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浙江省高考生物 第10單元 現(xiàn)代生物科技專題 第37講 克隆技術課件

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1、第37講克隆技術第十單元現(xiàn)代生物科技專題1.植物的克隆加試(b)。2.動物的克隆加試(a)。考綱要求內容索引內容索引考點一植物的克隆考點二動物的克隆做模擬練預測課時訓練考點一植物的克隆知識梳理答案1.植物細胞全能性和組織培養(yǎng)方法植物細胞全能性和組織培養(yǎng)方法(1)全能性:植物體的每個生活細胞都具有 上的全能性,因而都具有發(fā)育成 的潛能。(2)全能性表達的條件離體、 。一定的營養(yǎng)物質,如水、無機鹽、蔗糖、維生素等。 。遺傳完整植株無菌植物生長調節(jié)劑(3)植物組織培養(yǎng)程序配制培養(yǎng)基:配制含有適當 和 的半固體培養(yǎng)基切取 的組織塊獲得愈傷組織:由相對沒有分化的活的薄壁細胞團組成的新生組織答案誘導新植株

2、營養(yǎng)物質植物生長調節(jié)劑消毒以適當配比的營養(yǎng)物質和生長調節(jié)劑誘導愈傷組織再生新植株, 通過液體懸浮培養(yǎng)分散成單細胞胚狀體植株用纖維素酶和果膠酶制備原生質體原生質體培養(yǎng)新植株2.植物細胞培養(yǎng)和器官培養(yǎng)的措施植物細胞培養(yǎng)和器官培養(yǎng)的措施通過平衡的 進行調控。(1)適量的 和 配比,可誘導芽的分化。(2)適量的 及適當減除其他某些激素,可誘導生根。答案3.原生質體培養(yǎng)與植物細胞工程原生質體培養(yǎng)與植物細胞工程(1)原生質體培養(yǎng)植物激素配比激動素細胞分裂素吲哚乙酸植物細胞 新植株。原生質體(2)植物細胞工程的操作過程4.植物克隆技術的應用植物克隆技術的應用(1) 培育。(2)細胞 的生產(chǎn)。(3) 育種。(

3、4)誘發(fā)、篩選突變體。答案轉基因植株次生代謝產(chǎn)物單倍體思考診斷答案1.進行植物組織培養(yǎng)時,既用到消毒技術,也用到滅菌技術,它們分別針對哪些對象?為何需進行“無菌操作”。提示提示對培養(yǎng)材料及操作者衣著、手臂應進行消毒,對培養(yǎng)基應進行滅菌。由于雜菌不僅爭奪營養(yǎng),還會產(chǎn)生毒素,故應進行無菌操作。2.若培養(yǎng)物取自植物的幼莖、葉片等含有葉綠體的部位,愈傷組織中是否會含有葉綠體?提示提示培養(yǎng)物經(jīng)過誘導后,失去其特有的結構和功能而轉變成相對沒有分化的細胞,愈傷組織中不含葉綠體。 3.將無根的非洲菊幼苗轉入無植物激素的培養(yǎng)基中,在適宜的溫度和光照等條件下培養(yǎng)一段時間后,應出現(xiàn)的現(xiàn)象是下列中的哪一種?答案提示提

4、示細胞分裂素促進細胞分裂,誘導芽的分化;生長素可以促進不定根、側根的形成;此題中雖然培養(yǎng)基中沒有植物激素,但由于外植體為“菊幼苗”而非離體的組織或細胞,故仍可自行產(chǎn)生激素,從而產(chǎn)生如圖所示的生長現(xiàn)象。4.生長素和細胞分裂素在植物組織培養(yǎng)中的相互作用及其應用(1)細胞分裂素與生長素比例合適愈傷組織會分化出 。(2)細胞分裂素多,生長素少 。(3)生長素太多,細胞分裂素少 。(4)生長素少,細胞分裂素也不多 。答案根和芽只長莖葉不長根只長根,不長莖葉愈傷組織繼續(xù)生長,不發(fā)生分化題型一植物細胞的全能性和組織培養(yǎng)方法題型一植物細胞的全能性和組織培養(yǎng)方法1.下列關于植物克隆的敘述,錯誤的是()A.通過花

5、藥離體培養(yǎng)可獲得單倍體B.通過平衡植物激素種類可實現(xiàn)器官發(fā)生C.可利用細胞培養(yǎng)生產(chǎn)人參皂甙等中藥成分D.對植物愈傷組織進行誘變、培育和篩選可獲得新品種解析解析通過平衡植物激素配比可調控器官發(fā)生和形態(tài)建成。解題探究解析A.的培養(yǎng)基中需要加入一定配比的生長素和細胞分裂素,還要加入瓊脂 和蔗糖等B.的分化程度比低,全能性比高C.若是花藥,則是單倍體植株,將的種子用一定濃度的秋水仙素處理可 獲得純合子D.若將在搖床上進行液體懸浮培養(yǎng)可以獲得細胞質豐富、液泡小而細胞核大 的胚性細胞2.下圖為玉米植物(2n20)組織培養(yǎng)的簡略表示,下列有關說法不正確的是()解析解析解析玉米為二倍體,其單倍體植株高度不育,

