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1、武漢工程大學(xué)武漢工程大學(xué) 制藥工程部制藥工程部第七章第七章 苯乙胺類擬腎上腺苯乙胺類擬腎上腺素藥物的分析素藥物的分析武漢工程大學(xué)武漢工程大學(xué) 制藥工程部制藥工程部藥理：藥理： 收縮血管、升高血壓、散大瞳孔、舒收縮血管、升高血壓、散大瞳孔、舒 張支氣管、遲緩胃腸肌、加速心率、加張支氣管、遲緩胃腸肌、加速心率、加強(qiáng)心肌收縮力；強(qiáng)心肌收縮力；臨床應(yīng)用：臨床應(yīng)用： 升壓、平喘、充血治療。升壓、平喘、充血治療。武漢工程大學(xué)武漢工程大學(xué) 制藥工程部制藥工程部結(jié)構(gòu)結(jié)構(gòu) 擬腎上腺素?cái)M腎上腺素類藥物，分子類藥物，分子結(jié)構(gòu)中具有苯結(jié)構(gòu)中具有苯乙胺基本結(jié)構(gòu)乙胺基本結(jié)構(gòu)R1HCO HHCR3NHR2HOHOClH2N

2、ClHOHOH2CCH(CH3)2C(CH3)3CH3CH3CH3HHHHClHClH2SO4腎上腺素腎上腺素(adrenaline)鹽酸克倫特羅鹽酸克倫特羅(clenbuterol hydrochloride)硫酸沙丁胺醇硫酸沙丁胺醇(salbutamol sulfate)鹽酸麻黃堿鹽酸麻黃堿(ephedrine hydrochloride) R1 R2 R3 HX武漢工程大學(xué)武漢工程大學(xué) 制藥工程部制藥工程部化學(xué)性質(zhì)化學(xué)性質(zhì) R1HCOHHCR3NHR2弱弱 堿堿 性：性：烴胺基側(cè)鏈，仲胺氮弱堿性，游離堿難溶于烴胺基側(cè)鏈，仲胺氮弱堿性，游離堿難溶于水，易溶于有機(jī)溶劑；其鹽可溶于水水，易溶于

3、有機(jī)溶劑；其鹽可溶于水酚羥基特性：酚羥基特性：鄰苯二酚（或苯酚）結(jié)構(gòu)，與金屬離子絡(luò)合呈鄰苯二酚（或苯酚）結(jié)構(gòu)，與金屬離子絡(luò)合呈色；在空氣中或遇光、熱易氧化，色澤變深；色；在空氣中或遇光、熱易氧化，色澤變深；在堿性溶液中更易變色。在堿性溶液中更易變色。光學(xué)活性：光學(xué)活性：手性碳原子，具有旋光性。手性碳原子，具有旋光性。苯環(huán)取代基特性：苯環(huán)取代基特性：如鹽酸克倫特羅芳伯氨基；如鹽酸克倫特羅芳伯氨基；紫外、紅外吸收特性進(jìn)行定性、定量分析。紫外、紅外吸收特性進(jìn)行定性、定量分析。武漢工程大學(xué)武漢工程大學(xué) 制藥工程部制藥工程部鑒別試驗(yàn)鑒別試驗(yàn) (identification)與三氯化鐵反應(yīng)、與甲醛硫酸反應(yīng)

4、與三氯化鐵反應(yīng)、與甲醛硫酸反應(yīng)藥物藥物腎上腺素腎上腺素Adrenaline重酒石酸去甲腎上腺素重酒石酸去甲腎上腺素Noradrenaline bitartrate鹽酸去氧腎上腺素鹽酸去氧腎上腺素Phenylephrine hydrochloride鹽酸異丙腎上腺素鹽酸異丙腎上腺素Isoprenaline hydrochloride鹽酸多巴胺鹽酸多巴胺Dopamine hydrochloride三氯化鐵三氯化鐵0.1mol/L鹽酸液中顯翠綠色，鹽酸液中顯翠綠色，加氨試液顯紫色，紫紅色加氨試液顯紫色，紫紅色翠綠色，加碳酸氫鈉試液顯藍(lán)翠綠色，加碳酸氫鈉試液顯藍(lán)色，紅色色，紅色紫色紫色深綠色，滴加新制

5、深綠色，滴加新制5%碳酸氫碳酸氫鈉液，顯藍(lán)紫色，紅色鈉液，顯藍(lán)紫色，紅色墨綠色，滴加墨綠色，滴加1%氨溶液，顯氨溶液，顯紫紅色紫紅色甲醛硫酸甲醛硫酸紅色紅色淡紅色淡紅色玫瑰紅，橙紅，深棕紅玫瑰紅，橙紅，深棕紅棕色，暗紫色棕色，暗紫色武漢工程大學(xué)武漢工程大學(xué) 制藥工程部制藥工程部鑒別試驗(yàn)鑒別試驗(yàn) (identification)氧化反應(yīng)氧化反應(yīng)（酚羥基，易被碘、過氧化氫、鐵氰化鉀氧化呈現(xiàn)不同顏色）（酚羥基，易被碘、過氧化氫、鐵氰化鉀氧化呈現(xiàn)不同顏色）腎上腺素腎上腺素碘或過氧化氫碘或過氧化氫中性或酸性中性或酸性腎上腺素紅腎上腺素紅放置放置鹽酸異丙腎上腺素鹽酸異丙腎上腺素偏酸性條件偏酸性條件碘碘異丙

