整治療方案，避免造成嚴重的骨髓抑制。31優(yōu)秀課件 前景展望網(wǎng)織紅細胞分析具有很廣泛的應用前景，新技術(shù)和新參數(shù)的應用給臨床診斷治療 和監(jiān)測帶來新的研究方向和發(fā)展。32優(yōu)秀課件謝謝謝謝！33優(yōu)秀課件