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1、選 修 1 生 物 技 術 實 踐 專 題 三 酶 的 應 用 與 植 物 組 織 培 養(yǎng) 考綱考情識記要點1.酶 的 存 在 與 簡單 制 作 方 法 、 酶活 力 測 定 的 一 般原 理 和 方 法 2 酶 在 食 品 制造 和 洗 滌 等 方 面的 應 用 3 制 備 和 應 用固 定 化 酶 4 植 物 的 組 織培 養(yǎng) 我的問題(記 錄 下來 ， 重 點 突 破 )_ _ 1.無 論 是 菊 花 的 組 織 培 養(yǎng) 還 是 月 季 的 花 藥 培 養(yǎng) ， 其 理論 基 礎 都 是 植 物 細 胞 的 全 能 性 。2 植 物 組 織 培 養(yǎng) 包 括 脫 分 化 和 再 分 化 等

2、過 程 ， 培 養(yǎng)過 程 除 了 需 要 各 種 營 養(yǎng) 物 質(zhì) 外 ， 還 需 要 植 物 激 素 的 調(diào)節(jié) 。3 產(chǎn) 生 花 粉 植 株 的 途 徑 有 兩 條 ： 一 種 是 花 粉 通 過 胚狀 體 階 段 發(fā) 育 為 植 株 ； 另 一 種 是 花 粉 在 誘 導 培 養(yǎng) 基 上先 形 成 愈 傷 組 織 ， 再 將 其 誘 導 分 化 成 植 株 。4 固 定 化 細 胞 使 用 的 都 是 活 細 胞 ， 為 了 保 證 其 生 長 、增 殖 的 需 要 ， 應 該 為 其 提 供 一 定 的 營 養(yǎng) 物 質(zhì) 。5 固 定 化 細 胞 保 證 了 細 胞 的 完 整 性 ， 因

3、而 酶 的 環(huán) 境改 變 小 ， 對 酶 活 性 的 影 響 較 小 。 Z 整 合 核 心 考 點 1 酶 在 果 汁 生 產(chǎn) 、 洗 滌 等 方 面 的 應 用 (1)果 膠 酶 在 果 汁 生 產(chǎn) 中 的 作 用 果 膠 a 果 膠 的 成 分 與 存 在 ： 果 膠 是 的 主 要 組 成 成 分之 一 ， 它 是 由 聚 合 而 成 的 一 種 高 分 子 化 合 物 ， 不 溶 于 水 。 b 果 膠 與 果 汁 加 工 ： 果 膠 影 響 ， 使 果 汁 渾 濁 。 果 膠 酶 a 成 分 ： 果 膠 酶 并 不 是 特 指 某 一 種 酶 ， 而 是 分 解 果 膠 的 一 類

4、 酶 的 總 稱 。 b 作 用 ： 將 果 膠 分 解 成 可 溶 性 的 ， 使 出 汁 率 提 高 ， 也使 渾 濁 的 果 汁 變 得 澄 清 。 植 物 細 胞 壁 以 及 胞 間 層半 乳 糖 醛 酸 出 汁 率半 乳 糖 醛 酸 果 膠 酶 的 應 用 a 水 果 加 工 業(yè) ： 水 果 中 的 果 膠 經(jīng) 果 膠 酶 水 解 后 ， 可 降 低 果汁 的 _， 有 助 于 壓 榨 ； 在 葡 萄 酒 釀 造 中 加 入 果 膠酶 能 起 到 _作 用 ， 還 可 促 使 葡 萄 汁 中 的 酒 石 酸 發(fā) 生 沉淀 ； 果 膠 酶 可 用 于 橘 子 脫 囊 衣 ， 制 造 果

5、 粉 和 低 糖 果 凍 。 b 飼 料 工 業(yè) ： 果 膠 酶 與 酶 、 半 纖 維 素 酶 等 配 合 ，可 降 解 植 物 細 胞 壁 中 的 果 膠 和 纖 維 素 ， 促 使 淀 粉 、 脂 質(zhì) 、維 生 素 和 蛋 白 質(zhì) 等 釋 放 出 來 ， 從 而 提 高 了 飼 料 的 營 養(yǎng) 價 值 ；果 膠 酶 可 降 低 飼 料 的 黏 度 ， 促 進 飼 料 在 動 物 消 化 道 內(nèi)的 。 (2)加 酶 洗 衣 粉 在 洗 滌 中 的 應 用 加 酶 洗 衣 粉 ： 指 含 的 洗 衣 粉 。黏 度澄 清 纖 維 素消 化 吸 收 酶 制 劑 酶 制 劑 的 種 類 與 洗 滌

