《北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院考博真題整理0226》由會(huì)員分享，可在線閱讀，更多相關(guān)《北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院考博真題整理0226（48頁(yè)珍藏版）》請(qǐng)?jiān)谘b配圖網(wǎng)上搜索。

1、中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué) 細(xì)胞生物學(xué)歷年考博真題 2002年協(xié)和醫(yī)大細(xì)胞生物學(xué)博士試題 1、細(xì)胞連接包括幾種類型，及其各自的特點(diǎn) 動(dòng)物細(xì)胞的細(xì)胞連接按其功能分三大類：緊密連接、錨定連接和通訊連接。 緊密連接的主要作用是封閉相鄰細(xì)胞間的接縫，防止溶液中的分子沿細(xì)胞間隙滲入體內(nèi)，從而保證了機(jī)體內(nèi)環(huán)境的相對(duì)穩(wěn)定；特點(diǎn)是通過(guò)跨膜蛋白相連。錨定連接通過(guò)細(xì)胞的骨架系統(tǒng)將細(xì)胞或細(xì)胞與基質(zhì)相連成一個(gè)堅(jiān)挺、有序的細(xì)胞群體，使細(xì)胞間、細(xì)胞與基質(zhì)間具有抵抗機(jī)械張力的牢固粘合。參與錨定連接的骨架系統(tǒng)可分兩種不同形式，與中間纖維相連的錨定連接主要包括橋粒和半橋粒；與肌動(dòng)蛋白纖維相連的錨定連接主要包括粘合帶與粘合斑

2、。間隙連接是動(dòng)物細(xì)胞間最普遍的細(xì)胞連接，是在相互接觸的細(xì)胞之間建立的有孔道的、由連接蛋白形成的親水性跨膜通道，允許無(wú)機(jī)離子、第二信使及水溶性小分子量的代謝物質(zhì)從中通過(guò)，從而溝通細(xì)胞達(dá)到代謝與功能的統(tǒng)一。 2、核纖層的形態(tài)結(jié)構(gòu)，及其同中間纖維的共同點(diǎn) 核纖層纖維的直徑為10nm左右，縱橫排列整齊，呈正交狀編織成網(wǎng)絡(luò)，分布于內(nèi)層核膜與染色質(zhì)之間。一般認(rèn)為核纖層結(jié)構(gòu)整體觀呈一球狀或籠狀網(wǎng)絡(luò)，切面觀 呈片層結(jié)構(gòu)。在分裂期細(xì)胞，核纖層解體，以單體形式存在于胞質(zhì)中。核纖層是位于細(xì)胞核內(nèi)層核膜下的纖維蛋白片層或纖維網(wǎng)絡(luò)，核纖層由1至3種核纖層蛋白多肽組成。核纖層與中間纖維有許多共同點(diǎn)：(1)兩者均

3、形成10nm纖維；(2)兩者均能抵抗高鹽和非離子去垢劑的抽提；(3)某些抗中間纖維蛋白的抗體能與核纖層發(fā)生交叉反應(yīng)，說(shuō)明中間纖維蛋白與核纖層蛋白分子存 在相同的抗原決定簇(Osborn＆ Weber， 1987)；(4)兩者在結(jié)構(gòu)上有密切聯(lián)系，核纖層成為核骨架與中間纖維之間的橋梁 3、泛素降解蛋白的途徑 4、核糖體中蛋白組分同RNA的功能 rRNA具有肽酰轉(zhuǎn)移酶的活性；為tRNA提供結(jié)合位點(diǎn)(A位點(diǎn)、P位點(diǎn)和E位點(diǎn))；為多種蛋白質(zhì)合成因子提供結(jié)合位點(diǎn)；在蛋白質(zhì)合成起始時(shí)參與同mRNA選擇性地結(jié)合以及在肽鏈的延伸中與mRNA結(jié)合； 核糖體大小亞單位的結(jié)合、校正閱讀(p

4、roofreading)、無(wú)意義鏈或框架漂移的校正、以及抗菌素的作用等 都與rRNA有關(guān)。 5、一群細(xì)胞死亡，試舉三個(gè)以上證據(jù)，證明它們是調(diào)亡而非壞死（不能超過(guò)400字，否則扣分 2003年博士研究生入學(xué)考試試題細(xì)胞生物學(xué)試題（本人懷疑是生化題） 一、名詞解釋（1-5每題2分，6-9每題2.5分，共20分） 1、α互補(bǔ) 現(xiàn)在使用的許多載體都帶有一個(gè)E.coli DNA的短區(qū)段，其中含有β-半乳糖苷酶的-α肽基因（lacZ’）的調(diào)控序列和頭146個(gè)氨基酸的編碼信息。這個(gè)編碼區(qū)中插入了一個(gè)MCS，它并不破壞 讀框，但是可使少數(shù)幾個(gè)氨基酸插入到β-半乳糖苷酶的氨基端而不影響功能，這種載

5、體適用于編碼β-半乳糖苷酶C端部分序列的宿主細(xì)胞，雖然宿主和質(zhì)粒編碼 的片段各自都沒有酶活性，但它們可融為一體，形成具有酶活性的蛋白，從而實(shí)現(xiàn)互補(bǔ)。 2、RT-PCR 3、親和層析 親和層析是一種吸附層析，抗原（或抗體）和相應(yīng)的抗體（或抗原）發(fā)生特異性結(jié)合，而這種結(jié)合在一定的條件下又是可逆的。所以將抗原（或抗體）固相化后，就可以使存在液相中的相應(yīng)抗體（或抗原）選擇性地結(jié)合在固相載體上，借以與液相中的其他蛋白質(zhì)分開，達(dá)到分離提純的目的。 4、偏愛密碼子 5、同工酶 （isoenzyme）是指催化的化學(xué)反應(yīng)相同，酶蛋白的分子結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)乃至免疫學(xué)性質(zhì)不同的一組酶。這類酶存在于生

6、物的同一種屬或同一個(gè)體的不同組 織、甚至同一組織或細(xì)胞中。 翻譯并且解釋名詞 6、chromatin chromosome 7、nuclear matrix 用核酸酶與高鹽溶液對(duì)細(xì)胞核進(jìn)行處理，將DNA、組蛋白和RNA抽提后，殘留纖維蛋白的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。 8、gene cluster 指基因家族中的各成員緊密成簇排列成大串的重復(fù)單位，定于染色體的的特殊區(qū)域。他 們屬于同一個(gè)祖先的基因擴(kuò)增產(chǎn)物。也有一些基因家族的成員在染色體上排列并不緊密，中間還含有一些無(wú)關(guān)序列。但總體是分布在染色體上相對(duì)集中的區(qū)域。 9、transformation 二、填空（每空1分，共15分） 3

7、、協(xié)和生物化學(xué)系主任吳憲(1893-1959)對(duì)我國(guó)的科學(xué)事業(yè)貢獻(xiàn)巨大。 4、科學(xué)家1928年格里非斯（P．Griffith）首次證明DNA是遺傳物質(zhì),該證明實(shí)驗(yàn)是肺炎雙球菌感染小家鼠的實(shí)驗(yàn)。 5、能夠進(jìn)行可逆磷酸化的氨基酸是(3個(gè))Ser、Thr__________。 6、維持DNA雙螺旋的力是堿基堆積力和氫鍵。 8、真核細(xì)胞核糖體大亞基的18S rRNA與原核細(xì)胞16S rRNA 同源。 9、Plindromatic sequence 又叫----------,定義是:--------------------。 三、判斷并改錯(cuò)（每題2.5分，共5分） 1、細(xì)菌的操縱基因總在啟

8、動(dòng)子的后面。 2、乳酸操縱子模型中,阻遏蛋白與RNA聚合酶結(jié)合阻止啟動(dòng)子啟動(dòng)。 四、簡(jiǎn)答（每題5分，共20分） 1、CAMP激活蛋白激酶的分子機(jī)制? 2、核酸和蛋白質(zhì)分子為什么具有方向性? 核酸鏈具有方向性，有兩個(gè)末端分別是5’末端與3’末端。5’ 末端含磷酸基團(tuán)，3’末端含羥基。核酸鏈內(nèi)的前一個(gè)核苷酸的3’羥基和下一個(gè)核苷酸的5’磷酸形成3’,5’磷酸二酯鍵，故核酸中的核苷酸被稱為核苷酸殘基。 3、紫外線造成皮膚細(xì)胞DNA何種損傷?如何修復(fù)? 4、使肽鍵形成的酶叫什么名字?其化學(xué)本質(zhì)是什么?存在于細(xì)胞的什么位置? 五 論述（每題20分，共40分） 1、何謂限制性內(nèi)切酶

