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高中生物 專題2 課題1 微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)課件 新人教版選修1

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1、專題2課題1課前預(yù)習(xí)巧設(shè)計(jì)名師課堂一點(diǎn)通重點(diǎn)突破創(chuàng)新演練大沖關(guān)知識(shí)清單案例師說(shuō)課堂強(qiáng)化每課一練了解了解 培養(yǎng)基的種類、營(yíng)養(yǎng)要素、配制原則培養(yǎng)基的種類、營(yíng)養(yǎng)要素、配制原則理解理解 微生物培養(yǎng)過(guò)程中的無(wú)菌操作、接種微生物培養(yǎng)過(guò)程中的無(wú)菌操作、接種 操作要求操作要求無(wú)菌技術(shù)的操作無(wú)菌技術(shù)的操作 1概念概念 人們按照微生物對(duì)人們按照微生物對(duì) 的不同需求,配制出供其生的不同需求,配制出供其生長(zhǎng)繁殖的長(zhǎng)繁殖的 。 2種類種類(按照培養(yǎng)基的物理性質(zhì)劃分按照培養(yǎng)基的物理性質(zhì)劃分) (1)液體培養(yǎng)基:配制成的液體培養(yǎng)基:配制成的 狀態(tài)的基質(zhì)。狀態(tài)的基質(zhì)。 (2)固體培養(yǎng)基:配制成的固體培養(yǎng)基:配制成的 狀態(tài)的基

2、質(zhì),是實(shí)驗(yàn)室狀態(tài)的基質(zhì),是實(shí)驗(yàn)室中最常用的培養(yǎng)基之一,微生物在其上面生長(zhǎng),可形成肉眼中最常用的培養(yǎng)基之一,微生物在其上面生長(zhǎng),可形成肉眼可見(jiàn)的可見(jiàn)的 。營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)液體液體固體固體菌落菌落 3營(yíng)養(yǎng)要素營(yíng)養(yǎng)要素 各種培養(yǎng)基的具體配方不同,但一般都含有各種培養(yǎng)基的具體配方不同,但一般都含有 、 、 、 ,此外培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì),此外培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、 以及以及 的需求。的需求。水水碳源碳源氮源氮源無(wú)機(jī)鹽無(wú)機(jī)鹽特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)氧氣氧氣 二、無(wú)菌技術(shù)二、無(wú)菌技術(shù) 1避免雜菌污染的措施避免雜菌污染的措施 (1)對(duì)實(shí)驗(yàn)操作的空間、操作者的衣著和手進(jìn)行對(duì)

3、實(shí)驗(yàn)操作的空間、操作者的衣著和手進(jìn)行 和和 。 (2)將用于微生物培養(yǎng)的將用于微生物培養(yǎng)的 、 和和 等器具進(jìn)等器具進(jìn)行滅菌。行滅菌。 (3)為避免周?chē)h(huán)境中微生物的污染,實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在為避免周?chē)h(huán)境中微生物的污染,實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在 附近進(jìn)行。附近進(jìn)行。 (4)實(shí)驗(yàn)操作時(shí)應(yīng)避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與實(shí)驗(yàn)操作時(shí)應(yīng)避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與 相接觸。相接觸。 清潔清潔消毒消毒器皿器皿接種用具接種用具培養(yǎng)基培養(yǎng)基酒精燈酒精燈火焰火焰周?chē)奈镏車(chē)奈锲菲?2消毒和滅菌消毒和滅菌 (1)消毒:消毒: 概念:使用概念:使用 的物理或化學(xué)方法僅殺死物體表的物理或化學(xué)方法僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對(duì)人體面或內(nèi)部

4、一部分對(duì)人體 (不包括芽孢和孢子不包括芽孢和孢子)。 常用方法:常用方法: 消毒法、消毒法、 消毒法、消毒法、 消毒消毒法。法。 (2)滅菌:滅菌: 概念:使用概念:使用 的理化因素殺死的理化因素殺死 的微生的微生物物(包括芽孢和孢子包括芽孢和孢子)。 常用方法:常用方法: 滅菌、滅菌、 滅菌、滅菌、 滅菌。滅菌。較為溫和較為溫和有害的微生物有害的微生物煮沸煮沸巴氏巴氏化學(xué)藥品化學(xué)藥品強(qiáng)烈強(qiáng)烈物體內(nèi)外所有物體內(nèi)外所有灼燒灼燒干熱干熱高壓蒸汽高壓蒸汽 三、分離純化大腸桿菌的實(shí)驗(yàn)操作三、分離純化大腸桿菌的實(shí)驗(yàn)操作 1制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的一般步驟制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的一般步驟 計(jì)算計(jì)算

