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1、,單擊此處編輯母版標題樣式,單擊此處編輯母版文本樣式,第二級,第三級,第四級,第五級,#,微生物檢驗的質量控制,溫州醫(yī)學院檢驗醫(yī)學院溫州醫(yī)學院附屬第一醫(yī)院,周鐵麗,微生物檢驗的質量控制溫州醫(yī)學院檢驗醫(yī)學院溫州醫(yī)學院附屬第,1,微生物檢驗的質量控制,質量控制（Quality control）,是臨床微生物學實驗室為了保證檢驗結果實事求是地反映客觀存在而建立的操作程序體系。,室內質量控制,室內質量控制是由實驗室內部制定并實施的，是質量保證的核心和基礎。,室間質量控制評價,室間質量控制評價是由實驗室外部的組織或機構對實驗室進行的質量評價。,微生物檢驗的質量控制質量控制（Quality control

2、,2,檢驗前的質量保證,檢驗前程序：又叫分析前期。,指從臨床醫(yī)生開醫(yī)囑開始，到分析檢驗程序啟動時終止的步驟。,包 括,檢驗申請,標本的采集、運送與接收,檢驗前的質量保證 ,3,微生物檢驗中的質量保證,人員的組織與管理,規(guī)范的操作規(guī)程,試劑,培養(yǎng)基,設備,檢驗過程,微生物檢驗中的質量保證 人員的組織與管理,4,試劑、培養(yǎng)基的質量控制,有效期,外觀,性能測試,保存,試劑、培養(yǎng)基的質量控制有效期,5,各種試劑的監(jiān)控菌種試劑,“x+v”因子試劑條,流感嗜血桿菌,副流感嗜血桿菌,嗜沫嗜血桿菌,硝酸鹽還原試劑,大腸埃希菌,醋酸鈣不動桿菌,每批，以后每次,靛基質試劑,大腸埃希菌,產(chǎn)氣腸桿菌,每批，以后每天,

3、甲基紅試劑,大腸埃希菌,產(chǎn)氣腸桿菌,每批，以后每周,V-P試劑,產(chǎn)氣腸桿菌,大腸埃希菌,每批，以后每周,各種試劑的監(jiān)控菌種試劑“x+v”因子試劑條流感嗜血桿菌,6,常用試驗、染液的推薦菌株,試驗名稱,陽性對照菌,陰性對照菌,血漿凝固酶試驗,金黃色葡萄球菌,表皮葡萄球菌,觸酶試驗,金黃色葡萄球菌,肺炎鏈球菌,氧化酶試驗,銅綠假單胞菌,大腸埃希菌,桿菌肽試驗,A群鏈球菌,B群鏈球菌,奧普托欣試驗,肺炎鏈球菌,草綠色鏈球菌,革蘭染液,金黃色葡萄球菌,大腸埃希菌,抗酸染液,結核分枝桿菌,混合非抗酸菌,常用試驗、染液的推薦菌株 試驗名稱陽性對照菌陰性對照菌血漿凝,7,測定各種培養(yǎng)基性能的菌種,培養(yǎng)基 質

4、控菌株 判定標準,羊血瓊脂平板,金黃色葡萄球菌ATCC25923,生長,生長試驗,大腸埃希菌ATCC25922,生長,溶血反應,肺炎鏈球菌ATCC19615,生長，溶血,化膿性鏈球菌ATCC6305,生長，溶血,桿菌肽敏感（紙片法）,化膿性鏈球菌ATCC6305,10mm，敏感,B群鏈球菌,10mm，耐藥,Optochin敏感（紙片法）,肺炎鏈球菌,1518mm，敏感,涎鏈球菌,15mm，耐藥,測定各種培養(yǎng)基性能的菌種 培養(yǎng)基,8,測定各種培養(yǎng)基性能的菌種,巧克平板,生長試驗,淋病奈瑟菌,腦膜炎奈瑟菌,流感嗜血桿菌,肺炎鏈球菌,生長,SS平板,鼠傷寒沙門菌,傷寒沙門菌,福志賀菌,大腸埃希菌,腸