6、 原 理種 類 洗 滌 原 理 洗 滌 的 污 漬 種 類蛋 白 酶 蛋 白 質(zhì) _分 子 肽 或氨 基 酸 血 漬 、 奶 漬 及 各 種 食 品 類 的 蛋 白 質(zhì)污 垢脂 肪 酶 脂 肪 _ 食 品 的 油 漬 、 人 體 皮 脂 、 口 紅淀 粉 酶 淀 粉 _ 來 自 面 條 等 的 污 垢_酶 使 纖 維 的 結 構 變 得 蓬 松 棉 紡 品 的 表 面 浮 毛小甘 油 和 脂 肪 酸麥 芽 糖 、 葡 萄 糖纖 維 素 2.固 定 化 酶 和 固 定 化 細 胞 (1)概 念 ： 利 用 物 理 或 化 學 方 法 將_的 技 術 。 (2)方 法 及 適 用 對 象 一 般

7、來 講 ， 酶 更 適 合 用 法 固 定 化 ， 而細 胞 多 采 用 法 固 定 化 ， 這 是 因 為 個 大 的 細 胞 難 以 被吸 附 或 結 合 ， 而 個 小 的 酶 則 易 從 包 埋 材 料 中 漏 出 。酶 或 細 胞 固 定 在 一 定 空 間 內(nèi) 化 學 結 合 和 物 理 吸 附 包 埋 1.影響果汁產(chǎn)量的物質(zhì)及處理方法 (1)影響果汁產(chǎn)量的物質(zhì)纖維素和果膠是組成水果的重要物質(zhì)，這兩種物質(zhì)的存在使制作果汁時存在兩個問題：一是果肉的出汁率低，耗時長；二是榨取的果汁渾濁、黏度高，容易發(fā)生沉淀。 (2)處理方法酶解法常用的酶及其作用特點如下： 【特別提醒】果膠酶和纖維素酶

8、都是復合酶，并不特指某一種酶，而是一類酶的總稱。 (3)探究影響果膠酶活性因素實驗的分析實驗原則：遵循單一變量原則、對照原則，嚴格控制變量，盡量減少無關變量的影響。實驗原理：果膠酶活性受溫度、pH或酶抑制劑的影響，在最適溫度或pH時，其活性最高，果肉的出汁率、果汁的澄清度都與果膠酶的活性大小成正相關。 (4)三個實驗的變量分析實驗名稱自變量因變量注意事項探究溫度對果膠酶活性的影響溫度果汁量(澄清度)底物和酶在混合時的溫度是相同的溫度梯度越小，實驗結果越精確蘋果泥和果膠酶用量在各個試管應相同pH應為最適pH探究pH對果膠酶活性的影響pH果汁量(澄清度)溫度應為最適溫度pH梯度可用NaOH和鹽酸調(diào)

9、節(jié)用玻璃棒攪拌使反應充分進行探究果膠酶的用量果膠酶的用量果汁量(澄清度)制備蘋果勻漿后迅速加熱，使蘋果漿中果膠酶變性溫度、pH應為最適且保持不變 【特別提醒】在探究溫度或pH的影響時，不同的溫度梯度之間或不同的pH梯度之間構成了相互對照，通過相互對照可確定果膠酶活性的溫度或pH的最適值。 2不同加酶洗衣粉的洗滌原理及洗滌效果的實驗設計 (1)實驗變量的控制實驗目的自變量的控制比較普通洗衣粉與加酶洗衣粉的洗滌效果洗衣粉的種類探究加酶洗衣粉的最適溫度水溫(水溫梯度比較小)不同種類加酶洗衣粉的洗滌效果加酶洗衣粉種類 (2)影響洗滌效果的因素酶制劑的種類、污物的類型、水溫、水量、水質(zhì)、衣物的質(zhì)料、衣物

10、的大小、洗衣粉的用量、浸泡時間、洗滌時間等。 (3)使用時的注意事項溫度對酶制劑影響較大，溫度低，酶的活性受到抑制，不能充分發(fā)揮作用；溫度高，酶變性失活。故溫度應控制在4060 為宜。酶制劑有極強的選擇性，應根據(jù)不同的污垢選用不同的酶。加酶洗衣粉不宜長期儲存，一般儲存期為半年，超過一年酶的活性顯著下降。酶在強酸、強堿中活性降低以至失活，所以加酶洗衣粉 不能與強酸、強堿同用。 3 固 定 化 酶 與 固 定 化 細 胞 的 比 較項目固定化酶固定化細胞固定酶的種類一種一系列適用方法化學結合法、物理吸附法包埋法特點優(yōu)點酶既可與反應物結合，又可與產(chǎn)物分離，固定在載體上的酶可反復利用成本低，操作容易缺