9、的星活性?影響因素是什么? 所謂星活性又稱Star活性。是指由于反應(yīng)條件不同而產(chǎn)生的切斷與識(shí)別位點(diǎn)相似但不完全相同的序列。 導(dǎo)致星號(hào)活性的因素： 1.較高的甘油濃度（>5% v/v）； 2.酶與底物DNA比例過(guò)高（不同的酶情況不同，通常為>100 U/g）； 3.低鹽濃度（<25 mM） 4.高pH值（>pH 8.0） 5.存在有機(jī)溶劑（如DMSO、乙醇(9)、乙烯乙二醇、二甲基乙酰胺、二甲基甲酰胺、sulphalane等） 6.用其他二價(jià)離子替代鎂離子（如Mn2+，Cu2+，Co2+，Zn2+等） 抑制星號(hào)活性的方法： 1.盡量用較少的酶進(jìn)行完全消化反應(yīng)

10、。這樣可以避免過(guò)度消化以及過(guò)高的甘油濃度。 2.盡量避免有機(jī)溶劑（如制備DNA時(shí)引入的乙醇）的污染。 3.將離子濃度提高到100-150 mM（若酶活性不受離子強(qiáng)度影響）。 4.將反應(yīng)緩沖液的pH值降到7.0。 5.二價(jià)離子用Mg2+。 2、已知一個(gè)蛋白質(zhì)的全長(zhǎng)CDNA,設(shè)計(jì)一個(gè)實(shí)驗(yàn)步驟從CDNA開始提純此蛋白。 2004年協(xié)和考博細(xì)胞生物學(xué)試卷 名解（不全） 1.芽孢 細(xì)胞質(zhì)高度濃縮脫水所形成的一種抗逆性很強(qiáng)的球形或橢圓形的休眠體。 二、問(wèn)答（不全） 1.細(xì)胞核線粒體,高爾基體的分離 2.述NO的信號(hào)通路 3.怎樣分離細(xì)胞骨架，MAR的生理功能 mat

11、rinassociation region(MAR) 核骨架結(jié)合序列 5.腫瘤發(fā)生是一個(gè)多基因多步驟的過(guò)程,從癌基因和抑癌基因方面用簡(jiǎn)單的示意圖說(shuō)明腫瘤 的發(fā)生機(jī)制 一、名詞解釋（每題5分，共20分） 1、米倫反應(yīng)（Mliion reaction）：蛋白質(zhì)溶液中加入米倫試劑（亞硝酸汞、硝酸汞及硝酸的混合液），蛋白質(zhì)首先沉淀，加熱則變?yōu)榧t色沉淀，此反應(yīng)為酪氨酸的酚核所特有的 反應(yīng)，因此含有酪氨酸的蛋白質(zhì)均呈米倫反應(yīng)。 2、核內(nèi)基質(zhì) 3、核定位信號(hào) 4、星體 形體微管 二、判斷（每題1分，共10分） 一種周期蛋白與一種CDK相作用。 三、填空（每空1分，共20分） 1、

12、線蟲發(fā)育過(guò)程中有1090個(gè)細(xì)胞,其中凋亡了131個(gè)細(xì)胞，有14個(gè)基因與凋亡相關(guān)、ced-3和ced-4那兩個(gè)基因于凋亡密切相關(guān), ced-3基因抑制凋亡。 2、電境包埋劑有那四個(gè)特點(diǎn)高倍放大不顯示本身結(jié)構(gòu)、聚合時(shí)不發(fā)生明顯的收縮、有良好的機(jī)械性，鯉魚切片、易被電子穿透。 3、MAR核骨架結(jié)合序列有那四個(gè)特點(diǎn)富含AT、富含DNA解旋元件、富含重復(fù)序列、含有轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)。 4、G蛋白_α_亞基和_GDP_結(jié)合時(shí),G蛋白無(wú)活性 5、過(guò)氧化物酶體,有兩種酶,一種以FAD為輔基,產(chǎn)生H2O2、另一種是過(guò)氧化氫酶酶,分解H2O2生成水和氧氣。 6、根據(jù)著絲粒的位置，染色體可分那四種中著絲粒染

13、色體、亞中著絲粒染色體、亞端著絲粒染色體、端著絲粒染色體。 四、問(wèn)答題（每題10分，共50分） 1、簡(jiǎn)述ATP合成酶合成ATP的過(guò)程。 2、敘述信號(hào)肽的結(jié)構(gòu)及作用。 3、親核蛋白如何入核的? 4、如何用抗體對(duì)特異抗原進(jìn)行定位,定性? 5、P53與凋亡的關(guān)系。 2005年攻讀博士研究生入學(xué)考試細(xì)胞生物學(xué)試題 （回憶型） 一、填空：（每題2分，共20分） 1、龜?shù)男詣e決定受溫度的影響低溫雄性高溫雌性。 2、核孔復(fù)合體有四部分：孔環(huán)顆粒、周邊顆粒、中央顆粒和無(wú)定形物質(zhì)組成 3、細(xì)胞生長(zhǎng)分化因子都包括 ， ， ， ，

14、，細(xì)胞生長(zhǎng)分化因子又稱 。 4、目前推測(cè)R蛋白的功能有三個(gè)對(duì)rRNA折疊成有功能的三維結(jié)構(gòu)是十分重要的、在蛋白質(zhì)合成過(guò)程中，核糖體的空間構(gòu)象發(fā)生一系列的變化，某些r蛋白質(zhì)隊(duì)核糖體起“微調(diào)”作用、rRNA和r蛋白質(zhì)共同行使核糖體上的結(jié)合位點(diǎn)和催化作用中心。 5、酪氨酸信號(hào)通路的受體有兩個(gè) ， 。 9、溶酶體的標(biāo)志酶酸性磷酸酶。其膜蛋白通過(guò)膜蛋白高度糖基化方式防止自身被水解。 二、判斷（每題1分，共10分） 1、核小體蛋白與DNA的結(jié)合是有選擇性的。 2、吞噬泡的形成需要網(wǎng)格蛋白。 3、線粒體的分裂方式 酵母和撅類主要是通過(guò)內(nèi)縮。 三、名詞解釋（

15、每題2分，共20分） 1、亞線粒體小泡 用超聲波把線粒體破碎，線粒體內(nèi)膜碎片可形成顆粒朝外的小膜泡。 2、隱蔽mRNA 一般情況下，存在于未受精卵細(xì)胞中并不用以翻譯蛋白質(zhì)，為早期蛋白質(zhì)合成提供模板， 在卵細(xì)胞中與抑制蛋白質(zhì)結(jié)合而失去活性的mRNA。 3、死亡酶 即apopain催化poly（ADP-ribose）Polymerase（PARP），即聚（ADP-核糖）聚合酶的裂解執(zhí)，行著與線蟲中的ced3相同的功能，導(dǎo)致細(xì)胞的凋亡。 4、易位子 位于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上的與新合成的多肽進(jìn)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)有關(guān)的蛋白復(fù)合物，其本質(zhì)是一種通道蛋白。 5、核仁相隨染色質(zhì) 分為兩部分，一部分位于核仁周圍

16、，成為核仁周染色質(zhì)，即異染色質(zhì)；一部分位于核仁內(nèi)，為常染色質(zhì)，即核仁組織區(qū)，是rDNA所在的位置。 6、傳代培養(yǎng) 將培養(yǎng)細(xì)胞從培養(yǎng)器中取出，把一部分移至新的培養(yǎng)器中再進(jìn)行培養(yǎng)，這種培養(yǎng)方式稱為傳代培養(yǎng)。 7、第二信史 四、簡(jiǎn)答（每題10分，共50分） 1、什么是細(xì)胞工程 并舉兩例說(shuō)明之。 以細(xì)胞為對(duì)象，應(yīng)用生命科學(xué)理論，借助工程學(xué)原理與技術(shù)，有目的地利用或改造生物遺傳特性，以獲得特定的細(xì)胞、組織產(chǎn)品或新型物種的一門綜合性科學(xué)技術(shù)。 細(xì)胞融合技術(shù)和細(xì)胞雜合技術(shù)、單克隆技術(shù) 2、高爾基體的結(jié)構(gòu)和功能。 高爾基體是由數(shù)個(gè)扁平囊泡堆在一起形成的高度有極性的細(xì)胞器。常

17、分布于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)與細(xì)胞膜之間，呈弓形或半球形，凸出的一面對(duì)著內(nèi)質(zhì)網(wǎng)稱為形成面 （forming face）或順面（cis face）。凹進(jìn)的一面對(duì)著質(zhì)膜稱為成熟面（mature face）或反面（trans face）。順面和反面都有一些或大或小的運(yùn)輸小泡，在具有極性的細(xì)胞中，高爾基體常大量分布于分泌端的細(xì)胞質(zhì)中。高爾基體的主要功能將內(nèi)質(zhì)網(wǎng)合成的蛋白質(zhì)進(jìn)行加工、分類、與包裝，然后分門別類地送到細(xì)胞特 定的部位或分泌到細(xì)胞外。 1、蛋白質(zhì)的糖基化N-連接的糖鏈合成起始于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，完成與高爾基體。 2、參與細(xì)胞分泌活動(dòng)負(fù)責(zé)對(duì)細(xì)胞合成的蛋白質(zhì)進(jìn)行加工，分類，并運(yùn)出，其過(guò)程是SER上合成蛋白