6、腎上腺素紅異丙腎上腺素紅硫代硫酸鈉硫代硫酸鈉重酒石酸重酒石酸去甲腎上腺素去甲腎上腺素酒石酸氫鉀飽和液酒石酸氫鉀飽和液碘試液碘試液放置放置5min硫代硫酸鈉硫代硫酸鈉溶液為無色溶液為無色或僅顯或僅顯微紅色或微紅色或淡紫色淡紫色腎上腺素腎上腺素或鹽酸異丙腎上腺素或鹽酸異丙腎上腺素明顯的明顯的紅棕色紅棕色或紫色或紫色武漢工程大學(xué)武漢工程大學(xué) 制藥工程部制藥工程部鑒別試驗(yàn)鑒別試驗(yàn) (identification)雙縮脲反應(yīng)雙縮脲反應(yīng)鹽酸麻黃堿、鹽酸偽麻黃堿，芳環(huán)側(cè)鏈具有鹽酸麻黃堿、鹽酸偽麻黃堿，芳環(huán)側(cè)鏈具有氨基醇結(jié)構(gòu)，可顯雙縮脲特征反應(yīng)。氨基醇結(jié)構(gòu)，可顯雙縮脲特征反應(yīng)。例例：Chp2000，鑒別鹽酸麻

7、黃堿，鑒別鹽酸麻黃堿方法：取本品方法：取本品1%水溶液水溶液1ml，加硫酸銅試液，加硫酸銅試液2滴與滴與20%氫氧化鈉液氫氧化鈉液1ml，即顯藍(lán)紫色，加乙，即顯藍(lán)紫色，加乙醚醚1ml振搖、放置，乙醚層顯紫紅色，水層變振搖、放置，乙醚層顯紫紅色，水層變?yōu)樗{(lán)色。為藍(lán)色。武漢工程大學(xué)武漢工程大學(xué) 制藥工程部制藥工程部鑒別試驗(yàn)鑒別試驗(yàn) (identification)與亞硝基鐵氰化鈉反應(yīng)與亞硝基鐵氰化鈉反應(yīng)(Rimini試驗(yàn)試驗(yàn))HOHCOHHCCH3NH2重酒石酸間羥胺重酒石酸間羥胺水水溶解溶解亞硝基鐵氰化鈉試液亞硝基鐵氰化鈉試液丙酮數(shù)滴，碳酸氫鈉少量丙酮數(shù)滴，碳酸氫鈉少量脂肪伯氨基的專屬反應(yīng)脂肪伯

8、氨基的專屬反應(yīng)丙酮不含有甲醛丙酮不含有甲醛重酒石酸間羥胺的脂肪伯氨基重酒石酸間羥胺的脂肪伯氨基武漢工程大學(xué)武漢工程大學(xué) 制藥工程部制藥工程部鑒別試驗(yàn)鑒別試驗(yàn) (identification)紫外特征吸收紫外特征吸收藥物藥物重酒石酸間羥胺重酒石酸間羥胺鹽酸異丙腎上腺素鹽酸異丙腎上腺素鹽酸多巴胺鹽酸多巴胺鹽酸芬氟拉明鹽酸芬氟拉明鹽酸苯乙雙胍鹽酸苯乙雙胍鹽酸克倫特羅鹽酸克倫特羅硫酸沙丁胺醇硫酸沙丁胺醇鹽酸偽麻黃堿鹽酸偽麻黃堿溶劑溶劑水水水水0.5%硫酸硫酸0.1mol/L鹽酸鹽酸水水0.1mol/L鹽酸鹽酸水水水水濃度濃度(mg/ml)0.100.050.030.250.010.030.080.50

9、nm (nm)272280280263, 270234243, 296274251, 257, 263吸收度吸收度 (A)0.500.60紅外特征吸收：上述藥物還可采用紅外吸收光譜進(jìn)行鑒別。紅外特征吸收：上述藥物還可采用紅外吸收光譜進(jìn)行鑒別。武漢工程大學(xué)武漢工程大學(xué) 制藥工程部制藥工程部特殊雜質(zhì)檢查特殊雜質(zhì)檢查 (Detection of specific impurities)酮體檢查酮體檢查生產(chǎn)工藝：酮體氫化還原制得，若氫化不完全則引入酮體雜質(zhì)。生產(chǎn)工藝：酮體氫化還原制得，若氫化不完全則引入酮體雜質(zhì)。 藥物藥物腎上腺素腎上腺素鹽酸去氧腎上腺素鹽酸去氧腎上腺素重酒石酸去甲腎上腺素重酒石酸去甲