11、點一種酶只能催化一種或一類化學反應可能導致反應效率下降實例固定化葡萄糖異構酶固定化酵母細胞 1 (2015江蘇卷)下 列 關 于 固 定 化 酶 和 固 定 化 細 胞 的 敘 述 ，錯 誤 的 是 ( ) A 固 定 化 酶 的 主 要 目 的 是 實 現(xiàn) 酶 的 重 復 利 用 B 溶 解 氧 交 換 受 阻 是 固 定 化 酶 應 用 的 重 要 限 制 因 素 C 固 定 化 細 胞 用 于 生 產(chǎn) 能 分 泌 到 細 胞 外 的 產(chǎn) 物 D 凝 膠 與 被 包 埋 細 胞 之 間 不 是 通 過 共 價 鍵 結 合 解析固定化酶可以反復使用，其主要目的就是實現(xiàn)酶的重復利用；限制固定化

12、酶的因素是溫度、pH等，而不是溶解氧的多少；細胞分泌到細胞外的產(chǎn)物人們才容易分離，所以固定化細胞用于生產(chǎn)能分泌到細胞外的產(chǎn)物；凝膠與被包埋細胞之間并沒有通過化學鍵結合，僅僅是將包埋細胞通過凝膠固定住。答案B 2 下 列 說 法 不 正 確 的 是 ( ) A 在 探 究 果 膠 酶 用 量 實 驗 中 ， 雖 然 實 驗 的 變 量 發(fā) 生 了 變 化 ，但 通 過 設 置 梯 度 來 確 定 最 適 值 的 思 想 方 法 是 不 變 的 B 植 物 、 霉 菌 、 酵 母 菌 和 細 菌 均 能 產(chǎn) 生 果 膠 酶 C 通 過 測 定 濾 出 的 蘋 果 汁 的 體 積 大 小 無 法 來

13、 判 斷 果 膠 酶 活性 的 高 低 D 人 們 使 用 果 膠 酶 、 纖 維 素 酶 等 來 解 決 制 作 果 汁 面 臨 的 問題解析纖維素和果膠是組成水果的重要物質(zhì)，這兩種物質(zhì)的存在使制作果汁時存在兩個問題：一是果肉的出汁率低，耗時長；二是榨 取的果汁渾濁、黏度高，容易發(fā)生沉淀?？梢杂霉吻宥扰c果汁產(chǎn)量的多少確認果膠酶活性的高低。答案C 3 下 列 關 于 “ 探 究 加 酶 洗 衣 粉 和 普 通 洗 衣 粉 的 洗 滌 效 果 ”的 敘 述 ， 合 理 的 是 ( ) A 先 用 熱 水 溶 解 洗 衣 粉 ， 再 將 水 溫 調(diào) 節(jié) 到 最 適 溫 度 B 實 驗 的 觀

14、察 指 標 可 以 是 相 同 洗 滌 時 間 內(nèi) 污 漬 的 殘 留 程 度 C 相 同 pH時 加 酶 洗 衣 粉 洗 滌 效 果 好 于 普 通 洗 衣 粉 D 衣 物 質(zhì) 地 和 洗 衣 粉 用 量 不 會 影 響 實 驗 結 果 解析本題考查“探究加酶洗衣粉的洗滌效果”實驗，意在考查考生對影響酶活性的因素與實驗的自變量和因變量等相關知識的分析能力。高溫會導致加酶洗衣粉中酶變性失活，所以不能用熱水溶解洗衣粉，A項錯誤；本實驗的目的是探究兩種洗衣粉的洗滌效果，所以觀察指標可以是相同洗滌時間內(nèi)污漬的殘留程度或達到同樣洗滌效果所需時間的長短，B項正確；酶的活性受pH影響，在酶作用的適宜條件下

15、，加酶洗衣粉的洗滌效果好于普通洗衣粉，C項錯誤；酶具有專一性，加有蛋白酶的洗衣粉不能用于真絲、羊毛等衣料衣物的洗滌，適當增加洗衣粉的用量會使洗滌效果增強，D項錯誤。答案B 4 (2015海南單科)生 產(chǎn) 果 汁 時 ， 用 果 膠 酶 處 理 果 泥 可 提 高果 汁 的 出 汁 量 。 回 答 下 列 相 關 問 題 ： (1)某 同 學 用 三 種 來 源 的 果 膠 酶 進 行 三 組 實 驗 ， 各 組 實 驗 除酶 的 來 源 不 同 外 ， 其 他 條 件 都 相 同 ， 測 定 各 組 的 出 汁 量 ，據(jù) 此 計 算 各 組 果 膠 酶 活 性 的 平 均 值 并 進 行 比

