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1、專題二 克隆技術(shù) 1．(2009·全國(guó)卷Ⅰ，4)下列關(guān)于植物體細(xì)胞雜交或植物細(xì)胞質(zhì)遺傳的敘述，錯(cuò)誤的是(　　) A．利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)可克服生殖隔離的限制，培育遠(yuǎn)源雜種 B．不同種植物原生質(zhì)體融合的過程屬于植物體細(xì)胞雜交過程 C．兩個(gè)不同品種的紫茉莉雜交，正交、反交所得F1的表現(xiàn)型一致 D．兩個(gè)不同品種的紫茉莉雜交，F(xiàn)1的遺傳物質(zhì)來自母本的多于來自父本的 解析：植物有性雜交過程中，細(xì)胞核遺傳遵循孟德爾遺傳規(guī)律，一般正交和反交所得F1的性狀相同，而細(xì)胞質(zhì)遺傳所得F1的性狀一般總是與母本性狀相同。 答案：C 2．要想通過體細(xì)胞雜交技術(shù)獲得雜種植物，下列各套步驟中正確的是

2、(　　) A. 分離原生質(zhì)體→誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合→再生細(xì)胞壁→組織培養(yǎng)→雜種植株 B. 分離原生質(zhì)體→原生質(zhì)體自然融合→再生細(xì)胞壁→組織培養(yǎng)→雜種植株 C. 病毒誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合→組織培養(yǎng)→雜種植株 D. 分離原生質(zhì)體→脫分化→再分化→雜種植株 解析：體細(xì)胞雜交技術(shù)首先要獲得不同生物的體細(xì)胞，用纖維素酶、果膠酶除去細(xì)胞壁得到原生質(zhì)體，再通過物理或化學(xué)方法誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合，再生細(xì)胞壁成為雜種細(xì)胞，再經(jīng)組織培養(yǎng)形成雜種植株。 答案：A 3．(2010·威海模擬)對(duì)細(xì)胞全能性的表達(dá)正確的是(　　) A．離體的植物細(xì)胞均能夠表現(xiàn)出全能性 B．動(dòng)物細(xì)胞融合標(biāo)志著動(dòng)物細(xì)胞全能性的實(shí)現(xiàn)

3、 C．花粉可培育成單倍體植株是細(xì)胞全能性的表現(xiàn) D．單克隆抗體的制備依據(jù)的原理是細(xì)胞的全能性 解析：離體的植物細(xì)胞要表現(xiàn)出全能性，需要提供合適的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)；動(dòng)物細(xì)胞融合的結(jié)果是形成一個(gè)雜種細(xì)胞，并未形成一新個(gè)體；單克隆抗體的制備利用的是細(xì)胞融合的原理。 答案：C 4．動(dòng)物細(xì)胞融合和植物原生質(zhì)體融合比較，特殊性表現(xiàn)在(　　) A．融合的原因 B．融合的優(yōu)點(diǎn) C．融合的誘導(dǎo)手段 D．融合的過程 解析：動(dòng)物細(xì)胞融合和植物原生質(zhì)體融合都是為了將兩者的優(yōu)良性狀集于一體，過程都是先膜融合再質(zhì)融合，最后核融合，即融合的過程相同；動(dòng)物細(xì)胞融合可以用滅活的病毒誘導(dǎo)，而植物原生質(zhì)

4、體融合不能用病毒誘導(dǎo)。 答案：C 5．(2010·濰坊模擬)下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述，正確的是(　　) A．培養(yǎng)中的人效應(yīng)T細(xì)胞能產(chǎn)生單克隆抗體 B．培養(yǎng)中的人B細(xì)胞能夠無限地增殖 C．人的成熟紅細(xì)胞經(jīng)過培養(yǎng)能形成細(xì)胞株 D．用胰蛋白酶處理肝組織可獲得單個(gè)肝細(xì)胞 解析：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)目前主要的應(yīng)用是制備單克隆抗體，抗體是由雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生，T細(xì)胞不產(chǎn)生；人的B細(xì)胞不能無限增殖；人的成熟的紅細(xì)胞無細(xì)胞核，失去了細(xì)胞的完整性，不能進(jìn)行細(xì)胞分裂；將所選用的動(dòng)物組織取出后，首先用胰蛋白酶等處理，使組織分散成單個(gè)細(xì)胞，然后配制成一定濃度的細(xì)胞懸浮液，再將該懸浮液放入培養(yǎng)瓶中，在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

