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1、鄰 菲 羅 啉 分 光 光 度 法 測 定 鐵 （ 一 ）陳 睿 婷E-mail:ruiting_儀 器 分 析 實(shí) 驗(yàn) 紫 外 -可 見 分 光 光 度 法 紫 外 -可 見 分 光 光 度 法 是 研 究 物 質(zhì) 分 子 在 紫 外 -可 見 光 區(qū) 分 子 吸 收光 譜 的 分 析 方 法 。入 射 光 I0 透 射 光 It 0lg lg tIA T I 吸 光 度 ： 單 光 束 紫 外 可 見 分 光 光 度 計(jì) 主 要 部 件原 理 ： 由 光 源 發(fā) 出 的 連 續(xù) 光 譜 ， 進(jìn) 入 單 色 器 經(jīng) 色 散 元 件 分 光 ，獲 得 的 單 色 光 分 別 通 過 參 比 溶

2、 液 和 樣 品 溶 液 ， 進(jìn) 行 光 強(qiáng) 度 （ 吸收 ） 的 測 定 。 0.575光 源 單 色 器 吸 收 池 檢 測 器 顯 示 （ 一 ） 、 掌 握 分 光 光 度 法 測 定 鐵 的 原 理 及 方 法（ 二 ） 、 通 過 測 定 鐵 的 條 件 試 驗(yàn) ， 掌 握 分 光 光 度 法 測 定 鐵 的 條件 及 方 案 的 擬 定 。（ 三 ） 、 掌 握 分 光 光 度 計(jì) 的 組 成 部 分 ， 操 作 注 意 事 項(xiàng) 和 如 何 使用 它 實(shí) 現(xiàn) 對(duì) 物 質(zhì) 的 檢 測 。（ 四 ） 、 掌 握 7200型 分 光 光 度 計(jì) 的 使 用 方 法 。一 、 實(shí) 驗(yàn) 目

3、 的 Lamber-Beer定 律 Lambert-Beer定 律 是 說 明 物 質(zhì) 對(duì) 單 色 光 的 吸 光 度 （ A） 與 吸光 物 質(zhì) 的 濃 度 （ c） 和 液 層 厚 度 （ l） 間 的 關(guān) 系 的 定 律 ， 是 光 吸收 的 基 本 定 律 ， 是 紫 外 -可 見 光 度 法 定 量 的 基 礎(chǔ) 。Sample (conc. C)Path length l入 射 光 I0 透 射 光 It A Ecl 濃 度（ 比 爾 定 律 ） 厚 度(朗 伯 定 律 ）吸 光 系 數(shù)吸 光 度 二 、 實(shí) 驗(yàn) 原 理 在 pH=2 9的 條 件 下 ， Fe2+與 鄰 菲 羅 啉

4、 （ 鄰 二 氮 菲 ） 生 成 很穩(wěn) 定 的 橙 紅 色 的 絡(luò) 合 物 ， 其 反 應(yīng) 如 下 ：此 絡(luò) 合 物 的 logK 穩(wěn) =21.3， =11000。 顯 色 反 應(yīng) ： 使 得 無 色 物 質(zhì) 通 過 反 應(yīng) 生 成 有 色 物 質(zhì) ， 提 高測 定 靈 敏 度 和 選 擇 性 。 鄰 菲 羅 啉 -Fe2+配 合 物 的 紫 外 吸 收 光 譜510nm青 綠 色橙 紅 色 4Fe3+2NH2OHHCl4Fe2+N2 +H2O+4H+ +2Cl-在 顯 色 前 ， 首 先 用 鹽 酸 羥 胺 把 Fe3+還 原 為 Fe2+： 測 定 時(shí) ， 控 制 溶 液 酸 度 在 pH

5、=2 9較 適 宜 ， 酸 度 過 高 ， 反應(yīng) 速 度 慢 ， 酸 度 太 低 ， 則 Fe2+水 解 ， 影 響 顯 色 。 通 常 在 pH值 5的 緩 沖 液 介 質(zhì) 中 測 定 。 本 試 驗(yàn) 中 用 HAc-NaAc緩 沖 溶 液 三 、 儀 器 和 試 劑7200型 可 見 分 光 光 度 計(jì) 、 pHS-3B型 酸 度 計(jì)儀 器 ：鐵 標(biāo) 準(zhǔn) 溶 液 （ CFe3+=10g/ml）10%鹽 酸 羥 胺 水 溶 液0.1 鄰 菲 羅 啉 水 溶 液1mol/L NaAc緩 沖 溶 液C(HCl)=0.1mol/L溶 液 C(NaOH)=0.4mol/L溶 液試 劑 ： 四 、 實(shí)

6、 驗(yàn) 步 驟（ 一 ） 條 件 試 驗(yàn)F 1、 測 定 波 長 選 擇 ： 吸 收 曲 線 (A-l曲 線 )的 繪 制 ， 選 擇 最 大吸 收 波 長 作 為 測 定 波 長 ；F 2、 反 應(yīng) 時(shí) 間 選 擇 ： 鄰 菲 羅 啉 鐵 配 合 物 的 穩(wěn) 定 性 ， 繪 制 A-t曲 線 ；F 3、 顯 色 劑 用 量 ： 顯 色 劑 濃 度 的 影 響 ， 繪 制 A-V曲 線 ；F 4、 pH選 擇 ： 溶 液 酸 度 對(duì) 配 合 物 的 影 響 ， 繪 制 A-pH曲 線 。 1、 吸 收 曲 線 的 繪 制試 樣 配 制 ： 鐵 標(biāo) 液CFe3+=10 g/mL 鹽 酸 羥 胺10

