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北京上海廣州地區(qū)的流感嗜血桿菌分離及藥敏試驗(yàn)

上傳人:澤*** 文檔編號(hào):77638621 上傳時(shí)間:2022-04-20 格式:DOC 頁(yè)數(shù):5 大?。?26KB
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1、 流感嗜血桿菌可引起人類(lèi)各種感染, 包括常見(jiàn)的眼結(jié)膜炎,中耳炎,上呼吸道感染,它們多 由非 b 型株引起。而嚴(yán)重感染,如腦膜炎,會(huì)厭炎、心包炎,肺炎,關(guān)節(jié)炎,骨髓炎,菌 血癥,面部蜂窩組織炎,多由 b 型株引起。 5 歲以下為高發(fā)年齡,最常見(jiàn)于 6~8 個(gè)月的嬰 幼兒,但也可見(jiàn)于成人及老年人 [ 1] 。在美國(guó)自從 1985 年將流感嗜血桿菌的 b 型抗原化學(xué) 疫苗加入兒童免疫計(jì)劃后, b 型株引起的疾病發(fā)病率有所下降, 1987 年起多種多糖疫苗與 白喉類(lèi)毒素或破傷風(fēng)類(lèi)毒素結(jié)合,被推薦給 18 個(gè)月以下兒童的免疫計(jì)劃, b 型株感染率急

2、 劇地下降,減少了 95% [ 2, 3] 。為了解我國(guó)流感嗜血桿菌的分離率及藥敏譜,我們?cè)诒本? 廣州、上海三地區(qū)組織了 10 家教學(xué)醫(yī)院進(jìn)行了調(diào)查, 并對(duì)其結(jié)果進(jìn)行了分析, 現(xiàn)報(bào)告如下。 材料與方法 一、菌株來(lái)源 從門(mén)診急診呼吸道感染患者的痰及咽拭子標(biāo)本進(jìn)行流感嗜血桿菌的分離鑒定及藥 物敏感試驗(yàn),共獲得流感嗜血桿菌 319 株。 二、菌株分離鑒定方法 ( 一 ) 分離用培養(yǎng)基 1 立升蒸餾水加 40 克胰消化大豆瓊脂粉 (Oxoid) , 115°C15 分鐘蒸汽滅菌,冷卻至 80℃后,加

3、脫纖維羊血至 5% 濃度,維持 15 分鐘,再冷至 50℃~ 55 ℃,加溶于水中的 15 毫克的輔酶 I(NAD) 和 300 毫克桿菌肽,立即傾倒平皿, 4℃保存。 ( 二 ) 藥敏用培養(yǎng)基 1 升蒸餾水加嗜血桿菌試驗(yàn)用培養(yǎng)基瓊脂粉 (HTM ,Oxoid)8.6 克, 115 ℃ 15 分鐘蒸氣滅菌,將 2 整瓶生長(zhǎng)因子 (Hematin, Oxoid) 用 4ml 無(wú)菌水充分溶解 后, 55℃下無(wú)菌加入,立即定量?jī)A倒平皿至 4mm 厚, 4℃保存。 (三) 鑒定培養(yǎng)基 同分離用培養(yǎng)基,不加桿菌肽。 ( 四 ) 分離鑒定

4、步驟 將痰及咽拭子標(biāo)本按常規(guī)方法種入分離培養(yǎng)基內(nèi), 36℃下?tīng)T 缸內(nèi)培養(yǎng)過(guò)夜,挑選 4 ~ 6 個(gè)可疑菌落移種至鑒定培養(yǎng)基及 Mueller Hinton (M-H, Oxoid) 培 養(yǎng)基上作衛(wèi)星試驗(yàn)。在 M-H 培養(yǎng)基上貼 X+V 因子, X 因子, V 因子紙片。只在血平皿上衛(wèi) 星試驗(yàn)陽(yáng)性、在 M-H 平皿上衛(wèi)星試驗(yàn)陰性;以及只在 X+V 因子紙片周?chē)L(zhǎng)、 X 因子, V 因子紙片周?chē)簧L(zhǎng)的菌落可判定為流感嗜血桿菌,并進(jìn)行以下試驗(yàn): 1. 頭孢硝噻酚試驗(yàn) (Nitrocefin,Oxoid) 檢測(cè) β-內(nèi)酰胺酶。 2. 流感嗜血