10、腎上腺素鹽酸異丙腎上腺素鹽酸異丙腎上腺素鹽酸甲氧明鹽酸甲氧明 檢查的雜質(zhì)檢查的雜質(zhì) 腎上腺酮腎上腺酮 酮體酮體去甲腎上腺酮去甲腎上腺酮 酮體酮體 酮胺酮胺 溶劑溶劑HCl(92000) 水水 水水 水水 水水樣品濃度樣品濃度(mg/ml) 2.0 2.0 2.0 2.0 1.5測(cè)定波長測(cè)定波長(nm) 310 310 310 310 347 A不得過不得過0.05不得大于不得大于0.20不得大于不得大于0.05不得大于不得大于0.15不得大于不得大于0.06紫外分光光度法檢查酮體的條件及要求紫外分光光度法檢查酮體的條件及要求武漢工程大學(xué)武漢工程大學(xué) 制藥工程部制藥工程部特殊雜質(zhì)檢查特殊雜質(zhì)檢查

11、 (Detection of specific impurities)TLC法檢查有關(guān)物質(zhì)法檢查有關(guān)物質(zhì)例：例：鹽酸去氧腎上腺素鹽酸去氧腎上腺素、硫酸沙丁胺醇、硫酸沙丁胺醇檢查方法：避光操作。取本品，加甲醇制成每檢查方法：避光操作。取本品，加甲醇制成每1ml含含20mg的的溶液，作為供試品溶液；精密量取上述溶液適量，加甲醇稀溶液，作為供試品溶液；精密量取上述溶液適量，加甲醇稀釋成每釋成每1ml中含中含0.10mg的溶液，作為對(duì)照溶液。吸取上述兩的溶液，作為對(duì)照溶液。吸取上述兩種溶液各種溶液各10l，分別點(diǎn)于同一硅膠，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以異丙醇薄層板上，以異丙醇氯仿濃氨溶液氯仿濃氨溶液

12、(80:5:15)為展開劑，展開后，晾干，噴以重為展開劑，展開后，晾干，噴以重氮苯磺酸試液使顯色。供試品溶液如顯雜質(zhì)斑點(diǎn)，與對(duì)照溶氮苯磺酸試液使顯色。供試品溶液如顯雜質(zhì)斑點(diǎn)，與對(duì)照溶液的主斑點(diǎn)比較，不得更深。液的主斑點(diǎn)比較，不得更深。武漢工程大學(xué)武漢工程大學(xué) 制藥工程部制藥工程部特殊雜質(zhì)檢查特殊雜質(zhì)檢查 (Detection of specific impurities)鹽酸苯乙雙胍中有關(guān)雙胍的檢查（鹽酸苯乙雙胍中有關(guān)雙胍的檢查（Chp2000版）版） 取本品取本品1.00g ，置，置10ml量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，照紙色譜法（附錄勻，照紙色譜法

13、（附錄 A）試驗(yàn)，精密吸取上述溶液）試驗(yàn)，精密吸取上述溶液0.2ml ，分別點(diǎn)于，分別點(diǎn)于兩張色譜濾紙條兩張色譜濾紙條(7.5cm 50cm) 上，并以甲醇作空白點(diǎn)于另一色譜濾紙上，并以甲醇作空白點(diǎn)于另一色譜濾紙條，樣點(diǎn)直徑均為條，樣點(diǎn)直徑均為0.5 1cm ；照下行法，將上述色譜濾紙條同置展開室；照下行法，將上述色譜濾紙條同置展開室內(nèi)，以醋酸乙酯乙醇水內(nèi)，以醋酸乙酯乙醇水(6:3:1) 為展開劑，展開至前沿距下端約為展開劑，展開至前沿距下端約7cm 處，取出，晾干，用顯色劑（取處，取出，晾干，用顯色劑（取10鐵氰化鉀溶液鐵氰化鉀溶液1ml ，加，加10 亞硝基亞硝基鐵氰化鈉溶液與鐵氰化鈉溶液

14、與10氫氧化鈉溶液各氫氧化鈉溶液各1ml ，搖勻，放置，搖勻，放置15min，加水，加水10ml與丙酮與丙酮 12ml，混勻）噴其中一張點(diǎn)樣紙條（有關(guān)雙胍顯紅色帶，混勻）噴其中一張點(diǎn)樣紙條（有關(guān)雙胍顯紅色帶，Rf值約為值約為0.1 ），參照此色譜帶，在另一張點(diǎn)樣及空白紙條上，剪取其相應(yīng)），參照此色譜帶，在另一張點(diǎn)樣及空白紙條上，剪取其相應(yīng)部分并向外延伸部分并向外延伸1cm ，并分剪成碎條，精，并分剪成碎條，精 密吸取甲醇各密吸取甲醇各20ml分別進(jìn)行萃分別進(jìn)行萃取后，照分光光度法（附錄取后，照分光光度法（附錄 A），在），在232nm 的波長處測(cè)定吸收度，不的波長處測(cè)定吸收度，不得過得過0.4

15、8。 武漢工程大學(xué)武漢工程大學(xué) 制藥工程部制藥工程部含量測(cè)定含量測(cè)定()原原 料：非水溶液滴定法、溴量法料：非水溶液滴定法、溴量法制制 劑：劑：比色法比色法提取容量法提取容量法紫外分光光度法紫外分光光度法高效液相色譜法高效液相色譜法武漢工程大學(xué)武漢工程大學(xué) 制藥工程部制藥工程部含量測(cè)定含量測(cè)定 ()1、非水溶液滴定法弱堿性、非水溶液滴定法弱堿性冰醋酸為溶劑冰醋酸為溶劑醋酸汞消除氫鹵酸的干擾醋酸汞消除氫鹵酸的干擾結(jié)晶紫為指示劑結(jié)晶紫為指示劑 （鹽酸甲氧明的指示劑為萘酚苯（鹽酸甲氧明的指示劑為萘酚苯甲醇，也可電位法指示終點(diǎn)）甲醇，也可電位法指示終點(diǎn)）若堿性較弱則加醋酐使突躍明顯若堿性較弱則加醋酐使

