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1、
流感嗜血桿菌可引起人類(lèi)各種感染, 包括常見(jiàn)的眼結(jié)膜炎,中耳炎,上呼吸道感染,它們多
由非 b 型株引起。而嚴(yán)重感染,如腦膜炎,會(huì)厭炎、心包炎,肺炎,關(guān)節(jié)炎,骨髓炎,菌
血癥,面部蜂窩組織炎,多由
b 型株引起。 5 歲以下為高發(fā)年齡,最常見(jiàn)于
6~8 個(gè)月的嬰
幼兒,但也可見(jiàn)于成人及老年人
[ 1] 。在美國(guó)自從 1985 年將流感嗜血桿菌的
b 型抗原化學(xué)
疫苗加入兒童免疫計(jì)劃后,
b 型株引起的疾病發(fā)病率有所下降,
1987 年起多種多糖疫苗與
白喉類(lèi)毒素或破傷風(fēng)類(lèi)毒素結(jié)合,被推薦給
18 個(gè)月以下兒童的免疫計(jì)劃,
b 型株感染率急
2、
劇地下降,減少了 95% [ 2, 3] 。為了解我國(guó)流感嗜血桿菌的分離率及藥敏譜,我們?cè)诒本?
廣州、上海三地區(qū)組織了
10
家教學(xué)醫(yī)院進(jìn)行了調(diào)查, 并對(duì)其結(jié)果進(jìn)行了分析, 現(xiàn)報(bào)告如下。
材料與方法
一、菌株來(lái)源
從門(mén)診急診呼吸道感染患者的痰及咽拭子標(biāo)本進(jìn)行流感嗜血桿菌的分離鑒定及藥
物敏感試驗(yàn),共獲得流感嗜血桿菌
319 株。
二、菌株分離鑒定方法
( 一 ) 分離用培養(yǎng)基 1 立升蒸餾水加 40 克胰消化大豆瓊脂粉 (Oxoid) , 115°C15
分鐘蒸汽滅菌,冷卻至 80℃后,加
3、脫纖維羊血至 5% 濃度,維持 15 分鐘,再冷至 50℃~
55 ℃,加溶于水中的 15 毫克的輔酶 I(NAD) 和 300 毫克桿菌肽,立即傾倒平皿, 4℃保存。
( 二 ) 藥敏用培養(yǎng)基 1 升蒸餾水加嗜血桿菌試驗(yàn)用培養(yǎng)基瓊脂粉 (HTM ,Oxoid)8.6
克, 115 ℃ 15 分鐘蒸氣滅菌,將 2 整瓶生長(zhǎng)因子 (Hematin, Oxoid) 用 4ml 無(wú)菌水充分溶解
后, 55℃下無(wú)菌加入,立即定量?jī)A倒平皿至 4mm 厚, 4℃保存。
(三) 鑒定培養(yǎng)基 同分離用培養(yǎng)基,不加桿菌肽。
( 四 ) 分離鑒定
4、步驟 將痰及咽拭子標(biāo)本按常規(guī)方法種入分離培養(yǎng)基內(nèi), 36℃下?tīng)T
缸內(nèi)培養(yǎng)過(guò)夜,挑選 4 ~ 6 個(gè)可疑菌落移種至鑒定培養(yǎng)基及 Mueller Hinton (M-H, Oxoid) 培
養(yǎng)基上作衛(wèi)星試驗(yàn)。在 M-H 培養(yǎng)基上貼 X+V 因子, X 因子, V 因子紙片。只在血平皿上衛(wèi)
星試驗(yàn)陽(yáng)性、在 M-H 平皿上衛(wèi)星試驗(yàn)陰性;以及只在 X+V 因子紙片周?chē)L(zhǎng)、 X 因子, V
因子紙片周?chē)簧L(zhǎng)的菌落可判定為流感嗜血桿菌,并進(jìn)行以下試驗(yàn):
1. 頭孢硝噻酚試驗(yàn) (Nitrocefin,Oxoid) 檢測(cè) β-內(nèi)酰胺酶。
2. 流感嗜血
5、桿菌 b 型抗原乳膠凝集試驗(yàn) (bio Merieux Co.) 檢測(cè) b 型株 (Hib) ,流感