18、質(zhì)→進(jìn)入ER腔→以出芽形成囊泡→進(jìn)入CGN→在 medial Gdgi中加工→在TGN形成囊泡→囊泡與質(zhì)膜融合、排出。 3、進(jìn)行膜的轉(zhuǎn)化功能高爾基體的膜無(wú)論是厚度還是在化學(xué)組成上都處于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和質(zhì)膜之間，因此高爾基體在進(jìn)行著膜轉(zhuǎn)化的功能，在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上合成的新膜轉(zhuǎn)移至高 爾基體后，經(jīng)過(guò)修飾和加工，形成運(yùn)輸泡與質(zhì)膜融合，使新形成的膜整合到質(zhì)膜上。 4、將蛋白水解為活性物質(zhì)如將蛋白質(zhì)N端或C端切除，成為有活性的物質(zhì)（胰島素C端）或?qū)⒑卸鄠€(gè)相同氨基序列的前體水解為有活性的多肽。 5、參與形成溶酶體。 6、參與植物細(xì)胞壁的形成。 7、合成植物細(xì)胞壁中的纖維素和果膠質(zhì)

19、。 3、線粒體蛋白的合成和轉(zhuǎn)運(yùn)方式。 構(gòu)成線粒體的蛋白主要是核基因編碼的，少量是線粒體基因編碼的，無(wú)論是核基因還是線粒體基因編碼的蛋白質(zhì)都要轉(zhuǎn)運(yùn)定位。線粒體有四個(gè)組成部分，其中有兩層 膜，所以由細(xì)胞質(zhì)核糖體合成的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)到線粒體基質(zhì)必須穿過(guò)兩層膜障礙。 大部分線粒體蛋白質(zhì)在細(xì)胞質(zhì)核糖體上合成時(shí),其N端都帶有一肽段,稱為導(dǎo)肽,內(nèi)含定向運(yùn)往線粒體的信息。導(dǎo)肽的長(zhǎng)短與被引導(dǎo)的蛋白質(zhì)定位在線粒體的不同部 位有一定的關(guān)系。定位于基質(zhì)中的蛋白質(zhì)一般具有較短的導(dǎo)肽。 線粒體蛋白質(zhì)分別定位于外膜、內(nèi)膜、基質(zhì)以及內(nèi)外膜間隙。線粒體基質(zhì)蛋白，除極少數(shù)外， 都是游離核糖體合成， 并通過(guò)轉(zhuǎn)運(yùn)肽轉(zhuǎn)運(yùn)進(jìn)來(lái)的，轉(zhuǎn)

20、運(yùn)過(guò)程十分復(fù)雜。線粒體膜間隙蛋白，如細(xì)胞色素c的定位需要兩個(gè)導(dǎo)向序列，位于N端最前面的為基質(zhì)導(dǎo)向序列（matrix-targeting sequence），其后還有第二個(gè)導(dǎo)向序列，即膜間隙導(dǎo)向序列（intermembrane-space-targeting sequence），功能是將蛋白質(zhì)定位于內(nèi)膜或膜間隙，這類蛋白有兩種轉(zhuǎn)運(yùn)定位方式。 線粒體膜間隙蛋白的轉(zhuǎn)運(yùn) 　　線粒體膜間隙蛋白，如細(xì)胞色素c的定位需要兩個(gè)導(dǎo)向序列，位于N端最前面的為基質(zhì)導(dǎo)向序列 （matrix-targeting sequence），其后還有第二個(gè)導(dǎo)向序列，即膜間隙導(dǎo)向序列（intermembrane-space-t

21、argeting sequence），功能是將蛋白質(zhì)定位于內(nèi)膜或膜間隙，這類蛋白有兩種轉(zhuǎn)運(yùn)定位方式。［醫(yī)學(xué)　教育網(wǎng) 搜集整理］ 　　保守性尋靶（conservative targeting） 前體蛋白在N-端的基質(zhì)導(dǎo)向序列引導(dǎo)下采用與線粒體基質(zhì)蛋白同樣的運(yùn)輸方式，將前體蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)到線粒體基質(zhì)，在基質(zhì)中由轉(zhuǎn)肽酶切除基質(zhì)導(dǎo)向序列后， 膜間隙導(dǎo)向序列就成了N端的導(dǎo)向序列， 它能夠識(shí)別內(nèi)膜的受體和轉(zhuǎn)運(yùn)通道蛋白，引導(dǎo)蛋白質(zhì)穿過(guò)內(nèi)膜，進(jìn)入線粒體膜間隙，然后由線粒體膜間隙中的轉(zhuǎn)肽酶將膜間隙導(dǎo)向序列切除（圖7-15）。 非保守性尋靶（nonconservative targeting） 　　與保守 性尋

22、靶不同，蛋白質(zhì)的非保守性尋靶首先在線粒體基質(zhì)導(dǎo)向序列的引導(dǎo)下，通過(guò)線粒體的外膜和內(nèi)膜，但是疏水的膜間隙導(dǎo)向序列作為停止轉(zhuǎn)運(yùn)序列（stop- transfer sequence） 錨定在內(nèi)膜上，從而阻止了蛋白質(zhì)的C-末端穿過(guò)內(nèi)膜進(jìn)入線粒體基質(zhì)；然后通過(guò)蛋白質(zhì)的擴(kuò)散作用，錨定在內(nèi)膜上的蛋白逐漸離開轉(zhuǎn)運(yùn)通道，最后在轉(zhuǎn)肽酶的作用 下，將膜間隙導(dǎo)向序列切除，蛋白質(zhì)釋放到膜間隙，結(jié)合血紅素后，蛋白質(zhì)折疊成正確的構(gòu)型。 4、舉例說(shuō)明CDK的功能。 5、什么是基因組印記，并舉例說(shuō)明。 基因組印記是指同一等位基因根據(jù)其是母方還是父方的來(lái)源進(jìn)行選擇性差異表達(dá)的現(xiàn)象. 基因組印記可以是共價(jià)標(biāo)記（DNA甲

23、基化）上的，也可以是非共價(jià)標(biāo)記（DNA-蛋白質(zhì)和DNA-RNA互作，核基因組定位），印記方法包括在整個(gè)細(xì)胞周期中維持雙親表觀記號(hào)的特化的核內(nèi)酶的作用機(jī)制。 基因印記與動(dòng)物克隆技術(shù) 基因印記 (imprinting) 對(duì)核移植后基因組重新編程的影響。基因印記現(xiàn)象在哺乳動(dòng)物 的發(fā)育過(guò)程中普遍存在，它是指基因的表達(dá)與否取決于它們是在父源染色體上還是母源染色體上。有些印記基因只從母源染色體上表達(dá)，而有些則只從父源染色體上 表達(dá)?；蛴∮浥c動(dòng)物克隆技術(shù)的成功及不足有何關(guān)系值得深入研究。基因組印記病主要表現(xiàn)為過(guò)度生長(zhǎng)、生長(zhǎng)遲緩、智力障礙、行為異常。目前在腫瘤的研究中認(rèn) 為印記缺失是引起腫瘤

24、最常見的遺傳學(xué)因素之一。 2007年博士研究生入學(xué)考試細(xì)胞生物學(xué)專業(yè)試題 一、填空（每空0.5分，共20分） 1、使細(xì)胞膜破損分離細(xì)胞器的常用方法桿狀玻璃勻漿器法、高速組織搗碎機(jī)法、超聲波處理法、化學(xué)裂介法、反復(fù)凍融法。 2、染色質(zhì)DNA包括 蛋白編碼序列、編碼rRNA，tRNA，snRNA和組蛋白的串列重復(fù)序列、重復(fù)序列的DNA。 3、微管蛋白附屬結(jié)構(gòu)的作用________ ________ _________ _________。 4、NO分子通過(guò)與________結(jié)合，產(chǎn)生__________。 5、CDK激酶有兩個(gè)亞基__________和 _________，通過(guò)使蛋白

25、_________發(fā)揮作用，受_________負(fù)調(diào)節(jié)。 6、細(xì)胞外基質(zhì)包括參與 8、生物大分子的裝配方式大體可分為自我組裝、協(xié)助組裝 和直接組裝 以及更為復(fù)雜的細(xì)胞結(jié)構(gòu)及結(jié)構(gòu)體系之間的裝配。 9、核骨架結(jié)合蛋白轉(zhuǎn)錄因子具有嚴(yán)格的DNA序列特異性，包括DNA復(fù)制；復(fù)制起始點(diǎn)是MAR，DNA聚合酶與核骨架結(jié)合而被激活、活性基因和RNA聚合酶結(jié)合于核骨架上，RNA合成在核骨架上進(jìn)行、與病毒的復(fù)制有關(guān)、參與染色體的構(gòu)建。 10、細(xì)胞的決定與記憶有關(guān)，而細(xì)胞記憶可通過(guò)兩種方式實(shí)現(xiàn)，一是正反饋途徑：細(xì)胞接受信號(hào)刺激后，活化轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子，該因子不僅誘導(dǎo)自身基因的表達(dá)，還誘導(dǎo)其他組織特異性基因的表達(dá)

