《高考生物總復習 第一章第1節(jié) 微生物的分離和純培養(yǎng)課件 中圖版選修1》由會員分享，可在線閱讀，更多相關《高考生物總復習 第一章第1節(jié) 微生物的分離和純培養(yǎng)課件 中圖版選修1（32頁珍藏版）》請在裝配圖網(wǎng)上搜索。

1、第一章第一章 微生物培養(yǎng)技術微生物培養(yǎng)技術第一章第一章 微生物培養(yǎng)技術微生物培養(yǎng)技術第第1節(jié)節(jié)微生物的分離和純培養(yǎng)微生物的分離和純培養(yǎng)學習導航學習導航1.了解有關微生物及其培養(yǎng)基的基礎知識。了解有關微生物及其培養(yǎng)基的基礎知識。2.理解消毒和滅菌的原理、方法、進行無菌技理解消毒和滅菌的原理、方法、進行無菌技術的操作。術的操作。重點重點3.理解微生物接種的方法步驟，進行大腸桿菌理解微生物接種的方法步驟，進行大腸桿菌的分離和純培養(yǎng)。的分離和純培養(yǎng)。 重、難點重、難點新知初探思維啟動新知初探思維啟動一、培養(yǎng)基一、培養(yǎng)基1.含義：含義：由于微生物代謝方式的不同，因而由于微生物代謝方式的不同，因而對營養(yǎng)物

2、質(zhì)的需求也是有差異的。根據(jù)微生對營養(yǎng)物質(zhì)的需求也是有差異的。根據(jù)微生物物_的需要，將各種營養(yǎng)物的需要，將各種營養(yǎng)物質(zhì)混合在一起，配制成適合微生物生存的營質(zhì)混合在一起，配制成適合微生物生存的營養(yǎng)基質(zhì)。養(yǎng)基質(zhì)。生長繁殖和代謝生長繁殖和代謝2.平板培養(yǎng)基平板培養(yǎng)基將將_后的固體培養(yǎng)基基質(zhì)倒入后的固體培養(yǎng)基基質(zhì)倒入_，冷卻凝固后制成的培養(yǎng)基。，冷卻凝固后制成的培養(yǎng)基。二、接種技術二、接種技術1.含義含義：把相應的研究對象移入：把相應的研究對象移入_中中的過程。的過程。溶化溶化無菌培養(yǎng)皿無菌培養(yǎng)皿培養(yǎng)基培養(yǎng)基2.方法方法在平板培養(yǎng)基上接種的方法有平板劃線法、在平板培養(yǎng)基上接種的方法有平板劃線法、_法、法

3、、_法等。平法等。平板劃線法又包括連續(xù)劃線法和交叉劃線法。板劃線法又包括連續(xù)劃線法和交叉劃線法。稀釋涂布平板稀釋涂布平板稀釋混合平板稀釋混合平板判一判判一判(1)微生物是指由細胞組成的一類個體微小微生物是指由細胞組成的一類個體微小的生物。的生物。()(2)在微生物分離和純培養(yǎng)時，需要無菌操在微生物分離和純培養(yǎng)時，需要無菌操作。作。()(3)一般我們飲用的奶制品，多采用高溫滅一般我們飲用的奶制品，多采用高溫滅菌法。菌法。()(4)滅菌和消毒都能夠殺死細菌的芽孢等休滅菌和消毒都能夠殺死細菌的芽孢等休眠體。眠體。()三、無菌技術三、無菌技術1.目的和要求目的和要求在微生物的分離和純培養(yǎng)過程中，為了防

4、止在微生物的分離和純培養(yǎng)過程中，為了防止_污染，必須采用污染，必須采用_進行操進行操作。在實驗過程中，要對所用的器材、培養(yǎng)作。在實驗過程中，要對所用的器材、培養(yǎng)基進行嚴格的滅菌，對工作場所進行消毒?；M行嚴格的滅菌，對工作場所進行消毒。外來雜菌外來雜菌無菌技術無菌技術2.滅菌和消毒滅菌和消毒滅菌滅菌消毒消毒概念概念用用_的的理化理化因素殺死環(huán)境因素殺死環(huán)境或物體內(nèi)或物體內(nèi)外外_的的微生物微生物用相用相對對_的的理化方理化方法殺死環(huán)境或物體上法殺死環(huán)境或物體上的病原微生物和有害的病原微生物和有害微生物的營養(yǎng)細胞微生物的營養(yǎng)細胞常用常用方法方法_法法_消消毒法毒法和和_消消毒法毒法適用適用對象對象