16、較 。 這 一 實 驗的 目 的 是 _。 (2)現(xiàn) 有 一 種 新 分 離 出 來 的 果 膠 酶 ， 為 探 究 其 最 適 溫 度 ， 某同 學 設 計 了 如 下 實 驗 ： 取 試 管 16支 ， 分 別 加 入 等 量 的 果 泥 、果 膠 酶 、 緩 沖 液 ， 混 勻 ， 平 均 分 為 4組 ， 分 別 置 于 0 、 5 、 10 、 40 下 保 溫 相 同 時 間 ， 然 后 ， 測 定 各 試 管 中 的出 汁 量 并 計 算 各 組 出 汁 量 平 均 值 。 該 實 驗 溫 度 設 置 的 不 足之 處 有 _和 _。比 較 不 同 來 源 果 膠 酶 的 活 性

17、 溫 度 范 圍 設 置 不 合 理 溫 度 梯 度 設 置 不 合 理 (3)某 同 學 取 5組 試 管 (A E)分 別 加 入 等 量 的 同 種 果 泥 ， 在 A、B、 C、 D4個 實 驗 組 的 試 管 中 分 別 加 入 等 量 的 緩 沖 液 和 不 同量 的 同 種 果 膠 酶 ， 然 后 ， 補 充 蒸 餾 水 使 4組 試 管 內(nèi) 液 體 體 積相 同 ； E組 加 入 蒸 餾 水 使 試 管 中 液 體 體 積 與 實 驗 組 相 同 。 將5組 試 管 置 于 適 宜 溫 度 下 保 溫 一 定 時 間 后 ， 測 定 各 組 的 出 汁量 。 通 過 A D組

18、實 驗 可 比 較 不 同 實 驗 組 出 汁 量 的 差 異 。 本實 驗 中 ， 若 要 檢 測 加 入 酶 的 量 等 于 0而 其 他 條 件 均 與 實 驗 組相 同 時 的 出 汁 量 ， E組 設 計 _(填 “ 能 ” 或 “ 不能 ” )達 到 目 的 ， 其 原 因 是 _。不 能 未 加 入 緩 沖 液 解析(1)利用不同來源的果膠酶處理果泥，檢測各組出汁量，據(jù)此可以比較不同來源的果膠酶的活性大小。(2)探究果膠酶的最適溫度時，一般在2070 范圍內(nèi)，每隔5進行梯度設計。顯然題中溫度設置過低，溫度梯度設置不均。(3)本實驗的目的是檢測不同量的同種果膠酶下的出汁量的差異，為

19、保證單一變量，A，E組都應加入等量緩沖溶液。 1 菊 花 的 組 織 培 養(yǎng) (1)植 物 組 織 培 養(yǎng) 的 原 理 和 程 序 原 理 ： _。植 物 細 胞 的 全 能 性 (2)植 物 組 織 培 養(yǎng) 的 影 響 因 素 選 材 ： 不 同 植 物 組 織 或 同 一 植 物 組 織 的 不 同 部 分 ， 培 養(yǎng)的 難 易 程 度 差 別 很 大 ， 菊 花 的 組 織 培 養(yǎng) ， 一 般 選 擇 。 培 養(yǎng) 基 ： 植 物 組 織 培 養(yǎng) 需 要 適 宜 的 培 養(yǎng) 基 ， 常 用 的 是 ， 在 配 制 好 的 培 養(yǎng) 基 中 ， 常 常 需 要 添 加 細 胞 分 裂 素 和生

20、 長 素 兩 種 植 物 激 素 。 其 他 條 件 ： 等 條 件 對 于 植 物 組 織 的 培 養(yǎng) 也 很重 要 。 未 開 花 植 株 的 莖 上 部 新 萌 生 的 側 枝MS培 養(yǎng) 基 pH、 溫 度 和 光 照 (3)實 驗 操 作 配 制 好 的 培 養(yǎng) 基 要 進 行 。 外 植 體 要 先 用 消 毒 6 7 s， 取 出 后 用 無 菌 水 清 洗 ，再 用 消 毒 ， 最 后 再 用 清 洗 。 接 種 時 要 始 終 在 進 行 ， 對 于 接 種 工 具 要用 滅 菌 。 在 18 22 的 中 培 養(yǎng) ， 得 到 試 管 苗 后 進 行 移 栽 。高 壓 蒸 汽

21、滅 菌70%酒 精0.1%的 氯 化 汞 無 菌 水火 焰 灼 燒 酒 精 燈 火 焰 旁無 菌 箱 2 月 季 的 花 藥 培 養(yǎng) (1)被 子 植 物 花 粉 的 發(fā) 育 過 程 花 粉 母 細 胞 (小 孢 子 母 細 胞 ) 時 期 單 核 期 期 精 子 。 (2)產(chǎn) 生 花 粉 植 株 產(chǎn) 生 花 粉 植 株 的 兩 種 途 徑 上 述 兩 種 途 徑 并 無 絕 對 界 限 ， 主 要 取 決 于_。 四 分 體 雙 核 培 養(yǎng) 基 中 激 素 的 種 類 及 其 濃 度 配 比 (3)影 響 花 藥 培 養(yǎng) 的 因 素 主 要 影 響 因 素 ： 與 。 其 他 條 件 ： 如