26、；，二是染色體結(jié)構(gòu)變化的信息傳到子代細(xì)胞。 11、癌基因編碼的蛋白主要包括生長(zhǎng)因子、生長(zhǎng)因子受體、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中分子、基因轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子、細(xì)胞凋亡蛋白、DNA修復(fù)相關(guān)蛋白、細(xì)胞周期調(diào)控蛋白等幾大類。 二、名詞解釋（每題4分，共40分） 1、核被膜 內(nèi)外兩層平行但不連續(xù)的單位膜組成，面向核質(zhì)的一層是內(nèi)核膜，面向胞質(zhì)的是外核膜。 2、不朗棘輪模型 指線粒體前體蛋白從粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)轉(zhuǎn)運(yùn)到線粒體內(nèi)膜是由于前體蛋白的擺動(dòng)性（即布朗運(yùn)動(dòng)），可能會(huì)剛進(jìn)入線粒體內(nèi)膜即出膜，所以有mhsp（內(nèi)膜熱休克蛋 白）70與蛋白的N-導(dǎo)肽結(jié)合從而固定在內(nèi)膜的表面，N-導(dǎo)肽在前體蛋白成熟后會(huì)由特定水解酶將水解掉。 3

27、、GTP活化蛋白 4、隱蔽mRNA 5、微管相關(guān)蛋白 各種組織中提純微管蛋白可以發(fā)現(xiàn)還存在一些其他蛋白成分（5%-20%），這些蛋白具有組織特異性，表現(xiàn)出從相同αβ二聚體聚合形成的微管具有獨(dú)特的性質(zhì)，已從人類不同組織中發(fā)現(xiàn)了多種α及β微管蛋白，并追蹤微管基因表現(xiàn)出部分基因家族，某些基因被認(rèn)為是編碼獨(dú)特的微管蛋白。 6、G2期檢驗(yàn)點(diǎn) 主要檢驗(yàn)S期DNA是否有損傷，細(xì)胞體積是否夠大，是否可以順利進(jìn)入細(xì)胞分裂期。 7、泛素化 8、多潛能性 指細(xì)胞經(jīng)分裂和分化后仍具有產(chǎn)生完整機(jī)體的潛能或特征 9、腫瘤病毒 三、問(wèn)答及論述題（40分） 1、簡(jiǎn)述受體酪氨酸激酶信號(hào)通路。 2、核纖層蛋

28、白的分子結(jié)構(gòu)及其與中間纖維的關(guān)系。 3、有絲分裂過(guò)程中染色體的運(yùn)動(dòng)。 4、細(xì)胞表面黏附分子有幾種？其結(jié)構(gòu)特點(diǎn)及功能？ 5、什么叫基因差次表達(dá)？有什么意義？ 協(xié)和醫(yī)科大學(xué)2007考博 細(xì)胞生物和生化記憶版 名次解釋： LCAT; 卵磷脂膽固醇酰基轉(zhuǎn)移酶 是參與體內(nèi)脂質(zhì)代謝的主要酶之一, 催化游離膽固醇轉(zhuǎn)變成膽固醇酯, 參與HDL的成熟過(guò)程。主要催化卵磷脂S2-2位上的?；溵D(zhuǎn)移至膽固醇上, 分別生成溶血卵磷脂和膽固醇酯。 LDL;低密度脂蛋白 呼吸鏈；又稱電子傳遞鏈，是由一系列電子載體構(gòu)成的，從NADH或FADH2向氧傳遞電子的系統(tǒng)。氫以質(zhì)子形式脫下，電子沿呼吸鏈轉(zhuǎn)移到分子

29、氧，形成粒子型氧，再與質(zhì)子結(jié)合生成水。放出的能量則使ADP和磷酸生成ATP。電子傳遞和ATP形成的偶聯(lián)機(jī) 制稱為氧化磷酸化作用 r－谷氨?；h(huán): 是指氨基酸從腸粘膜細(xì)胞吸收，通過(guò)定位于膜上的r－谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶催化使吸收的氨基酸與G－SH反應(yīng)，生成r－谷氨?；被岫鴮被徂D(zhuǎn)入細(xì)胞內(nèi)的過(guò) 程。由于該過(guò)程具有循環(huán)往復(fù)的性質(zhì). klenow片斷 大腸桿菌DNA聚合酶Ⅰ大片段（klenow片段）是完整的DNA聚合酶Ⅰ的一個(gè)片段，只有在5’→3聚合酶活性和3’→5’外切酶活性，失去了5’→3外切酶活性。它可用于填補(bǔ)DNA單鏈末端成為雙鏈。 填空 亞氨基酸是Pro；含硫氨基酸有半胱氨酸、

30、胱氨酸、甲硫氨酸；糖原合成酶； 問(wèn)答 為什么肝硬化的病人不能用堿性利尿藥，為什么不能用堿性液體灌腸。 膽固醇的合成，運(yùn)輸和去向 酵母發(fā)生變異，從3－p甘油醛轉(zhuǎn)變了3－p甘油酸是否對(duì)酵母有利，為什么。 補(bǔ)救合成的途徑，及其意義 為什么文獻(xiàn)里用對(duì)應(yīng)于編碼鏈的另一條鏈作為基因的序列，那條鏈又名什么 camp分子的作用機(jī)制是什么 2008協(xié)和細(xì)胞生物學(xué)考博試題 一.名詞解釋 彈性蛋白 主要存在于韌帶和脈管壁。彈性纖維與膠原纖維共同存在, 賦予組織以彈性和抗張能力。彈性蛋白由二種類型短肽段交替排列構(gòu)成。一種是疏水短肽賦予分子以彈性；另一種短肽為富丙氨酸及賴氨酸殘基的

31、α螺旋，負(fù)責(zé)在相鄰分子間形成交聯(lián)。 自噬性溶酶體 自噬性溶酶體是一種自體吞噬泡, 作用底物是內(nèi)源性的,即細(xì)胞內(nèi)的蛻變、破損的某些細(xì)胞器或局部細(xì)胞質(zhì)。它們由單層膜包圍，內(nèi)部常含有尚未分解的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、線粒體和高爾基復(fù)合體或脂類、糖原等。正常細(xì)胞中的自噬性溶酶體在消化、 分解、自然更替一些細(xì)胞內(nèi)的結(jié)構(gòu)上起著重要作用。 蛋白質(zhì)分選 主要是指膜結(jié)合核糖體上合成的蛋白質(zhì), 通過(guò)信號(hào)肽,在翻譯的同時(shí)進(jìn)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng), 然后經(jīng)過(guò)各種加工和修飾,使不同去向的蛋白質(zhì)帶上不同的標(biāo)記, 最后經(jīng)過(guò)高爾基體反面網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行分選,包裝到不同類型的小泡,并運(yùn)送到目的地, 包括內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體、溶酶體、細(xì)胞質(zhì)膜、細(xì)胞外和核膜等。

32、 雙信使系統(tǒng) I3P 和DAG 核酶 呼吸鏈 核仁組織區(qū) 即rRNA序列區(qū)，它與細(xì)胞間期核仁形成有關(guān)，構(gòu)成核仁的某一個(gè)或幾個(gè)特定染色體片斷。這一片段的DNA轉(zhuǎn)錄為rRNA。核仁是NOR中的基因活動(dòng)而形成的可見的球體結(jié)構(gòu)。具有核仁組織區(qū)的染色體數(shù)目依不同細(xì)胞種類而異，人有5對(duì)染色體即 13、14、15、21、22號(hào)染色體上有核仁組織區(qū)。 基因敲除 基因敲除是基因打靶技術(shù)的一種，類似于基因的同源重組。指外源DNA與受體細(xì)胞基因組中序列相同或相近的基因發(fā)生同源重組，從而代替受體細(xì)胞基因組中的相 同/相似的基因序列，整合入受體細(xì)胞的基因組中，然后從整體觀察實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，推測(cè)相應(yīng)基因的功能

33、。 去分化 細(xì)胞改變了原來(lái)的分化程序，失去了原來(lái)應(yīng)有的結(jié)構(gòu)和功能，成為一個(gè)具有未分化細(xì)胞特征的普通細(xì)胞，細(xì)胞還有繼續(xù)分化的能力。 Caspase家族 保守的Asp特異性半胱氨酸蛋白酶(Caspase)家族是哺乳動(dòng)物細(xì)胞中程序性死亡(PCD)的介導(dǎo)者和執(zhí)行者. 原凋亡信號(hào)首先活化不同的Caspase啟始因子，再由啟始因子激活級(jí)聯(lián)下游的Caspase效應(yīng)分子，最終由效應(yīng)分子特異地水解細(xì)胞中的一系列底物而導(dǎo)致細(xì)胞解體.Caspase家族是整個(gè)PCD過(guò)程的關(guān)鍵元件，它們通過(guò)與眾多蛋白質(zhì)(激活因子或抑制因子)的相互作用來(lái)調(diào)控細(xì)胞的生死存亡. 三.問(wèn)答： 原位雜交技術(shù)與免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)的原理，