7、% NaAc緩 沖 液1mol/L 鄰 菲 羅 啉0.1%參 比 溶 液 0.00mL 1mL 5mL 5mL試 液 5.00mL 1mL 5mL 5mL吸 收 曲 線 （ A-） 波 長 (nm) 450 460 470 480 490 500 510吸 光 度 A波 長 (nm) 520 530 540 550 560 570 吸 光 度 A 用 蒸 餾 水 定 容 至 50mL靜 置 10分 鐘 ， 測 試 2、 鄰 菲 羅 啉 配 合 物 的 穩(wěn) 定 性試 樣 配 制 ： 與 實(shí) 驗(yàn) 1一 樣 ， 可 共 用 。鐵 標(biāo) 液CFe3+=10 g/mL 鹽 酸 羥 胺10% NaAc緩 沖

8、 液1mol/L 鄰 菲 羅 啉0.1%參 比 溶 液 0.00mL 1mL 5mL 5mL試 液 5.00mL 1mL 5mL 5mL曲 線 （ A-t） ：時(shí) 間 t (min) 5 15 30 60 90吸 光 度 A檢 測 波 長 ： 510nm 用 蒸 餾 水 定 容 至 50mL0 2 4 6 10 15 45 60 3、 顯 色 劑 濃 度 影 響試 樣 配 制 ： 鐵 標(biāo) 液CFe3+=10 g/mL 鹽 酸 羥 胺10% NaAc緩 沖 液1mol/L 鄰 菲 羅 啉0.1%試 液 10.00mL 1mL 5mL x mL曲 線 （ c-A） 鄰 菲 羅 啉 0.1% 0.1

9、0mL 0.30mL 0.50mL 1.00mL 3.00mL 5.00mL 10.00mL吸 光 度 A參 比 ： 蒸 餾 水 ； 檢 測 波 長 ： 510nm 靜 置 10分 鐘 ， 測 試用 蒸 餾 水 定 容 至 50mL 4、 溶 液 酸 度 對(duì) 配 合 物 的 影 響試 樣 配 制 ：鐵 標(biāo) 液10 g/mL 鹽 酸 羥胺10% pH調(diào) 節(jié)溶 液 鄰 菲 羅 啉0.1% pH值 吸 光 度1 10.00mL 2mL 5mL 0.4mol/LNaOH 5mL2 10.00mL 2mL 5mL 0.1mol/LHCl 5mL3 10.00mL 2mL 5mL NaAc緩 沖 5mL參

10、 比 ： 蒸 餾 水 作 參 比 ； 檢 測 波 長 ： 510nm溶 液 反 應(yīng) 5分 鐘 后 測 量 ， 加 樣 順 序 從 左 到 右 ， 看 溶 液 pH值 對(duì) 配合 物 穩(wěn) 定 性 和 配 位 反 應(yīng) 的 速 度 的 影 響 。 用 蒸 餾 水 定 容 至 50mL 1、 移 液 管 的 使 用 常 見 移 液 管 ： 標(biāo) 有溫 度 和 容 量 (注 意 是否 標(biāo) 有 吹 ) 用 途 ： 準(zhǔn) 確 移 取 一定 體 積 的 液 體 操 作 ： 洗 滌 (蒸 餾 水 )、潤 洗 (3次 )、 移 液 、洗 滌 干 凈注 意 事 項(xiàng) ： 1、 整 個(gè) 操 作 過 程 中 ， 保 持 移 液

11、 管 的 垂 直 ； 2、 讀 數(shù)時(shí) 視 線 與 凹 液 面 平 齊 ； 3、 每 次 移 液 后 ， 錐 形 瓶 壁 用 蒸 餾 水 沖洗 （ 洗 瓶 的 頭 不 要 碰 到 瓶 壁 ） 容 量 瓶 的 使 用 注 意 事 項(xiàng) ：1、 使 用 前 要 檢 漏 。 加 水 至 刻 度 ，塞 上 瓶 塞 ， 倒 立 ， 檢 查 是 否 漏 水 ，瓶 塞 旋 轉(zhuǎn) 180 ， 如 上 操 作 。2、 使 用 過 程 中 ， 防 止 瓶 塞 被 混淆 污 染 ， 不 能 隨 意 放 置 桌 上 。3、 洗 滌 時(shí) 洗 至 不 掛 水 珠 ， 再 用蒸 餾 水 潤 洗 3次 ， 用 鉻 酸 洗 液 清洗

12、 。4、 讀 數(shù) 時(shí) 要 用 手 前 3指 輕 輕 夾 起容 量 瓶 ， 使 之 自 然 垂 直 ， 再 讀 數(shù) 。5、 容 量 瓶 不 可 烘 干 ， 防 止 體 積變 化 。 7200可 見 分 光 光 度 計(jì)1、 選 擇 模 式 ： mode 透 光 率 （ Transmittance ） 吸 光 度 （ Absorbance ）校 正 ： 透 光 率 模 式全 黑 比 色 皿 ： 0%空 白 溶 液 ： 100%測 試 ： 吸 光 度 模 式2、 波 長 選 擇轉(zhuǎn) 動(dòng) 波 長 旋 鈕每 次 測 量 前 都 要 重 新 校 正 。測 試 從 低 濃 度 到 高 濃 度 ， 測試 前 比 色 皿 要 用 待 測 液 潤 洗 。 選擇模式為透過率再按0%模式不變再按100%選擇模式為吸光度讀取讀數(shù) 數(shù) 據(jù) 處 理用 excel作 圖電 子 圖 表 班 長 收 齊 后 壓 縮發(fā) 送 到 ： ruiting_另 外 ， 實(shí) 驗(yàn) 報(bào) 告 每 人 一 份 ， 將 圖 表 打 印 出 來 附 在 末 尾 。