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湖南省高考生物復習 生物技術實踐 第3講 植物的組織培養(yǎng)技術課件 新人教版選修1

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1、 一、菊花的組織培養(yǎng) 【答案】全能性脫分化再分化種類年齡微量元素維生素甘氨酸煙酸生長素細胞分裂素5.8接種移栽 【答案】全能性四分體時期單核期雙核期 脫分化胚狀體21.愈傷組織 二、月季的花藥培養(yǎng) 【答案】22.初花期23.完全未開放24.單核期細胞核由中央移向細胞一側的時期25.醋酸洋紅法26.焙花青鉻礬法27.紅28.藍黑29.從受傷部位產(chǎn)生愈傷組織30.徹底去除花絲31.愈傷組織32.胚狀體33.長出愈傷組織34.分化培養(yǎng)基上35.幼小植株分開 一、植物組織培養(yǎng)的過程 1.菊花的組織培養(yǎng)過程 二、影響植物組織培養(yǎng)的因素及成功的關鍵 1影響因素 (1)內(nèi)部因素:材料的選取。 (2)外部因素

2、:營養(yǎng)成分的種類及配比;植物激素的用量及使用順序;pH、溫度、光照等。 2獲得成功的關鍵 (1)植物組織培養(yǎng)所利用的植物材料體積小、抗逆性差,對培養(yǎng)條件要求較高。 (2)培養(yǎng)材料一旦被微生物污染,就會導致實驗失敗。原因是微生物增殖快,生長迅速,消耗養(yǎng)分多,并產(chǎn)生代謝廢物毒害培養(yǎng)材料。 (3)無菌技術主要包括對操作空間、實驗用具、實驗材料以及操作者的消毒滅菌。 【友情提醒】一旦發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)物被污染,特別是真菌性污染,一定不要打開培養(yǎng)瓶。應先將被污染的培養(yǎng)瓶統(tǒng)一放在高壓蒸汽鍋內(nèi)進行高壓蒸汽滅菌,然后再打開培養(yǎng)瓶進行清理。 三、植物激素在組織培養(yǎng)過程中的重要作用使用順序?qū)嶒灲Y果先使用生長素,后使用細胞分

3、裂素有利于細胞分裂,但細胞不分化先使用細胞分裂素,后使用生長素細胞既分裂又分化同時使用分化頻率提高 生長素和細胞分裂素是啟動細胞分裂、脫分化和再分化的關鍵性激素,其作用及特點為: 1在生長素存在的情況下,細胞分裂素的作用呈現(xiàn)加強的趨勢。 2使用順序不同,結果不同,具體如下: 3.用量比例不同,結果也不同:生長素/細胞分裂素比值與結果比值高時促進根分化,抑芽形成比值低時促進芽分化,抑根形成比值適中促進愈傷組織的形成 四、實驗操作中應注意的幾個問題 1材料的選?。壕栈ǖ慕M織培養(yǎng)實驗中,應選擇未開花植株的莖上部新萌生的側枝;月季花藥的培養(yǎng)實驗中,應選擇花粉發(fā)育過程中的單核靠邊期的花粉進行培養(yǎng)。 2外

4、植體消毒:所用消毒劑為體積分數(shù)為70%的酒精和質(zhì)量分數(shù)為0.1%的氯化汞溶液,所使用的清洗液是無菌水。 3培養(yǎng)過程:在初期,菊花的組織培養(yǎng)需光照,月季花藥的培養(yǎng)不需光照,而在后期均需光照。 【例1】利用植物組織培養(yǎng)的方法可快速、大量繁殖植物,在培養(yǎng)過程中,取該植物的花芽并將其分別培養(yǎng)在含有不同比例的生長素和細胞分裂素的培養(yǎng)基中,花芽的生長狀況如下表所示:生長素細胞分裂素花芽生長狀況A組花芽00組織切塊B組花芽3 ppm0.2 ppm形成愈傷組織C組花芽3 ppm0.002 ppm愈傷組織分化出根D組花芽0.03 ppm1.0 ppm愈傷組織分化出嫩枝E組花芽00.2 ppm稍生長 (1)在此過

