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1、專題14 生物技術(shù)實踐 1．（2019北京卷·3）篩選淀粉分解菌需使用以淀粉為唯一碳源的培養(yǎng)基。接種培養(yǎng)后，若細菌能分解淀粉，培養(yǎng)平板經(jīng)稀碘液處理，會出現(xiàn)以菌落為中心的透明圈（如圖），實驗結(jié)果見下表。 菌種 菌落直徑：C（mm） 透明圈直徑：H（mm） H/C 細菌Ⅰ 5.1 11.2 2.2 細菌Ⅱ 8.1 13.0 1.6 有關(guān)本實驗的敘述，錯誤的是 A．培養(yǎng)基除淀粉外還含有氮源等其他營養(yǎng)物質(zhì) B．篩選分解淀粉的細菌時，菌液應(yīng)稀釋后涂布 C．以上兩種細菌均不能將淀粉酶分泌至細胞外 D．H/C值反映了兩種細菌分解淀粉能力的差異 【答案】C 【解析

2、】 【分析】該選擇培養(yǎng)基上的唯一碳源是淀粉，只有能利用淀粉的微生物才能存活，微生物分解淀粉后，會產(chǎn)生透明圈。 【詳解】培養(yǎng)基一般含有碳源、氮源、水、無機鹽和生長因子等成分，A正確；篩選淀粉分解菌時，需要對菌液進行一系列的梯度稀釋，再將不同稀釋度的菌液分別涂布到固體培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)，B正確；由題意可知，兩種菌均會產(chǎn)生透明圈，說明兩種菌均可以產(chǎn)生淀粉酶并分泌到細胞外分解淀粉，C錯誤；H/C越大，說明該淀粉分解菌分解淀粉的能力越強，D正確。因此，本題答案選C。 2．（2019江蘇卷·9）下列關(guān)于傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)應(yīng)用的敘述，正確的是 A．利用乳酸菌制作酸奶過程中，先通氣培養(yǎng)，后密封發(fā)酵 B．家庭

3、制作果酒、果醋和腐乳通常都不是純種發(fā)酵 C．果醋制作過程中發(fā)酵液pH逐漸降低，果酒制作過程中情況相反 D．毛霉主要通過產(chǎn)生脂肪酶、蛋白酶和纖維素酶參與腐乳發(fā)酵 【答案】B 【解析】 【分析】 制作果酒的酵母菌的代謝類型是異養(yǎng)兼性厭氧型，制作酸奶的乳酸菌屬于厭氧菌，只能在無氧條件下繁殖，制作果醋的醋酸菌的代謝類型是異養(yǎng)需養(yǎng)型；腐乳是用豆腐發(fā)酵制成，多種微生物參與發(fā)酵，其中起主要作用的是毛霉。毛霉是一種絲狀真菌具發(fā)達的白色菌絲。毛霉等微生物產(chǎn)生的以蛋白酶為主各種酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可將脂肪水解為甘油和脂肪酸。 【詳解】乳酸菌是一種嚴格的厭氧菌，有氧氣存

4、在時，其發(fā)酵會受到抑制，因此利用乳酸菌制作酸奶的過程中，應(yīng)一致處于密閉狀態(tài)，否則會導(dǎo)致發(fā)酵失敗，A錯誤；家庭制作果酒、果醋與腐乳過程中所用的菌種均來源于自然環(huán)境，有多種微生物參與發(fā)酵過程，因此均不是純種發(fā)酵，B正確；果醋制作過程中，醋酸菌有氧呼吸產(chǎn)生二氧化碳和水，二氧化碳溶于水形成碳酸，隨著二氧化碳濃度的增加，溶液的pH逐漸降低；果酒制作過程中，酵母菌無氧呼吸產(chǎn)生二氧化碳與酒精，二氧化碳溶于水形成碳酸，隨著二氧化碳濃度的增加，溶液的pH逐漸降低，因此果酒、果醋制作過程中溶液的pH都是逐漸降低，C錯誤；毛霉主要通過產(chǎn)生脂肪酶、蛋白酶參與腐乳發(fā)酵，D錯誤。 3．（2019江蘇卷·10）下列關(guān)于D