6、并不產(chǎn)生“種子”。題型二影響植物組織培養(yǎng)的因素題型二影響植物組織培養(yǎng)的因素3.植物激素中生長素和細胞分裂素是啟動細胞分裂、脫分化和再分化的關鍵性因素。按照不同順序使用這兩類激素,會得到不同的實驗結果。若先使用生長素,后使用細胞分裂素,實驗結果是()A.有利于細胞分裂,但細胞不分化B.細胞既分裂也分化C.細胞分化頻率提高D.有利于細胞分化,但細胞不分裂解析解析解析植物組織培養(yǎng)過程中,細胞分裂素和生長素的使用順序不同,培養(yǎng)的結果不同。先使用生長素,后使用細胞分裂素,有利于細胞分裂,但細胞不分化;先使用細胞分裂素,后使用生長素,細胞既分裂也分化;兩者同時使用,細胞分化頻率提高。4.如圖表示植物組織培

7、養(yǎng)過程。據(jù)圖分析下列敘述正確的是()解析A.植株根尖細胞的全能性比植株根尖細胞的強B.試管的培養(yǎng)基中含有植物生長調節(jié)劑,不含有機物C.試管中的細胞具有細胞質豐富、細胞核和液泡都大的特性D.調節(jié)培養(yǎng)基中植物生長調節(jié)劑的比例可誘導產(chǎn)生不同的植物器官解析解析由于是由上的組織經(jīng)培養(yǎng)形成的個體,故二者的全能性應該相同,A錯誤;由到的過程中植物細胞不能進行光合作用,因而試管中含有有機物如蔗糖等,故B錯誤;試管中細胞為愈傷組織細胞,液泡小,故C錯誤。題型三植物細胞工程流程題型三植物細胞工程流程5.植物組織培養(yǎng)是克隆植物的一種方法,過程如下圖所示,回答相應的問題:(1)為了獲得脫毒植株,外植體往往取自植物的花

8、芽、葉芽等處的分生組織,其原因是_。這些部位不含或極少含病毒解析解析作物脫毒是利用莖尖等組織細胞不含或極少含病毒的原理。解析答案(2)培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基除添加營養(yǎng)物質外,還需要添加植物激素,其目的是誘導外植體_。(3)在生產(chǎn)實踐中為獲得大量的細胞產(chǎn)物,如紫杉醇,可將_放入液體培養(yǎng)基中,經(jīng)機械作用分散成單個細胞,制備成細胞懸浮液,再經(jīng)過_即可獲得大量細胞。脫分化和再分化愈傷組織細胞分裂解析解析植物激素在植物組織培養(yǎng)中的作用是啟動細胞分裂,在脫分化和再分化過程中起關鍵作用。解析解析細胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)并沒有利用細胞的全能性原理將離體細胞培養(yǎng)成完整植株,而是對愈傷組織進行培養(yǎng)產(chǎn)生大量的細胞產(chǎn)物。解析答

9、案(4)組織培養(yǎng)過程需要提供植物生長和繁殖的最適條件,否則在光學顯微鏡下可能觀察到發(fā)生_異常,進而使植物出現(xiàn)遺傳不穩(wěn)定甚至不育。染色體結構與數(shù)目解析解析題中提示顯微鏡觀察發(fā)現(xiàn)的異常為染色體畸變,包括數(shù)目和結構的變異。解析答案6.下圖是煙草葉片原生質體分離和培養(yǎng)的流程圖。請回答:(1)酶解時,在纖維素酶和果膠酶的混合液中,還需添加_來提高混合液的滲透壓,以便獲得完整的原生質體。甘露醇解析解析為防止原生質體吸水脹破,可加入適宜濃度的甘露醇溶液來提高混合液的滲透壓。解析答案(2)獲得原生質體后,可用_法檢測原生質體是否存活。然后將原生質體制成懸浮液,滴加在_上,用顯微鏡觀察并計數(shù)。要判定原生質體是否

10、已形成細胞壁,可用_法鑒別。紅墨水染色血細胞計數(shù)板質壁分離解析解析活細胞的質膜具有選擇透性,紅墨水非細胞生長所需物質,不會被吸收,而死細胞的質膜變?yōu)槿感?,紅墨水可進入使細胞染色;細胞顯微計數(shù)的常用裝置為血細胞計數(shù)板,形成細胞壁的細胞置于較高濃度的溶液中會發(fā)生質壁分離現(xiàn)象。解析答案(3)欲通過原生質體培養(yǎng)得到愈傷組織,從培養(yǎng)基的成分(除瓊脂外)考慮,配制培養(yǎng)基時需要注意的主要方面是_。營養(yǎng)物質和植物生長調節(jié)劑的適當配比解析解析植物組織培養(yǎng)過程中需要適當配比的營養(yǎng)物質和植物生長調節(jié)劑誘導,才能順利發(fā)生脫分化,形成愈傷組織。解析答案返回考點二動物的克隆知識梳理答案1.動物細胞、組織培養(yǎng)動物細胞、組

11、織培養(yǎng)(1)動物克隆的技術基礎是 。(2)動物細胞培養(yǎng)的過程:動物細胞培養(yǎng)包括 、 及 三個階段。分散組織細胞常用的方法有 和 。(3)原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)的含義原代培養(yǎng):從 取出后立即進行的細胞、組織培養(yǎng)的過程。傳代培養(yǎng):將 分成若干份,接種到若干份培養(yǎng)基中,使其繼續(xù)生長、增殖。(4)動物成纖維細胞的培養(yǎng)過程:切取組織小片 培養(yǎng) 培養(yǎng)。動物的細胞和組織培養(yǎng)組織塊的切取組織細胞的分散機械消化法胰酶消化法細胞培養(yǎng)機體原代培養(yǎng)細胞胰蛋白酶酶解原代傳代2.細胞系和細胞株細胞系和細胞株(1)細胞系的類型: 細胞系(惡性細胞系:具有異體致瘤性;不死性細胞系:保留接觸抑制現(xiàn)象,不致癌)和 細胞系。( 2 )