5、程中能實現(xiàn)脫分化的花芽是_組。從實驗結果可以看出,能誘導新的花芽形成的條件是_。 (2)上述實驗結果說明,在植物組織培養(yǎng)過程中,誘導芽和根形成的關鍵是培養(yǎng)基中_。 在生產(chǎn)實踐中,欲快速、大量獲得此植物的花芽,可選用_組的培養(yǎng)基進行擴大生產(chǎn)。 【解析】脫分化、再分化過程與植物激素生長素和細胞分裂素有關,且生長素用量與細胞分裂素用量直接影響培養(yǎng)過程。當生長素/細胞分裂素比值高時,有利于根的分化,抑制芽的分化,即表中的C組;當生長素/細胞分裂素比值低時,有利于芽的分化,抑制根的分化,即表中的D組;當比值適中時,有利于促進愈傷組織的生長,即表中的B組。欲快速、大量獲得此植物的花芽,必須首先獲得大量的嫩

6、枝。 【答案】 (1)B、C、D細胞分裂素濃度大于生長素濃度 (2)細胞分裂素含量與生長素含量之間的比例(或培養(yǎng)基中細胞分裂素與生長素的濃度比)D 1.(2008江蘇)下列關于植物組織培養(yǎng)的敘述中,錯誤的是( ) A培養(yǎng)基中添加蔗糖的目的是提供營養(yǎng)和調(diào)節(jié)滲透壓 B培養(yǎng)基中的生長素和細胞分裂素影響愈傷組織的生長和分化 C離體器官或組織的細胞都必須通過脫分化才能形成愈傷組織 D同一株綠色開花植物不同部位的細胞經(jīng)培養(yǎng)獲得的愈傷組織基因相同D 【解析】此題考查學生對植物組織培養(yǎng)技術的掌握。培養(yǎng)基中加入蔗糖的目的:一方面可以提供營養(yǎng),另一方面可以調(diào)節(jié)滲透壓;在整個組織培養(yǎng)過程中影響再分化的關鍵是生長素和

7、細胞分裂素的使用比例和使用順序;組織培養(yǎng)過程中的第一個關鍵環(huán)節(jié)是脫分化,從而形成愈傷組織;組織培養(yǎng)的對象既可以是體細胞也可以是生殖細胞,因此獲得的愈傷組織的基因組成不一定相同,采用綠色開花植物的生殖器官部位如花藥進行培養(yǎng)獲得的愈傷組織的基因只有體細胞的一半。 2.(2009山東)人參是一種名貴中藥材,其有效成分主要是人參皂苷。利用細胞培養(yǎng)技術生產(chǎn)人參皂苷的大致流程如下: 請回答: (1)配制誘導愈傷組織的固體培養(yǎng)基,分裝后要進行_。接種前,要對人參根進行_。 (2)用于離體培養(yǎng)的根切塊,叫做_。培養(yǎng)幾天后發(fā)現(xiàn)少數(shù)培養(yǎng)基被污染,若是有顏色的絨毛狀菌落,屬于_污染;若是有光澤的黏液狀菌落,屬于_污

8、染。滅菌消毒外植體真菌(霉菌)細菌 (3)用少量_酶處理愈傷組織,獲取單細胞或小細胞團,在液體培養(yǎng)基中進行懸浮培養(yǎng),可有效提高人參皂苷合成量。 (4)人參皂苷易溶于水溶性(親水性)有機溶劑,從培養(yǎng)物干粉中提取人參皂苷宜選用_方法,操作時應采用_加熱。果膠萃取(浸取)水浴 【解析】山東理綜生物試題的選修1試題,歷年來,都是立足課本,主要考查課本的基礎知識,題目較簡單。以植物組織培養(yǎng)為材料背景考查了植物組織培養(yǎng)過程中涉及的培養(yǎng)基及消毒滅菌的相關知識及污染后的菌落特征的比較。同時考查了選修1中關于物質(zhì)的提取和鑒定的專題,跨度較大,考查的知識面較廣。 (1)接種前,要對材料進行消毒(不能填滅菌,滅菌時是采用強烈的因素殺菌),配制培養(yǎng)基并分裝后要用滅菌鍋滅菌。 (2)比較菌落特征: 真菌污染:有顏色的絨毛狀菌落;細菌污染:有光澤的黏液狀菌落。 (3)利用果膠酶處理愈傷組織可以獲得單個的細胞。 (4)由題干知,人參皂苷易溶于親水性有機溶液,故而采用萃取的方法可以從培養(yǎng)物干粉中提取人參皂苷。

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