嗜血桿菌 b 型株送協(xié)和醫(yī)院再檢驗(yàn)。
3. 在 HTM 平皿上作 8 種抗生素的紙片擴(kuò)散法藥敏試驗(yàn)。
三、藥敏試驗(yàn)
藥敏試驗(yàn)采用 NCCLS 規(guī)定的紙片瓊脂擴(kuò)散法,按 NCCLS 的判定標(biāo)準(zhǔn)測(cè)量抑菌圈直徑及判定耐藥及敏感 (表 1) 。
四、質(zhì)量控制
用 ATCC 49766 監(jiān)測(cè)頭孢克羅的活性,用大腸桿菌 ATCC 25923 監(jiān)測(cè)其他 7 種藥
的活性, NCCLS 規(guī)定 ATCC 497
6、66 對(duì)頭孢克羅的抑菌范圍為 25~ 31mm ,本資料中各醫(yī)院所測(cè)值為 25~ 31mm ,平均為 28.4mm 。大腸肝菌 ATCC 25922 對(duì)其余抗生素的抑菌大小也在規(guī)定范圍內(nèi)。
五、電腦分析
各醫(yī)院的原始數(shù)據(jù)均送至協(xié)和醫(yī)
院,統(tǒng)一輸入電腦中,用 WHONET-3
軟件進(jìn)行分析。
結(jié) 果
一、各醫(yī)院分離流感嗜血桿菌株數(shù)及咽試子標(biāo)本和痰標(biāo)本分離陽(yáng)性率
見(jiàn)表 2。
二、北京廣州兩地區(qū)流感嗜血桿菌的生物學(xué)特點(diǎn)
見(jiàn)表 3。由于分離菌株數(shù)少,不能判定三地區(qū) b 型株及產(chǎn)
7、 β-內(nèi)酰胺酶株有多大差
別,但三地區(qū) b 型株分離株占 5.9% ,產(chǎn) β-內(nèi)酰胺酶株占 4.7% 。
三、 8 種抗生素對(duì)流感嗜血桿菌的敏感性
見(jiàn)表 4。表 4 中結(jié)果證實(shí):北京地區(qū)的流感嗜血桿菌對(duì)頭孢克羅、頭孢呋辛、環(huán)
丙沙星、多西環(huán)素,都是非常敏感的,敏感率分別為 99% 、 99% 、 98% 、 95% 。而且對(duì)氨
芐青霉素也很敏感 (92%) ,氯霉素的敏感率為 87% ,紅霉素及復(fù)方新諾明則較差。廣州地
區(qū)除了對(duì)頭孢克羅及頭孢呋肟高度敏感外,其它六種抗生素的敏感率從 79% 至 3% 。上海
地區(qū)與北京相似,但前者對(duì)氨芐
8、青霉素的敏感率為 59% 。
表 1 對(duì)流感嗜血桿菌的抑菌圈判定值 (NCCLS 規(guī)定 )
劑量
抑菌圈直徑 (mm)
藥 名
R
I
S
( μg)
氨芐西林
10
≤18
19~21
≥22
頭孢克羅
30
≤16
17~19
≥20
頭孢呋辛
30
≤16
17~19
≥
環(huán)丙沙星
5
≤20
≥21
紅霉素
15
≤13
14~ 22
≥23
多西環(huán)素
30
≤12
13~ 15
≥16
氯霉素
30
≤25
9、
26~ 28
≥29
TMP/SMZ
1.25/23.75
≤ 10
11~ 15
≥ 16
表 2
流感嗜血桿菌的分離情況
醫(yī)
院
例
數(shù)
分離株數(shù)
分
離
率(%)
咽拭
痰
北京協(xié)和醫(yī)院
249
50
20.1
-
北京醫(yī)院
400
38
9.5
-
北京友誼醫(yī)院
371
36
9.7
-
北京解放軍總院
213
26
12.2
-
北京朝陽(yáng)紅十字醫(yī)院
309
38
12.3
-
北京中日
10、友好醫(yī)院
177
36
20.4
-
廣州醫(yī)院
60+107
31
41.5
5.6
中山醫(yī)院
127+93
30
19.7
5.4