12、 細 胞 株 : 通 過 一 定 的 選 擇 或 純 化 方 法 , 從 中獲得的具有 的細胞??煞譃?細胞株和 細胞株。答案連續(xù)有限原代培養(yǎng)物或細胞系特殊性質連續(xù)有限答案3.克隆培養(yǎng)法克隆培養(yǎng)法(1)概念:把一個單細胞從群體中分離出來單獨培養(yǎng),使之繁衍成一個 的技術。(2)基本要求:必須肯定所建成的克隆來源于 。(3)提高細胞克隆形成率的措施有:選擇適宜的培養(yǎng)基;添加 ;以 支持生長; 刺激;使用 培養(yǎng)箱;調節(jié) 。新的細胞群體單個細胞血清滋養(yǎng)細胞激素CO2pH答案4.動物的細胞融合技術及其應用動物的細胞融合技術及其應用(1)細胞融合概念:是指在一定的條件下將兩個或多個動物細胞融合成一個細胞的

13、現(xiàn)象。原理: 。誘導融合的方法a.物理方法和化學方法:電激法、 等。b.生物方法: (如仙臺病毒)。細胞膜的流動性聚乙二醇滅活的病毒答案(2)細胞雜交概念: 就是細胞雜交。過程應用:由于細胞雜交中染色體容易丟失,利用雜交細胞檢測特定染色體丟失與特定基因產(chǎn)物(蛋白質)減少的對應關系可以進行 ?;蛐筒煌募毎g的融合基因定位(3)雜交瘤技術和單克隆抗體的制備過程答案根據(jù)上圖完善下面的過程B淋巴細胞產(chǎn)生特定抗體的雜交細胞提取抗體 骨髓瘤細胞答案為什么選擇B淋巴細胞與骨髓瘤細胞進行融合?答案答案a.選擇B淋巴細胞:若采取單個的B淋巴細胞進行無性繁殖,形成細胞群,這樣的細胞群就能產(chǎn)生化學性質單一、特異

14、性強的抗體。b.選擇骨髓瘤細胞:在體外培養(yǎng)的條件下,腫瘤細胞(如骨髓瘤細胞)具有無限增殖的特性。答案5.動物的克隆繁殖動物的克隆繁殖(1)動物細胞全能性的表現(xiàn)程度 具有全能性。 細胞只具有分化出多種組織細胞的潛能。單能細胞只能分化為一種細胞。高度分化的細胞不再分化為其他細胞。(2)動物難以克隆的根本原因在動物的個體發(fā)育過程中,細胞分化使得細胞發(fā)生了 ,細胞基因組中基因的活動很不完全。受精卵多能基因的差異表達答案(3)細胞核移植實驗和動物的克隆繁殖核移植:利用一個細胞的 來取代另一個細胞中的細胞核,形成一個重建的“合子”。動物的克隆繁殖細胞核早期胚胎思考診斷答案1.區(qū)分原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)(1)原

15、代培養(yǎng)細胞懸浮液第一次在瓶中培養(yǎng), 的細胞培養(yǎng)。有時把第1代細胞的培養(yǎng)與傳的細胞培養(yǎng)統(tǒng)稱為原代培養(yǎng)。(2)傳代培養(yǎng)細胞懸浮液培養(yǎng)一段時間后, 的細胞培養(yǎng)。傳 的細胞培養(yǎng)稱為傳代培養(yǎng)。沒有分瓶培養(yǎng)之前10代以內分瓶再進行10代以后2.比較細胞系和細胞株答案種類來源特點細胞系有限細胞系通常由 培養(yǎng)建成有接觸抑制;不能連續(xù)培養(yǎng)連續(xù)細胞系 由 培養(yǎng)建成發(fā)生了轉化,多數(shù)具有異倍體核型;有些具有異體致瘤性;有些具有不死性,但不致癌細胞株有限細胞株通過一定的選擇或純化方法,從原代培養(yǎng)物或細胞系中獲得的具有特殊性質的細胞傳代次數(shù)有限一般具有恒定的染色體組型、同功酶類型、病毒敏感性和生化特性等連續(xù)細胞株可連續(xù)多

16、次傳代二倍體細胞傳代傳代細胞連續(xù)3.動物細胞培養(yǎng)過程中,也需要將動物細胞分散開來,這與觀察植物細胞的有絲分裂中的解離作用類似。兩種處理方法的結果最大的區(qū)別是什么?提示提示動物細胞培養(yǎng)過程中的處理,動物細胞還保持活性;但在植物細胞的解離過程中,細胞被解離液殺死,已經(jīng)失去活性。4.通過動物體細胞核移植技術獲得的克隆動物,其遺傳物質是否和供核細胞的遺傳物質完全一樣?提示提示不完全一樣。細胞核遺傳物質一樣,但細胞質遺傳物質和提供去核卵細胞的個體幾乎完全一樣(分析遺傳物質來源時,一定要注意細胞核遺傳物質和細胞質遺傳物質的區(qū)別)。答案題型一動物細胞培養(yǎng)與克隆繁殖題型一動物細胞培養(yǎng)與克隆繁殖1.下列關于動物