5、細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中貼壁生長(zhǎng)，隨著細(xì)胞越來越多，當(dāng)貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到表面相互接觸時(shí)就停止分裂增殖，這種現(xiàn)象叫做接觸抑制。所以，需要定期用胰蛋白酶使細(xì)胞從瓶壁上脫離下來，進(jìn)行傳代培養(yǎng)。 答案：D 6．利用細(xì)胞工程方法，以SARS病毒核衣殼蛋白為抗原制備出單克隆抗體。下列相關(guān)敘述正確的是(　　) A．用純化的核衣殼蛋白反復(fù)注射到小鼠體內(nèi)，產(chǎn)生的血清抗體為單克隆抗體 B．體外培養(yǎng)單個(gè)漿細(xì)胞可以獲得大量針對(duì)SARS病毒的單克隆抗體 C．將等量漿細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞混合，經(jīng)PEG誘導(dǎo)融合后的細(xì)胞不一定為雜交瘤細(xì)胞 D．利用該單克隆抗體與SARS病毒核衣殼蛋白特異性結(jié)合的方法不一定能診斷出SA病毒

6、感染者 解析：?jiǎn)慰寺】贵w是由免疫的B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合后的雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的，其制備過程是先用SARS病毒核衣殼蛋白刺激機(jī)體產(chǎn)生相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞，將B淋巴細(xì)胞(不能無限增殖但能產(chǎn)生專一性的抗體)與骨髓瘤細(xì)胞(能無限增殖但不能產(chǎn)生專一性的抗體)相融合，經(jīng)過篩選，去掉相同細(xì)胞的融合體，再經(jīng)抗原—抗體檢測(cè)，得到既能無限增殖又能產(chǎn)生專一抗體的雜交瘤細(xì)胞，經(jīng)體內(nèi)培養(yǎng)或體外培養(yǎng)就可獲得相應(yīng)的單克隆抗體。通過單克隆抗體與病毒特異性結(jié)合可診斷是否被病毒感染。 答案：C 7．(2009·山東卷，34)人參是一種名貴中藥材，其有效成分主要是人參皂苷。利用細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)人參皂苷的大致流程如下： 請(qǐng)

7、回答： (1)配制誘導(dǎo)愈傷組織的固體培養(yǎng)基，分裝后要進(jìn)行________。接種前，要對(duì)人參根進(jìn)行________。 (2)用于離體培養(yǎng)的根切塊，叫做________。培養(yǎng)幾天后發(fā)現(xiàn)少數(shù)培養(yǎng)基被污染，若是有顏色的絨毛狀菌落，屬于________污染；若是有光澤的黏液狀菌落，屬于________污染。 (3)用少量________酶處理愈傷組織，獲取單細(xì)胞或小細(xì)胞團(tuán)，在液體培養(yǎng)基中進(jìn)行懸浮培養(yǎng)，可有效提高人參皂苷合成量。 (4)人參皂苷易溶于水溶性(親水性)有機(jī)溶劑，從培養(yǎng)物干粉中提取人參皂苷宜選用________方法，操作時(shí)應(yīng)采用________加熱。 解析：本題考查植物組織培養(yǎng)技術(shù)的