5、所用器材、培所用器材、培養(yǎng)基養(yǎng)基工作場所工作場所強烈強烈所有所有溫和溫和高溫滅菌高溫滅菌射線射線化學藥劑化學藥劑四、大腸桿菌的分離和純培養(yǎng)四、大腸桿菌的分離和純培養(yǎng)1.方法方法：_。2.步驟步驟平板劃線分離法平板劃線分離法牛肉膏蛋白胨瓊脂牛肉膏蛋白胨瓊脂接種環(huán)接種環(huán)連續(xù)連續(xù)交叉交叉菌落菌落倒置倒置想一想想一想劃線法為什么可以分離出大腸桿菌？劃線法為什么可以分離出大腸桿菌？【提示提示】隨著線的延長，菌數(shù)越來越少隨著線的延長，菌數(shù)越來越少,最最終可分離得到由一個細菌繁殖而來的菌落。終可分離得到由一個細菌繁殖而來的菌落。要點突破講練互動要點突破講練互動要點一要點一無菌技術無菌技術1.概念：概念：無菌

6、技術不僅能防止實驗室的培養(yǎng)無菌技術不僅能防止實驗室的培養(yǎng)物被其他外來微生物污染，保持微生物的純物被其他外來微生物污染，保持微生物的純培養(yǎng)，而且在分離、轉接時亦能防止其他微培養(yǎng)，而且在分離、轉接時亦能防止其他微生物污染。獲得純凈培養(yǎng)物的關鍵是防止外生物污染。獲得純凈培養(yǎng)物的關鍵是防止外來雜菌的入侵，無菌技術圍繞著如何避免雜來雜菌的入侵，無菌技術圍繞著如何避免雜菌的污染展開，主要包括以下幾個方面：菌的污染展開，主要包括以下幾個方面：(1)對實驗操作的空間、操作者的衣著和手，對實驗操作的空間、操作者的衣著和手，進行清潔和消毒。雙手用肥皂洗凈，擦干后進行清潔和消毒。雙手用肥皂洗凈，擦干后用用75%酒精

7、消毒。酒精消毒。(2)將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等進行滅菌。培養(yǎng)基用高壓蒸氣滅菌，養(yǎng)基等進行滅菌。培養(yǎng)基用高壓蒸氣滅菌，接種環(huán)用火焰灼燒來滅菌。接種環(huán)用火焰灼燒來滅菌。(3)為避免周圍環(huán)境中微生物的污染，實驗操為避免周圍環(huán)境中微生物的污染，實驗操作應在酒精燈火焰附近進行。作應在酒精燈火焰附近進行。(4)實驗操作時應避免已經(jīng)滅菌處理的材料用實驗操作時應避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與周圍的物品相接觸。具與周圍的物品相接觸。2.常見消毒滅菌方法及其適用范圍常見消毒滅菌方法及其適用范圍方法方法適用范圍適用范圍煮沸消煮沸消毒法毒法日常生活中廣泛使用日常生活

8、中廣泛使用巴氏消巴氏消毒法毒法牛奶、啤酒等不宜進行高溫消牛奶、啤酒等不宜進行高溫消毒的液體毒的液體化學藥化學藥劑消毒劑消毒法法皮膚、傷口、動植物組織表面皮膚、傷口、動植物組織表面消消毒毒,空空氣、手術器械、塑料氣、手術器械、塑料或玻璃器皿等或玻璃器皿等方法方法適用范圍適用范圍紫外線紫外線消毒法消毒法接種室空氣接種室空氣灼燒滅灼燒滅菌法菌法微生物接種工具，如接種環(huán)、微生物接種工具，如接種環(huán)、接種針或其他金屬用具等，接接種針或其他金屬用具等，接種過程中試管口或錐形瓶口等種過程中試管口或錐形瓶口等干熱滅干熱滅菌法菌法玻璃器皿、金屬用具等玻璃器皿、金屬用具等高壓蒸高壓蒸汽滅菌汽滅菌法法培養(yǎng)基及多種器材

9、、物品培養(yǎng)基及多種器材、物品特別提醒特別提醒無菌技術除了用來防止實驗室的無菌技術除了用來防止實驗室的培養(yǎng)物被其他外來微生物污染外，還能有效培養(yǎng)物被其他外來微生物污染外，還能有效避免操作者自身被微生物感染。避免操作者自身被微生物感染。 細菌培養(yǎng)過程中分別采用了高壓蒸汽細菌培養(yǎng)過程中分別采用了高壓蒸汽滅菌鍋、酒精、火焰灼燒等幾種不同的處理滅菌鍋、酒精、火焰灼燒等幾種不同的處理,這些方法依次用于殺滅哪些部位的雜菌這些方法依次用于殺滅哪些部位的雜菌()A接種環(huán)、手、培養(yǎng)基接種環(huán)、手、培養(yǎng)基B高壓鍋、手、接種環(huán)高壓鍋、手、接種環(huán)C培養(yǎng)基、手、接種環(huán)培養(yǎng)基、手、接種環(huán)D接種環(huán)、手、高壓鍋接種環(huán)、手、高壓鍋