22、 親 本 植 株 的 生 長 條 件 、 材 料 的 預 處理 、 接 種 _等 。 花 藥 培 養(yǎng) 成 功 率 最 高 的 時 期 為 期 ， 為 此 常 選 擇_的 花 蕾 做 實 驗 材 料 。材 料 的 選 擇 培 養(yǎng) 基 的 組 成低 溫 密 度 單 核完 全 未 開 放 植物的組織培養(yǎng)應注意的問題 1植物組織培養(yǎng)技術和花藥離體培養(yǎng)技術的異同 2.花 粉 植 株 (單 倍 體 植 株 )產(chǎn) 生 的 兩 種 途 徑 3植物激素與組織培養(yǎng)生長素和細胞分裂素是啟動細胞分裂、脫分化和再分化的關鍵性激素，其作用及特點為： (1)在生長素存在的情況下，細胞分裂素的作用呈現(xiàn)加強的趨勢。 (2)使用

23、順序不同，結果不同，具體如下：使用順序?qū)嶒灲Y果先使用生長素，后使用細胞分裂素有利于細胞分裂，但細胞不分化先使用細胞分裂素，后使用生長素細胞既分裂又分化同時使用分化頻率提高 (3)用 量 比 例 不 同 ， 結 果 也 不 同 ： 【特別提醒】(1)在剝離花藥時，要盡量不損傷花藥，否則接種后容易從受傷部位產(chǎn)生愈傷組織，同時還要徹底去除花絲，因為與花絲相連的花藥不利于愈傷組織或胚狀體的形成。 (2)花藥開裂長出愈傷組織或釋放出胚狀體時，應及時轉移到分化培養(yǎng)基上。 為 了 探 究 6 BA和 IAA對 某 菊 花 品 種 莖 尖 外 植 體 再 生 叢 芽 的影 響 ， 某 研 究 小 組 在 MS

24、培 養(yǎng) 基 中 加 入 6 BA和 IAA， 配 制 成四 種 培 養(yǎng) 基 (見 表 )， 滅 菌 后 分 別 接 種 數(shù) 量 相 同 、 生 長 狀 態(tài) 一致 、 消 毒 后 的 莖 尖 外 植 體 ， 在 適 宜 條 件 下 培 養(yǎng) 一 段 時 間 后 ，統(tǒng) 計 再 生 叢 芽 外 植 體 的 比 率 (m)， 以 及 再 生 叢 芽 外 植 體 上 的叢 芽 平 均 數(shù) (n)， 結 果 如 下 表 。培 養(yǎng) 基 編 號 濃 度 /mgL 1 m/% n/個6 BA IAA1 0.5 0 76.7 3.12 0.1 77.4 6.13 0.2 66.7 5.34 0.5 60.0 5.0

25、 回 答 下 列 問 題 ： (1)按 照 植 物 的 需 求 量 ， 培 養(yǎng) 基 中 無 機 鹽 的 元 素 可 分 為_和 _兩 類 。 上 述 培 養(yǎng) 基 中 ， 6 BA屬 于_類 生 長 調(diào) 節(jié) 劑 。 (2)在 該 實 驗 中 ， 自 變 量 是 _， 因 變 量 是_， 自 變 量 的 取 值 范 圍 是 _。 (3)從 實 驗 結 果 可 知 ， 誘 導 叢 芽 總 數(shù) 最 少 的 培 養(yǎng) 基 是_號 培 養(yǎng) 基 。 (4)為 了 誘 導 該 菊 花 試 管 苗 生 根 ， 培 養(yǎng) 基 中 一 般 不 加 入_(填 “ 6 BA”或 “ IAA”)。大 量 元 素 微 量 元

26、素 細 胞 分 裂 素 IAA濃 度 再 生 叢 芽 外 植 體 的 比 率 (m)和 再 生 叢 芽 外 植 體 上 的 叢 芽 平 均 數(shù) (n) 0 0.5 mgL 1 1 6 BA 解析本題考查組織培養(yǎng)中細胞分裂素和生長素的作用，同時考查考生的實驗分析能力，難度較小。按照植物的需求量，在培養(yǎng)基中加入的無機鹽可分為大量元素和微量元素。6BA是細胞分裂素類生長調(diào)節(jié)劑，由于該實驗探究的是6BA和IAA對菊花品種莖尖外植體再生叢芽的影響，而6BA的濃度在各實驗組中相同，因此實驗的自變量是IAA濃度，取值范圍是00.5 mgL1，因變量是再生叢芽外植體的比率及再生叢芽外植體上的叢芽平均數(shù)，即表中

