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1、專題專題2細胞工程細胞工程第第2節(jié)動物細胞工程節(jié)動物細胞工程第第2課時動物細胞融合與單克隆課時動物細胞融合與單克隆抗體抗體 欄目鏈接欄目鏈接一、動物細胞融合一、動物細胞融合1概念：指概念：指_或多個動物細胞結(jié)合或多個動物細胞結(jié)合形成一個細胞的過程，又叫形成一個細胞的過程，又叫_。2過程：含有不同過程：含有不同_的兩個細胞的兩個細胞_細胞。細胞。3意義：克服了意義：克服了_雜交不親和的障雜交不親和的障礙。礙。兩個兩個細胞雜交細胞雜交遺傳信息遺傳信息雜交雜交遠緣遠緣 欄目鏈接欄目鏈接二、單克隆抗體二、單克隆抗體1B淋巴細胞特點：一個淋巴細胞特點：一個B淋巴細胞分泌淋巴細胞分泌_種特異性抗體；體外培

2、養(yǎng)條件下，種特異性抗體；體外培養(yǎng)條件下，B淋巴細淋巴細胞胞_無限增殖。無限增殖。2制備。制備。一一不能不能雜交瘤細胞雜交瘤細胞能分泌所需抗能分泌所需抗體的雜交瘤細胞體的雜交瘤細胞 欄目鏈接欄目鏈接3 應(yīng) 用 ： 最 廣 泛 的 用 途 是 用 作 應(yīng) 用 ： 最 廣 泛 的 用 途 是 用 作_；用于；用于_；制成；制成“生物生物導彈導彈”，定向運載藥物。，定向運載藥物。體外診斷試劑體外診斷試劑治療疾病治療疾病 欄目鏈接欄目鏈接 欄目鏈接欄目鏈接知識點知識點1 1 動物細胞融合動物細胞融合1概念：是指兩個或多個動物細胞結(jié)合形成概念：是指兩個或多個動物細胞結(jié)合形成一個細胞的過程，又稱細胞雜交。一

3、個細胞的過程，又稱細胞雜交。2原理：細胞膜的流動性。原理：細胞膜的流動性。3誘導方法：物理法誘導方法：物理法離心、振動、電激；離心、振動、電激；化學法化學法聚乙二醇；生物方法聚乙二醇；生物方法滅活的病毒。滅活的病毒。 欄目鏈接欄目鏈接4動物細胞融合的過程動物細胞融合的過程(如下圖所示如下圖所示)。 欄目鏈接欄目鏈接5優(yōu)點：動物細胞融合技術(shù)突破了有性雜交方優(yōu)點：動物細胞融合技術(shù)突破了有性雜交方法的局限，使遠緣雜交成為可能。法的局限，使遠緣雜交成為可能。6植物、動物細胞融合的比較。植物、動物細胞融合的比較。比較項目比較項目植物體細胞雜交植物體細胞雜交動物細胞融合動物細胞融合原理原理細胞膜的流動性，

4、植物細胞膜的流動性，植物細胞全能性細胞全能性細胞膜的流動性細胞膜的流動性細胞融合細胞融合的方法的方法去除細胞壁后誘導原生去除細胞壁后誘導原生質(zhì)體融合質(zhì)體融合使細胞分散后誘導細胞融使細胞分散后誘導細胞融合合誘導方法誘導方法物理物理(離心、振動、電離心、振動、電激激) 化學化學(聚乙二醇聚乙二醇)物理、化學方法物理、化學方法(同左同左) 滅滅活的病毒活的病毒用途用途獲得雜種植株獲得雜種植株主要用于制備單克隆抗體主要用于制備單克隆抗體 欄目鏈接欄目鏈接7.已成功的動物細胞融合實例。已成功的動物細胞融合實例。生物種類生物種類細胞來源細胞來源成功年份成功年份酵母菌酵母菌雞雞原生質(zhì)體原生質(zhì)體血紅細胞血紅細

5、胞1975人人胡蘿卜胡蘿卜腹水癌細胞腹水癌細胞原生質(zhì)體原生質(zhì)體1976人人小鼠小鼠纖維肉瘤細胞纖維肉瘤細胞畸胎瘤細畸胎瘤細胞胞1978 欄目鏈接欄目鏈接例例1 1 動物細胞融合和植物體細胞雜交的比較中，動物細胞融合和植物體細胞雜交的比較中，正確的是正確的是()A誘導融合的方法完全相同誘導融合的方法完全相同B所用的技術(shù)手段完全相同所用的技術(shù)手段完全相同C所采用的原理完全相同所采用的原理完全相同D都能形成雜種細胞都能形成雜種細胞 欄目鏈接欄目鏈接解析：解析：首先兩種細胞工程技術(shù)中都要進行細胞融首先兩種細胞工程技術(shù)中都要進行細胞融合，且融合的技術(shù)基本相同；第二，誘導的方法，除合，且融合的技術(shù)基本相同

