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粗茶中茶多糖的提取和測(cè)定的分析論文-范例

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1、 粗茶中茶多糖的提取和測(cè)定的分析論文 1實(shí)驗(yàn)部分 1.1儀器和試劑 儀器:722型可見分光光度計(jì)(上海光學(xué)儀器),KQ-500VDB雙頻數(shù)控超聲清洗器(昆山市超聲儀器有限公司);超純水機(jī)(南京易普易達(dá)科學(xué)發(fā)展有限公司);電子天平(賽多利斯利科儀器(北京)有限公司)等。 試劑:無水乙醇,蒽酮,濃硫酸,葡萄糖,丙酮,無水乙醚等,所用的化學(xué)試劑均為分析純。 1.2茶多糖的提取 粗老茶葉-烘干-研磨-溫水浸提-過濾-濃縮-乙醇沉淀-靜置-離心-無水乙醇、丙酮、無水乙醚交替洗滌-烘干-茶多糖粗成品。 稱取10 g粗茶,60 度干燥2 h,磨碎過40-50目篩,溫水浸提(80 度 ,

2、80 min, 3次),過濾,減壓濃縮,沉淀劑,95%乙醇沉淀,離心(4000 r/min,10 min)得沉淀物,用無水乙醇、丙酮、無水乙醚交替攪拌洗滌2次干燥(60 度, 4 h),得粗茶多糖,稱量。 1.3蒽酮-硫酸試液的配制 稱取0.30 g蒽酮,加100 mL濃硫酸,置于棕色試劑瓶中,搖勻后置于冰箱中。 1.4標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 稱取無水葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品適量,加蒸餾水配成1.008 mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液。精密移取標(biāo)準(zhǔn)溶液1.0. 2.0. 4.0. 6.0. 8.0. 10.0 mL分別置于100 mL容量瓶中,各加水至刻度,搖勻。分別精密移 取上述標(biāo)準(zhǔn)溶液各2.0 ml置具塞試管

3、中,以2 mL蒸餾水作空自,每管再加8 mL蒽酮-硫酸試液,立即搖勻,冰水浴冷卻。沸水浴中加熱7 min,流動(dòng)水冷卻至室溫,10 min后在560 nm處測(cè)定吸光度,以吸光度(A)對(duì)葡萄糖濃度(C)作回歸處理,得回歸方程:C=105.0383 A-7.2499, r=0.9995 。 1.5換算因子的測(cè)定 1.6茶多糖的測(cè)定 2 結(jié)果與討論 2.1茶多糖提取最佳條件選擇 選擇浸提時(shí)間、浸提溫度、料液比三個(gè)因素、三個(gè)水平,進(jìn)行茶多糖提取最佳條件的選擇。 2.2重復(fù)性 精確稱取粗老茶葉1g,按照1.6項(xiàng)下方法處理后重復(fù)測(cè)定6次分別計(jì)算茶葉多糖含量,RSD=0.54,表明精密度良好。 2.3穩(wěn)定性 精確吸取1.6項(xiàng)下制取茶多糖樣品液1 mL于具塞試管中,每間隔1h測(cè)定溶液的吸光度,RSD=0.23 %(n=5),在5h內(nèi)顯色穩(wěn)定。 2.4加樣回收率 精確稱取3份粗老茶葉各1g,加入精制茶葉多糖約20 mg,按1.6項(xiàng)下方法測(cè)定茶葉多糖含量,計(jì)算回收率,回收率范圍為98.86%-102.32%。 3結(jié)論 本實(shí)驗(yàn)采用蒽酮-硫酸法測(cè)定粗老茶葉中茶多糖的含量,方法快速、準(zhǔn)確、靈敏。由正交設(shè)計(jì)得出茶多糖提取的最佳工藝,結(jié)果表明粗老茶葉中茶多糖含量較高。

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