16、突躍明顯例：例：重酒石酸去甲腎上腺素直接滴定重酒石酸去甲腎上腺素直接滴定 鹽酸克倫特羅加醋酸汞消除氫鹵酸干擾；鹽酸克倫特羅加醋酸汞消除氫鹵酸干擾； 由于堿性較弱，電位法指示終點(diǎn)由于堿性較弱，電位法指示終點(diǎn) 硫酸沙丁胺醇加入醋酐以增大突躍，結(jié)晶紫為指示劑硫酸沙丁胺醇加入醋酐以增大突躍，結(jié)晶紫為指示劑武漢工程大學(xué)武漢工程大學(xué) 制藥工程部制藥工程部四種非水溶劑：四種非水溶劑：1.酸性溶劑：有機(jī)弱堿在酸性溶劑中酸性溶劑：有機(jī)弱堿在酸性溶劑中可顯著增強(qiáng)其相對(duì)堿度，比如冰醋可顯著增強(qiáng)其相對(duì)堿度，比如冰醋酸。酸。2.堿性溶劑：比如堿性溶劑：比如DMF。3.兩性溶劑：比如甲醇。兩性溶劑：比如甲醇。4.惰性溶劑

17、：比如甲苯、三氯甲烷等。惰性溶劑：比如甲苯、三氯甲烷等。武漢工程大學(xué)武漢工程大學(xué) 制藥工程部制藥工程部 1. 1. 酸性溶劑：常用冰酸性溶劑：常用冰HAcHAc除水除水（加入計(jì)算量的醋酐）（加入計(jì)算量的醋酐）基準(zhǔn)物：鄰苯二甲酸氫鉀基準(zhǔn)物：鄰苯二甲酸氫鉀（既可標(biāo)定酸又可標(biāo)定堿既可標(biāo)定酸又可標(biāo)定堿）COOKCOOHCOOHCOOHHClOKClO44+指示劑：結(jié)晶紫指示劑：結(jié)晶紫2. 標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)準(zhǔn)溶液：HClO4的冰HAc溶液武漢工程大學(xué)武漢工程大學(xué) 制藥工程部制藥工程部基本原理基本原理置換反應(yīng)：強(qiáng)酸置換弱酸的過程，故置換反應(yīng)：強(qiáng)酸置換弱酸的過程，故而所用的酸多為高氯酸。而所用的酸多為高氯酸。一般

18、方法一般方法精密稱取供試樣品加冰醋酸溶解，加精密稱取供試樣品加冰醋酸溶解，加各規(guī)定試液，指示液各規(guī)定試液，指示液1-2滴，用高滴，用高氯酸滴定液滴定。氯酸滴定液滴定。終點(diǎn)以電位滴定終點(diǎn)以電位滴定時(shí)的突躍點(diǎn)為準(zhǔn)。時(shí)的突躍點(diǎn)為準(zhǔn)。武漢工程大學(xué)武漢工程大學(xué) 制藥工程部制藥工程部注意事項(xiàng)注意事項(xiàng)1.加入醋酐防止氨基被乙酐化，氨基加入醋酐防止氨基被乙酐化，氨基乙酐化后堿性顯著減弱；乙酐化后堿性顯著減弱；2.低溫可以防止氨基乙酐化；低溫可以防止氨基乙酐化；3.仲氨基的乙?；?，以指示劑法和仲氨基的乙?；?，以指示劑法和電位滴定法都不能被滴定；電位滴定法都不能被滴定；4.伯氨基的乙酰化物以電位滴定法尚伯氨基

19、的乙酰化物以電位滴定法尚可以；可以；武漢工程大學(xué)武漢工程大學(xué) 制藥工程部制藥工程部適用范圍：適用范圍：1.適用于適用于pka8的有機(jī)弱堿性藥物及的有機(jī)弱堿性藥物及其鹽類的含量測(cè)定，但不同的堿性其鹽類的含量測(cè)定，但不同的堿性有不同的溶劑、滴定劑和指示方法；有不同的溶劑、滴定劑和指示方法；2.Pka=8-10,以冰醋酸為溶劑；以冰醋酸為溶劑；10-12，醋酸加醋酐為溶劑；醋酸加醋酐為溶劑；12以醋酐為以醋酐為溶劑；溶劑；此外還可以加入乙酸，以利于堿性藥此外還可以加入乙酸，以利于堿性藥物的堿性增強(qiáng)，使突躍顯著增大。物的堿性增強(qiáng)，使突躍顯著增大。武漢工程大學(xué)武漢工程大學(xué) 制藥工程部制藥工程部各種影響：