27、的m和n。再生外植體數(shù)乘以外植體上的叢芽平均數(shù)即為叢芽總數(shù)，計算可知誘導叢芽總數(shù)最少的是1號培養(yǎng)基。在植物組織培養(yǎng)中，生長素用于誘導細胞的分裂和根的分化，細胞分裂素主要促進細胞分裂和分化出不定芽，因此為了誘導生根，培養(yǎng)基中一般不加6BA(細胞分裂素類生長調(diào)節(jié)劑)而加入IAA(生長素類生長調(diào)節(jié)劑)。 T 突 破 考 疑 考 技 1酶的應用易錯點 (1)在蘋果泥和果膠酶混合之前，一定要保證底物和酶達到所要求的溫度或pH條件。以避免混合后條件的變化，確保實驗結果的可靠性。 (2)相同條件下的酶促反應速率的快慢可以表示酶活性的高低，但酶活性與酶促反應速率仍然是兩個完全不同的概念，其影響因素也不完全相同

28、，如酶的濃度、反應物的濃度可以影響酶促反應速率，但不能影響酶的活性。 2固定化實驗中的易錯點 (1)海藻酸鈉溶液的濃度對包埋酵母細胞數(shù)量的影響：海藻酸鈉溶液濃度過高，將很難形成凝膠珠；濃度過低，形成的凝膠珠所包埋的酵母細胞的數(shù)量少。 (2)海藻酸鈉溶液配制注意事項： 海藻酸鈉溶化時要用小火或間斷加熱，避免海藻酸鈉發(fā)生焦糊。將溶化后的海藻酸鈉先冷卻至室溫，再與酵母細胞混合，避免高溫殺死酵母細胞。固定化酵母細胞時，應將海藻酸鈉酵母細胞的混合液用注射器緩慢滴加到CaCl 2溶液中，而不是注射，以免影響凝膠珠的形成。 3植物組織培養(yǎng)實驗操作中易錯點 (1)材料的選取：菊花的組織培養(yǎng)實驗中，應選擇未開花

29、植株的莖上部新萌生的側枝；月季花藥的培養(yǎng)實驗中，應選擇花粉發(fā)育過程中的單核靠邊期的花粉進行培養(yǎng)。 (2)外植體消毒：所用消毒劑為體積分數(shù)為70%的酒精和質(zhì)量分數(shù)為0.1%的氯化汞溶液，所使用的清洗液是無菌水。 (3)培養(yǎng)過程：在初期，菊花的組織培養(yǎng)需光照，月季花藥的培養(yǎng)不需光照；而在后期均需光照。 (4)月季花藥培養(yǎng)得到的并不都是單倍體植株：花粉壁發(fā)育成二倍體，花藥發(fā)育成單倍體。 (5)花藥開裂長出愈傷組織或釋放出胚狀體時，應及時轉移到分化培養(yǎng)基上。 1(2015江蘇單科)如 圖 為 制 備 人 工 種 子 部 分 流 程 示 意 圖 ， 下 列 敘 述 正確 的 是 ( ) A 胚 狀 體

30、是 外 植 體 在 培 養(yǎng) 基 上 脫 分 化 形 成 的 一 團 愈 傷 組 織 B 該 過 程 以 海 藻 酸 鈉 作 為 營 養(yǎng) 成 分 ， 以 CaCl 2溶 液 作 為 凝 固 劑 C 可 在 海 藻 酸 鈉 溶 液 中 添 加 蔗 糖 ， 為 胚 狀 體 提 供 碳 源 D 包 埋 胚 狀 體 的 凝 膠 珠 能 夠 隔 絕 空 氣 ， 有 利 于 人 工 種 子 的 儲 藏 解析胚狀體可由愈傷組織經(jīng)再分化形成，具有生根發(fā)芽的能力；海藻酸鈉是包埋的載體，不提供營養(yǎng)成分，CaCl2能使海藻酸鈉形成凝膠珠；植物組織培養(yǎng)中常用蔗糖作為碳源；人工種子儲藏過程中胚狀體細胞需要進行有氧呼吸，不

31、能完全隔絕空氣。答案C 2 (2016江蘇高三調(diào)研)在 酵 母 細 胞 固 定 化 的 實 驗 中 ， 下 列操 作 與 目 的 不 相 符 的 是 ( ) A 干 酵 母 加 入 蒸 餾 水 攪 拌 均 勻 后 ， 放 置 一 段 時 間 ， 使 酵 母細 胞 活 化 B 采 用 小 火 間 斷 加 熱 的 方 法 ， 防 止 海 藻 酸 鈉 發(fā) 生 焦 糊 C 將 活 化 的 酵 母 細 胞 加 入 海 藻 酸 鈉 溶 液 ， 輕 輕 攪 拌 ， 以 免產(chǎn) 生 氣 泡 D 用 注 射 器 滴 加 溶 液 時 要 接 近 CaCl2溶 液 的 液 面 ， 防 止 凝 膠珠 出 現(xiàn) “ 尾 巴