17、細胞培養(yǎng)的敘述,正確的是()A.連續(xù)細胞系的細胞大多具有二倍體核型B.某些癌細胞在合適條件下能逆轉為正常細胞C.由多個祖細胞培養(yǎng)形成的細胞群為一個克隆D.未經(jīng)克隆化培養(yǎng)的細胞系細胞具有相同的性狀解題探究解析解析解析連續(xù)細胞系的細胞大多數(shù)具有異倍體核型;癌細胞仍能逆轉為正常細胞,如小鼠畸胎癌細胞能分化為各種正常體細胞;由一個共同的祖細胞培養(yǎng)形成的細胞群為一個克隆;未經(jīng)克隆化培養(yǎng)的細胞系具有異質性。2.如圖所示為哺乳動物生殖的過程。其中b為卵細胞,c為體細胞。下列敘述不正確的是()解析A.形成動物的過程分別屬于有性生殖和無性生殖B.產(chǎn)生動物的過程中可發(fā)生基因突變、基因重組等C.動物的產(chǎn)生表明動物細

18、胞的細胞核具有全能性D.a、b、c細胞的形成過程,僅c細胞為有絲分裂解析解析動物通過受精作用形成,屬于有性生殖,動物通過細胞核移植技術形成,利用的原理是動物細胞的細胞核具有全能性,形成動物的過程屬于無性生殖,A、C正確;a、b細胞分別由精原細胞和卵原細胞通過減數(shù)分裂形成,c細胞是體細胞,通過有絲分裂形成,D正確;產(chǎn)生動物的過程中并沒有發(fā)生基因重組,故B錯誤。 比較動物細胞培養(yǎng)、核移植與動物細胞融合歸納提升歸納提升比較動物細胞培養(yǎng)核移植動物細胞融合原理細胞增殖動物細胞核的全能性細胞膜的流動性過程結果相同分化程度的細胞群與供體基本相同的個體雜交細胞關鍵環(huán)節(jié)細胞增殖(分裂)、細胞癌變核融合、細胞分化

19、人工誘導細胞膜融合應用生產(chǎn)生物制品;基因工程;檢測有毒物質加速良種繁育;保護瀕危物種;生產(chǎn)醫(yī)用蛋白;提供克隆器官、組織等獲得雜種細胞,制備細胞產(chǎn)物如單克隆抗體題型二單克隆抗體的制備題型二單克隆抗體的制備3.關于下面制備單克隆抗體過程示意圖的敘述,不正確的是()解析A.表示已免疫的B淋巴細胞和骨髓瘤細胞均是從小鼠的脾臟中提取的B.促進細胞融合的方法可以利用聚乙二醇作介導C.中的篩選是通過抗原抗體反應進行的D.可以無限增殖解析解析已免疫的B淋巴細胞可以從小鼠的脾臟中提取,也可以從血漿中提取,骨髓瘤細胞是從小鼠的骨髓中提取的。單克隆抗體是利用已免疫的B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合形成的雜交瘤細胞得到的,

20、融合方法可以用化學方法聚乙二醇,生物方法滅活的病毒等。如果要篩選能產(chǎn)生特定抗體的細胞群,可以通過檢測抗原抗體反應,如果有反應說明產(chǎn)生了抗體。融合細胞具有雙親的特點,既能無限增殖又能產(chǎn)生單一抗體。4.如圖是制備乙肝病毒表面抗體的流程,該抗體是乙肝病毒免疫的保護性抗體?;卮鹨韵聠栴}:(1)圖中抗原特指_抗原,細胞是指_。培養(yǎng)基中含有的某種天然成分是_。乙肝病毒表面骨髓瘤細胞動物血清答案(2)不考慮多細胞融合,那么第一次篩選淘汰的細胞有_,而第二次篩選得到的目的細胞是_。(3)從圖中可知,培養(yǎng)目的細胞有兩種途徑,即_。與普通抗體比較,得到的單克隆抗體具有_等優(yōu)點。(4)該技術制備的單克隆抗體可用于基

21、因工程的第四步工作,而該步工作中使用單克隆抗體的目的是_。 未融合的B淋巴細胞和骨髓瘤細胞、骨髓瘤細胞間融合的細胞、B淋巴細胞間融合的細胞能產(chǎn)生乙肝病毒表面抗體的雜交瘤細胞 體外培養(yǎng)和體內培養(yǎng)特異性強、靈敏度高,并可大量制備檢測目的基因是否成功表達答案返回做模擬練預測1.下圖為某二倍體植株花藥中未成熟花粉在適宜培養(yǎng)基上形成完整植株的過程。下列有關敘述正確的是()解析A.過程表示脫分化,過程表示再分化B.過程、需要避光,過程需要照光C.過程說明花粉細胞具有全能性D.過程獲得的完整植株自交后代不會發(fā)生性狀分離解析解析圖中過程表示脫分化,、表示再分化,A項正確;脫分化需要避光處理,再分化和植物生長需

22、要照光,因此過程需要避光,過程、需要照光,B項錯誤;過程、是植物的組織培養(yǎng)過程,由花粉細胞最終獲得了完整植株個體,說明花粉細胞具有全能性,C項錯誤;過程獲得的完整植株屬于單倍體植株,高度不育,不能自交產(chǎn)生后代,D項錯誤。2.下圖表示利用棉花葉肉細胞原生質體培養(yǎng)進行遺傳改良的過程,據(jù)圖分析錯誤的是()解析A.過程需在適宜條件下用纖維素酶和果膠酶的混合物處理B.過程能定向誘導原生質體產(chǎn)生優(yōu)良性狀的突變C.過程中葉肉細胞失去了其特有的結構和功能D.過程需用適宜配比的植物激素處理解析解析植物細胞壁主要是由纖維素和果膠組成的,常選用纖維素酶和果膠酶去除細胞壁,獲得具有活力的原生質體。紫外線照射誘變育種所