10、例例1【解析解析】此題考查學生對無菌技術的掌握。此題考查學生對無菌技術的掌握。高壓蒸汽滅菌鍋是滅菌的一個設備，通常用于高壓蒸汽滅菌鍋是滅菌的一個設備，通常用于培養(yǎng)基的滅菌。用酒精擦拭雙手是消毒的一種培養(yǎng)基的滅菌。用酒精擦拭雙手是消毒的一種方法?；鹧孀茻梢匝杆購氐椎販缇?，適用于方法?；鹧孀茻梢匝杆購氐椎販缇?，適用于微生物的接種工具，如接種環(huán)。微生物的接種工具，如接種環(huán)。【答案答案】C變式訓練變式訓練下列操作錯誤的是下列操作錯誤的是()A用酒精擦拭雙手用酒精擦拭雙手B用氯氣消毒水源用氯氣消毒水源C實驗室用紫外線進行消毒實驗室用紫外線進行消毒D玻璃器皿玻璃器皿(吸管、培養(yǎng)皿吸管、培養(yǎng)皿)用酒精直

11、接擦拭用酒精直接擦拭即可達到徹底滅菌的目的即可達到徹底滅菌的目的解析：選解析：選D。玻璃器皿、金屬用具等耐高。玻璃器皿、金屬用具等耐高溫、需要保持干燥的物品，應采用干熱滅溫、需要保持干燥的物品，應采用干熱滅菌法進行滅菌，而用酒精直接擦拭達不到菌法進行滅菌，而用酒精直接擦拭達不到徹底滅菌的目的。徹底滅菌的目的。要點二要點二探究微生物的分離和純培養(yǎng)探究微生物的分離和純培養(yǎng)1.菌落的含義及菌種的鑒定菌落的含義及菌種的鑒定在固體平板培養(yǎng)基上，由單個微生物細胞或在固體平板培養(yǎng)基上，由單個微生物細胞或孢子繁殖而來的一個具有特定形狀的子細胞孢子繁殖而來的一個具有特定形狀的子細胞群體，稱為菌落。其各方面特征，

12、如形狀、群體，稱為菌落。其各方面特征，如形狀、大小、表面、邊緣、隆起、透明度、顏色等大小、表面、邊緣、隆起、透明度、顏色等均可作為菌種鑒定的依據(jù)。均可作為菌種鑒定的依據(jù)。2.純化培養(yǎng)純化培養(yǎng)純培養(yǎng)過程中如果劃線接種形成的菌落特征純培養(yǎng)過程中如果劃線接種形成的菌落特征不一致不一致,說明含雜菌，需要進一步劃線挑菌，說明含雜菌，需要進一步劃線挑菌，直至純化。直至純化。3.培養(yǎng)不同的微生物，需要不同的培養(yǎng)不同的微生物，需要不同的pH微生物種類微生物種類最適最適pH大腸桿菌等細菌大腸桿菌等細菌中性中性放線菌放線菌偏堿性偏堿性酵母菌、霉菌酵母菌、霉菌微酸性微酸性 (1)在大腸桿菌培養(yǎng)過程中，除考慮在大腸桿

13、菌培養(yǎng)過程中，除考慮營養(yǎng)條件外，還要考慮營養(yǎng)條件外，還要考慮_、_和和滲透壓等條件。由于該細菌具有體積小、結滲透壓等條件。由于該細菌具有體積小、結構簡單、變異類型容易選擇、構簡單、變異類型容易選擇、_、_等優(yōu)點，因此常作為遺傳學研究的實等優(yōu)點，因此常作為遺傳學研究的實驗材料。驗材料。例例2(2)在微生物培養(yǎng)操作過程中，為防止雜菌在微生物培養(yǎng)操作過程中，為防止雜菌污染，需對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進行污染，需對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進行_(消毒、滅菌消毒、滅菌)；操作者的雙手需要進行清洗；操作者的雙手需要進行清洗和和_；靜止空氣中的細菌可用紫外線；靜止空氣中的細菌可用紫外線殺滅，其原因是紫外線能使蛋白質(zhì)變性，還殺