32、 ” 解析實驗中，為了防止凝膠珠出現(xiàn)“尾巴”，注射器應離CaCl 2溶液的液面遠一些。答案D 3 (2015山東理綜)乳 糖 酶 能 夠 催 化 乳 糖 水 解 為 葡 萄 糖 和 半乳 糖 ， 具 有 重 要 應 用 價 值 。 乳 糖 酶 的 制 備 及 固 定 化 步 驟 如 下 ： (1)篩 選 產(chǎn) 乳 糖 酶 的 微 生 物 L時 ， 宜 用 _作 為 培 養(yǎng)基 中 的 唯 一 碳 源 。 培 養(yǎng) 基 中 瓊 脂 的 作 用 是 _。從 功 能 上 講 ， 這 種 培 養(yǎng) 基 屬 于 _。 (2)培 養(yǎng) 微 生 物 L前 ， 宜 采 用 _方 法 對 接 種 環(huán) 進 行 滅 菌 。乳

33、 糖 凝 固 劑 選 擇 培 養(yǎng) 基 灼 燒 (3)純 化 后 的 乳 糖 酶 可 用 電 泳 法 檢 測 其 分 子 量 大 小 。 在 相 同 條件 下 ， 帶 電 荷 相 同 的 蛋 白 質(zhì) 電 泳 速 度 越 快 ， 說 明 其 分 子 量 越_。 (4)乳 糖 酶 宜 采 用 化 學 結 合 法 (共 價 鍵 結 合 法 )進 行 固 定 化 ， 可通 過 檢 測 固 定 化 乳 糖 酶 的 _確 定 其 應 用價 值 。 除 化 學 結 合 法 外 ， 酶 的 固 定 化 方 法 還 包 括_、 _、 離 子 吸 附 法 及 交 聯(lián) 法等 。 小 (酶 )活 性 或 ： (酶 )活

34、 力 包 埋 法 物 理 吸 附 法 解析(1)該選擇培養(yǎng)基的唯一碳源應為乳糖，只有能利用乳糖的微生物能在該培養(yǎng)基上生存，而其他微生物將因缺乏碳源而無法生存，利用這個原理可以篩選產(chǎn)乳糖酶的微生物L；固體培養(yǎng)基中瓊脂是很好的凝固劑；從功能上講這種培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。(2)接種環(huán)的滅菌宜采用灼燒法。(3)電泳過程中若蛋白質(zhì)所帶電荷相同，則電泳速度只與蛋白質(zhì)的分子量大小有關，蛋白質(zhì)分子量越小，電泳速度越快。(4)固定化酶常要通過測定其活性來確定其應用價值；酶的固定化方法包括包埋法、化學結合法、物理吸附法等。 4 (2014浙江自選模塊)下 面 是 關 于 固 定 化 酶 和 細 菌 培 養(yǎng) 實驗

35、的 問 題 。 請 回 答 ： (1)某 興 趣 小 組 欲 利 用 固 定 化 酶 進 行 酶 解 淀 粉 的 實 驗 ， 分 組 見下 表 。 將 吸 附 了 淀 粉 酶 的 石 英 砂 裝 入 柱 中 后 ， 需 用 蒸 餾 水 充 分 洗滌 固 定 化 酶 柱 ， 以 除 去 _。 按 上 表 分 組 ，將 配 制 好 的 淀 粉 溶 液 加 入 到 固 定 化 酶 柱 中 ， 然 后 取 一 定 量 的流 出 液 進 行 KII 2檢 測 。 若 流 出 液 呈 紅 色 ， 表 明 有 _生 成 ； 若 各 組 呈 現(xiàn) 的 顏 色 有 顯 著 差 異 ， 則 流 出 液 中 淀 粉

36、水 解產(chǎn) 物 濃 度 最 高 的 是 _組 。組 別 固 定 化 酶 柱 長 度 (cm) 淀 粉 溶 液 的 流 速 (mLmin 1)甲乙丙丁 10101515 0.30 50 30 5未 吸 附 的 淀 粉 酶 糊 精 丙 (2)下 列 關 于 上 述 固 定 化 酶 實 驗 的 敘 述 ， 錯 誤 的 是 ( ) A 固 定 化 酶 柱 長 度 和 淀 粉 溶 液 流 速 決 定 了 酶 柱 中 酶 的 含 量 B 淀 粉 溶 液 流 速 過 快 會 導 致 流 出 液 中 含 有 淀 粉 C 各 組 實 驗 所 用 的 淀 粉 溶 液 濃 度 應 相 同 D 淀 粉 溶 液 的 pH