5、NA粗提取與鑒定的敘述，錯誤的是 A．用同樣方法從等體積兔血和雞血中提取的DNA量相近 B．DNA析出過程中，攪拌操作要輕柔以防DNA斷裂 C．預(yù)冷的乙醇可用來進一步純化粗提的DNA D．用二苯胺試劑鑒定DNA需要進行水浴加熱 【答案】A 【解析】 【分析】DNA粗提取選材的標(biāo)準(zhǔn)：DNA含量高，并且材料易得．由于哺乳動物成熟的紅細胞中沒有細胞核和細胞器，因此不采用哺乳動物的血液。 DNA粗提取和鑒定的原理： 1、DNA的溶解性：DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同（DNA在0.14 mol/L的氯化鈉中溶解度最低）；DNA不溶于酒精溶液，但細胞中的某些蛋白

6、質(zhì)溶于酒精。 2、DNA對酶、高溫和洗滌劑的耐受性不同。3、DNA的鑒定：在沸水浴的條件下，DNA遇二苯胺會被染成藍色。 【詳解】兔屬于哺乳動物，其紅細胞沒有細胞核及各種細胞器，提取不到DNA，而雞屬于鳥類，其紅細胞內(nèi)含有細胞核與各種細胞器，DNA含量較多，A錯誤；DNA分子從細胞中被釋放出來且除去蛋白后是非常容易斷裂的,如果太過劇烈的攪拌，DNA鏈可能會被破環(huán)，因此輕柔攪拌的目的是為了獲得較完整的DNA分子，B正確；在冷的95%酒精溶液中DNA的溶解度最低，DNA的沉淀量最大。如果用熱的95%酒精會提高DNA的溶解度,不能完全使DNA沉淀，C正確；將析出的DNA溶解在2 mol/L的Na

7、Cl溶液中，加入二苯胺試劑后需要水浴加熱才會呈現(xiàn)藍色，D正確。 4．（2019江蘇卷·13）下列關(guān)于加酶洗滌劑的敘述，錯誤的是 A．加酶洗衣粉中一般都含有酸性脂肪酶 B．用加酶洗滌劑能減少洗滌時間并節(jié)約用水 C．含纖維素酶洗滌劑可以洗滌印花棉織物 D．加酶洗衣粉中的蛋白酶是相對耐高溫的 【答案】A 【解析】 【分析】 加酶洗衣粉指含有酶制劑的洗衣粉，目前常用的酶制劑有四類：蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纖維素酶。其中，應(yīng)用最廣泛、效果最明顯的是堿性蛋白酶和堿性脂肪酶。 【詳解】加酶洗衣粉中應(yīng)用最廣泛、效果最明顯的是堿性蛋白酶和堿性脂肪酶，A錯誤；加酶洗衣粉含酶制劑，酶具有高效性，

8、故可以節(jié)約洗滌時間，B正確；棉織物的主要成分是纖維素，纖維素酶可以使織物更蓬松，有利于洗去污漬，C正確；科學(xué)家通過基因工程生產(chǎn)出了耐酸、耐堿、忍受表面活性劑和較高溫度的酶，制作加酶洗衣粉，D正確。故選A。 5．（2019江蘇卷·19）下列關(guān)于產(chǎn)纖維素酶菌分離及運用的敘述，不合理的是 A．篩選培養(yǎng)基中應(yīng)含有大量的葡萄糖或蔗糖提供生長營養(yǎng) B．可從富含腐殖質(zhì)的林下土壤中篩選產(chǎn)纖維素酶菌 C．在分離平板上長出的菌落需進一步確定其產(chǎn)纖維素酶的能力 D．用產(chǎn)纖維素酶菌發(fā)酵處理農(nóng)作物秸稈可提高其飼用價值 【答案】A 【解析】 【分析】 纖維素酶是一種復(fù)合酶，包括C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶

9、，前兩種酶使纖維素分解成纖維二糖，第三種酶將纖維二糖分解成葡萄糖。 【詳解】應(yīng)該用以纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基篩選纖維素分解菌，只有纖維素分解菌能夠存活，A錯誤；木材、秸稈中富含纖維素，故可以從富含腐殖質(zhì)的林下土壤中篩選產(chǎn)纖維素酶菌，B正確；用以纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基篩選纖維素分解菌后，為了確定得到的是纖維素分解菌，還需要進行發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶的實驗，C正確；用產(chǎn)纖維素酶菌發(fā)酵處理農(nóng)作物秸稈，可以把纖維素分解成葡萄糖，提高飼用價值，D正確。故選A。 6．（2019江蘇卷·20）為探究矮牽牛原生質(zhì)體的培養(yǎng)條件和植株再生能力，某研究小組的實驗過程如下圖。下列敘述正確的是 A．過程①獲得的原生