5、稱量稱量溶化溶化滅菌滅菌倒平板。倒平板。 2純化大腸桿菌純化大腸桿菌 微生物接種的最常用方法是微生物接種的最常用方法是 和和 。 (1)平板劃線法:通過(guò)接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面平板劃線法:通過(guò)接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面 的操作,將聚集的菌種逐步的操作,將聚集的菌種逐步 到培養(yǎng)基的表面。到培養(yǎng)基的表面。 (2)稀釋涂布平板法:將菌液進(jìn)行一系列的稀釋涂布平板法:將菌液進(jìn)行一系列的 ,然,然后將不同稀釋度的菌液分別后將不同稀釋度的菌液分別 到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面,到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面,進(jìn)行培養(yǎng)。進(jìn)行培養(yǎng)。平板劃線法平板劃線法稀釋涂布平板稀釋涂布平板法法連續(xù)連續(xù)劃線劃線稀釋分散稀釋分散梯度稀釋梯度

6、稀釋涂布涂布 3結(jié)果分析結(jié)果分析 (1)如果接種了大腸桿菌的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的菌落顏色、如果接種了大腸桿菌的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的菌落顏色、形狀、大小基本一致,說(shuō)明形狀、大小基本一致,說(shuō)明 操作符合要求。操作符合要求。 (2)若培養(yǎng)基上出現(xiàn)了其他菌落,則說(shuō)明接種過(guò)程中被若培養(yǎng)基上出現(xiàn)了其他菌落,則說(shuō)明接種過(guò)程中被 。 (3)未接種大腸桿菌的空白對(duì)照的培養(yǎng)基在培養(yǎng)過(guò)程中未接種大腸桿菌的空白對(duì)照的培養(yǎng)基在培養(yǎng)過(guò)程中若若 ,則說(shuō)明滅菌不徹底,實(shí)驗(yàn)失敗。,則說(shuō)明滅菌不徹底,實(shí)驗(yàn)失敗。接種接種雜菌污染雜菌污染長(zhǎng)出菌落長(zhǎng)出菌落 四、菌種保存四、菌種保存 1臨時(shí)保藏法臨時(shí)保藏法 適用于適用于 使用的菌種。使用的菌種。

7、(1)過(guò)程:過(guò)程: 將菌種接種到試管的將菌種接種到試管的 培養(yǎng)基上,合適溫度下培養(yǎng)基上,合適溫度下培養(yǎng)。培養(yǎng)。 保藏:菌落長(zhǎng)成后,放于保藏:菌落長(zhǎng)成后,放于 冰箱中。冰箱中。 轉(zhuǎn)移:每隔轉(zhuǎn)移:每隔36個(gè)月,將菌種從舊的培養(yǎng)基上轉(zhuǎn)移到個(gè)月,將菌種從舊的培養(yǎng)基上轉(zhuǎn)移到 的培養(yǎng)基上。的培養(yǎng)基上。 (2)缺點(diǎn):菌種容易被缺點(diǎn):菌種容易被 或產(chǎn)生或產(chǎn)生 。 2菌種的長(zhǎng)期保存菌種的長(zhǎng)期保存 對(duì)于需要長(zhǎng)期保存的菌種,可采用對(duì)于需要長(zhǎng)期保存的菌種,可采用 的方法。的方法。固體斜面固體斜面頻繁頻繁4新鮮新鮮污染污染變異變異甘油管藏甘油管藏 1讀教材讀教材P14基礎(chǔ)知識(shí)基礎(chǔ)知識(shí)培養(yǎng)基,歸納并回答下列問(wèn)題。培養(yǎng)基,

8、歸納并回答下列問(wèn)題。 (1)微生物營(yíng)養(yǎng)要素有哪些?碳源的主要來(lái)源有哪些?微生物營(yíng)養(yǎng)要素有哪些?碳源的主要來(lái)源有哪些? 提示:提示:各種培養(yǎng)基的具體配方不同,但一般都含有水、各種培養(yǎng)基的具體配方不同,但一般都含有水、碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽和生長(zhǎng)因子。碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽和生長(zhǎng)因子。 主要來(lái)源:無(wú)機(jī)化合物有主要來(lái)源:無(wú)機(jī)化合物有CO2、Na2CO3等;有機(jī)化合等;有機(jī)化合物有糖類、脂肪酸、花生餅、石油等。物有糖類、脂肪酸、花生餅、石油等。 (2)結(jié)合微生物物質(zhì)組成分析碳源、氮源、生長(zhǎng)因子結(jié)合微生物物質(zhì)組成分析碳源、氮源、生長(zhǎng)因子在微生物體內(nèi)有哪些作用?在微生物體內(nèi)有哪些作用?(完成下表完成下表)2讀教材