20、各種影響：1.醋酸汞可以消除鹽酸對(duì)滴定醋酸汞可以消除鹽酸對(duì)滴定的影響；的影響；2.醋酸具有揮發(fā)，溫度和貯存醋酸具有揮發(fā)，溫度和貯存條件影響滴定劑濃度；條件影響滴定劑濃度；3.以電位滴定法來確定指示劑以電位滴定法來確定指示劑的終點(diǎn)顏色變化；的終點(diǎn)顏色變化；注：加入醋酐注意防止氨基被乙?；?，所以在冰醋酸溶解樣品后應(yīng)放冷后再加醋酐。注：加入醋酐注意防止氨基被乙?；?，所以在冰醋酸溶解樣品后應(yīng)放冷后再加醋酐。武漢工程大學(xué)武漢工程大學(xué) 制藥工程部制藥工程部（3）加入醋酐可過量，但測(cè) 或 時(shí)不能過量。 （4）防凍 16以下 冰+醋酐混合溶劑 或加入丙酸武漢工程大學(xué)武漢工程大學(xué) 制藥工程部制藥工程部3.溫度校

21、正：冰HAC體積膨脹系數(shù)大，溫度，C，不標(biāo)定，測(cè)定時(shí)結(jié)果偏高，可以用公式校正。4.指示劑（或用電位法）：結(jié)晶紫 紫色藍(lán)藍(lán)綠黃應(yīng)用電位法確定時(shí) 空白校正武漢工程大學(xué)武漢工程大學(xué) 制藥工程部制藥工程部（1）市售HClO4含水約為30.0，加入醋酐除去。（2）配制時(shí)（HClO4與醋酐反應(yīng)劇烈 ） 配0.1M HClO4 1000ml，需HClO4 （70%） M=100.5 d=1.75, HClO4多少mL? V=8.2mL 用8.5mL1 . 05 .100%7075. 1VCMLmLn武漢工程大學(xué)武漢工程大學(xué) 制藥工程部制藥工程部3. 應(yīng)用 1）胺類、氨基酸、含氮雜環(huán)）胺類、氨基酸、含氮雜環(huán)

22、2）有機(jī)酸的堿金屬鹽）有機(jī)酸的堿金屬鹽 3）有機(jī)堿的氫鹵酸鹽）有機(jī)堿的氫鹵酸鹽 4）有機(jī)堿的有機(jī)酸鹽）有機(jī)堿的有機(jī)酸鹽武漢工程大學(xué)武漢工程大學(xué) 制藥工程部制藥工程部含量測(cè)定含量測(cè)定 ()2、溴量法、溴量法基本原理：基本原理：HOHCOHCH2NHCH3+3Br2HOHCOHCH2NHCH3BrBrBr+3HBrBr2+2KI2KBr+I2I2+2Na2SO32NaI+Na2S4O6測(cè)定方法：測(cè)定方法：取本品約取本品約0.1g，精密稱定，置碘瓶中，加水，精密稱定，置碘瓶中，加水20ml使溶解，精密加溴使溶解，精密加溴 滴定滴定液液(0.1mol/L)50ml，再加鹽酸，再加鹽酸5ml,立即密塞，

23、放置立即密塞，放置15分鐘并時(shí)時(shí)振搖，注意微開瓶分鐘并時(shí)時(shí)振搖，注意微開瓶 塞，塞，加碘化鉀試液加碘化鉀試液10ml ，立即密塞，振搖后，用硫代硫酸鈉滴定液，立即密塞，振搖后，用硫代硫酸鈉滴定液(0.1mol/L)滴定，至滴定，至 近近終點(diǎn)時(shí)，加淀粉指示液，繼續(xù)滴定至藍(lán)色消失，并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每終點(diǎn)時(shí)，加淀粉指示液，繼續(xù)滴定至藍(lán)色消失，并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每 1ml溴滴定液溴滴定液(0.1mol/L)相當(dāng)于相當(dāng)于3.395mg 的的C9H13NO2HCl。 武漢工程大學(xué)武漢工程大學(xué) 制藥工程部制藥工程部含量測(cè)定含量測(cè)定 ()3、比色法、比色法測(cè)定原理：測(cè)定原理：ClCl

24、N2+Cl-CH(OH)CH2NH(CH3)3+NHCH2CH2NH2ClClNCH(OH)CH2NH(CH3)3NNHCH2CH2NH22HNO2+2H2NSO3NH42N2+(NH4)2SO4+H2SO4+H2O注意：注意：由于偶合劑（由于偶合劑（N-(1-萘基萘基)-乙二胺）與亞硝酸也能顯色干擾測(cè)定，所以乙二胺）與亞硝酸也能顯色干擾測(cè)定，所以在重氮化后，應(yīng)加入氨基磺酸銨分解剩余的亞硝酸。在重氮化后，應(yīng)加入氨基磺酸銨分解剩余的亞硝酸。武漢工程大學(xué)武漢工程大學(xué) 制藥工程部制藥工程部比色法含量測(cè)定比色法含量測(cè)定例：例：鹽酸克倫特羅栓（鹽酸克倫特羅栓（Chp2005）【含量測(cè)定】含量測(cè)定】 對(duì)照