14、滅，其原因是紫外線能使蛋白質(zhì)變性，還能能_。(3)若用稀釋涂布平板法計數(shù)大腸桿菌活菌的若用稀釋涂布平板法計數(shù)大腸桿菌活菌的個數(shù)，要想使所得估計值更接近實際值，除個數(shù)，要想使所得估計值更接近實際值，除應嚴格操作、多次重復外，還應保證待測樣應嚴格操作、多次重復外，還應保證待測樣品稀釋的品稀釋的_。(4)通常，對獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的通常，對獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的形狀、大小等菌落特征對細菌進行初步的形狀、大小等菌落特征對細菌進行初步的_。(5)培養(yǎng)大腸桿菌時，在接種前需要檢測培養(yǎng)培養(yǎng)大腸桿菌時，在接種前需要檢測培養(yǎng)基是否被污染。對于固體培養(yǎng)基應采用的檢基是否被污染。對于固體培養(yǎng)基應采用的

15、檢測方法是測方法是_。(6)若用大腸桿菌進行實驗，使用過的培養(yǎng)基若用大腸桿菌進行實驗，使用過的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過_處理后才能丟棄處理后才能丟棄，以防止培養(yǎng)物的擴散，造成污染。，以防止培養(yǎng)物的擴散，造成污染?！窘馕鼋馕觥?1)大腸桿菌具有體積小、結構簡大腸桿菌具有體積小、結構簡單、變異類型容易選擇、易培養(yǎng)、生活周期單、變異類型容易選擇、易培養(yǎng)、生活周期短等優(yōu)點短等優(yōu)點,培養(yǎng)過程中，除考慮營養(yǎng)條件外，培養(yǎng)過程中，除考慮營養(yǎng)條件外，還要考慮溫度、酸堿度和滲透壓等條件。還要考慮溫度、酸堿度和滲透壓等條件。(2)滅菌是用強烈的理化因素殺死物體內(nèi)外滅菌是用強烈的理化因素殺死物體內(nèi)外

16、所有的微生物，所以對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿要進所有的微生物，所以對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿要進行滅菌；而消毒是用較為溫和的物理或化學行滅菌；而消毒是用較為溫和的物理或化學方法僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對人體有方法僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對人體有害的微生物，所以操作者的雙手需要進行清害的微生物，所以操作者的雙手需要進行清洗和消毒；紫外線能使蛋白質(zhì)變性，還能損洗和消毒；紫外線能使蛋白質(zhì)變性，還能損傷傷DNA的結構。的結構。(3)稀釋涂布平板法是將菌液進行一系列的梯稀釋涂布平板法是將菌液進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進行培養(yǎng)，應保到

17、瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進行培養(yǎng)，應保證樣品稀釋的比例合適。證樣品稀釋的比例合適。(4)對獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的形狀、對獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的形狀、大小等菌落特征對細菌進行初步的鑒定。大小等菌落特征對細菌進行初步的鑒定。(5)培養(yǎng)大腸桿菌時，在接種前需要檢測培養(yǎng)培養(yǎng)大腸桿菌時，在接種前需要檢測培養(yǎng)基是否被污染。對于固體培養(yǎng)基應采用的檢測基是否被污染。對于固體培養(yǎng)基應采用的檢測方法是將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置方法是將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生。適宜的時間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生。(6)因為有的大腸桿菌會釋放一種強烈的毒素因為有的大

18、腸桿菌會釋放一種強烈的毒素,并可能導致腸管出現(xiàn)嚴重癥狀，使用過的培養(yǎng)并可能導致腸管出現(xiàn)嚴重癥狀，使用過的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過滅菌處理后才能丟棄，基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過滅菌處理后才能丟棄，以防止培養(yǎng)物的擴散，造成污染。以防止培養(yǎng)物的擴散，造成污染?！敬鸢复鸢浮?1)溫度溫度酸堿度酸堿度易培養(yǎng)易培養(yǎng)生活生活周期短周期短(2)滅菌滅菌消毒消毒損傷損傷DNA的結構的結構(3)比例合適比例合適(4)鑒定鑒定(或分類或分類)(5)將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生宜的時間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生(6)滅菌滅菌互動探究互動探究大腸桿菌菌落在固體平板培養(yǎng)基上是什么形大腸桿菌菌落在固體平板培養(yǎng)基上是什么形狀？狀？【提示提示】菌落光滑、圓形菌落光滑、圓形,易與基質(zhì)脫離。易與基質(zhì)脫離。