9、讀教材P15無(wú)菌技術(shù)無(wú)菌技術(shù)的相關(guān)內(nèi)容,歸納并回答下列問(wèn)題:的相關(guān)內(nèi)容,歸納并回答下列問(wèn)題:(1)實(shí)驗(yàn)室常用的消毒、滅菌方法有哪些?實(shí)驗(yàn)室常用的消毒、滅菌方法有哪些?提示:提示:消毒消毒滅菌滅菌具體方法具體方法煮沸消毒法、巴氏消毒煮沸消毒法、巴氏消毒法、化學(xué)藥物消毒法法、化學(xué)藥物消毒法灼燒滅菌、干熱滅菌、高灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌壓蒸汽滅菌 (2)試從消毒、滅菌的條件和結(jié)果方面進(jìn)行比較分析試從消毒、滅菌的條件和結(jié)果方面進(jìn)行比較分析二者的區(qū)別并填寫(xiě)下表。二者的區(qū)別并填寫(xiě)下表。 3讀教材讀教材P16實(shí)驗(yàn)操作實(shí)驗(yàn)操作制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基相關(guān)內(nèi)容,思考并討論下列

10、問(wèn)題:相關(guān)內(nèi)容,思考并討論下列問(wèn)題: (1)分析配制培養(yǎng)基之前,對(duì)所需要的各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)要計(jì)分析配制培養(yǎng)基之前,對(duì)所需要的各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)要計(jì)算稱量的原因。算稱量的原因。 提示:提示:保證培養(yǎng)基中的各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)比例協(xié)調(diào),有利于保證培養(yǎng)基中的各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)比例協(xié)調(diào),有利于微生物的生長(zhǎng)。微生物的生長(zhǎng)。 (2)在配制培養(yǎng)基時(shí),各組分溶化后是否立即進(jìn)行滅菌?在配制培養(yǎng)基時(shí),各組分溶化后是否立即進(jìn)行滅菌?為什么?為什么? 提示:提示:配制的培養(yǎng)基除滿足微生物的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)需求外,配制的培養(yǎng)基除滿足微生物的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)需求外,還需滿足微生物對(duì)還需滿足微生物對(duì)pH、氧氣等的要求,所以培養(yǎng)基各組分溶、氧氣等的要求,所以培養(yǎng)基

11、各組分溶化后需調(diào)化后需調(diào)pH后再進(jìn)行滅菌。后再進(jìn)行滅菌。 (3)倒平板時(shí),應(yīng)注意哪些問(wèn)題?倒平板時(shí),應(yīng)注意哪些問(wèn)題? 提示:提示:培養(yǎng)基滅菌后,需冷卻至培養(yǎng)基滅菌后,需冷卻至50左右時(shí)才能倒左右時(shí)才能倒平板;平板;整個(gè)操作在酒精燈火焰旁進(jìn)行;整個(gè)操作在酒精燈火焰旁進(jìn)行;倒平板時(shí),培倒平板時(shí),培養(yǎng)基若濺到培養(yǎng)皿蓋和皿底之間的部位,該平板應(yīng)丟棄;養(yǎng)基若濺到培養(yǎng)皿蓋和皿底之間的部位,該平板應(yīng)丟棄;平板冷凝后要倒置。平板冷凝后要倒置。 (4)平板劃線操作時(shí),需要對(duì)接種環(huán)灼燒滅菌,填表比較平板劃線操作時(shí),需要對(duì)接種環(huán)灼燒滅菌,填表比較下列灼燒滅菌的目的。下列灼燒滅菌的目的。 4讀教材讀教材P20結(jié)果分析