23、依據(jù)的原理是基因突變,這種突變是不定向的。過程是脫分化,指已經(jīng)分化的植物器官、組織或細胞,當受到創(chuàng)傷或進行離體(也受到創(chuàng)傷)培養(yǎng)時,已停止分裂的細胞,又重新恢復分裂,細胞改變原有的分化狀態(tài),失去原有結構和功能,成為具有未分化特性的細胞。是再分化,需用適宜配比的植物激素誘導。3.(2015鄞州中學測試)下列關于動物細胞培養(yǎng)的敘述,錯誤的是()A.在培養(yǎng)基中加入胰島素可提高動物細胞克隆形成率B.細胞克隆可以從普通細胞系中分離出缺乏特殊基因的突變細胞系C.連續(xù)細胞系可認為是發(fā)生了轉化的細胞系,大多數(shù)具有二倍體核型D.無限細胞系比有限細胞系更容易克隆解析解析解析胰島素可促進氨基酸、葡萄糖等物質轉運進入

24、組織細胞,A項正確;細胞克隆即克隆培養(yǎng)法,是將單一細胞從細胞群體中分離出來單獨培養(yǎng)形成純系的技術,從普通細胞系中分離出單個突變細胞即可采用這種方法培養(yǎng)成細胞系,B項正確;連續(xù)細胞系大多具有異倍體核型,C項錯誤;無限細胞系增殖能力更強,更易克隆,D項正確。4.實驗小鼠皮膚細胞培養(yǎng)(非克隆培養(yǎng))的基本過程如圖所示,下列敘述錯誤的是()解析A.甲過程需要對實驗小鼠進行消毒B.乙過程可用胰蛋白酶處理皮膚組織C.丙過程得到的細胞大多具有異倍體核型D.丁過程得到的細胞具有異質性解析解析離體動物細胞培養(yǎng)需要無菌、無毒的環(huán)境,防止微生物對培養(yǎng)細胞的生長、增殖造成影響,因此要對實驗小鼠進行消毒,A項正確;動物細

25、胞培養(yǎng)前需用胰蛋白酶處理皮膚組織,使細胞分散開,B項正確;丙是原代培養(yǎng)過程,離體的細胞經(jīng)過原代培養(yǎng),大多數(shù)細胞會死亡,只有少部分細胞會繼續(xù)活下來進行傳代培養(yǎng),原代培養(yǎng)的細胞通常能保持正常的二倍體核型,C項錯誤;由于皮膚細胞非克隆化培養(yǎng),丁過程所得細胞并非為同一細胞的后代,因此其結構和功能并非完全一致,具有一定的異質性,D項正確。5.經(jīng)實驗發(fā)現(xiàn)0.5 mg/L 6BA和0.3 mg/L IAA的配比混合物能誘導某品種菊花莖尖外植體再生叢芽比率達70%,再生叢芽外植體上的叢芽平均個數(shù)達5.3,適當降低IAA濃度或不含IAA,效果是否不同呢?有人利用所提供的0.5 mg/L 6BA和濃度分別為0.1

26、 mg/L、0.2 mg/L、0.3 mg/L的IAA進行探究。請回答有關問題:實驗思路:配制適宜的培養(yǎng)基,分成若干組,滅菌。往培養(yǎng)基中各加入適量的0.5 mg/L 6BA,并分別依次加入等量的0.1 mg/L、0.2 mg/L、0.3 mg/L的IAA。分別接種數(shù)量相同、生長狀態(tài)一致、消毒后的某菊花品種莖尖外植體。在適宜條件下培養(yǎng)一段時間后,統(tǒng)計并計算再生叢芽外植體的比率。 缺乏對照組,應該增加一組加入適量的0.5 mg/L的6BA,并加入等量的蒸餾水作為對照;統(tǒng)計指標少了一個,應該統(tǒng)計外植體上的叢芽數(shù),并求平均數(shù)(1)指出上述實驗思路的兩處不足之處并改正:_。解析解析根據(jù)題意可知,該實驗的

27、自變量為不同濃度的IAA,0.5 mg/L 6BA在各組中并無差別,屬于實驗的無關變量。由題意中“適當降低IAA濃度或不含IAA,效果是否不同呢”可知,本實驗中需設置不加入IAA但加入等量的蒸餾水的空白對照組。題干信息中提示因變量不止一個:再生叢芽比率和叢芽平均數(shù),而實驗過程步驟表述中缺少一個,進行前后表述的對比后可分析出應統(tǒng)計外植體上的叢芽數(shù),并求平均數(shù)。解析答案(2)本實驗的實驗原理是(寫出其中兩點即可)_ _。 多種激素的平衡協(xié)調作用,控制著植物的生長和發(fā)育;細胞分裂素與生長素濃度配比會影響外植體的分化,菊花莖尖細胞具有全能性;能否再生叢芽可以反映出激素配比可否誘導外植體的分化,叢芽比率