5、桿菌 b 型抗原乳膠凝集試驗(yàn) (bio Merieux Co.) 檢測(cè) b 型株 (Hib) ,流感 嗜血桿菌 b 型株送協(xié)和醫(yī)院再檢驗(yàn)。 3. 在 HTM 平皿上作 8 種抗生素的紙片擴(kuò)散法藥敏試驗(yàn)。 三、藥敏試驗(yàn) 藥敏試驗(yàn)采用 NCCLS 規(guī)定的紙片瓊脂擴(kuò)散法,按 NCCLS 的判定標(biāo)準(zhǔn)測(cè)量抑菌圈直徑及判定耐藥及敏感 (表 1) 。 四、質(zhì)量控制 用 ATCC 49766 監(jiān)測(cè)頭孢克羅的活性,用大腸桿菌 ATCC 25923 監(jiān)測(cè)其他 7 種藥 的活性, NCCLS 規(guī)定 ATCC 497

6、66 對(duì)頭孢克羅的抑菌范圍為 25~ 31mm ,本資料中各醫(yī)院所測(cè)值為 25~ 31mm ,平均為 28.4mm 。大腸肝菌 ATCC 25922 對(duì)其余抗生素的抑菌大小也在規(guī)定范圍內(nèi)。 五、電腦分析 各醫(yī)院的原始數(shù)據(jù)均送至協(xié)和醫(yī) 院,統(tǒng)一輸入電腦中,用 WHONET-3 軟件進(jìn)行分析。 結(jié) 果 一、各醫(yī)院分離流感嗜血桿菌株數(shù)及咽試子標(biāo)本和痰標(biāo)本分離陽(yáng)性率 見(jiàn)表 2。 二、北京廣州兩地區(qū)流感嗜血桿菌的生物學(xué)特點(diǎn) 見(jiàn)表 3。由于分離菌株數(shù)少,不能判定三地區(qū) b 型株及產(chǎn)

7、 β-內(nèi)酰胺酶株有多大差 別,但三地區(qū) b 型株分離株占 5.9% ,產(chǎn) β-內(nèi)酰胺酶株占 4.7% 。 三、 8 種抗生素對(duì)流感嗜血桿菌的敏感性 見(jiàn)表 4。表 4 中結(jié)果證實(shí):北京地區(qū)的流感嗜血桿菌對(duì)頭孢克羅、頭孢呋辛、環(huán) 丙沙星、多西環(huán)素,都是非常敏感的,敏感率分別為 99% 、 99% 、 98% 、 95% 。而且對(duì)氨 芐青霉素也很敏感 (92%) ,氯霉素的敏感率為 87% ,紅霉素及復(fù)方新諾明則較差。廣州地 區(qū)除了對(duì)頭孢克羅及頭孢呋肟高度敏感外,其它六種抗生素的敏感率從 79% 至 3% 。上海 地區(qū)與北京相似,但前者對(duì)氨芐

8、青霉素的敏感率為 59% 。 表 1 對(duì)流感嗜血桿菌的抑菌圈判定值 (NCCLS 規(guī)定 ) 劑量 抑菌圈直徑 (mm) 藥 名 R I S ( μg) 氨芐西林 10 ≤18 19~21 ≥22 頭孢克羅 30 ≤16 17~19 ≥20 頭孢呋辛 30 ≤16 17~19 ≥ 環(huán)丙沙星 5 ≤20 ≥21 紅霉素 15 ≤13 14~ 22 ≥23 多西環(huán)素 30 ≤12 13~ 15 ≥16 氯霉素 30 ≤25

9、 26~ 28 ≥29 TMP/SMZ 1.25/23.75 ≤ 10 11~ 15 ≥ 16 表 2 流感嗜血桿菌的分離情況 醫(yī) 院 例 數(shù) 分離株數(shù) 分 離 率(%) 咽拭 痰 北京協(xié)和醫(yī)院 249 50 20.1 - 北京醫(yī)院 400 38 9.5 - 北京友誼醫(yī)院 371 36 9.7 - 北京解放軍總院 213 26 12.2 - 北京朝陽(yáng)紅十字醫(yī)院 309 38 12.3 - 北京中日