12、與評(píng)價(jià)結(jié)果分析與評(píng)價(jià)內(nèi)容,根據(jù)你自己的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容,根據(jù)你自己的實(shí)驗(yàn)操作,分析交流下列問(wèn)題:操作,分析交流下列問(wèn)題: (1)如何判斷培養(yǎng)基的制作是否合格?如何判斷培養(yǎng)基的制作是否合格? 提示:提示:將未接種的培養(yǎng)基在恒溫箱中保溫將未接種的培養(yǎng)基在恒溫箱中保溫12 d,無(wú)菌落,無(wú)菌落生長(zhǎng),說(shuō)明培養(yǎng)基制備成功。生長(zhǎng),說(shuō)明培養(yǎng)基制備成功。 (2)如何判斷接種操作是否符合無(wú)菌要求?如何判斷接種操作是否符合無(wú)菌要求? 提示:提示:根據(jù)培養(yǎng)基上生長(zhǎng)出的菌落的顏色、形狀、大小根據(jù)培養(yǎng)基上生長(zhǎng)出的菌落的顏色、形狀、大小等特征判斷,若菌落特征符合大腸桿菌的特點(diǎn),則說(shuō)明接種等特征判斷,若菌落特征符合大腸桿菌的特點(diǎn),則

13、說(shuō)明接種操作符合要求,若培養(yǎng)基上出現(xiàn)了其他菌落,則說(shuō)明接種過(guò)操作符合要求,若培養(yǎng)基上出現(xiàn)了其他菌落,則說(shuō)明接種過(guò)程中,無(wú)菌操作未達(dá)到要求。程中,無(wú)菌操作未達(dá)到要求。 某小組同學(xué)為了調(diào)查湖水中細(xì)菌的污染情況而進(jìn)某小組同學(xué)為了調(diào)查湖水中細(xì)菌的污染情況而進(jìn)行了實(shí)驗(yàn),實(shí)驗(yàn)包括制備培養(yǎng)基、滅菌、接種及培養(yǎng)、菌落行了實(shí)驗(yàn),實(shí)驗(yàn)包括制備培養(yǎng)基、滅菌、接種及培養(yǎng)、菌落觀察計(jì)數(shù)。請(qǐng)回答與此實(shí)驗(yàn)相關(guān)的問(wèn)題。觀察計(jì)數(shù)。請(qǐng)回答與此實(shí)驗(yàn)相關(guān)的問(wèn)題。 (1)培養(yǎng)基中含有的蛋白胨、淀粉分別為細(xì)菌培養(yǎng)提供培養(yǎng)基中含有的蛋白胨、淀粉分別為細(xì)菌培養(yǎng)提供了了_和和_。除此之外,培養(yǎng)基還必須含有的基。除此之外,培養(yǎng)基還必須含有的基本

14、成分是本成分是_和和_。 (2)對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌,應(yīng)該采用的方法是對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌,應(yīng)該采用的方法是_。 (3)為了盡快觀察到細(xì)菌培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,應(yīng)將接種了湖水為了盡快觀察到細(xì)菌培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,應(yīng)將接種了湖水樣品的平板置于樣品的平板置于_中培養(yǎng),培養(yǎng)的溫度設(shè)定在中培養(yǎng),培養(yǎng)的溫度設(shè)定在37。要。要使該實(shí)驗(yàn)所得結(jié)果可靠,還應(yīng)該同時(shí)在另一平板上接種使該實(shí)驗(yàn)所得結(jié)果可靠,還應(yīng)該同時(shí)在另一平板上接種_作為對(duì)照實(shí)驗(yàn)。作為對(duì)照實(shí)驗(yàn)。 (4)培養(yǎng)培養(yǎng)20小時(shí)后,觀察到平板上有形態(tài)和顏色不同的菌落,小時(shí)后,觀察到平板上有形態(tài)和顏色不同的菌落,這說(shuō)明湖水樣品中有這說(shuō)明湖水樣品中有_種細(xì)菌。一般說(shuō)來(lái),菌落總種細(xì)菌

15、。一般說(shuō)來(lái),菌落總數(shù)越多,湖水遭受細(xì)菌污染的程度越數(shù)越多,湖水遭受細(xì)菌污染的程度越_。 (5)如果提高培養(yǎng)基中如果提高培養(yǎng)基中NaCl的濃度,可以用于篩選耐的濃度,可以用于篩選耐_細(xì)菌,這種培養(yǎng)基被稱為細(xì)菌,這種培養(yǎng)基被稱為_(kāi)。 解析解析(1)蛋白胨可提供碳源、氮源、維生素,而淀粉可蛋白胨可提供碳源、氮源、維生素,而淀粉可提供碳源,除此之外,微生物的生長(zhǎng)還需無(wú)機(jī)鹽和水。提供碳源,除此之外,微生物的生長(zhǎng)還需無(wú)機(jī)鹽和水。 (2)對(duì)培養(yǎng)基的滅菌,在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)常用高壓蒸汽滅菌法。對(duì)培養(yǎng)基的滅菌,在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)常用高壓蒸汽滅菌法。 (3)在實(shí)驗(yàn)的過(guò)程中,除實(shí)驗(yàn)變量以外其他各變量均應(yīng)適宜在實(shí)驗(yàn)的過(guò)程中,除實(shí)驗(yàn)變