34、用途，異同 受體硌氨酸激酶介導(dǎo)的信號(hào)傳導(dǎo)途徑 什么是染色體支架，與核骨架的關(guān)系，有何重要性？ 在染色體包裝時(shí), 為染色質(zhì)提供錨定位點(diǎn)的非組蛋白。為了證明染色體骨架的存在, 分離有絲分裂前的染色體, 接著用試劑溶解組蛋白和大多數(shù)主要的非組蛋白, 然后在電子顯微鏡下觀察可見一完整的染色體結(jié)構(gòu)框架(framework)或支架(scaffold)。在間期, 染色體支架解體, 而構(gòu)成支架的蛋白則作為核基質(zhì)的組成部分起作用。分析表明染色體骨架與核骨架中存在相同的蛋白組分，如DNA拓樸酶II。核骨架的某些組分在細(xì)胞分裂期可能轉(zhuǎn)變?yōu)槿旧w骨架。 細(xì)胞周期的調(diào)控機(jī)理

35、 細(xì)胞分化過(guò)程中的基因表達(dá)的調(diào)節(jié) 15 細(xì)胞生物學(xué)補(bǔ)充： 1．免疫熒光技術(shù)和免疫電鏡技術(shù)是細(xì)胞體內(nèi)特異性蛋白質(zhì)分子定位研究常用的技術(shù)方法。 2. 與酶連接的細(xì)胞表面受體至少包括5類：受體酪氨酸激酶、受體絲氨酸/蘇氨酸激酶、受體酪氨酸磷酸酯酶、受體尿苷酸環(huán)化酶、酪氨酸蛋白激酶聯(lián)系的受體。 3.V型質(zhì)子泵的功能是利用ATP水解供能從細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中逆H+電化學(xué)梯度泵出H+進(jìn)入細(xì)胞器，以維持細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)pH中性和細(xì)胞器內(nèi)的PH酸性。 4.高爾基體至少由互相聯(lián)系的4個(gè)部分組成，它們是_________________________________ .

36、 5.廣義的細(xì)胞骨架包括細(xì)胞核骨架、細(xì)胞質(zhì)骨架、細(xì)胞膜骨架和細(xì)胞外基質(zhì)四部分。 6．染色體中組蛋白和非組蛋白質(zhì)的功能是_________________________________________. 7.BCR能識(shí)別________蛋白質(zhì)抗原分子，它識(shí)別的表位是__________________. 8.神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞與神經(jīng)原共同起源于胚盤外胚層神經(jīng)上皮組織,而施旺細(xì)胞則來(lái)自____________. 9.組織胺主要存在于____________. 10．Dna具有信息載體功能而無(wú)酶活性。 11。光學(xué)顯微鏡的光學(xué)放大系統(tǒng)主要由目鏡和物鏡組成。 12.分化基因分類管家基因和奢侈

37、基因，后者又稱組織特異性表達(dá)的基因。 13．改變細(xì)胞所處的位置，僅僅可導(dǎo)致細(xì)胞分化方向的改變，這種現(xiàn)象稱為 .產(chǎn)生該現(xiàn)象的主要原因是 之故。 14．儲(chǔ)存在卵細(xì)胞中沒有翻譯活性的mRNA可稱為隱蔽RNA。 . 論述題： 1． 敘述在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上合成的磷脂轉(zhuǎn)運(yùn)至其它膜上的兩種主要方式。 2． 在氧化磷酸化機(jī)制中最為流行的一種假說(shuō)，化學(xué)滲透學(xué)說(shuō)有哪兩種特點(diǎn)。 3． 試述細(xì)胞信號(hào)傳遞的基本特征。 4． 簡(jiǎn)述染色體結(jié)構(gòu)與基因轉(zhuǎn)錄的關(guān)系。 5． 以原核生物為例，簡(jiǎn)述肽鏈合成的基本環(huán)節(jié)與主要

38、步驟。 6． 什么是胚胎干細(xì)胞，通常如何獲得ESC，怎么證明它的全能性？ 中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué) 生物化學(xué)與分子生物學(xué)歷年考博真題 2003年攻讀博士學(xué)位研究生入學(xué)考試生物化學(xué)與分子生物學(xué)試題 一、名詞解釋（每題2分，共10分） 1、糖原脫支酶 2、酮體 在肝臟中，脂肪酸氧化分解的中間產(chǎn)物乙酰乙酸、β-羥基丁酸及丙酮，三者統(tǒng)稱為酮體 3、氧化磷酸化 在呼吸鏈電子傳遞過(guò)程中偶聯(lián)ATP的生成。 4、RNA INTERFERENCE 指在進(jìn)化過(guò)程中高度保守的、由雙鏈RNA（dsRNA）介導(dǎo)的、由特定酶參與的特異性基因沉默現(xiàn)象,它在轉(zhuǎn)錄水平、轉(zhuǎn)錄后水平和翻譯水平上阻斷基因的表達(dá)

39、。 5、ATTENATOR 在trp mRNA 5，端trp正基因的起始密碼前有一個(gè)長(zhǎng)162 bp的DNA序列稱為前導(dǎo)區(qū)，其中第123～150位核苷酸如果缺失，trp基因的表達(dá)水平可提高6倍。如在培養(yǎng)基中完全不含色氨酸，則轉(zhuǎn)錄不會(huì)終止，這個(gè)區(qū)域被稱為弱化子。 二、說(shuō)明下列酶的作用特點(diǎn)與性質(zhì)（每題2.5分，共10分） 1、DNA連接酶 2、DNA內(nèi)切酶 3、光復(fù)合酶 常見的一種修復(fù)作用就是光復(fù)活作用。生物體細(xì)胞受損傷后能產(chǎn)生光復(fù)合酶，該酶能與受傷的DNA結(jié)合，行使核酸內(nèi)切酶作用，切除突變部分，以另一聯(lián)為母聯(lián)重新合成DNA。該酶在黑暗條件下無(wú)活性，光照條件下能激活光復(fù)合酶。 4

40、、大腸桿菌DNA聚合酶Ⅰ 主要有3種作用：①5’→3’的聚合作用。但不是復(fù)制染色體而是修補(bǔ)DNA，填補(bǔ)DNA上的空隙或是切除RNA引物后留下的空隙。②3’→5’的外切酶活性。消除在聚合作用中摻入的錯(cuò)誤核苷酸。③5’→3’外切酶活性。切除受損傷的DNA。它在切口平移（nick translation）中應(yīng)用。 三、簡(jiǎn)答題（每題10分，共50分） 1、PH=8.0時(shí),核酸與蛋白質(zhì)電泳泳動(dòng)有何不同特點(diǎn)？ 2、1953年4月25，發(fā)生了什么讓生物學(xué)界震動(dòng)的事情？請(qǐng)說(shuō)明其意義？ 3、下面兩句話對(duì)么？請(qǐng)分別說(shuō)明理由： 1）Trp操縱子只有衰減作用一種負(fù)調(diào)節(jié)方式。 2）Cro蛋白與λ阻遏蛋白結(jié)

41、合與不同位點(diǎn)調(diào)節(jié)溶菌性循環(huán)與溶源循環(huán)。 4、2002年SCIENCE評(píng)出年度十大，說(shuō)ｍicroRNA是重要發(fā)現(xiàn)，說(shuō)明ｍicroRNA的意義。 MicroRNA也可以寫做miRNA ，是一種21－25nt長(zhǎng)的單鏈小分子RNA。它廣泛存在于真核生物中，是一組不編碼蛋白質(zhì)的短序列RNA，其本身不具有開放閱讀框（ORF）。成熟的miRNA，5′端有一個(gè)磷酸基團(tuán)，3′端為羥基。編碼miRNAs的基因最初產(chǎn)生一個(gè)長(zhǎng)的pri-RNA分子，這種初期分子還必須被剪切成約70-90個(gè)堿基大小、具發(fā)夾結(jié)構(gòu)單鏈RNA前體（pre-miRNA）并經(jīng)過(guò)Dicer酶加工后生成。成熟的miRNA 5’端的磷酸

42、基團(tuán)和3端羥基則是它與相同長(zhǎng)度的功能RNA降解片段的區(qū)分標(biāo)志。 研究表明MiRNAs在物種間具有高度的保守性、時(shí)序性和組織特異性——在特定的時(shí)間、組織才會(huì)表達(dá)。 MiRNA研究與疾病及研究進(jìn)展 RNA干擾 新的研究表明miRNA在從癌癥、心臟病到艾滋病的各種疾病中起到一定的作用，而且有間接的證據(jù)表明如果將兩個(gè)miRNA從人類基因組中刪除就會(huì)發(fā)生白血病。據(jù)推測(cè)，MiRNA能夠調(diào)節(jié)人類的三分之一的基因。有研究表明miRNA能夠調(diào)節(jié)Ras癌基因、干細(xì)胞分化、脊椎動(dòng)物肢體的形成等。 5、為什么DNA合成必須有引物而RNA合成不需引物可以直接將兩個(gè)核苷酸連接？ 四、問(wèn)答題（每題15分