10、質(zhì)體需懸浮在30%蔗糖溶液中 B．過程②需提高生長素的比例以促進芽的分化 C．過程③需用秋水仙素處理誘導(dǎo)細胞壁再生 D．原生質(zhì)體雖無細胞壁但仍保持細胞的全能性 【答案】D 【解析】 【分析】 由圖可知，①用纖維素酶和果膠酶處理得到原生質(zhì)體的過程；②③再分化。 【詳解】原生質(zhì)體在30%的蔗糖溶液中會失水皺縮，A錯誤；②誘導(dǎo)芽分化時，需要提高細胞分裂素的比例，B錯誤；③可以表示誘導(dǎo)根的分化形成幼苗，此時細胞壁已經(jīng)形成，C錯誤；原生質(zhì)體無細胞壁，但由于含有一整套的遺傳物質(zhì)，故具有全能性，D正確。故選D。 【點睛】植物組織培養(yǎng)時植物激素處理的不同處理：生長素與細胞分裂素比例適中時，有

11、利于愈傷組織的形成；生長素/細胞分裂素比例升高，利于根的分化；生長素/細胞分裂素比例降低，利于芽的分化。 7．（2018北京卷·4）以下高中生物學(xué)實驗中，操作不正確的是 A．在制作果酒的實驗中，將葡萄汁液裝滿整個發(fā)酵裝置 B．鑒定DNA時，將粗提產(chǎn)物與二苯胺混合后進行沸水浴 C．用蘇丹Ⅲ染液染色，觀察花生子葉細胞中的脂肪滴（顆粒） D．用龍膽紫染液染色，觀察洋蔥根尖分生區(qū)細胞中的染色體 【答案】A 【解析】在制作果酒的實驗中，葡萄汁液不能裝滿發(fā)酵裝置，要留出1/3的空間，A錯誤；在DNA鑒定實驗中，DNA遇二苯胺(沸水浴)會染成藍色，B正確；用蘇丹Ⅲ染液可以把花生子葉細胞中的脂肪

12、顆粒染成橘黃色，C正確；用龍膽紫染液能將細胞中的染色體染成深紫色，在洋蔥根尖分生區(qū)細胞中能清晰地觀察到，D正確。 8．（2018江蘇卷·8）花藥離體培養(yǎng)是重要的育種手段。下圖是某二倍體植物花藥育種過程的示意圖，下列敘述正確的是 A．為了防止微生物污染，過程①所用的花藥需在70%乙醇中浸泡30min B．過程②的培養(yǎng)基中需添加較高濃度的細胞分裂素以利于根的分化 C．過程③逐步分化的植株中可篩選獲得純合的二倍體 D．過程④應(yīng)將煉苗后的植株移栽到含有蔗糖和多種植物激素的基質(zhì)上 【答案】C 【解析】植物組織培養(yǎng)過程應(yīng)該在無菌的條件下進行，因此過程①所用的花藥需在70%乙醇中浸泡10m

13、in，以防止雜菌污染，A錯誤；過程②的培養(yǎng)基中需添加比值適中的細胞分裂素和生長素，以利于形成愈傷組織，B錯誤；過程③得到的植株是經(jīng)過花藥離體培養(yǎng)和秋水仙素處理的，因此可篩選獲得純合的二倍體，C正確；過程④獲得的植株可以進行光合作用了，因此培養(yǎng)基中不需要加入蔗糖，D錯誤。 9．（2018江蘇卷·14）下列關(guān)于酵母細胞固定化實驗的敘述，正確的是 A．用溫水使海藻酸鈉迅速溶解，待其冷卻到室溫后用于包埋細胞 B．進行包埋時，用于懸浮細胞的CaCl2溶液濃度要適宜 C．注射器（或滴管）出口應(yīng)盡量貼近液面以保證凝膠珠成為球狀 D．包埋酵母細胞的凝膠珠為淡黃色半透明狀，并具有一定的彈性 【答案】