5、球菌,生長，黑色菌落中心,生長，無色透明菌落,生長，無色透明菌落,部分抑制生長，紅色混濁菌落,部分抑制生長,測定各種培養(yǎng)基性能的菌種巧克平板淋病奈瑟菌 生長S,9,測定各種培養(yǎng)基性能的菌種,麥康凱平板,大腸埃希菌生長，,紅色混濁菌落,傷寒沙門菌生長，,無色透明菌落,中國藍瓊脂,大腸埃希菌,生長，藍色菌落,傷寒沙門菌,生長，無色菌落,營養(yǎng)瓊脂,金黃色葡萄球菌,大量生長,福志賀菌,大量生長,厭氧血平板,脆弱擬桿菌,生長,產(chǎn)氣莢膜梭菌,生長，溶血,堿性蛋白胨水,霍亂弧菌,大量生長,大腸埃希菌,抑制生長,測定各種培養(yǎng)基性能的菌種麥康凱平板 大腸埃希菌生長，紅,10,測定各種培養(yǎng)基性能的菌種,彎曲菌瓊脂

6、,空腸彎曲菌,生長,大腸埃希菌,部分抑制,TCBS平板,霍亂弧菌,生長，黃色菌落,副溶血性弧菌,生長，藍綠色菌落,沙保弱瓊脂,白色念珠菌,生長,大腸埃希菌,部分或完全抑制,需氧血液增菌液,肺炎鏈球菌,生長,化膿性鏈球菌,銅綠假單胞菌,白色念珠菌,厭氧血液增菌液,脆弱擬桿菌,生長,測定各種培養(yǎng)基性能的菌種彎曲菌瓊脂 空腸彎曲菌,11,各種鑒別培養(yǎng)基的測試菌種,培養(yǎng)基 陽性對照菌 陰性對照菌,賴氨酸脫羧酶,遲緩愛德華菌,費枸櫞酸桿菌,鳥氨酸脫羧酶,產(chǎn)氣腸桿菌,費枸櫞酸桿菌,精氨酸雙水解酶,陰溝腸桿菌,普通變形桿菌,蛋白胨水（靛基質）,大腸埃希菌,陰溝腸桿菌,各種鑒別培養(yǎng)基的測試菌種 培養(yǎng)基 陽性對

7、照菌,12,各種鑒別培養(yǎng)基的測試菌種,培養(yǎng)基 陽性對照菌 陰性對照菌,MR,大腸埃希菌,陰溝腸桿菌,V-P,陰溝腸桿菌,大腸埃希菌,枸櫞酸鹽（西蒙氏）,產(chǎn)氣腸桿菌,遲緩愛德華菌,苯丙氨酸脫氨酶,雷極變形桿菌,費枸櫞酸桿菌,O-F試驗管,銅綠假單胞菌（氧化型）,洛菲不動桿菌（不利用）,大腸埃希菌（發(fā)酵型）,硝酸鹽還原,大腸埃希菌,洛菲不動桿菌,各種鑒別培養(yǎng)基的測試菌種 培養(yǎng)基 陽性對,13,各種鑒別培養(yǎng)基的測試菌種,培養(yǎng)基 陽性對照菌 陰性對照菌,膽汁-七葉苷,糞腸球菌,化膿性鏈球菌,脫氧核糖核酸瓊脂,粘質沙雷菌,表皮葡萄球菌,氰化鉀肉湯,產(chǎn)氣腸桿菌,遲緩愛德華菌,丙二酸鹽,產(chǎn)氣腸桿菌,遲緩愛德