43、，共30分） 1、近年來(lái)人們對(duì)真核基因調(diào)控理論有了深入的認(rèn)識(shí)，現(xiàn)在大家普遍接受“unified theory”的理論，請(qǐng)你談?wù)勀銓?duì)該理論的理解及你的觀點(diǎn)。 2、用微球菌核酸酶酶解染色質(zhì)，然后進(jìn)行電泳，發(fā)現(xiàn)200bp、400bp、600bp、800bp…的條帶，試問(wèn)從該現(xiàn)象可以得出什么結(jié)論？圖1所示的條帶不是非常狹窄，試解釋其原因？ 2004年攻讀博士學(xué)位研究生入學(xué)考試 生物化學(xué)與分子生物學(xué)試題 編號(hào)：221 一、名詞解釋（每題2分，共30分） 1、復(fù)合脂質(zhì) 含有其他化學(xué)基團(tuán)的脂肪酸酯，體內(nèi)主要含磷脂和糖脂兩種復(fù)合脂質(zhì) 2、糖原脫支酶 為水解糖原中α-1，6-葡糖苷

44、鍵的酶類的總稱。 3、酮體　（ketone body）：在肝臟中，脂肪酸氧化分解的中間產(chǎn)物乙酰乙酸、β-羥基丁酸及丙酮，三者統(tǒng)稱為酮體 4、氧化磷酸化（oxidative phosphorylation）是指在生物氧化中伴隨著ATP生成的作用。有代謝物連接的磷酸化和呼吸鏈連接的磷酸化兩種類型。即ATP生成方式有兩種。 5、結(jié)構(gòu)域Structural Domain蛋白質(zhì)亞基結(jié)構(gòu)中明顯分開的緊密球狀結(jié)構(gòu)區(qū)域，又稱為轄區(qū)。 6、同工酶isozyme，isoenzyme）廣義是指生物體內(nèi)催化相同反應(yīng)而分子結(jié)構(gòu)不同的酶。按照國(guó)際生化聯(lián)合會(huì)（IUB）所屬生化命名委員會(huì)（CBN）的建議，則只把其中因

45、編碼基因不同而產(chǎn)生的多種分子結(jié)構(gòu)的酶稱為同工酶。 7、染色體核骨架 為DNA的復(fù)制提供支架，DNA是以復(fù)制環(huán)的形式錨定在核骨架上的，是基因轉(zhuǎn)錄加工的場(chǎng)所，RNA的轉(zhuǎn)錄同樣需要DNA錨定在核骨架上才能進(jìn)行，核骨架上有RNA聚合酶的結(jié)合位點(diǎn)，使之固定于核骨架 上，RNA的合成是在核骨架上進(jìn)行的。新合成的RNA也結(jié)合在核骨架上，并在這里進(jìn)行加工和修飾。 8、染色質(zhì)重塑 DNA 復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、修復(fù)、重組在染色質(zhì)水平發(fā)生, 這些過(guò)程中, 染色質(zhì)重塑可導(dǎo)致核小體位置和結(jié)構(gòu)的變化, 引起染色質(zhì)變化。 9、核基質(zhì)（nuclear matrix） 亦稱核骨架。有廣義和狹義兩種概念。廣義概念認(rèn)為核基質(zhì)包

46、括核基質(zhì)-核纖層-核孔復(fù)合體結(jié)構(gòu)體系；狹義概念是指真核細(xì)胞核內(nèi)除去核膜、核纖層、染色質(zhì)、核仁以外存在的一個(gè)由纖維蛋白構(gòu)成的網(wǎng)架體系。目前較多使用狹義概念。 10、轉(zhuǎn)導(dǎo)transduction）由噬菌體將一個(gè)細(xì)胞的基因傳遞給另一細(xì)胞的過(guò)程。它是細(xì)菌之間傳遞遺傳物質(zhì)的方式之一。其具體含義是指一個(gè)細(xì)胞的DNA或RNA通過(guò)病毒載體的感染轉(zhuǎn)移到另一個(gè)細(xì)胞中。 11、密碼子的偏嗜性 一個(gè)氨基酸具有兩個(gè)以上的密碼子就成為密碼簡(jiǎn)并 12、基因簇 指基因家族中 的各成員緊密成簇排列成大串的重復(fù)單位，定于染色體的的特殊區(qū)域?；虼厣賱t可以是由重復(fù)產(chǎn)生的兩個(gè)相鄰相關(guān)基因所組成，多則可以是幾百個(gè)相同基因串

47、聯(lián)排列而成。他們屬于同一個(gè)祖先的基因擴(kuò)增產(chǎn) 物。 13、逆轉(zhuǎn)座子 在基因組內(nèi)存在著通過(guò)DNA轉(zhuǎn)錄為RNA后，再經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄成為cDNA并插入到基因組的新位點(diǎn)上的因子。逆轉(zhuǎn)座子的整體結(jié)構(gòu)與整合的逆轉(zhuǎn)錄病毒極為相似，其主要特征之一是在兩端具有長(zhǎng)的同向末端重復(fù)序列(Long terminal repeat, LTR)，而兩個(gè)末端的每一個(gè)末端又各具備一個(gè)倒轉(zhuǎn)重復(fù)序列。 14、后基因改變(Epigenitic change) 基因外改變 環(huán)境因子引起細(xì)胞和機(jī)體表型的改變可以通過(guò)基因型的改變而致,也可以不通過(guò)基因型改變而致,后者即基因外改變,它是研究致病機(jī)制的一個(gè)重要方面. 15、雙向電泳（two-

48、dimensional electrophoresis）是等電聚焦電泳和SDS-PAGE的組合，即先進(jìn)行等電聚焦電泳（按照pI分離），然后再進(jìn)行SDS-PAGE（按照分子大小），經(jīng)染色得到的電泳圖是個(gè)二維分布的蛋白質(zhì)圖。 二、填空題（每題1分，共5分） 7、脂肪酸氧化限速酶----。乙酰CoA合成酶和肉毒堿脂酰轉(zhuǎn)移酶Ⅰ 8、酶促反應(yīng)速率的影響因素---溫度，PH，酶濃度，激活劑和抑制劑 9. 維持DNA雙螺旋的力是__氫鍵和堿基堆積力 10. 真核細(xì)胞核糖體大亞基___80s____rRNA與原核生物_________同源。 三、簡(jiǎn)答題（每題8分，共40分） 5、簡(jiǎn)述膽汁酸的生理

49、功能。 膽汁酸為兩性分子，主要起表面活性劑作用。 在膽汁中，膽汁酸可以避免膽固醇結(jié)晶析出。當(dāng)膽汁中膽汁酸、卵磷脂、膽固醇比例失調(diào)時(shí)，可形成膽固醇結(jié)石。 在腸道中，膽汁酸有助于脂類物質(zhì)乳化，增強(qiáng)其消化吸收。由于結(jié)合膽汁酸的酸性更強(qiáng)，在腸道的pH環(huán)境中能以離子的形式存在，因此其乳化的作用更強(qiáng) 6、TATA box 及其功能。 是一段DNA序列，位于真核生物和古細(xì)菌的轉(zhuǎn)錄啟動(dòng)子上，大約位在轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)上游第25個(gè)堿基對(duì)。 7、tRNA中常出現(xiàn)次黃嘌呤，為什么？（另一種說(shuō)法：tRNA反密碼子第一個(gè)堿基往往是I，為什么？） tRNA反密碼子的第一個(gè)堿基（由5`-端向3`-端計(jì)數(shù)）常

50、被次黃嘌呤即I所占據(jù)，很少有U，幾乎沒有A。tRNA反密碼子中的第一個(gè)堿基與mRNA密碼子中的第三個(gè)堿基（由5`-端向3`-端計(jì)數(shù)）配對(duì)時(shí)并不嚴(yán)格遵循堿基互補(bǔ)配對(duì)原則，除A-U，G-C可以配對(duì)外，反密碼子中的I與密碼子3`-端的U、A、C都能配對(duì)， 8、只有偶數(shù)碳原子的脂肪酸氧化時(shí)才能產(chǎn)生乙酰輔酶A嗎，為什么？ 脂酸經(jīng)過(guò)β-氧化，每次切下兩個(gè)c而生成乙酰輔酶A。 偶數(shù)C的脂酸（n個(gè)C）最后生成 n/2個(gè) 乙酰輔酶A； 奇數(shù)C的脂酸（n個(gè)C）最后生成 （n-3）/2 個(gè)乙酰輔酶A和一分子丙酰輔酶A 所以無(wú)論偶數(shù)還是奇數(shù)C脂酸在氧化降解的時(shí)候都產(chǎn)生乙酰輔酶A，但奇數(shù)的多產(chǎn)生丙酰輔酶A