14、D 【解析】在酵母細胞固定化實驗中，應(yīng)該用小火、間斷加熱的方式使海藻酸鈉緩慢溶解，A錯誤；將混合液用注射器緩慢滴加到CaCl2溶液進行固定化酵母細胞，CaCl2的作用是使海藻酸鈉形成凝膠珠，B錯誤；注射器（或滴管）出口應(yīng)與液面保持適當(dāng)?shù)木嚯x，以保證凝膠珠成為球狀，C錯誤；包埋酵母細胞的凝膠珠為淡黃色半透明狀，并具有一定的彈性，D正確。 10．（2018江蘇卷·16）某高校采用如圖所示的發(fā)酵罐進行葡萄酒主發(fā)酵過程的研究，下列敘述錯誤的是 A．夏季生產(chǎn)果酒時，常需對罐體進行降溫處理 B．乙醇為揮發(fā)性物質(zhì)，故發(fā)酵過程中空氣的進氣量不宜太大 C．正常發(fā)酵過程中罐內(nèi)的壓力不會低于大氣壓

15、 D．可以通過監(jiān)測發(fā)酵過程中殘余糖的濃度來決定何時終止發(fā)酵 【答案】B 【解析】根據(jù)以上分析已知，果酒發(fā)酵的適宜溫度為18℃-25℃，因此夏季生產(chǎn)果酒時，常需對罐體進行降溫處理，A正確；乙醇是酵母菌無氧呼吸的產(chǎn)物，因此分解過程中不需要通入空氣，B錯誤；無氧呼吸產(chǎn)生了二氧化碳，但是沒有消耗氧氣，因此發(fā)酵罐中的氣壓不會低于大氣壓，C正確；葡萄酒發(fā)酵的原料是糖類，因此可以通過監(jiān)測發(fā)酵過程中殘余糖的濃度來決定何時終止發(fā)酵，D正確。 11．（2018江蘇卷·17）關(guān)于還原糖、蛋白質(zhì)和DNA的鑒定實驗，下列敘述正確的是 A．在甘蔗莖的組織樣液中加入雙縮脲試劑，溫水浴后液體由藍色變成磚紅色 B．

16、在大豆種子勻漿液中加入斐林試劑，液體由藍色變成紫色 C．提取DNA時，在切碎的洋蔥中加入適量洗滌劑和食鹽，充分研磨，過濾并棄去濾液 D．將DNA粗提物溶解在2mol/LNaCl溶液中，加入二苯胺試劑，沸水浴后液體由無色變成藍色 【答案】D 【解析】甘蔗莖的組織樣液富含蔗糖，而蔗糖屬于非還原糖，且不能用斐林試劑檢測，A錯誤；大豆種子中富含蛋白質(zhì)，先后加入雙縮脲試劑A液和B液搖勻后，液體由藍色變?yōu)樽仙?，B錯誤；提取DNA時，在切碎的洋蔥中加入適量的洗滌劑和食鹽，充分研磨，過濾并棄去濾紙上的粘稠物，留下濾液，C錯誤；將DNA粗提物溶解在2mol/LNaCl溶液中，加入二苯胺試劑并水浴加熱，溶

17、液由無色變?yōu)樗{色，D正確。 12．（2018江蘇卷·21）下列關(guān)于加酶洗衣粉的敘述，錯誤的是 A．洗衣粉中添加的酶通常是由微生物發(fā)酵生產(chǎn)而來 B．洗衣粉中的蛋白酶通常會將添加的其他酶迅速分解 C．在50℃熱水中用加酶洗衣粉洗衣時，其中的酶會迅速失活 D．加酶洗衣粉受潮后重新晾干保存，不會影響其中酶的活性 【答案】BCD 【解析】加酶洗衣粉中加入的酶多是微生物發(fā)酵產(chǎn)生的,其本質(zhì)與生物體內(nèi)的酶無明顯差異，A正確；洗衣粉中的蛋白酶通常不會將添加的其他酶迅速分解，這是因為加酶洗衣粉中的酶經(jīng)過了特殊的化學(xué)物質(zhì)的包裹，使之與其他成分隔離，這些酶在遇水后，包裹層分解，酶才能發(fā)揮作用，B錯誤；加