6、；第二，誘導的方法，除動物細胞的融合常用滅活的病毒做誘導劑外，其他的動物細胞的融合常用滅活的病毒做誘導劑外，其他的二者基本相同；第三，二者采用的原理不完全相同，二者基本相同；第三，二者采用的原理不完全相同，動物細胞融合的原理是細胞膜的流動性，最終形成的動物細胞融合的原理是細胞膜的流動性，最終形成的是雜種細胞，植物體細胞雜交除細胞膜的流動性外，是雜種細胞，植物體細胞雜交除細胞膜的流動性外，還有細胞的全能性，最終雜種細胞形成的是雜種植株。還有細胞的全能性，最終雜種細胞形成的是雜種植株。答案：答案：D 欄目鏈接欄目鏈接1以下四種細胞工程技術(shù)中，培育出的新個體以下四種細胞工程技術(shù)中，培育出的新個體(或

7、細胞或細胞)同時具有兩個親本遺傳特性的是同時具有兩個親本遺傳特性的是()植物組織培養(yǎng)植物體細胞雜交動物植物組織培養(yǎng)植物體細胞雜交動物細胞融合核移植細胞融合核移植A BC D變變 式式遷遷 移移 欄目鏈接欄目鏈接解析：解析：是通過細胞脫分化、再分化和有絲分是通過細胞脫分化、再分化和有絲分裂形成新個體的過程，只具有一個親本遺傳特性。裂形成新個體的過程，只具有一個親本遺傳特性。不同程度地都具有雙親遺傳特性。不同程度地都具有雙親遺傳特性。答案：答案：C變變 式式遷遷 移移 欄目鏈接欄目鏈接知識點知識點2 2 單克隆抗體單克隆抗體1概念：由單個概念：由單個B淋巴細胞進行無性繁殖形成淋巴細胞進行無性繁殖形

8、成的細胞系所產(chǎn)生出的化學性質(zhì)單一、特異性強的抗的細胞系所產(chǎn)生出的化學性質(zhì)單一、特異性強的抗體。體。2特點：化學性質(zhì)單一，特異性強，靈敏度高，特點：化學性質(zhì)單一，特異性強，靈敏度高，可大量制備?？纱罅恐苽?。3制備過程制備過程(如下圖所示如下圖所示)。 欄目鏈接欄目鏈接 欄目鏈接欄目鏈接在制備單克隆抗體時，需經(jīng)兩次篩選，但目的在制備單克隆抗體時，需經(jīng)兩次篩選，但目的不同。不同。(1)第一次篩選是在第一次篩選是在B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合之后，因為有三種融合情況：之后，因為有三種融合情況：B淋巴細胞與淋巴細胞與B淋巴細胞淋巴細胞融合、骨髓瘤細胞與骨髓瘤細胞融合、融合、骨髓瘤細

9、胞與骨髓瘤細胞融合、B淋巴細胞與淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合。而只有骨髓瘤細胞融合。而只有B淋巴細胞與骨髓瘤細胞的淋巴細胞與骨髓瘤細胞的融合細胞才是需要的雜種細胞。融合細胞才是需要的雜種細胞。 欄目鏈接欄目鏈接(2)第二次篩選需先在多孔培養(yǎng)皿上培養(yǎng)，在每第二次篩選需先在多孔培養(yǎng)皿上培養(yǎng)，在每個孔只有一個雜交瘤細胞的情況下開始培養(yǎng)，然后再個孔只有一個雜交瘤細胞的情況下開始培養(yǎng)，然后再篩選出能產(chǎn)生特異性抗體的細胞群。由于該細胞群是篩選出能產(chǎn)生特異性抗體的細胞群。由于該細胞群是由單個雜交瘤細胞克隆來的，所以產(chǎn)生的抗體一定是由單個雜交瘤細胞克隆來的，所以產(chǎn)生的抗體一定是化學性質(zhì)單一、特異性強的單克隆抗體。

10、化學性質(zhì)單一、特異性強的單克隆抗體。 欄目鏈接欄目鏈接4應(yīng)用。應(yīng)用。(1)診斷疾病：診斷病毒引起的疾病和用癌細胞診斷疾?。涸\斷病毒引起的疾病和用癌細胞抗原制備的單克隆抗體定位診斷?？乖苽涞膯慰寺】贵w定位診斷。(2)用于治療疾病和運載藥物：運用藥物與單克用于治療疾病和運載藥物：運用藥物與單克隆抗體連接在一起制成隆抗體連接在一起制成“生物導彈生物導彈”。(3)分離和純化抗原分子。分離和純化抗原分子。 欄目鏈接欄目鏈接例例2 2 下列關(guān)于單克隆抗體制備過程的敘述，正確下列關(guān)于單克隆抗體制備過程的敘述，正確的是的是()A制備過程中不需要動物細胞培養(yǎng)技術(shù)制備過程中不需要動物細胞培養(yǎng)技術(shù)B雜交瘤細胞具有