8、華菌,尿素瓊脂,雷極變形桿菌（快）,大腸埃希菌,肺炎克雷白菌（慢）,半固體瓊脂動力試驗,大腸埃希菌,肺炎克雷白菌,各種鑒別培養(yǎng)基的測試菌種培養(yǎng)基 陽性對照菌,14,儀器設備的質量控制,設備 控制范圍 備注,高壓滅菌器,121,定期用嗜熱芽胞桿菌測試（每月）,孵育箱,35 1,定期加水,水浴箱,370.5,定期加水、清潔內壁,冰箱,4 2,定期清潔內部,CO,2,箱,5-10%,淋病奈瑟氏菌檢測效果,厭氧箱,美蘭或銅綠假單胞菌測試厭氧條件,生物安全柜,更換濾網(wǎng)，紫外線消毒性能檢測（每三個月）,血液培養(yǎng)儀,培養(yǎng)瓶進行少量生長試驗；瓶位定期校正,微生物鑒定儀,探測部位定期清潔；鑒定卡、條、板測試,儀

9、器設備的質量控制設備 控制范圍,15,標本檢驗過程的質量控制,選擇合理的檢驗項目,選擇適當?shù)臉吮?正確書寫檢驗申清單,標本檢驗過程的質量控制選擇合理的檢驗項目,16,直接診斷,直接發(fā)現(xiàn)病原體,-膿、腦脊液、胸腹水等無菌部位標本,確定標本是否合格，并推測病原體,-痰液標本,發(fā)現(xiàn)病原體并進行初步計數(shù),-尿液標本,為培養(yǎng)基和培養(yǎng)方法的選擇提供信息,直接診斷 直接發(fā)現(xiàn)病原體,17,病原菌的分離培養(yǎng),呼吸道標本,接種血瓊脂平板、巧克力平板、麥康復凱平板和沙保弱瓊脂，并將巧克力血平板置5%-10%CO,2,35環(huán)境中培養(yǎng)。,糞便標本,接種SS平板、麥康凱平板或中國藍平板,血液培養(yǎng),在血液增菌培養(yǎng)期間，應至

10、少在24h48h盲目翻種一次，以后有可疑細菌生長即刻翻種，盡早發(fā)現(xiàn)病原菌。,病原菌的分離培養(yǎng) ,18,病原菌的鑒定,菌落形態(tài)觀察-涂片染色鏡檢-生化鑒定-血清學試驗,-,氧化酶試驗不應在糖類發(fā)酵選擇性平板上進行，以免假陰性結果出現(xiàn)。,-,在腸道選擇性平板上應挑取菌落進行生化反應，生化反應符合，血清學凝集陽性者可確認報告。,不能從選擇性平板上挑取菌落進行血清學凝集，會因為交叉抗原的存在或抗原的丟失而導致假陽性或假陰性。,每次血清凝集試驗時，應用生理鹽水作對照。防止粗糙型菌落造成的假凝集,病原菌的鑒定 菌落形態(tài)觀察-涂片染色鏡檢-生化鑒定-,19,藥敏試驗的質量控制要點,培養(yǎng)基,紙片,菌量,操作,

11、孵育：,時間、溫度、平板放置,結果判斷,質控菌株,藥敏試驗的質量控制要點培養(yǎng)基,20,紙片擴散法的質控菌株,金黃色葡萄球菌ATCC25923,大腸埃希菌ATCC25922,大腸埃希菌ATCC35218（用于內酰胺酶抑制劑復合制劑）,銅綠假單胞菌ATCC27853,糞腸球菌ATCC29212,流感嗜血桿菌（用于HTM培養(yǎng)基）ATCC49247、49766,淋病奈瑟菌（用于GC瓊脂）ATCC49226,肺炎鏈球菌（用于5%羊血MH瓊脂）ATCC49619,紙片擴散法的質控菌株金黃色葡萄球菌ATCC25923,21,失控的常見的原因,-質控結果記錄錯誤,-量取抑菌環(huán)直徑時讀數(shù)錯誤,-標準菌株被污染或