18、酶洗衣粉的pH值一般不大于10，在水溫45～60℃時，能充分發(fā)揮洗滌作用，因此在50℃熱水中用加酶洗衣粉洗衣時，其中的酶不會失活，C錯誤；加酶洗衣粉受潮后重新晾干保存，會導(dǎo)致其中酶的活性降低，D錯誤。 13．（2017江蘇卷·10）下列關(guān)于“腐乳的制作”的實驗，敘述正確的是 A．控制發(fā)酵溫度的主要目的是腐乳調(diào)味 B．腐乳制作后期加入香辛料和料酒有防腐作用 C．毛霉的主要作用是分解脂肪和淀粉 D．成品腐乳表面的粘性物質(zhì)主要由細菌產(chǎn)生 【答案】B 【解析】溫度通過影響酶的活性影響腐乳發(fā)酵，控制發(fā)酵的溫度主要有利于毛霉等微生物的生長和腐乳發(fā)酵，A錯誤；香辛料和料酒都能抑制微生物的生長，

19、具有防腐作用，B正確；毛霉的主要作用是產(chǎn)生蛋白酶和脂肪酶，將蛋白質(zhì)和脂肪分解成小分子化合物，C錯誤；成品腐乳表面的黏性物質(zhì)主要是毛霉產(chǎn)生的，毛霉屬于真菌，D錯誤。 【考點定位】腐乳的制作實驗。 【名師點睛】本題主要考查腐乳制作的相關(guān)知識，要求學(xué)生理解腐乳制作的原理和具體操作過程。 14．（2017江蘇卷·12）固定化單寧酶應(yīng)用于茶飲料加工，可消除其中的苦澀味。下列有關(guān)敘述正確的是 A．在單寧酶純化時可采用透析法去除雜蛋白 B．化學(xué)結(jié)合法比吸附法對單寧酶活性影響更小 C．溫度、pH 和重金屬離子都可能影響固定化單寧酶活性 D．酶的高效性決定固定化單寧酶不會降解茶飲料中的有益成分

20、【答案】C 【解析】透析法是利用膜的選擇透過性去除混合物中的小分子物質(zhì)，不能去除雜蛋白，A錯誤；物理吸附法比化學(xué)結(jié)合法對單寧酶活性影響更小，B錯誤；溫度、pH和重金屬離子都會影響酶活性，C正確；酶的專一性決定了單寧酶不會降解茶飲料中的有益成分，D錯誤。 【考點定位】固定化酶，酶的特性。 【名師點睛】本題主要考查固定化酶的知識，要求學(xué)生理解固定化酶純化的方法，明確溫度、pH和重金屬鹽會影響酶的活性。 15．（2017江蘇卷·17）為了探究一種新型堿性纖維素酶的去污效能，研究性學(xué)習(xí)小組進行了相關(guān)實驗，結(jié)果如下圖。由圖中實驗結(jié)果能直接得出的結(jié)論是 A．堿性纖維素酶對污布類型2的去污力最

21、強 B．不同類型洗衣粉影響堿性纖維素酶的去污力 C．堿性纖維素酶對污布類型2、3的去污力不同 D．加大酶用量可以顯著提高洗衣粉的去污力 【答案】C 【解析】20 U/L的堿性纖維素酶處理對污布類型1，去污力為60%，30 U/L的堿性纖維素酶處理污布類型2，去污力約為80%，則單位堿性纖維素酶對污布類型1去污力最強，A錯誤；由于污布類型不同，不能探究不同類型的洗衣粉對堿性蛋白酶的去污力的影響，B錯誤；對污布類型2、3而言，都是Y型洗衣粉，30%的酶用量，但去污力不同，說明堿性纖維素酶對污布類型2、3的去污力不同，C正確；該實驗沒有針對同一類型的洗衣粉加大酶用量的探究，則不能判斷加大酶

22、用量是否提高洗衣粉的去污力，D錯誤。 【考點定位】堿性纖維素酶，實驗分析。 【名師點睛】本題以堿性纖維素酶為背景考查實驗分析，要求學(xué)生理解實驗分析的兩個基本原則：對照原則和單一變量原則。 16．（2017江蘇卷·20）下列關(guān)于“酵母細胞的固定化技術(shù)”實驗的敘述，正確的是 A．活化酵母時，將適量干酵母與蒸餾水混合并攪拌成糊狀 B．配制CaCl2 溶液時，需要邊小火加熱邊攪拌 C．將海藻酸鈉溶液滴加到CaCl2 溶液時，凝膠珠成形后應(yīng)即刻取出 D．海藻酸鈉溶液濃度過高時凝膠珠呈白色，過低時凝膠珠易呈蝌蚪狀 【答案】A 【解析】活化酵母時，將適量干酵母與蒸餾水混合，并攪拌成糊狀，A