28、和平均數(shù)可反映誘導的最佳配比(任選兩點即可)解析答案解析解析實驗原理是指該實驗的理論依據(jù)與分析鑒定方法等。本實驗涉及兩種植物激素的不同配比,說明多種激素共同協(xié)調作用,共同控制著植物的生長和發(fā)育。實驗活動中提到了外植體和叢芽的形成,二者可繼續(xù)分化為完整植物體,說明用來培養(yǎng)的菊花莖尖細胞等具有全能性。實驗還能證明一定濃度(0.5 mg/L)的6BA與不同濃度IAA進行配比,對叢芽數(shù)和外植體再生叢芽比率有不同的作用效果,因此看出一定配比的激素混合溶液可誘導外植體的分化。(3)制備菊花原生質體時,一般應將組織放在0.50.6 mol/L的甘露醇溶液中用纖維素酶和果膠酶混合液處理,0.50.6 mol/

29、L甘露醇溶液的作用是_,原生質體再生出細胞壁時_(填兩種細胞器)的活動明顯增強。解析解析甘露醇是一種植物組織培養(yǎng)過程中常用的試劑,一般用于調節(jié)和維持一定的滲透壓,使去壁后的原生質體能維持正常形態(tài)。答題時注意提示點原生質體,暗示該結構暫時無細胞壁,對滲透壓的要求較高,所以可以順利找準得分點。植物細胞壁形成過程中需高爾基體,且消耗能量,所以與線粒體的功能也有關。維持一定的滲透壓高爾基體、線粒體解析答案返回課時訓練一、選擇題1.(2015臺州中學統(tǒng)考)下列過程不涉及植物組織培養(yǎng)技術的是()A.由馬鈴薯的莖尖培育出無病毒植株B.白菜和甘藍經(jīng)體細胞雜交過程培育出雜種植株C.轉入抗卡那霉素基因的煙草細胞培

30、育出轉基因植株D.二倍體水稻剛萌發(fā)的種子經(jīng)秋水仙素處理后培育出四倍體植株解析解析解析植物組織培養(yǎng)屬于無性繁殖技術。將離體的植物組織、細胞培養(yǎng)成完整植株,需制備相應的培養(yǎng)基并添加適當配比的營養(yǎng)物質和植物生長調節(jié)劑誘導,即必須依賴植物組織培養(yǎng)技術,故A、B、C項均涉及該技術;用秋水仙素處理二倍體水稻剛萌發(fā)的種子即可得到四倍體植株,無須利用植物組織培養(yǎng)技術,D項不涉及該技術。2.下圖為植物組織培養(yǎng)過程的流程圖,以下相關敘述不正確的是()解析A.上述過程中脫分化發(fā)生在步驟b,在此過程中植物激素發(fā)揮了重要作用B.再分化發(fā)生在步驟d,是愈傷組織重新分化形成根或芽等器官的過程C.從葉組織塊到種苗形成的過程利

31、用的原理是植物葉片細胞具有全能性D.人工種子可以解決有些作物品種繁殖能力差、結子困難或發(fā)芽率低等問題解析解析植物組織培養(yǎng)的原理是植物細胞具有全能性;再分化發(fā)生在步驟c,為愈傷組織重新分化形成根或芽等器官的過程;植物激素在啟動細胞分裂、脫分化和再分化中發(fā)揮重要作用。3.(2015杭州模擬)科學家將豹蛙的囊胚期細胞的細胞核移植到去核的卵母細胞中,形成重組細胞,然后培養(yǎng)重組細胞形成囊胚,最終發(fā)育為成體豹蛙。下列相關敘述錯誤的是()A.“多莉”羊培育方法與題中獲得成體豹蛙方法本質相似B.囊胚期細胞已發(fā)生分化,但細胞核中的基因組完整C.重組細胞形成成蛙過程需要進行胚胎移植,但不能用原腸胚期的胚胎進 行移

32、植D.重組細胞最初分裂時雖然進行了DNA復制,但基因轉錄并未開始解析解析解析豹蛙和“多莉”羊的培育過程都采用了細胞核移植技術,本質相似,A項正確;細胞分化的實質是基因的選擇性表達,遺傳物質并未改變,基因組的完整性得以保留,B項正確;蛙類屬于卵生動物,無須進行胚胎移植,C項錯誤;重組細胞最初分裂時進行了DNA復制,但基因轉錄尚未開始,重組細胞開始第三次分裂時核受體細胞的調節(jié)蛋白全部被卵細胞質中的蛋白因子替代,核DNA重新編排,胚細胞基因才開始表達,D項正確。4.下列有關單克隆抗體制備的敘述,正確的是()A.先利用特定的抗原蛋白飼喂小鼠,再從小鼠脾臟中分離出B淋巴細胞B.體外培養(yǎng)雜交瘤細胞需要在培

33、養(yǎng)液中添加動物血清和一些抗生素C.為避免病毒感染,需用聚乙二醇誘導骨髓瘤細胞和B淋巴細胞融合D.單克隆抗體制備技術和植物體細胞雜交技術均依據(jù)細胞的全能性原理解析解析解析先利用特定的抗原蛋白注射小鼠,再從小鼠脾臟中分離B淋巴細胞,因蛋白質水解會失去活性,故不能用特定的抗原蛋白飼喂小鼠,A錯誤;由于培養(yǎng)液中缺乏天然培養(yǎng)基中某些無法替代的成分,則體外培養(yǎng)雜交瘤細胞需要在培養(yǎng)液中添加動物血清,還應添加抗生素進行消毒,B正確;用離心、電刺激、聚乙二醇、滅活病毒等方法誘導骨髓瘤細胞和B淋巴細胞融合,C錯誤;細胞的全能性是指最后能獲得完整個體,而動物細胞融合的結果是獲得雜交細胞,D錯誤。5.美國科學家將胡蘿