25、品溶液的制備對(duì)照品溶液的制備 精密稱取鹽酸克侖特羅對(duì)照品適量，加鹽酸溶精密稱取鹽酸克侖特羅對(duì)照品適量，加鹽酸溶液液 (9100)制成每制成每1ml 中含中含7.2g的溶液。的溶液。 供試品溶液的制備供試品溶液的制備 取本品取本品20粒，精密稱定，切成小片，精密稱取適量（約相當(dāng)粒，精密稱定，切成小片，精密稱取適量（約相當(dāng)于于 鹽酸克侖特羅鹽酸克侖特羅0.36mg），置分液漏斗中，加溫?zé)岬穆确拢梅忠郝┒分?，加溫?zé)岬穆确?0ml使溶解，用鹽酸使溶解，用鹽酸溶液溶液(9 100)振搖提取振搖提取3 次次(20ml、15ml、10ml) ，分取酸提取液，置，分取酸提取液，置50ml量瓶量瓶中，用鹽酸

26、溶液中，用鹽酸溶液(9 100)稀釋至刻度，搖勻，濾過，收集續(xù)濾液，即得。稀釋至刻度，搖勻，濾過，收集續(xù)濾液，即得。 測(cè)定法測(cè)定法 精密量取對(duì)照品溶液與供試品溶液各精密量取對(duì)照品溶液與供試品溶液各15ml，分置，分置25ml量瓶中，各加鹽酸量瓶中，各加鹽酸溶溶 液液(9100)5ml 與與0.1 亞硝酸鈉溶液亞硝酸鈉溶液1ml ，搖勻，放置，搖勻，放置3 分鐘，各加分鐘，各加0.5 氨氨基磺酸基磺酸 銨溶液銨溶液1ml ，混勻，時(shí)時(shí)振搖，混勻，時(shí)時(shí)振搖10分鐘，再各加分鐘，再各加0.1 鹽酸萘乙二胺溶液鹽酸萘乙二胺溶液1ml,混勻，放置混勻，放置 10分鐘，用鹽酸溶液分鐘，用鹽酸溶液(9100

27、)稀釋至刻度，搖勻，照分光光度法稀釋至刻度，搖勻，照分光光度法（附錄（附錄 B），在），在 500 nm的波長處分別測(cè)定吸收度，計(jì)算，即得。的波長處分別測(cè)定吸收度，計(jì)算，即得。武漢工程大學(xué)武漢工程大學(xué) 制藥工程部制藥工程部含量測(cè)定含量測(cè)定 ()4、提取酸堿滴定法、提取酸堿滴定法原理：原理：溶解性鹽酸鹽或硫酸鹽可溶于水，游離堿不溶于水，溶于有機(jī)溶劑。溶解性鹽酸鹽或硫酸鹽可溶于水，游離堿不溶于水，溶于有機(jī)溶劑。方法：方法：供試品溶于水或礦酸，加入適量堿性試劑使藥物游離，用適當(dāng)?shù)挠袡C(jī)供試品溶于水或礦酸，加入適量堿性試劑使藥物游離，用適當(dāng)?shù)挠袡C(jī)溶劑提取，將提取液蒸干，殘?jiān)屑又行砸掖既芙猓脴?biāo)準(zhǔn)酸滴定

28、液直接滴溶劑提取，將提取液蒸干，殘?jiān)屑又行砸掖既芙猓脴?biāo)準(zhǔn)酸滴定液直接滴定（或在提取液中加定量過量的標(biāo)準(zhǔn)酸滴定液，蒸去有機(jī)溶劑后，再用標(biāo)準(zhǔn)定（或在提取液中加定量過量的標(biāo)準(zhǔn)酸滴定液，蒸去有機(jī)溶劑后，再用標(biāo)準(zhǔn)堿滴定液回滴定）。堿滴定液回滴定）。例：例：硫酸苯丙胺硫酸苯丙胺加水溶解加水溶解加氫氧化鈉試液加氫氧化鈉試液8ml 加氯化鈉使飽和加氯化鈉使飽和乙醚乙醚多次提取多次提取合并乙醚液合并乙醚液精密加硫酸滴定液（精密加硫酸滴定液（0.05mol/L）25ml振搖振搖低溫蒸低溫蒸去乙醚去乙醚放冷至室溫放冷至室溫加甲基紅指示液加甲基紅指示液2滴滴用氫氧化鈉（用氫氧化鈉（0.1mol/L）滴定。）滴定。

29、每每1ml硫酸滴定液（硫酸滴定液（0.05mol/L）相當(dāng)于）相當(dāng)于18.42mg的的C18H26N2H2SO4。武漢工程大學(xué)武漢工程大學(xué) 制藥工程部制藥工程部含量測(cè)定含量測(cè)定 ()5、熒光分光光度法、熒光分光光度法 基本原理：基本原理：腎上腺素含有的鄰苯二酚結(jié)構(gòu)，被弱氧化劑氧化，腎上腺素含有的鄰苯二酚結(jié)構(gòu)，被弱氧化劑氧化，生成腎上腺素紅，發(fā)生轉(zhuǎn)位為生成腎上腺素紅，發(fā)生轉(zhuǎn)位為N-甲基甲基-3,5,6-三羥基吲哚三羥基吲哚（THI）。）。(Tri- Hydroxyl- Indole-)N+O-OOHROH-NHOHOOHR本法還可用于測(cè)定微量兒茶酚胺類藥物。本法還可用于測(cè)定微量兒茶酚胺類藥物。武