12、其它改變,-接種的菌懸液太濃或過淡,-0.5管麥氏濁度標準管未搖勻或已過期失效,-孵育溫度或氣體環(huán)境不正確,-MH培養(yǎng)基質量有無問題,-含藥紙片失效,失控的常見的原因-質控結果記錄錯誤,22,檢驗后的質量保證,檢驗后程序：也稱分析后期。,指檢驗后全部過程。,包 括,檢驗結果的評審與報告,-報告時間、分級報告、危急值報告及記錄,標本的處置,-感染性廢棄物,檢驗后的質量保證 檢驗后程序：也稱分析后期。,23,菌種保存方法,培養(yǎng)基保存法,快速冷凍法,冷凍干燥法,菌種保存方法培養(yǎng)基保存法,24,菌種保管,定期轉種,制備記錄卡,專人負責,菌種保管定期轉種,25,室內全面質量控制,全面實施各項質量控制內容

13、,對人員要及時進行培訓和考核,嚴格審核標本和結果報告,在日常標本中摻入模擬標本，進行盲點試驗,發(fā)現(xiàn)誤差，應及時找出原因，進行改進,室內全面質量控制全面實施各項質量控制內容,26,室間質量控制的實施,組織單位：,各級臨床檢驗中心和參考實驗室,工作任務：,定期或不定期地進行熟練程度考核和盲點試驗檢查。,定期或不定期地舉辦各種學習班，提高各級技術人員的技術水平，學習新的知識。,提供或督促有關部門提供合格的標準化的試劑、抗血清、培養(yǎng)基等實驗必需品。,室間質量控制的實施組織單位：各級臨床檢驗中心和參考實驗室,27,盲點質量控制,-quality control blind unknown,方 法,質控管

14、理機構將模擬標本混入臨床普通標本，送入實驗室進行常規(guī)測定。,評 價,質控管理機構負責收回和評價實驗結果，根據(jù)參加的規(guī)模和鑒定的正確數(shù)，計算鑒定正確率及所有參加實驗室的平均分，以及每個實驗室的得分。,盲點質量控制方 法,28,謝 謝,謝 謝,29,安全生產(chǎn)日日好，員工生活步步高。,11月-24,11月-24,Thursday,November 21,2024,文明施工，安全生產(chǎn)。,20:21:16,20:21:16,20:21,11/21/2024 8:21:16 PM,質量不光由生產(chǎn)者決定，更應由顧客決定。,11月-24,20:21:16,20:21,Nov-24,21-Nov-24,抓好安全

15、生產(chǎn)促進經(jīng)濟發(fā)展。,20:21:16,20:21:16,20:21,Thursday,November 21,2024,善待別人就是善待自已。,11月-24,11月-24,20:21:16,20:21:16,November 21,2024,疏忽一時，痛苦一世。,2024年11月21日,8:21 下午,11月-24,11月-24,安全生產(chǎn)你管我管，大家管才平安，事故隱患你查我查，人人查方安全。,21 十一月 2024,8:21:16 下午,20:21:16,11月-24,持續(xù)的質量改進是企業(yè)永恒的目標。,十一月 24,8:21 下午,11月-24,20:21,November 21,2024,

16、精打細算降成本,千方百計提效益。,2024/11/21 20:21:16,20:21:16,21 November 2024,全力生產(chǎn)，注意安全。,8:21:16 下午,8:21 下午,20:21:16,11月-24,樹立安全觀念，堅持安全生產(chǎn)。,11月-24,11月-24,20:21,20:21:16,20:21:16,Nov-24,制造精良產(chǎn)品，培育優(yōu)秀人才。,2024/11/21 20:21:16,Thursday,November 21,2024,強化服務意識，倡導奉獻精神。,11月-24,2024/11/21 20:21:16,11月-24,謝謝大家！,安全生產(chǎn)日日好，員工生活步步高。9月-239月-23Frid,30,