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基因工程PPT課件 第二章 染色體與DNA

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1、 本章將介紹DNA 的結(jié)構(gòu)和從一代細(xì)胞到下一代細(xì)胞的傳遞、遺傳及變異等過(guò)程。 由 于 親 代 能 夠 將 自 己 的 遺 傳 物 質(zhì) DNA以 染 色 體 的 形 式 傳給 子 代 , 保 持 物 種 的 穩(wěn) 定 性 和 連 續(xù) 性 。 因 此 , 人 們 普 遍 認(rèn) 為染 色 體 在 遺 傳 上 起 著 主 要 作 用 。人 類 22對(duì) 染 色 體 及 性 染色 體 性 染 色 體 掃 描 電鏡 圖 左 圖 為 人 類 染 色 體 , 在 光 鏡 下 即 可 觀 察 其 形 態(tài) , 右 圖 為電 鏡 圖 片 , 可 見(jiàn) 不 規(guī) 則 的 染 色 質(zhì) 。 1 2.4. 真 核 細(xì) 胞 染 色體

2、的 結(jié) 構(gòu)v 真 核 細(xì) 胞 染 色 體 的DNA如 圖 所 示 , 經(jīng) 過(guò)四 級(jí) 壓 縮 , 長(zhǎng) 度 壓 縮將 近 10000倍 。v 四 級(jí) 分 別 為 :n 核 小 體 n 螺 線 管n 超 螺 旋 圓 筒n 染 色 單 體 第二節(jié) DNA 的結(jié)構(gòu) 拓 撲 異構(gòu) 酶溴 乙啶 拓 撲 異構(gòu) 酶溴 乙啶負(fù) 超 螺旋 正 超 螺旋松 弛DNA 螺旋超螺旋 物 種 細(xì) 胞 內(nèi) 復(fù) 制 子 數(shù)目 /個(gè) 平 均 長(zhǎng) 度 /kb 復(fù) 制 子 移 動(dòng) 速 度/(bpmin-1)大 腸 桿 菌 1 4200 50000酵 母 500 40 3600果 蠅 3500 40 2600爪 蟾 15000 200

3、 500蠶 豆 35000 300 ? v環(huán) 狀 DNA復(fù) 制n 型n 滾 環(huán) 型n D-環(huán) 型 v復(fù) 制 的 終 止n 當(dāng) 復(fù) 制 叉 前 移 , 遇 到 約 22個(gè) 堿 基 的 重 復(fù) 性 終 止 序 列( Ter) 時(shí) , Ter-Tus復(fù) 合 物 能 阻 止 DNA的 解 鏈 , 阻 擋復(fù) 制 叉 的 前 移 。n 復(fù) 制 停 止 后 , 仍 有 50-100bp未 被 復(fù) 制 , 將 由 修 復(fù) 方 式填 補(bǔ) 空 缺 , 而 后 兩 鏈 解 開(kāi) 。 DNA聚 合 酶 DNA聚 合 酶 DNA聚 合 酶 ( 復(fù) 合 物 )分 子 量 109 000 120 000 400 000每 個(gè)

4、 細(xì) 胞 所 含 400 100 102053聚 合 作 用 + + +35核 酸 外 切 酶 + + +53核 酸 外 切 酶 + 新 生 鏈 合 成 +生 物 學(xué) 活 性 1 0.05 15聚 合 速 度 ( 37 核 苷 酸 /min.分 子 ) 1 000 100300 15 000以 上 表 11-9 真 核 生 物 五 種 DNA聚 合 酶DNA聚 合 酶 ( ) ( ) ( ) 位 置 核 核 核 核 線 粒 體功 能 后 隨 鏈 的 合 成和 引 發(fā) 前 導(dǎo) 鏈 的 合 成 修 復(fù) 修 復(fù) 復(fù) 制相 對(duì) 活 性 80% 10 15% 2 15%分 子 量 300kD 170 2

5、30kD 250 kD 40 kD 180 300 kD53外 切 35外 切 + + + 雙 脫 氧 T 不 影 響 不 影 響 弱 抑 制 抑 制 DNA修 復(fù) 系 統(tǒng) 功 能錯(cuò) 配 修 復(fù) 恢 復(fù) 錯(cuò) 配切 除 修 復(fù) ( 堿 基 、 核 苷 酸 ) 切 除 突 變 的 堿 基 和 核 苷 酸 片 段重 組 修 復(fù) 復(fù) 制 后 的 修 復(fù)DNA直 接 修 復(fù) 修 復(fù) 嘧 啶 二 體SOS系 統(tǒng) DNA的 修 復(fù) , 導(dǎo) 致 變 異 UV 常見(jiàn)的化學(xué)誘變劑化合物類別作用點(diǎn)分子改變堿基類似物如:5-BU A 5-BU G - A - T - - G - C -羥胺類(NH 2OH)T C -

6、 T - A - - C - G -亞硝酸鹽(NO2)C U - G - C - - A - T -烷化劑如:氮芥類,Nitromins G mGG G DNA缺失G 鐮形紅細(xì)胞貧血病人Hb (HbS) 亞基N-val his leu thr pro val glu C 肽鏈CAC GTG基因正常成人Hb (HbA)亞基N-val his leu thr pro glu glu C 肽鏈CTC GAG基因 谷 酪 蛋 絲5 G C A G U A C A U G U C 丙 纈 組 纈正常5 G A G U A C A U G U C 缺失C 缺 失 引 起 框 移 突 變 Holliday中 間 體 的 拆 分 34 1, 2切 割 3, 4切 割1 2 DNA內(nèi) 切 酶DNA內(nèi) 切 酶 DNA內(nèi)切酶DNA內(nèi)切酶產(chǎn) 生 含 異 源 雙 鏈的 親 本 DNA分 子 產(chǎn) 生 重 組 體 Holliday的 異 構(gòu) 化 產(chǎn) 生 重 組 體 的 拆 分Hol l i day結(jié) 構(gòu) 一 經(jīng) 生 成 即 可不 斷 地 處 于 異 構(gòu) 化 異 源 雙 鏈 heteroduplex DNA 重 組 結(jié) 果 取 決 于 拆 分 時(shí)配 對(duì) 鏈 上 的 切 口 位 置 “ 親 本 鏈 ” “ 重 組 體 ” 復(fù) 制型 非 復(fù) 制型

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