注: -為未作
表 4
319 株流感嗜血桿菌對(duì)
8 種抗生素的敏感率
抗生素
北京 (224)
上海 (34)
廣州 (61)
合計(jì) (285)
I%
S%
I%
S%
I%
S%
I%
S%
氨芐西林
3
92
12
59
10
75
5
88
頭孢克羅
1
99
0
9
11、7
7
93
2
98
頭孢呋肟
1
99
6
88
2
98
1
99
環(huán)丙沙星
0
98
0
94
0
79
0
表 3 流感嗜血桿菌中的 b 型株及
產(chǎn) β-內(nèi)酰胺酶株的分離率
b 型
產(chǎn) β-內(nèi)
地區(qū)
菌株數(shù)
(%)
酰胺酶 (%)
北京
224
4(1.8)
9(4.0)
廣州
61
4(6.5)
6(9.8)
上海
34
11(32.3)
NR
合計(jì)
319
19(5.9)
15(4.7)
討 論
12、
本資料中的我國(guó)三大城市的流感嗜血桿菌大多數(shù)來(lái)自門(mén)急診的上呼吸道感染的輕
癥患者;尤以兒童為多。 b 型株及產(chǎn) β-內(nèi)酰胺酶株的檢出率分別為 2.8% 及 5.3% 。
流感嗜血桿菌對(duì)口服的頭孢克羅及頭孢呋肟很敏感,用散點(diǎn)圖配對(duì)比較二者相關(guān)
性很好, 這是因?yàn)槎咦饔脵C(jī)制相同所致。 說(shuō)明都是治療中輕癥流感嗜血桿菌感染的合適的藥。
所有耐氨芐西林的菌株,不論廣州,上?;虮本┏焕舛紝?duì)頭孢克羅及頭孢呋肟敏感,本例 β- 內(nèi)酰胺酶陰性,卻對(duì)氨芐西林耐藥,估計(jì)是染色體介導(dǎo)的耐藥性所致。
13、
古希臘哲學(xué)大師亞里士多德說(shuō): 人有兩種,一種即
“吃飯是為了活著
”,一種是 “活著是為了吃飯
14、
”一.個(gè)人之所以偉大,首先是因?yàn)樗谐诔H说男摹?
“志當(dāng)存高遠(yuǎn) ”,風(fēng)“物長(zhǎng)宜放眼量
”,這些古語(yǔ)
皆鼓舞人們要樹(shù)立雄心壯志,要有遠(yuǎn)大的理想。
有一位心理學(xué)家到一個(gè)建筑工地,分別問(wèn)三個(gè)正在砌磚的工人: “你在干什
15、么? ”
第一個(gè)工人懶洋洋地說(shuō): “我在砌磚。 ” 第二個(gè)工人缺乏熱情地說(shuō): “我在砌一堵墻。 ”第三個(gè)工人滿懷憧憬地說(shuō): “我在建一座高樓! ”
聽(tīng)完回答,心理學(xué)家判定: 第一個(gè)人心中只有磚,他一輩子能把磚砌好就不錯(cuò)了;第二個(gè)人眼中只有墻,好好干或許能當(dāng)一位技術(shù)員;而第三個(gè)人心中已經(jīng)立起了一座殿堂,因?yàn)樗膽B(tài)
樂(lè)觀,胸懷遠(yuǎn)大的志向!
井底之蛙,只能看到巴掌大的天空;摸到大象腿的盲人,只能認(rèn)為大象長(zhǎng)得像柱子;登上五岳的人,才能感覺(jué) “一覽眾山小 ”;看到大海的人,就會(huì)頓感心胸開(kāi)闊舒暢;
心中沒(méi)有希望的人,是世界上最貧窮的人;心中沒(méi)有夢(mèng)想的人,是普天下最平庸的人;目光短淺的人,是最沒(méi)有希望的人。
清代 “紅頂商人 ”胡雪巖說(shuō): “做生意頂要緊的是眼光,看得到一省,就能做一省的生意;看得到天下,就能做天下的生意;看得到外國(guó),就能做外國(guó)的生意。
決定了他志向的短淺或高遠(yuǎn);一個(gè)人的希望和夢(mèng)想,決定了他的人生暗淡或輝煌。
”可見(jiàn),一個(gè)人的心胸和眼光,