51、9、寫出一段反式串聯(lián)結(jié)構(gòu)的DNA序列不少于10bp，并畫出二級(jí)結(jié)構(gòu)草圖？ 10、大腸桿菌岡崎片斷一般有多少bp,如何連接？ 岡崎片段的大小，在原核生物中約為1000～2000個(gè)核苷酸，而在真核生物中約為100個(gè)核苷酸。由DNApolI發(fā)揮5′-3′外切酶的功能，切去引物，并有該酶繼續(xù)延長(zhǎng)DNA鏈，填補(bǔ)切除引物后形成的空隙，最后由DNA連接酶催化DNA相鄰的5′磷酸基和3′羥基末端之間形成磷酸二酯鍵，使DNA單鏈缺口封合起來(lái)。 11．紫外線造成皮膚細(xì)胞DNA何種損傷，如何修復(fù)？ 使相鄰嘧啶堿基間通過(guò)共價(jià)連接形成嘧啶二聚體。采用光修復(fù)，利用光能使嘧啶二聚體拆開，需要光修復(fù)酶的參與。 12

52、．使肽鍵形成的酶叫什么名字，其化學(xué)本質(zhì)是什么？存在于干細(xì)胞的什么位置？轉(zhuǎn)肽酶即γ—谷氨酰轉(zhuǎn)移酶，是核糖體50S亞基上的一個(gè)蛋白質(zhì)組分。 13。已知一個(gè)蛋白質(zhì)的全長(zhǎng)CDNA，設(shè)計(jì)一個(gè)實(shí)驗(yàn)步驟從cDNA開始提純此蛋白？ 四、設(shè)計(jì)題（共25分） 1、已知一種cDNA的中間一段序列，請(qǐng)?jiān)O(shè)計(jì)一種方法找到其全長(zhǎng)。（10分） 2、已知蛋白X是一種胞質(zhì)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)中起作用的蛋白，請(qǐng)?jiān)O(shè)計(jì)幾種策略找與其相互作用的蛋白。（15分） GFP、GST標(biāo)簽、酵母雙雜交系統(tǒng) 五、論述題 給定一個(gè)cDNA序列,如何表達(dá),純化到蛋白質(zhì)？ 判斷： 細(xì)菌的操縱基因總是在啟動(dòng)子的后面。 乳酸操縱子模型中，阻

53、遏蛋白與RNA聚合酶結(jié)合組織啟動(dòng)子的啟動(dòng)。錯(cuò) 阻遏蛋白與操縱基因結(jié)合組織啟動(dòng)子的啟動(dòng) 2005年攻讀博士學(xué)位研究生入學(xué)考試 生物化學(xué)與分子生物學(xué)試題 一、 名詞解釋（每題2分，共10分） 1、必需脂肪酸 凡是體內(nèi)不能合成，必須由飼糧供給，或能通過(guò)體內(nèi)特定先體物形成，對(duì)機(jī)體正常機(jī)能和健康具有重要保護(hù)作用的脂肪酸稱為必需脂肪酸（essential fatty acids,縮寫EFA）。 2、磷氧比 呼吸過(guò)程中無(wú)機(jī)磷酸（Pi）消耗量和氧消耗量的比值稱為磷氧比。 3、糖異生 由簡(jiǎn)單的非糖前體（乳酸、甘油、生糖氨基酸等）轉(zhuǎn)變?yōu)樘?葡萄糖或糖原)的過(guò)程。糖異生不是糖酵解的簡(jiǎn)單逆轉(zhuǎn)。 4、酮

54、體（ketone body）：在肝臟中，脂肪酸氧化分解的中間產(chǎn)物乙酰乙酸、β-羥基丁酸及丙酮，三者統(tǒng)稱為酮體 5、hnRNA (heterogeneous nuclear RNA,hnRNA)。核內(nèi)不均一RNA 為存在于真核生物細(xì)胞核中的不穩(wěn)定、大小不均的一組高分子RNA（分子量約為105～2107，沉降系數(shù)約為30—100S）之總稱。占細(xì)胞全部RNA之百分之幾，在核內(nèi)主要存在于核仁的外側(cè)。 二、判斷（請(qǐng)判斷對(duì)錯(cuò)并改錯(cuò)。每題1分，共8分） 1、有氧條件改為無(wú)氧條件，葡萄糖的利用速度增加。 2、氰化物阻止了氧化磷酸化。 3、非糖飲食，偶數(shù)脂肪酸比奇數(shù)脂肪酸好。 4、膽固醇增高癥患者

55、，服用谷固醇，會(huì)增高血脂之類的。 5、DNA復(fù)制必須有引物，這一特點(diǎn)和復(fù)制的忠實(shí)性（或準(zhǔn)確性）有關(guān)。 6、體內(nèi)DNA復(fù)制所需要的能量來(lái)自焦磷酸水解釋放的自由能。 7、剪接（?。w的大小為40-60s。 8、真核mRMA前體剪接加工的機(jī)制是轉(zhuǎn)酯反應(yīng)，這一過(guò)程不需要消耗ATP。 錯(cuò) 三、填空（每題1分，共15分） 1、血液中的氨的來(lái)源 丙氨酸和谷氨酰胺。 2、氨基丁酸的前體 是谷氨酸。 3、體內(nèi)合成1摩尿素要消耗 4個(gè)ATP,可以過(guò)膜運(yùn)輸?shù)闹虚g物是瓜氨酸和鳥氨酸，精氨酸水解后生成尿素。 4、連接尿素和TCA循環(huán)的兩中間物為： 延胡索酸和α-酮戊二酸 。 5、糖原合成的關(guān)鍵

56、酶是 糖原合成酶，糖原分解的限素酶是 糖原磷酸化酶。 6、乙酰輔酶A的來(lái)源葡萄糖，甘油脂肪酸，酮體，氨基酸 ，去向 三羧酸循環(huán)，合成膽固醇脂肪 ，酮體 ，參與生化反應(yīng) 。 8、Asp氨基酸參與尿嘧啶合成。 9、蛋白質(zhì)組學(xué)是 的學(xué)科。 10、非蛋白N是 。 11、腦的氨的轉(zhuǎn)運(yùn)形式是 。 12、CPS是 和 的中間產(chǎn)物。 13、 脫羧成為使血管擴(kuò)張的物質(zhì)。 14、膽固醇的代謝終產(chǎn)物是膽汁酸。 15、脂肪酸進(jìn)入線粒體的載體是 肉毒堿脂酰轉(zhuǎn)移酶。 四、簡(jiǎn)答題（8分） 膽汁酸循環(huán)的生化原理和意義。 膽汁酸由肝細(xì)胞分泌,經(jīng)肝左右管-肝總管-膽總管.進(jìn)入十二指腸.參加消化.然后在小腸

57、膽汁酸可被重吸收,經(jīng)肝門靜脈進(jìn)入肝.完成循環(huán). 生理意義:①保證了膽汁酸的量;②增加了膽汁酸的利用率. 五、論述題（每題15分，共45分） 1、根據(jù)圖說(shuō)明DNA鏈的方向，標(biāo)出核糖C的序號(hào)，并畫出另一條相應(yīng)的DNA鏈。 (圖的內(nèi)容是給了一個(gè)鏈沒有標(biāo)出方向) 2、已知ddCTP和dCTP的結(jié)構(gòu)示意圖（ddCTP和dCTP的結(jié)構(gòu)式是一個(gè)少4位的OH，一個(gè)少5位的P），問(wèn)在DNA復(fù)制反應(yīng)中， （1）如[ddCTP]>>[dCTP]，會(huì)出現(xiàn)什么現(xiàn)象？為什么？ （2）[ddCTP]=10%[dCTP]，會(huì)出現(xiàn)什么現(xiàn)象？為什么？ （3）dCMP的濃度遠(yuǎn)大于dCTP或只有10％又會(huì)怎樣？為什么

58、？ 3、圖示說(shuō)明大腸桿菌的乳糖操縱子模型的調(diào)控方式。 六、簡(jiǎn)述題（每題7分，共14分） 1、有一個(gè)四肽，被胰蛋白酶水解后形成兩個(gè)二肽，其中一個(gè)在280nm處有強(qiáng)光吸收，并且有呱基反應(yīng)，另一個(gè)可被HBr水解后釋放一個(gè)與茚三酮反應(yīng)后呈黃色的氨基酸。請(qǐng)寫出四肽序列。 2、某組織中含有某種蛋白，但含量低也無(wú)法純化，已知蛋白分子量，并有抗體，如何用一種辦法證明該組織確有此蛋白。 協(xié)和醫(yī)科大學(xué)2006年生物化學(xué)與分子生物學(xué)專業(yè)考博試題 一、 填空 （24空24分） 1.1953年，由----Waston---和-----Crick--（英文姓）首次提出了dna的雙螺旋模型，其結(jié)果發(fā)表