34、卜韌皮部的細胞培養(yǎng)產(chǎn)生完整植株,如圖所示。請據(jù)圖回答下列問題:(1)科學家所用的胡蘿卜韌皮部的細胞,在正常生物體內能否進行有絲分裂?說明原因。_。不能。因為植物韌皮部的細胞已經(jīng)分化,在正常植物體內,不再分裂解析解析在生物體內已經(jīng)分化的細胞不再具有分裂能力。解析答案二、非選擇題(2)韌皮部細胞通過_和_形成的許多植株的特點是_。(3)此實驗證明了高度分化的植物細胞仍具有發(fā)育成完整植株的能力,即具有_,高度分化的細胞具有此特性的原因是_。細胞分裂細胞分化 彼此性狀極為相似全能性 這些細胞最終由同一細胞(受精卵)經(jīng)有絲分裂形成,細胞核中含有保持該物種遺傳特性所需要的全套遺傳物質解析解析韌皮部細胞為胡

35、蘿卜體細胞,其細胞核內含有其生長發(fā)育所需要的全套遺傳物質,遺傳物質在特定時間和特定空間表達,從而形成許多植株。解析答案(4)下表為幾種組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基配方的部分成分及培養(yǎng)條件和特點。培養(yǎng)基作用糖類大量元素微量元素植物激素條件建立愈傷組織的培養(yǎng)基蔗糖N、P、K、Ca、Mg、S等B、Cu、Mn、Mo、Cl、Fe等2,4D25 黑暗培養(yǎng)根尖的培養(yǎng)基蔗糖N、P、K、Ca、Mg、S等B、Cu、Mn、Mo、Cl、Fe等15 黑暗培養(yǎng)莖尖的培養(yǎng)基蔗糖N、P、K、Ca、Mg、S等B、Cu、Mn、Mo、Cl、Fe等萘乙酸18 連續(xù)光照根據(jù)上表分析說明,組織培養(yǎng)的條件是_。 組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基中一般都含有能維持細胞

36、正常生活的物質,如蔗糖、大量元素和微量元素等,不同功能的培養(yǎng)基中還含有不同的植物激素,同時因為培養(yǎng)的目的不同,培養(yǎng)的外界條件(光照和溫度等)也不同解析解析在植物組織培養(yǎng)過程中,不同的營養(yǎng)條件,不同的植物激素對植物細胞的表達影響不同。解析答案(5)試簡要說明組織培養(yǎng)技術的優(yōu)點以及這一技術在實踐中的具體應用(舉例)。_。優(yōu)點:取材少、培養(yǎng)周期短、繁殖率高,而且便于自動化管理。應用:快速繁殖花卉和果樹,培育無病毒植物,生產(chǎn)藥物、食品添加劑,制造人工種子等解析解析該項技術屬于無性繁殖范疇,不但能保持親本的優(yōu)良性狀,而且便于管理。解析答案6.如圖是某實驗室做的通過動物纖維母細胞等獲得單克隆抗體的實驗研究

37、。請據(jù)圖回答下列問題:(1)X、Y、Z細胞的名稱分別是_、抗原刺激下產(chǎn)生的B淋巴細胞、_。骨髓瘤細胞雜交瘤細胞答案(2)過程類似于植物組織培養(yǎng)技術中的_(選填脫分化/再分化)過程。與纖維母細胞相比,誘導干細胞的全能性較_。過程的實質是_ 。(3)過程中需用到的生物誘導劑是_。(4)處需要篩選,最終目的是_。(5)單克隆抗體在應用上可作為診斷試劑、用于治療疾病和_ 。脫分化高基因的選擇性表達滅活的病毒篩選出能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細胞運載藥物(制作生物導彈也可)答案7.基因型為AaBb的水稻(24條染色體)的花藥通過無菌操作,接入試管后,在一定條件下培養(yǎng)形成試管苗。據(jù)圖回答下列問題:(1)愈傷組

38、織是花粉細胞不斷分裂后形成的不規(guī)則的細胞團,愈傷組織形成過程中,必須從培養(yǎng)基中獲得_和小分子有機物等營養(yǎng)物質。水、無機鹽解析解析愈傷組織不能進行光合作用,其全部的營養(yǎng)均來自培養(yǎng)基。解析答案(2)花藥在培養(yǎng)基所提供的特定條件下發(fā)生多次細胞分裂,形成愈傷組織,此過程叫做_,細胞分裂的方式是_。(3)誘導愈傷組織分化出芽和根,最后長成植株。這一過程叫_。該植株是_植株,其特點是_,生產(chǎn)上沒有推廣應用的價值。脫分化有絲分裂再分化單倍體長勢弱小,高度不育解析解析在植物組織培養(yǎng)過程中,細胞只進行有絲分裂。解析解析花藥離體培養(yǎng)得到的植株為單倍體,該植株在生產(chǎn)上無應用價值,其價值體現(xiàn)在育種方面。解析答案(4)