16、量以外其他各變量均應(yīng)適宜且相同,以利于更好的實(shí)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹G蚁嗤?,以利于更好的?shí)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?(4)不同的菌落具有各自的菌落特征不同的菌落具有各自的菌落特征(如硬度、顏色、透明如硬度、顏色、透明度、光滑度等度、光滑度等)。 (5)培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì),以抑制不需要的微生物的培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì),以抑制不需要的微生物的生長(zhǎng),促進(jìn)所需要的微生物的生長(zhǎng),稱為選擇培養(yǎng)基,可以培生長(zhǎng),促進(jìn)所需要的微生物的生長(zhǎng),稱為選擇培養(yǎng)基,可以培養(yǎng)、分離出特定微生物。養(yǎng)、分離出特定微生物。 答案答案(1)氮源氮源(碳源不作要求碳源不作要求)碳源無(wú)機(jī)鹽水碳源無(wú)機(jī)鹽水(2)高壓蒸汽滅菌高壓蒸汽滅菌(3)恒溫培養(yǎng)箱

17、無(wú)菌水恒溫培養(yǎng)箱無(wú)菌水(4)多高多高(5)鹽鹽(或或NaCl)選擇培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基微生物的培養(yǎng)和應(yīng)用相關(guān)題目的解題策略微生物的培養(yǎng)和應(yīng)用相關(guān)題目的解題策略 對(duì)于有關(guān)微生物的培養(yǎng)和應(yīng)用的題目,在解答時(shí)應(yīng)注意對(duì)于有關(guān)微生物的培養(yǎng)和應(yīng)用的題目,在解答時(shí)應(yīng)注意從以下幾個(gè)方面把握:從以下幾個(gè)方面把握: (1)培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)構(gòu)成,包括碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽和水以培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)構(gòu)成,包括碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽和水以及生長(zhǎng)因子,其中各種成分由哪種有機(jī)物提供應(yīng)根據(jù)其化學(xué)及生長(zhǎng)因子,其中各種成分由哪種有機(jī)物提供應(yīng)根據(jù)其化學(xué)元素組成來(lái)推斷。元素組成來(lái)推斷。 (2)無(wú)菌操作技術(shù),區(qū)別消毒和滅菌,以及各自常用的方無(wú)菌操作技術(shù),區(qū)別

18、消毒和滅菌,以及各自常用的方法和優(yōu)點(diǎn)。法和優(yōu)點(diǎn)。 (3)在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,必須設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn),明確設(shè)置對(duì)照的在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,必須設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn),明確設(shè)置對(duì)照的方法。方法。 培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、實(shí)驗(yàn)操作者的雙手、培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、實(shí)驗(yàn)操作者的雙手、空氣、牛奶所采用的滅菌、消毒方法依次是空氣、牛奶所采用的滅菌、消毒方法依次是()化學(xué)消毒化學(xué)消毒灼燒滅菌灼燒滅菌干熱滅菌干熱滅菌紫外線消毒紫外線消毒高壓蒸汽滅菌高壓蒸汽滅菌巴氏消毒法巴氏消毒法ABC D 解析解析培養(yǎng)基用高壓蒸汽滅菌;培養(yǎng)皿能耐高溫,需培養(yǎng)基用高壓蒸汽滅菌;培養(yǎng)皿能耐高溫,需用干熱滅菌;接種環(huán)可用灼燒滅菌達(dá)到迅速?gòu)氐椎臏缇Ч挥酶蔁釡缇?;接種環(huán)可用灼燒滅菌達(dá)到迅速?gòu)氐椎臏缇Ч粚?shí)驗(yàn)操作者的雙手可用化學(xué)藥劑進(jìn)行消毒,如用酒精擦拭雙實(shí)驗(yàn)操作者的雙手可用化學(xué)藥劑進(jìn)行消毒,如用酒精擦拭雙手;空氣可用紫外線消毒;牛奶為不破壞其營(yíng)養(yǎng)成分可采用手;空氣可用紫外線消毒;牛奶為不破壞其營(yíng)養(yǎng)成分可采用巴氏消毒法。答案為巴氏消毒法。答案為A。 答案答案A

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