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1、
違土s 4..蹲亂疋毛二存旳L片: 班級:
姓名: 學號:
學習|1、嘗試學會提取DNA勺方法及鑒定DNA勺方法 目標 2、注意提取DNAi程中2次加水的作用
備注
課前預習
一、 認真閱讀P56-57的“提取DNA的正文,討論此實驗中的實驗原理:
(1)
DNA的 隨NaCI的濃度變化而 ,DN/在 NaCI 溶液
中的溶解度最低。通過改變 NaCI溶液的濃度,溶解在 NaCI溶液中的DN會析出
來。
(2)
DNA不溶于 溶液,部分 可以溶于酒精溶液,據(jù)此可將 DNA
進一步提純。
(3)DNA遇到 ,沸水浴下呈 。
1 .材料制備
0.1g/m
2、l檸檬酸鈉100ml 活雞血180ml
二、 實驗步驟
500ml燒杯t玻璃棒充分攪拌t 將混合均勻的活雞血置于 4 C冰
箱內靜置Id,使血細胞沉淀
取雞血細胞液5?10ml + 20ml 于50 ml
(1
)提取血細胞核物質 攪拌5 min,用紗布過濾,取 ,濾液中
T 含 和其他核物質,如蛋白質
JaCl溶液40ml,玻璃棒沿 攪拌
r ;
匕述溶液中緩緩加入,并用玻璃棒輕輕地沿方向攪拌,發(fā)現(xiàn)有 出現(xiàn),當絲狀物不再增加時,停止 ( 此時NaCI溶液相當于稀 釋到 )
,布過濾,含 的粘稠物留在紗布上
I
?I/LNaCI溶液 放在50m|燒杯中 T
3、術粘稠物* 緩慢攪拌3 min
液:
用2層紗布過濾, 中含DNA
I
[液+ ,緩慢攪拌, 出現(xiàn)
色絲狀物,用玻璃棒將絲裝物卷起。
水浴加熱變 ,因此,可用
作為DNA勺鑒定試劑
課堂研討 備注
1、用來提取DNA勺動物血液,~為何選用雞血而不用豬、~羊等哺乳動物的血液?
2、在制備雞血細胞溶液過程中,要加入檸檬酸鈉溶液有何作用? 聯(lián)系生活想一想:此有何應用?
3、第一次提取過濾時,為何要取其濾液?
實驗過程中加了蒸餾水幾次?各有什么作用?當向濾液中加入蒸餾水到一定量 時,為何有絲狀物出現(xiàn),這絲狀物是什么?
5、每次用玻璃棒攪拌時,有何要求?為什么?
6、討論:
4、試畫出DNA溶解度隨著NaCI溶液的濃度變化的曲線圖。
、現(xiàn)在由于禽流感緣故,雞血很難采集,能否用植物細胞作為提取 DNA實驗材
料,若能,又如何操作?
學后反思
課題:4.1探索遺傳物質的過程(2)
班級: 姓名: 學號:
課堂檢測
備注
1、對提取DNAi程中三次過濾的敘述中,不正確的是
A. 第一次過濾后,核物質存在于濾出的固體物中
B. 第一次過濾后,使用多層紗布, DNA存在于紗布上的黏稠物中
C .第三次過濾后,DNA存在于濾液中,可進一步除去非 DNA物質
D.上述BC均正確
()
2、下列操作中,對 DNA勺提取量影響較小的是
A. 使雞
5、血細胞在蒸餾水中充分破裂,放出 DNA等核物質
B. 攪拌時,要用玻璃棒沿一個方向輕緩攪動
C. 在“析出DNA占稠物”時,要緩緩加蒸餾水,直至溶液中的黏稠物不再
增多
D. 在用酒精沉淀DNA寸,要使用冷酒精,甚至再將混合液放入冰箱中冷卻
3、 .對析出DNA占稠物有關的敘述,不正確的是
A. 操作時緩緩滴加蒸餾水,降低 DNA勺溶解度
B. 在操作A時,用玻璃棒輕緩攪拌,以保證 DNA分子完整
C. 加蒸餾水可同時降低 DNA和蛋白質的溶解度,兩者均可析出
D. 當絲狀黏稠物不再增加時,此時氯化鈉的濃度相當于 O. 14 mol / L
4、 在提取DNAi程中,
6、玻璃棒要輕緩沿一個方向攪拌,目的是
A. 為了省勁 B .加快的DN晰出
C.加大DNA勺溶解度 D. 防止DNA吉構被破壞,析出較多的 DNA
5、 在提取DNAi程中,加入酒精的目的是
A.溶解,DNA
B
. 除去DNA中的雜質
C.析出DNA
D .
稀釋溶液,降低濃度
6、鑒定DNA勺試劑是
A 斐林試劑 B
蘇丹川染液
C.雙縮脲試劑 D. 二苯胺
備注
課后鞏固
1
2
3
AJ
4
5
(1
(2)
(3)
(4)
A
.0.14 mol/L ,
0.2 mol/L B
.2 mol/L ,
0.14 mo
7、l/L
C
.0.15 mol/L ,
2 mol/L
D . 0.14mol/L
,2 mol/L
DNA不溶解于
A.
氯化鈉 B.
氯化鉀溶液
C.酒精溶液
D. 氯化鎂溶液
.選出能使DNA析出最徹底的一種和溶解度最咼的一組氯化鈉溶液
()
()
()
()
.初步析出DNA和提取較純凈的DNA所用的藥品的濃度及其名稱分別是
①0.1g/m L檸檬酸鈉溶液 ②2md/L氯化鈉 ③O.14mol/L氯化鈉
④95%勺酒精溶液 ⑤0.015mol/L氯化鈉
①③⑤ B.③④ C.②④ D.②③④
?關于DNA勺粗提取與鑒定實
8、驗的表達哪項是錯誤的
A.向沉淀的血細胞中加水是為了提取 DNA
B. 氯化鈉2mol/L時,DNA溶解度最大
C. 向溶解的DNA燒杯中加蒸餾水是漂洗 DNA
D. 離心后除去血液中的上清液是為了除去雜質
.關于DNAS提取的實驗材料的選擇,
)經(jīng)過多次實驗效果的比較,最終選擇雞血做實驗材料原因是
實驗前由老師制備血細胞液供同學們作實驗材料,而不用雞全血,主要原因是
生活在牧區(qū)的人們,采集牛、羊和馬血比較方便,若他們按實驗要求完成實驗
步驟后,結果 ,這是因為這些動物和人類一樣,成熟的紅細
胞中 ;但若改用動物肝臟作實驗材料,實驗能順利進行,這
是因為 。
若選用動物肝臟作實驗材料,提取之前,最好增加 程序,使組織細
胞更易分離。