30、漢工程大學(xué)武漢工程大學(xué) 制藥工程部制藥工程部含量測(cè)定含量測(cè)定 ()6、高效液相色譜法、高效液相色譜法高效分離，高靈敏度和高選擇性可用于制劑常規(guī)分析，臨床藥物監(jiān)測(cè)和體內(nèi)藥物高效分離，高靈敏度和高選擇性可用于制劑常規(guī)分析，臨床藥物監(jiān)測(cè)和體內(nèi)藥物動(dòng)力學(xué)研究。動(dòng)力學(xué)研究。例例1 1：重酒石酸去甲腎上腺素注射液分析重酒石酸去甲腎上腺素注射液分析色譜條件：色譜條件：色譜柱：色譜柱：ODS流動(dòng)相：流動(dòng)相：0.14%庚烷基磺酸鈉溶液甲醇庚烷基磺酸鈉溶液甲醇(65:35)，用磷酸調(diào)，用磷酸調(diào)pH至至3.00.1，流速：，流速：1.0ml/min檢測(cè)波長：檢測(cè)波長：280nm測(cè)定方法：測(cè)定方法：精密量取本品適量（

31、約相當(dāng)于重酒石酸去甲腎上腺素精密量取本品適量（約相當(dāng)于重酒石酸去甲腎上腺素4mg），置），置25ml量瓶中，量瓶中， 加醋酸溶液（加醋酸溶液（125）稀釋至刻度，搖勻，?。┫♂屩量潭龋瑩u勻，取2l注入液相色譜儀，記錄注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取重酒石色譜圖；另取重酒石 酸去甲腎腺素對(duì)照品適量，精密稱定，加醋酸溶液（酸去甲腎腺素對(duì)照品適量，精密稱定，加醋酸溶液（125）制成每制成每1ml中含中含0.16mg的溶液，的溶液， 同法測(cè)定。按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，即得。同法測(cè)定。按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，即得。 武漢工程大學(xué)武漢工程大學(xué) 制藥工程部制藥工程部含量測(cè)定含量測(cè)定 ()6、高效液相色譜法、高效

32、液相色譜法例例1：HPLC-EChD法測(cè)定血漿中兒茶酚胺類藥物法測(cè)定血漿中兒茶酚胺類藥物色譜條件：色譜柱：色譜條件：色譜柱：ODS型鍵合相型鍵合相 流動(dòng)相：離子對(duì)試劑流動(dòng)相：離子對(duì)試劑 檢測(cè)器：電化學(xué)檢測(cè)器檢測(cè)器：電化學(xué)檢測(cè)器供試品溶液的制備：氧化鋁吸附洗脫供試品溶液的制備：氧化鋁吸附洗脫武漢工程大學(xué)武漢工程大學(xué) 制藥工程部制藥工程部含量測(cè)定含量測(cè)定 ()7、衍生化氣相色譜法、衍生化氣相色譜法例：例：鹽酸芬氟拉明鹽酸芬氟拉明 (fenfluramine hydrochloride)F3CHCOHHCCH3NHC2H5由于結(jié)構(gòu)中的仲胺基極性極強(qiáng)，使得氣相色譜法測(cè)定值波動(dòng)較由于結(jié)構(gòu)中的仲胺基極性極

33、強(qiáng)，使得氣相色譜法測(cè)定值波動(dòng)較大，因此將樣品溶解后經(jīng)堿化乙酸乙酯提取，加入內(nèi)標(biāo)，提取大，因此將樣品溶解后經(jīng)堿化乙酸乙酯提取，加入內(nèi)標(biāo)，提取液用三氟乙酸酐進(jìn)行?；苌瑢⒀苌a(chǎn)物在液用三氟乙酸酐進(jìn)行?；苌?，將衍生化產(chǎn)物在5%SE-30的的色譜柱上分析，用色譜柱上分析，用FID檢測(cè)器檢測(cè)。檢測(cè)器檢測(cè)。武漢工程大學(xué)武漢工程大學(xué) 制藥工程部制藥工程部第三節(jié)第三節(jié) 芳氧丙醇胺類藥物芳氧丙醇胺類藥物典型藥物：典型藥物：氧烯洛爾氧烯洛爾 (Oxprenolol, 別名烯丙氧心胺，心得平，別名烯丙氧心胺，心得平，Tracosal, Trasacor, Trasieor )腎上腺素受體阻滯藥腎上腺素受體

34、阻滯藥 鹽酸卡替洛爾鹽酸卡替洛爾 (Carteolol hydrochloride)受體阻滯藥受體阻滯藥 HNOOHHNCH3H3CCH3O HClONHOHCH3CH3OCH2HNOOHHNCH3H3CCH3O HClONHOHCH3CH3OCH2武漢工程大學(xué)武漢工程大學(xué) 制藥工程部制藥工程部鑒別反應(yīng)鑒別反應(yīng) (identification)化學(xué)鑒別化學(xué)鑒別氧烯洛爾：取本品氧烯洛爾：取本品0.1g，加乙醇，加乙醇2ml溶解后，滴加溶解后，滴加0.1mol/L高錳酸鉀高錳酸鉀溶液溶液1ml，振，振 搖數(shù)分鐘，高錳酸搖數(shù)分鐘，高錳酸鉀顏色消褪，并產(chǎn)生棕色沉淀。鉀顏色消褪，并產(chǎn)生棕色沉淀。 鹽酸卡