11、漿細胞與癌細胞的所有特點雜交瘤細胞具有漿細胞與癌細胞的所有特點C經(jīng)選擇性培養(yǎng)基篩選出來的雜交瘤細胞即可經(jīng)選擇性培養(yǎng)基篩選出來的雜交瘤細胞即可用于單克隆抗體的生產(chǎn)用于單克隆抗體的生產(chǎn)D單克隆抗體制備過程中的細胞兩兩融合得到單克隆抗體制備過程中的細胞兩兩融合得到三種融合細胞三種融合細胞 欄目鏈接欄目鏈接解析：解析：單克隆抗體的制備是將骨髓瘤細胞與效應(yīng)單克隆抗體的制備是將骨髓瘤細胞與效應(yīng)B細胞細胞(漿細胞漿細胞)結(jié)合，得到雜交瘤細胞經(jīng)過選擇培養(yǎng)基結(jié)合，得到雜交瘤細胞經(jīng)過選擇培養(yǎng)基的篩選并經(jīng)單一抗體檢測后，培養(yǎng)能產(chǎn)生特定抗體的的篩選并經(jīng)單一抗體檢測后，培養(yǎng)能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞即可得單克隆抗體。雜

12、交瘤細胞能無限繁雜交瘤細胞即可得單克隆抗體。雜交瘤細胞能無限繁殖但不具有癌細胞的轉(zhuǎn)移能力。經(jīng)過免疫的效應(yīng)殖但不具有癌細胞的轉(zhuǎn)移能力。經(jīng)過免疫的效應(yīng)B細細胞和骨髓瘤細胞雜交獲得三種細胞：效應(yīng)胞和骨髓瘤細胞雜交獲得三種細胞：效應(yīng)B細胞與效細胞與效應(yīng)應(yīng)B細胞融合形成的融合細胞、效應(yīng)細胞融合形成的融合細胞、效應(yīng)B細胞與骨髓瘤細細胞與骨髓瘤細胞融合形成的雜交瘤細胞、骨髓瘤細胞與骨髓瘤細胞胞融合形成的雜交瘤細胞、骨髓瘤細胞與骨髓瘤細胞融合形成的融合細胞。融合形成的融合細胞。答案：答案：D 欄目鏈接欄目鏈接2用動物細胞工程技術(shù)獲取單克隆抗體，下列實用動物細胞工程技術(shù)獲取單克隆抗體，下列實驗步驟中錯誤的是驗步

13、驟中錯誤的是()A將抗原注入小鼠體內(nèi)，獲得能產(chǎn)生抗體的將抗原注入小鼠體內(nèi)，獲得能產(chǎn)生抗體的B淋淋巴細胞巴細胞B用纖維素酶處理用纖維素酶處理B淋巴細胞與小鼠骨髓瘤細胞淋巴細胞與小鼠骨髓瘤細胞C用聚乙二醇作誘導劑，促使能產(chǎn)生抗體的用聚乙二醇作誘導劑，促使能產(chǎn)生抗體的B淋淋巴細胞與小鼠骨髓瘤細胞融合巴細胞與小鼠骨髓瘤細胞融合D篩選雜交瘤細胞，并從中選出能產(chǎn)生所需抗體篩選雜交瘤細胞，并從中選出能產(chǎn)生所需抗體的細胞群，培養(yǎng)后提取單克隆抗體的細胞群，培養(yǎng)后提取單克隆抗體變變 式式遷遷 移移 欄目鏈接欄目鏈接解析：解析：酶具有專一性，纖維素酶只能分解纖維酶具有專一性，纖維素酶只能分解纖維素，用纖維素酶處理植

14、物細胞是植物細胞工程中用素，用纖維素酶處理植物細胞是植物細胞工程中用來除去細胞壁獲得原生質(zhì)體的方法，與動物細胞工來除去細胞壁獲得原生質(zhì)體的方法，與動物細胞工程無關(guān)。程無關(guān)。B淋巴細胞與小鼠骨髓瘤細胞無纖維素。淋巴細胞與小鼠骨髓瘤細胞無纖維素。答案：答案：B變變 式式遷遷 移移 欄目鏈接欄目鏈接點評：點評：(1)教材中提及的教材中提及的B淋巴細胞實際上是經(jīng)過淋巴細胞實際上是經(jīng)過免疫的免疫的B淋巴細胞，即漿細胞。淋巴細胞，即漿細胞。(2)兩次篩選的手段與目的均不相同。兩次篩選的手段與目的均不相同。(3)誘導融合處理后，培養(yǎng)液中至少有誘導融合處理后，培養(yǎng)液中至少有5種細胞。種細胞。(4)注意已涉及的病毒的用途：疫苗、載體、促融注意已涉及的病毒的用途：疫苗、載體、促融等。等。變變 式式遷遷 移移 欄目鏈接欄目鏈接