37、對 實 驗 結 果 有 影 響 A 解析(1)將吸附了酶的石英砂裝入柱中后，有的酶未吸附到固定化酶柱上，故應用蒸餾水進行洗滌。KII2用來檢測糊精的生成，顏色反應為紅色。從固定化酶柱長度(酶量)、淀粉溶液的流速兩方面分析，丙組固定化酶柱最長，酶量最多，溶液流速最慢，酶與淀粉接觸更加充分，故丙組淀粉水解產(chǎn)物濃度最高。 (2)酶柱的長度決定了酶的總量，而與溶液的流速無關，故A項錯誤。溶液流速過快，縮短了酶促反應的時間，淀粉水解不徹底，故B項正確。根據(jù)對照實驗單一變量原則，C項正確。酶的活性受溫度、pH影響，故D項正確。 5 (2014江蘇理綜)為 了 獲 得 植 物 次 生 代 謝 產(chǎn) 物 ， 先

38、 用 植 物外 植 體 獲 得 愈 傷 組 織 ， 然 后 在 液 體 培 養(yǎng) 基 中 懸 浮 培 養(yǎng) 。 請 回答 下 列 問 題 ： (1)外 植 體 經(jīng) 誘 導 后 形 成 愈 傷 組 織 的 過 程 稱 為 _。 (2)在 愈 傷 組 織 懸 浮 培 養(yǎng) 時 ， 細 胞 干 重 、 蔗 糖 濃 度 和 pH的 變化 如 圖 所 示 。 細 胞 干 重 在 12 d后 下 降 的 原 因 有_； 培 養(yǎng) 液 中 蔗 糖 的 作 用 是_、 _。 脫 分 化 蔗 糖 濃 度 下 降 ， pH降 低 提 供 能 源 調(diào) 節(jié) 滲 透 壓 (3)多 倍 體 愈 傷 組 織 細 胞 產(chǎn) 生 的 次

39、 生 代 謝 產(chǎn) 物 量 常 高 于 二 倍 體 。二 倍 體 愈 傷 組 織 細 胞 經(jīng) _處 理 ， 會 產(chǎn) 生 染色 體 加 倍 的 細 胞 。 為 檢 測 愈 傷 組 織 細 胞 染 色 體 數(shù) 目 ， 壓 片 前常 用 纖 維 素 酶 和 _酶 解 離 愈 傷 組 織 。 若 愈 傷 組 織 細 胞(2n)經(jīng) 誘 導 處 理 后 ， 觀 察 到 染 色 體 數(shù) 為 8n的 細 胞 ， 合 理 的 解釋 是 _、_。秋 水 仙 素 (低 溫 ) 果 膠 經(jīng) 加 倍 到 4n的 細 胞 處 于 有 絲 分 裂 后 期 經(jīng) 加 倍 到 8n的 細 胞 處 于 有 絲 分 裂 中 期 (4)

40、為 了 更 好 地 獲 得 次 生 代 謝 產(chǎn) 物 ， 生 產(chǎn) 中 采 用 植 物 細 胞 的 固定 化 技 術 ， 其 原 理 與 酵 母 細 胞 固 定 化 類 似 。 下 列 說 法 正 確 的有 _(填 序 號 )。 選 取 旺 盛 生 長 的 愈 傷 組 織 細 胞 包 埋 必 須 在 光 照 條 件 下 培 養(yǎng) 培 養(yǎng) 過 程 中 需 通 空 氣 固 定 化 后 植 物 細 胞 生 長 會 變 慢 解析本題考查了植物細胞培養(yǎng)、染色體變異等知識。 (1)由外植體形成愈傷組織的過程，叫作脫分化。 (2)由曲線很容易看出隨著培養(yǎng)的進行，蔗糖濃度下降，pH下降，導致細胞干重降低。培養(yǎng)基中蔗糖作為碳源，為細胞提供能量，另外，蔗糖還能調(diào)節(jié)培養(yǎng)液的滲透壓。 (3)誘導染色體加倍，常用的方法是用秋水仙素(低溫)處理植物的組織細胞，這樣細胞中染色體數(shù)目就由2n變?yōu)?n，也有的由4n變?yōu)?n。 (4)為更好地獲得次生代謝產(chǎn)物，應選取生長旺盛、代謝快的愈傷組織細胞。愈傷組織的培養(yǎng)要嚴格避光，因為在光照條件下容易分化產(chǎn)生維管等組織，不利于產(chǎn)生大量的愈傷組織。為了保證愈傷組織進行有氧呼吸，應通氣培養(yǎng)。愈傷組織包埋以后，與外界物質(zhì)交換過程受到影響，所以生長會變緩慢。