8、應(yīng)用。為防止雜菌污染，實(shí)驗(yàn)中必須對(duì)植物細(xì)胞培養(yǎng)基、生物材料進(jìn)行滅菌或消毒。植物組織培養(yǎng)中離體的植物組織塊稱為外植體。固體培養(yǎng)基上有顏色的絨毛狀菌落多為真菌(霉菌)菌落。實(shí)驗(yàn)室可以利用果膠酶專一地催化植物細(xì)胞壁的水解，獲取單個(gè)植物細(xì)胞或小細(xì)胞團(tuán)。由于人參皂苷能溶于水溶性有機(jī)溶劑(如乙醇、丙酮等)，因此可以利用萃取法提取人參皂苷。 答案：(1)滅菌　消毒　(2)外植體　真菌(霉菌)　細(xì)菌　(3)果膠　(4)萃取(浸取)　水浴 8．科學(xué)家從某些能無限增殖的細(xì)胞質(zhì)中分離出無限增殖的調(diào)控基因(prC)，該基因能激發(fā)許多動(dòng)物細(xì)胞分裂，這為單克隆抗體的制備提供了更為廣闊的前景。請(qǐng)回答以下問題。 (1)

9、利用細(xì)胞融合技術(shù)制備單克隆抗體，促進(jìn)動(dòng)物細(xì)胞融合常用的誘導(dǎo)因素是______________。 (2)利用細(xì)胞融合技術(shù)制備單克隆抗體時(shí)有兩次篩選，第1次篩選的目的是________，第2次篩選的目的是_________________________________________________________。 (3)有人提出，可以直接通過基因工程導(dǎo)入該調(diào)控基因來制備單克隆抗體，其思路如圖所示。請(qǐng)回答： ①酶A是指________，酶B是指________。 ②對(duì)已導(dǎo)入重組質(zhì)粒的Ⅱ進(jìn)行“檢測(cè)”的目的是______________________；題目中Ⅱ所指的細(xì)胞是______

10、__，Ⅲ所指的細(xì)胞具有的特點(diǎn)是____________________。 (4)也有人提出用細(xì)胞核移植技術(shù)構(gòu)建重組細(xì)胞來生產(chǎn)單克隆抗體，試用相關(guān)的圖示及文字表示該過程： 解析：(1)誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法有三種，其中用滅活的病毒是常用方法。(2)在單克隆抗體制備過程中，融合的細(xì)胞共有3種類型，第1次篩選的目的是選出雜交瘤細(xì)胞，但是雜交瘤細(xì)胞不一定產(chǎn)生所需抗體，所以還必須進(jìn)行第2次篩選。(3)基因工程中用到的酶是限制性(核酸)內(nèi)切酶和DNA連接酶，將重組質(zhì)粒成功導(dǎo)入后，進(jìn)行檢測(cè)的目的是看目的基因是否表達(dá)。題目Ⅱ所指的細(xì)胞是漿細(xì)胞，因?yàn)橹挥袧{細(xì)胞才會(huì)產(chǎn)生抗體，Ⅲ所指的細(xì)胞是導(dǎo)入目的基因的漿細(xì)胞，由于目的基因控制細(xì)胞無限增殖，所以可用轉(zhuǎn)基因技術(shù)來生產(chǎn)單克隆抗體。(4)由題干可知，從無限增殖細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中分離出無限增殖調(diào)控基因(prG)，所以采用核移植技術(shù)，應(yīng)將無限增殖細(xì)胞的核除去，留下細(xì)胞質(zhì)，讓其與漿細(xì)胞核融合，則可產(chǎn)生單克隆抗體。 答案：(1)滅活的病毒 (2)篩選出雜交瘤細(xì)胞 篩選出能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞 (3)①限制性(核酸)內(nèi)切酶　DNA連接酶 ②檢測(cè)目的基因在受體細(xì)胞中是否進(jìn)行了表達(dá)(或檢測(cè)受體細(xì)胞是否顯示出目的基因控制的性狀)　漿細(xì)胞　既能無限增殖又能產(chǎn)生特定抗體 (4)如圖