35、替洛爾：取本品約鹽酸卡替洛爾：取本品約0.1g，加，加水水5ml使溶解，加硫氰酸鉻銨試使溶解，加硫氰酸鉻銨試液液5滴，即生成淡紅色沉淀。滴，即生成淡紅色沉淀。 紫外吸收峰特征紫外吸收峰特征 氧烯洛爾水溶液氧烯洛爾水溶液 (40g/ml): 在在275nm 的波長處有最大吸的波長處有最大吸收。收。 鹽酸卡替洛爾鹽酸卡替洛爾 (8g/ml): 在在215nm 與與252nm的波長處的波長處有最大吸收。有最大吸收。 武漢工程大學(xué)武漢工程大學(xué) 制藥工程部制藥工程部鹽酸卡替洛爾的有關(guān)物質(zhì)檢查鹽酸卡替洛爾的有關(guān)物質(zhì)檢查TLC法，自身對(duì)照法法，自身對(duì)照法檢查方法：取本品檢查方法：取本品0.20g，加甲醇，加

36、甲醇10ml使溶解，作為供試品使溶解，作為供試品溶液；精密量取溶液；精密量取2ml，置，置100ml量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，精密量取搖勻，精密量取1ml，置，置10ml量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照溶液。照薄層色譜法搖勻，作為對(duì)照溶液。照薄層色譜法 (附錄附錄 B)試驗(yàn)，吸取試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液備上述兩種溶液備10l，分別點(diǎn)于同一硅膠，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上，以薄層板上，以氯仿氯仿-甲醇甲醇-濃氨溶液濃氨溶液 (50:20:1)為展開劑，展開后，晾干，置為展開劑，展開后，晾干，置紫外光燈紫外光燈(254nm)下

37、檢視。供試品溶液如顯雜質(zhì)斑點(diǎn)，與對(duì)下檢視。供試品溶液如顯雜質(zhì)斑點(diǎn)，與對(duì)照溶液的照溶液的 主斑點(diǎn)比較，不得更深。主斑點(diǎn)比較，不得更深。 武漢工程大學(xué)武漢工程大學(xué) 制藥工程部制藥工程部含量測(cè)定含量測(cè)定 鹽酸卡替洛爾原料鹽酸卡替洛爾原料取本品約取本品約0.5g，精密稱定，加冰醋酸，精密稱定，加冰醋酸30ml，在水浴上加熱溶解，放冷，加醋酐在水浴上加熱溶解，放冷，加醋酐70ml，照電位，照電位 滴定法滴定法(附錄附錄 A)，用高氯酸滴定液，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴滴定，并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每定，并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每1ml高高氯酸滴定氯酸滴定 液液(0.1mol/L)相

38、當(dāng)于相當(dāng)于32.88mg的的C16H24N2O3HCl。 武漢工程大學(xué)武漢工程大學(xué) 制藥工程部制藥工程部含量測(cè)定含量測(cè)定鹽酸卡替洛爾滴眼液鹽酸卡替洛爾滴眼液 精密量取本品適量，用水定量稀釋制成每精密量取本品適量，用水定量稀釋制成每1ml中約含鹽酸卡替洛爾中約含鹽酸卡替洛爾16g的溶液，照分光光的溶液，照分光光度法度法(附錄附錄 A)，在，在252nm的波長處測(cè)定吸收的波長處測(cè)定吸收度；另取鹽酸卡替洛爾對(duì)照品適量，精密稱度；另取鹽酸卡替洛爾對(duì)照品適量，精密稱定，加水溶解并定量稀釋制成每定，加水溶解并定量稀釋制成每1ml中約含鹽中約含鹽酸卡替洛爾酸卡替洛爾16g的溶液，同法測(cè)定，計(jì)算，的溶液，同法

39、測(cè)定，計(jì)算，即得。即得。 武漢工程大學(xué)武漢工程大學(xué) 制藥工程部制藥工程部含量測(cè)定含量測(cè)定人血漿中氧烯洛爾及其異構(gòu)體的分析人血漿中氧烯洛爾及其異構(gòu)體的分析色譜條件：色譜條件：預(yù)柱：預(yù)柱：ODS填料，分析柱：手性填料，分析柱：手性O(shè)D-R柱（手性選擇劑為柱（手性選擇劑為3,5-二甲苯氨基甲酸酯二甲苯氨基甲酸酯纖維素）纖維素）流動(dòng)相：流動(dòng)相：NaClO4(0.45mol/L)-乙腈乙腈(70:30)的磷的磷酸鹽緩沖溶液酸鹽緩沖溶液(pH6.0)檢測(cè)波長：檢測(cè)波長：273nm血漿處理方法：血漿處理方法：醋酸纖維膜透析醋酸纖維膜透析用預(yù)柱純化、用預(yù)柱純化、富集富集手性柱分離分析。手性柱分離分析。武漢工程大學(xué)武漢工程大學(xué) 制藥工程部制藥工程部