59、在-《自然》---雜志，他們提出的實(shí)驗(yàn)依據(jù)是—A=T-----和------G=C--。 2.蛋白質(zhì)濃度測(cè)定在-280nm, 原因是苯基，但有時(shí)候也在220nm處測(cè)量，原因是肽鍵 3.表皮生長(zhǎng)因子受體具有酪氨酸激酶的活性， 4.嗅覺、視覺、味覺和細(xì)胞膜上的G蛋白結(jié)合，這種受體具有7個(gè)跨膜α-螺旋的的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，產(chǎn)生的第二信使是cAMP、I3P、DAG。 5. 維持蛋白高級(jí)結(jié)構(gòu)的因素氫鍵、離子鍵、范德華力、疏水作用。 二、名詞解釋 （4題16分） 1. CpG island CpG雙核苷酸在人類基因組中的分布很不均一，而在基因組的某些區(qū)段，CpG保持或高于正常概率，這些區(qū)段被稱作

60、CpG島, 2. CTD of RNA Pol II RNA聚合酶II最大亞基末端的羧基端結(jié)構(gòu)域是由以七氨基酸(–Tyr-Ser-Pro-Thr-Ser- Pro-Ser-)為重復(fù)單位的高度保守的重復(fù)序列組成的. 該結(jié)構(gòu)可通過(guò)與mRNA加工因子的相互作用而對(duì)其加工過(guò)程產(chǎn)生直接或間接的影響,在mRNA的轉(zhuǎn)錄和加工的偶聯(lián)過(guò)程中具有重要的作用. 3. SiRNA是一種小RNA分子（~21-25核苷酸），由Dicer（RNAase Ⅲ家族中對(duì)雙鏈RNA具有特異 性的酶）加工而成。SiRNA是siRISC的主要成員，激發(fā)與之互補(bǔ)的目標(biāo)mRNA的沉默。 4.basic l

61、eucrine zipzag (堿性亮氨酸拉鏈)該結(jié)構(gòu)的特點(diǎn)是蛋白質(zhì)分子的肽鏈上每隔6個(gè)氨基酸就有1個(gè)亮氨酸殘基，結(jié)果就導(dǎo)致這些亮氨酸殘基都在。 三、問(wèn)答題 （4題40分） 1. 基因組DNA有時(shí)會(huì)產(chǎn)生G:T錯(cuò)配，DNA復(fù)制時(shí)有時(shí)會(huì)發(fā)生A:C錯(cuò)配，他們產(chǎn)生的原因是什么，各怎么修復(fù)？（12分） 2. 大腸桿菌的啟動(dòng)子（或操縱子）活性有無(wú)強(qiáng)弱之分，如果有，決定其強(qiáng)弱的因素什么？（10分） 動(dòng)子是一種順式作用(cis-acting)正調(diào)控元件，其強(qiáng)弱決定基因轉(zhuǎn)錄水平的高低，而啟動(dòng)子中所含有的轉(zhuǎn)錄因子則決定了啟動(dòng)子的強(qiáng)弱。 在原核生物的啟動(dòng)子中有4個(gè)區(qū)域：轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)、－10區(qū)、－35區(qū)、－1

62、0與－35之間的序列，區(qū)域是啟動(dòng)子強(qiáng)弱的決定因素。 3. 什么是基因印記（imprinting）,它是怎么遺傳的？舉例說(shuō)明。（10分） 基因組印記是指來(lái)自父方和母方的等位基因在通過(guò)精子和卵子傳遞給子代時(shí)發(fā)生了修飾，使帶有親代 印記的等位基因具有不同的表達(dá)特性，這種修飾常為DNA甲基化修飾，也包括組蛋白乙?；?、甲基化等修飾。在生殖細(xì)胞形成早期，來(lái)自父方和母方的印記將全部被消除，父方等位基因在精母細(xì)胞形成精子時(shí)產(chǎn)生新的甲基化模式，但在受精時(shí)這種甲基化模式還將發(fā) 生改變；母方等位基因甲基化模式在卵子發(fā)生時(shí)形成，因此在受精前來(lái)自父方和母方的等位基因具有不同的甲基化模式。 基因印記與動(dòng)物克隆技術(shù)

63、 基因印記 (imprinting) 對(duì)核移植后基因組重新編程的影響。基因印記現(xiàn)象在哺乳動(dòng)物的發(fā)育過(guò)程中普遍存在，它是指基因的表達(dá)與否取決于它們是在父源染色體上還是母源染色體上。有 些印記基因只從母源染色體上表達(dá)，而有些則只從父源染色體上表達(dá)。基因印記與動(dòng)物克隆技術(shù)的成功及不足有何關(guān)系值得深入研究。 4. 為什么說(shuō)‘ribosome is a ribozyme”? （8分） rRNA為肽酰轉(zhuǎn)移酶(peptidyl transferase)時(shí)，催化使肽鍵形成，不需要額外的能量。 四，名詞解釋 4題8分 1.酵母雙雜交 酵母體內(nèi)分析蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用的基因系統(tǒng)，也是一個(gè)基于轉(zhuǎn)錄因子

64、模塊結(jié)構(gòu)的遺傳學(xué)方法。典型的真核生長(zhǎng)轉(zhuǎn)錄因子， 如GAL4、GCN4、等都含有二個(gè)不同的結(jié)構(gòu)域: DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域(DNA-binding domain)和轉(zhuǎn)錄激活結(jié)構(gòu)域(transcription-activating domain)。前者可識(shí)別DNA上的特異序列， 并使轉(zhuǎn)錄激活結(jié)構(gòu)域定位于所調(diào)節(jié)的基因的上游， 轉(zhuǎn)錄激活結(jié)構(gòu)域可同轉(zhuǎn)錄復(fù)合體的其他成分作用， 啟動(dòng)它所調(diào)節(jié)的基因的轉(zhuǎn)錄。 2.細(xì)菌人工染色體 Bacterial artificial chromosome，BAC）是指一種以F質(zhì)粒（F-plasmid）為基礎(chǔ)建構(gòu)而成的細(xì)菌染色體克隆載體，長(zhǎng)用來(lái)克隆150kb左右大小的DNA片段，

65、最多可保存300kb個(gè)堿基對(duì)。以BAC為基礎(chǔ)克隆的載體成嵌合體的頻率較低，轉(zhuǎn)化效率高，而且以環(huán)狀結(jié)構(gòu)存在于細(xì)菌體內(nèi)，易于分辨和分離純化。 五，簡(jiǎn)述題 2題12分 1. 給定一個(gè)組織，簡(jiǎn)述如何構(gòu)建Cdna文庫(kù)。 2. 簡(jiǎn)述基因敲除小鼠模型的策略 利用基因打靶技術(shù)產(chǎn)生轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的程序一般為： 　?。幔瓻S細(xì)胞的獲得：現(xiàn)在基因敲除一般應(yīng)用于鼠，而最常用的鼠的種系是129及其雜合體，因?yàn)檫@類小鼠具有自發(fā)突變形成畸胎瘤和畸胎肉瘤的傾向，是基因敲除的理想實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。而其他遺傳背景的胚胎干細(xì)胞系逐漸被發(fā)展應(yīng)用，最近來(lái)自于C57BL/6CBN/JNCrjF1小鼠的胚胎干細(xì)胞系成功地用于基因敲除。c5

66、7BL／6小鼠種系等已經(jīng)廣泛的應(yīng)用于免疫學(xué)領(lǐng)域，并以此為背景建立了許多成功的轉(zhuǎn)基因模型。 　?。猓蜉d體的構(gòu)建：把目的基因和與細(xì)胞內(nèi)靶基因特異片段同源的DNA分子都重組到帶有標(biāo)記基因(如neo基因，TK基因等)的載體上，此重組載體即為打靶載體。因基因打靶的目的不同，此載體有不同的設(shè)計(jì)方法，可分為替換性載體和插入型載體。如為了把某一外源基因引入染色體DNA的某一位點(diǎn)上，這種情況下應(yīng)設(shè)計(jì)的插入型載體要包括外源基因(即目的基因)、同源基因片段及標(biāo)記基因等部分。如為了使某一基因失去其生理功能，這時(shí)所要設(shè)計(jì)的替換型打靶載體，應(yīng)包括含有此靶基因的啟動(dòng)子及第一外顯子的DNA片段及標(biāo)記基因等諸成分。 　　ｃ．將基因打靶載體通過(guò)一定的方式(常用電穿孔法)導(dǎo)入同源的胚胎干細(xì)胞(EScell)中，使外源DNA與胚胎干細(xì)胞基因組中相應(yīng)部分發(fā)生同源重組，將打靶載體中的DNA序列整合到內(nèi)源基因組中從而得以表達(dá)。一般地，顯微注射命中率較高，但技術(shù)難度較大，電穿孔命中率比顯微注射低，但便于使用。 　?。洌眠x擇性培養(yǎng)基篩選已擊中的細(xì)胞：一般地，篩選使用正、負(fù)選擇法，比如用G418篩選所有能表達(dá)n