10、友好醫(yī)院 177 36 20.4 - 廣州醫(yī)院 60+107 31 41.5 5.6 中山醫(yī)院 127+93 30 19.7 5.4 注: -為未作 表 4 319 株流感嗜血桿菌對(duì) 8 種抗生素的敏感率 抗生素 北京 (224) 上海 (34) 廣州 (61) 合計(jì) (285) I% S% I% S% I% S% I% S% 氨芐西林 3 92 12 59 10 75 5 88 頭孢克羅 1 99 0 9

11、7 7 93 2 98 頭孢呋肟 1 99 6 88 2 98 1 99 環(huán)丙沙星 0 98 0 94 0 79 0 表 3 流感嗜血桿菌中的 b 型株及 產(chǎn) β-內(nèi)酰胺酶株的分離率 b 型 產(chǎn) β-內(nèi) 地區(qū) 菌株數(shù) (%) 酰胺酶 (%) 北京 224 4(1.8) 9(4.0) 廣州 61 4(6.5) 6(9.8) 上海 34 11(32.3) NR 合計(jì) 319 19(5.9) 15(4.7) 討 論

12、 本資料中的我國(guó)三大城市的流感嗜血桿菌大多數(shù)來(lái)自門(mén)急診的上呼吸道感染的輕 癥患者;尤以兒童為多。 b 型株及產(chǎn) β-內(nèi)酰胺酶株的檢出率分別為 2.8% 及 5.3% 。 流感嗜血桿菌對(duì)口服的頭孢克羅及頭孢呋肟很敏感,用散點(diǎn)圖配對(duì)比較二者相關(guān) 性很好, 這是因?yàn)槎咦饔脵C(jī)制相同所致。 說(shuō)明都是治療中輕癥流感嗜血桿菌感染的合適的藥。 所有耐氨芐西林的菌株,不論廣州,上?;虮本┏焕舛紝?duì)頭孢克羅及頭孢呋肟敏感,本例 β- 內(nèi)酰胺酶陰性,卻對(duì)氨芐西林耐藥,估計(jì)是染色體介導(dǎo)的耐藥性所致。

13、 古希臘哲學(xué)大師亞里士多德說(shuō): 人有兩種,一種即  “吃飯是為了活著  ”,一種是 “活著是為了吃飯 

14、 ”一.個(gè)人之所以偉大,首先是因?yàn)樗谐诔H说男摹?  “志當(dāng)存高遠(yuǎn) ”,風(fēng)“物長(zhǎng)宜放眼量  ”,這些古語(yǔ) 皆鼓舞人們要樹(shù)立雄心壯志,要有遠(yuǎn)大的理想。 有一位心理學(xué)家到一個(gè)建筑工地,分別問(wèn)三個(gè)正在砌磚的工人: “你在干什

15、么? ” 第一個(gè)工人懶洋洋地說(shuō): “我在砌磚。 ” 第二個(gè)工人缺乏熱情地說(shuō): “我在砌一堵墻。 ”第三個(gè)工人滿懷憧憬地說(shuō): “我在建一座高樓! ” 聽(tīng)完回答,心理學(xué)家判定: 第一個(gè)人心中只有磚,他一輩子能把磚砌好就不錯(cuò)了;第二個(gè)人眼中只有墻,好好干或許能當(dāng)一位技術(shù)員;而第三個(gè)人心中已經(jīng)立起了一座殿堂,因?yàn)樗膽B(tài) 樂(lè)觀,胸懷遠(yuǎn)大的志向! 井底之蛙,只能看到巴掌大的天空;摸到大象腿的盲人,只能認(rèn)為大象長(zhǎng)得像柱子;登上五岳的人,才能感覺(jué) “一覽眾山小 ”;看到大海的人,就會(huì)頓感心胸開(kāi)闊舒暢; 心中沒(méi)有希望的人,是世界上最貧窮的人;心中沒(méi)有夢(mèng)想的人,是普天下最平庸的人;目光短淺的人,是最沒(méi)有希望的人。 清代 “紅頂商人 ”胡雪巖說(shuō): “做生意頂要緊的是眼光,看得到一省,就能做一省的生意;看得到天下,就能做天下的生意;看得到外國(guó),就能做外國(guó)的生意。 決定了他志向的短淺或高遠(yuǎn);一個(gè)人的希望和夢(mèng)想,決定了他的人生暗淡或輝煌。  ”可見(jiàn),一個(gè)人的心胸和眼光,

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