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新課標(biāo)人教版高中生物選修三專題一《DNA重組技術(shù)的基本工具》

上傳人:san****019 文檔編號(hào):22988374 上傳時(shí)間:2021-06-03 格式:PPT 頁(yè)數(shù):28 大?。?.45MB
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1、生 長(zhǎng) 快 、 肉 質(zhì) 好 的 轉(zhuǎn) 基 因魚 (中 國(guó) ) 乳 汁 中 含 有 人 生 長(zhǎng) 激 素 的轉(zhuǎn) 基 因 牛 (阿 根 廷 )過(guò) 程 分 析 DNA重 組 技 術(shù) 的 基 本 工 具 準(zhǔn) 確 切 割 DNA的 工 具 ( “ 分 子 手 術(shù) 刀 ” ) DNA片 段 的 連 接 工 具 ( “ 分 子 縫 合 針 ” ) 基 因 轉(zhuǎn) 移 工 具 ( “ 分 子 運(yùn) 輸 車 ” ) 基 因 的 大 小 以 納 米 計(jì) 算 , 要 對(duì) 它 進(jìn) 行 剪 切 、拼 接 等 操 作 , 沒 有 非 常 精 細(xì) 的 工 具 是 不 行 的 。 進(jìn)行 基 因 操 作 最 少 需 要 以 下 三 種

2、工 具 : 黏 性 末 端平 末 端 大 腸 桿 菌 的 一 種 限 制 酶( EcoR )能 識(shí) 別 GAATTC序 列 ,并 在 G和 A之 間 切 開 形 成 黏 性 末端 。 Sma 能 識(shí) 別 CCCGGG序 列 , 并在 C和 G之 間 切 割 形 成 平 末 端 。 重 播 限 制 酶 切 割 DNA后 形成 的 末 端 黏 性 末 端 、平 末 端 是 如 何 形 成 的 ? 基 因 的 針 線 DNA連 接 酶切 斷 的 DNA片 段 要 與 受 體 細(xì) 胞 的DNA連 接 , 你 覺 得 可 以 用 什 么 酶 ?DNA聚 合 酶 和 DNA連 接 酶 有 何相 同 點(diǎn) 和

3、 不 同 點(diǎn) ? DNA連 接 酶 DNA聚 合 酶連 接 DNA鏈 雙 鏈 單 鏈連 接 部 位 在 兩 DNA片 段 之 間形 成 磷 酸 二 酯 鍵 將 單 個(gè) 核 苷 酸 加到 已 存 在 的 核 酸片 段 的 3末 端 的羥 基 上 , 形 成 磷酸 二 酯 鍵 限 制 酶 切 割 后 有 兩 種 不 同 的 結(jié) 果 ,一 種 產(chǎn) 生 黏 性 末 端 , 一 種 產(chǎn) 生 平 末 端 。那 么 恢 復(fù) 它 們 的 連 接 時(shí) , 所 用 DNA連接 酶 是 否 可 以 不 加 選 擇 ?E.coliDNA連 接 酶 : 連 接 黏 性 末 端T4DNA連 接 酶 : 連 接 黏 性 末

4、 端 和 平 末 端 基 因 進(jìn) 入 受 體 細(xì) 胞 的 載 體 要 讓 一 個(gè) 從 甲 生 物 細(xì) 胞 內(nèi) 取 出來(lái) 的 基 因 在 乙 生 物 體 內(nèi) 進(jìn) 行 表 達(dá) ,首 先 得 將 這 個(gè) 基 因 送 到 乙 生 物 的 細(xì)胞 內(nèi) 去 ! 能 將 外 源 基 因 送 入 細(xì) 胞 的工 具 就 是 載 體 。 載 體 必 須 具 備 的 條 件如 果 載 體 對(duì) 受 體 細(xì) 胞 有 害 將 怎 樣 ?目 的 基 因 是 否 進(jìn) 入 受 體 細(xì) 胞 , 沒 有 標(biāo) 記基 因 我 們 能 否 鑒 定 ?假 如 目 的 基 因 導(dǎo) 入 受 體 細(xì) 胞 后 不 能 復(fù) 制將 怎 樣 ?作 為 載