39、要促進花粉細胞分裂生長,培養(yǎng)基中應有_和_兩類激素。(5)愈傷組織分化是指愈傷組織形成芽和莖。這一過程中必須給予光照,其原因是:_。_。生長素細胞分裂素光是葉綠體形成的必要條件光合作用需要光解析解析生長素和細胞分裂素可以調節(jié)細胞分裂與細胞分化過程。解析答案(6)試管苗的細胞核中含有_個DNA分子。12解析解析該試管苗為單倍體,核DNA分子數(shù)為12。(7)培養(yǎng)成的試管苗可能出現(xiàn)的基因型有_。如果要獲得育種需要的植株,并能繁殖新品種,后面的育種步驟是_ 。ab、Ab、AB、aB用秋水仙素處理單倍體幼苗解析解析提供花藥的植株基因型為AaBb,故培養(yǎng)成的單倍體幼苗的基因型有ab、Ab、AB、aB四種。

40、解析答案8.(2015溫州中學測試)下圖為動物細胞培養(yǎng)的基本過程示意圖,回答下列問題:解析(1)容器A中放入的一般是幼齡動物的器官或組織,原因是其細胞_、易于培養(yǎng)。培養(yǎng)時先要剪碎,然后用_分散細胞,制成B瓶中的細胞懸液。將細胞懸液轉入C瓶中進行的初次培養(yǎng)稱為_。分裂能力強胰蛋白酶原代培養(yǎng)答案解析解析動物細胞培養(yǎng)是利用細胞增殖能力以獲取大量動物細胞的技術。幼齡動物的器官或組織中的細胞分裂能力強,適宜培養(yǎng);胰蛋白酶處理可去除細胞粘連蛋白,使細胞分散開來;從機體中取出的細胞經(jīng)分散處理后立即進行的培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)。(2)在D瓶中正常培養(yǎng)了一段時間后,發(fā)現(xiàn)細胞絕大部分死亡,只有極少數(shù)細胞存活并可無限增殖

41、,這樣的細胞系被稱為_,它們大多數(shù)具有_核型。連續(xù)細胞系異倍體解析解析能夠連續(xù)培養(yǎng)下去的細胞系稱為連續(xù)細胞系,題中明確說明這些細胞可無限增殖,故屬于連續(xù)細胞系;連續(xù)細胞系被認為是發(fā)生了轉化的細胞系,大多具有異倍體核型。解析答案(3)為保證無菌、無毒的環(huán)境,B、C、D瓶中的培養(yǎng)基中需要添加一定量的_;還需要提供O2和CO2等氣體環(huán)境,CO2的作用主要是_??股鼐S持培養(yǎng)液的pH解析解析加入一定量的抗生素可殺滅病菌,防止對動物細胞的生長增殖造成影響;CO2的作用主要是維持動物細胞正常生長所需的pH。解析答案(4)動物細胞體外培養(yǎng)時,通常要在培養(yǎng)基中補充一定濃度的某些物質。下圖表示血清對正常細胞和癌

42、細胞培養(yǎng)影響的實驗結果。解析解析據(jù)圖中實驗結果可知,是否添加血清對癌細胞的數(shù)量影響不大,但明顯影響正常細胞的數(shù)量,故正常細胞培養(yǎng)過程一定要添加血清。據(jù)圖可知,培養(yǎng)_細胞一定需要添加血清。正常解析答案9.人的血清白蛋白在臨床上需求量很大,通常從人血中提取。由于艾滋病病毒(HIV)等人類感染性病原體造成的威脅與日俱增,使人們對血液制品顧慮重重。如果將人的血清白蛋白基因導入奶牛細胞中,那么利用牛的乳汁來生產(chǎn)血清白蛋白就成為可能。大致過程如下:a.將人的血清白蛋白基因導入雌性奶牛胚胎細胞,形成重組細胞;b.取出重組細胞的細胞核,注入牛去核卵細胞中形成重組細胞;c.電脈沖刺激重組細胞,促使其形成早期胚胎

43、;d.將胚胎移植到母牛的子宮中,最終發(fā)育成轉基因小牛。(1)重組細胞的獲得是利用了_技術,它實現(xiàn)了奶牛胚胎細胞中的DNA與_的重組?;蚬こ倘说难灏椎鞍谆蚪馕鼋馕龌蚬こ炭蓪⒛康幕蛉说难灏椎鞍谆蚺c受體細胞牛胚胎細胞的DNA進行重組。解析答案(2)重組細胞的獲得是利用了克隆技術中的_技術,使重組細胞的細胞核與牛的_融合。解析解析克隆技術中的細胞核移植技術可將去核的牛卵細胞與含有目的基因的供體細胞核融合構建重組細胞。(3)由圖可知,動物克隆技術的基礎是_。A.動物細胞融合B.動物細胞的全能性C.動物細胞和組織培養(yǎng)D.核移植核移植去核卵細胞解析答案(4)利用轉基因牛乳汁提取藥物工藝簡單,甚至可直接飲用治病。如果將藥物蛋白基因移到動物(如牛)的膀胱上皮細胞中,利用轉基因牛的尿液生產(chǎn)提取藥物比乳汁提取藥物的更大優(yōu)越性是:_、_。解析解析建立膀胱生物反應器的好處是可以不分動物的性別及不同生長發(fā)育期,均可產(chǎn)生所需藥物。處于不同發(fā)育時期的動物都可生產(chǎn)雌性和雄性動物都可生產(chǎn)解析答案(5)重組細胞培養(yǎng)成早期胚胎利用了動物細胞培養(yǎng)技術。下列與動物細胞培養(yǎng)技術無密切關系的是_。A.細胞全能性的揭示B.噬菌體的研究C.細胞周期調節(jié)控制機理的分析D.對癌變機理和衰老原因的研究解析解析噬菌體是細菌病毒,無細胞結構,A、C、D項所述的內容都與細胞培養(yǎng)技術密不可分。解析返回

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