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1、單擊此處編輯母版標題樣式,單擊此處編輯母版文本樣式,第二級,第三級,第四級,第五級,2015/10/20,#,酶法制備葡萄糖酸鈣,月餅小分隊：白朋綱,楊夢雪,姜昌熊,張雪冰,鈣是體內(nèi)含量最大的無機物，為維持人體神經(jīng)，肌肉，骨骼系統(tǒng)，細胞膜和毛細血管通透性正常功能所必需。,葡萄糖酸鈣在中國和許多國家的藥典里都有收藏，是一種我們比較熟悉的的藥物，葡萄糖酸鈣常常被用來做補鈣劑。它有利于人體骨質(zhì)的形成，對青少年骨骼發(fā)育有促進作用,同時由于它是一種抗過敏溶解度高，生理活性大的鈣營養(yǎng)藥，可以治療生理性缺鈣癥和血鈣引起的手足抽搐、痙攣等癥，以及治療軟骨、佝僂等缺鈣癥。,發(fā)酵法：營養(yǎng)鹽和黑霉菌種子營養(yǎng)液，進行

2、發(fā)酵。發(fā)酵液加石灰乳中和，過濾，濾液減壓濃縮，結(jié)晶得到粗品，經(jīng)精制得到葡萄糖酸鈣。,（,生產(chǎn)成本較高，純化工藝較復雜,）,試驗原理,（,1,）,-,淀粉酶,(EC 3.2.1.1),又稱液化型淀粉酶，它作用于淀粉時，隨機的從淀粉分子內(nèi)部切開,-1,4,糖苷鍵，使淀粉水解成糊精和一些還原糖。,（,2,）糖化酶（,EC 3.2.1.3,）又稱葡萄糖淀粉酶，它作用于淀粉時，從淀粉分子的非還原端開始逐個地水解,-1,4,糖苷鍵，生成葡萄糖和一些低聚糖，且糖化酶還有一定的水解,-1,6,糖苷鍵和,-1,3,糖苷鍵的能力,(C,6,H,10,O,5,),n,+nH,2,O,nC,6,H,10,O,6,-,

3、淀粉酶,糖化酶,試驗原理,（,3,）葡萄糖氧化酶（,EC 1.1.3.4,）是一種糖蛋白，它能夠特異性的氧化,-D-,葡萄糖生成中間產(chǎn)物,D-,葡萄糖酸,-,-,內(nèi)酯和過氧化氫，并發(fā)生非酶促反應水解為葡糖酸。,（,4,）過氧化氫酶,（,EC1.1.1.1.6,）它以過氧化氫作為專一的底物，催化過氧化氫分解為水和氧氣保護酶受到過氧化氫的毒害。,4C,6,H,12,O,6,+3O,2,+2H,2,O,4C,6,H,12,O,7,+2H,2,O,2,葡萄糖氧化酶,2C,6,H,12,O,7,+CaCO,3,Ca(C,6,H,11,O,7,),2,+CO,2,+H,2,O,2H,2,O,2,2H,2,

4、O+O,2,過氧化氫酶,實驗器材,500ML,燒杯,，,PH,試紙,，,玻璃棒,，,水浴鍋,，,電爐,，,石棉網(wǎng),，,溫度計,，,濾紙,，,漏斗,，,電子天平,，,量筒等常用試驗用器材,試驗試劑,淀粉，,a-,淀粉酶,，,糖化酶,，,葡萄糖氧化酶,，,過氧化氫酶,，,NaOH Na,2,CO,3,，,CaCO,3,，,CaCl,2,，,碘液,，活性炭等等,操作步驟,一，葡萄糖標準曲線,配置,5,個梯度濃度的,葡萄糖標準溶液,各取,1mL,分裝于五支試管中,設置一個空白組,分別加入,2mL DNS,試劑,沸水浴中,2min,后取出,加,蒸餾水至,15mL,測定吸光值，獲得標準曲線,操作步驟,45

5、g,淀粉,+150ml,水攪拌,Na2CO3,調(diào)節(jié),pH=6-6.4,加入,a-,淀粉酶，,72,加熱攪拌,15min,再加熱至,90,30min,淀粉糊化,加,熱,到,沸騰,10min,，,酶失活,二，液化,冷卻至,55-60,加入糖化酶,調(diào)節(jié),ph=4.5,于,60-65,恒溫水浴糖化,3-4h,加入活性炭，在,80,攪拌,30min,抽濾,，得到透明糖液,測量葡萄糖含量,三，糖化,操作步驟,四，,雙酶氧化,葡萄糖,+CaCO,3,(,過量,),加過氧化氫酶和葡萄糖氧化酶,35,攪拌反應，通過,pH,判斷反應進行的程度,反應結(jié)束，加活性炭脫色,獲得葡萄糖酸鈣溶液,操作步驟,試驗結(jié)果,吸光值,1.414,2.682,2.891,2.958,3.01,濃度（,%,）,0.5,1,3,5,7,樣品的吸光值為,1.636,，通過表中的數(shù)據(jù)整合出,的,標準曲線得出葡萄糖的濃度為,0.58%,試驗過程及其產(chǎn)物照片,謝謝！,