5、 體 沒 有 切 割 位 點(diǎn) 將 怎 樣 ? 作 為 載 體 的 必 要 條 件1、 能 夠 在 宿 主 細(xì) 胞 中 復(fù) 制 并 穩(wěn) 定 地 保 存 ;2、 具 有 多 個(gè) 限 制 酶 切 點(diǎn) , 以 便 與 外 源 基 因連 接 ;3、 具 有 某 些 標(biāo) 記 基 因 , 便 于 進(jìn) 行 篩 選 。 (如 抗 菌 素 的 抗 性 基 因 、 產(chǎn) 物 具 有 顏 色 反 應(yīng)的 基 因 等 )4、 對(duì) 受 體 細(xì) 胞 無(wú) 害 作 為 載 體 的 必 要 條 件 能 自 我 復(fù) 制 有 切 割 位 點(diǎn) 能 與 目 的 基 因 結(jié) 合 能 進(jìn) 入 受 體 生 物 細(xì) 胞 并 在 受 體 生 物 細(xì)

6、胞 內(nèi) 復(fù) 制并 表 達(dá) ; 有 遺 傳 標(biāo) 記 基 因 對(duì) 受 體 細(xì) 胞 無(wú) 害 比 較 容 易 得 到 3、 基 因 的 運(yùn) 輸 工 具 運(yùn) 載 體 能 復(fù) 制 并 帶 著 插入 的 目 的 基 因 一起 復(fù) 制有 切 割 位 點(diǎn)有 標(biāo) 記 基 因 的 存在 , 將 來(lái) 可 用 含青 霉 素 的 培 養(yǎng) 基鑒 別 。 在 基 因 工 程 中 , 切 割 運(yùn) 載 體 和含 有 目 的 基 因 的 DNA片 段 , 需使 用 ( )A.同 種 限 制 酶 B. 兩 種 限 制 酶C.同 種 連 接 酶 D. 兩 種 連 接 酶 達(dá) 標(biāo) 練 習(xí) 在 基 因 工 程 中 , 切 割 運(yùn) 載 體

7、和 含 有 目 的 基 因的 DNA片 段 , 需 使 用 ( )A. 同 種 限 制 酶 B. 兩 種 限 制 酶C. 同 種 連 接 酶 D. 兩 種 連 接 酶 基 因 工 程 常 用 的 受 體 細(xì) 胞 有 ( )(1)大 腸 桿 菌 ( 2) 枯 草 桿 菌( 3) 支 原 體 ( 4) 動(dòng) 植 物 細(xì) 胞A. ( 3) ( 4) B. ( 1) ( 2) ( 4)C. ( 2) ( 3) ( 4) D. ( 1) ( 2) ( 3) A、 BamHI和 EcoRI; 末 端 互 補(bǔ) 序 列 AATT B、 BamHI和 Hind ; 末 端 互 補(bǔ) 序 列 GATCC、 EcoRI

8、和 Hind ; 末 端 互 補(bǔ) 序 列 AATTD、 BamHI和 BglII; 末 端 互 補(bǔ) 序 列 GATC限 制 酶 是 一 種 核 酸 切 割 酶 , 可 辨 識(shí) 并 切 割 DNA分 子 上特 定 的 核 苷 酸 堿 基 序 列 。 下 圖 為 四 種 限 制 酶 BamHI,EcoRI, Hind 以 及 Bgl 的 辨 識(shí) 序 列 。 箭 頭 表 示每 一 種 限 制 酶 的 特 定 切 割 部 位 , 其 中 哪 兩 種 限 制 酶所 切 割 出 來(lái) 的 DNA片 段 末 端 可 以 互 補(bǔ) 黏 合 ? 其 正 確的 末 端 互 補(bǔ) 序 列 為 何 ? ( ) 本 課 小 結(jié) : 分 類作 用 來(lái) 源作 用特 點(diǎn)結(jié) 果 作 業(yè) : 重 組 DNA分 子 的 模 擬 制 作 。效 果 分 析 :

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