23、正確；配制CaCl2溶液時，不需進行加熱，B錯誤；CaCl2溶液使酵母細胞可以形成穩(wěn)定的結(jié)構(gòu)，固定在凝膠珠中，需要一段時間，時間不宜過短或過長，C錯誤；海藻酸鈉溶液濃度過低時凝膠珠呈白色，過高時凝膠珠易呈蝌蚪狀，D錯誤。 【考點定位】固定化酵母細胞。 【名師點睛】本題主要考查酵母細胞的固定化，要求學(xué)生理解酵母細胞固定化的過程以及異常情況。 17．（2017江蘇卷·25）下圖是探究果酒與果醋發(fā)酵的裝置示意圖。下列相關(guān)敘述正確的是 A．改變通入氣體種類，可以研究呼吸作用類型對發(fā)酵的影響 B．果酒發(fā)酵中期通入氮氣，酵母菌將從有氧呼吸轉(zhuǎn)變?yōu)闊o氧呼吸 C．果醋的發(fā)酵周期與實驗設(shè)定的溫度密

24、切相關(guān) D．氣體入口與氣體出口可以交換使用 【答案】ABC 【解析】酵母菌是兼性厭氧菌，可進行有氧呼吸和無氧呼吸，通入氧氣后，酵母菌進行有氧呼吸，通入其他氣體，酵母菌進行無氧呼吸，故改變通入氣體種類，可以研究呼吸作用類型對發(fā)酵的影響，A正確；果酒發(fā)酵中期通入氮氣，裝置中氧氣減少，使酵母菌從有氧呼吸轉(zhuǎn)變?yōu)闊o氧呼吸，B正確；溫度影響酶的活性，則果醋的發(fā)酵周期與實驗設(shè)定的溫度有密切關(guān)系，C正確；氣體入口管通入液面以下，氣體出口管在液面以上，不能交換使用，D錯誤。 【考點定位】果酒的制作，果醋的制作。 【名師點睛】本題主要考查果酒和果醋的制作，要求學(xué)生理解酵母菌屬于兼性厭氧菌，既能進行有氧呼

25、吸，又能進行無氧呼吸。 18．（2019全國卷Ⅰ·37） 已知一種有機物X（僅含有C、H兩種元素）不易降解，會造成環(huán)境污染。某小組用三種培養(yǎng)基篩選土壤中能高效降解X的細菌（目標(biāo)菌）。 Ⅰ號培養(yǎng)基：在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中加入X（5 g/L）。 Ⅱ號培養(yǎng)基：氯化鈉（5 g/L），硝酸銨（3 g/L），其他無機鹽（適量），X（15 g/L）。 Ⅲ號培養(yǎng)基：氯化鈉（5 g/L），硝酸銨（3 g/L），其他無機鹽（適量）。X（45 g/L）。 回答下列問題。 （1）在Ⅰ號培養(yǎng)基中，為微生物提供氮源的是___________。Ⅱ、Ⅲ號培養(yǎng)基中為微生物提供碳源的有機物是_________。

26、（2）若將土壤懸浮液接種在Ⅱ號液體培養(yǎng)基中，培養(yǎng)一段時間后，不能降解X的細菌比例會_________，其原因是_________。 （3）Ⅱ號培養(yǎng)基加入瓊脂后可以制成固體培養(yǎng)基，若要以該固體培養(yǎng)基培養(yǎng)目標(biāo)菌并對菌落進行計數(shù)，接種時，應(yīng)采用的方法是______________。 （4）假設(shè)從Ⅲ號培養(yǎng)基中得到了能高效降解X的細菌，且該菌能將X代謝為丙酮酸，則在有氧條件下，丙酮酸可為該菌的生長提供_________和_________。 【答案】（1）牛肉膏、蛋白胨 X （2）下降 不能降解X的細菌因缺乏碳源不能增殖，而能降解X的細菌能夠增殖 （3）稀釋涂布平板法 （4）能

27、量 合成其他物質(zhì)的原料 【解析】 【分析】 1、選擇培養(yǎng)基的概念：在微生物學(xué)中，將允許特定微生物種類生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基，稱為選擇培養(yǎng)基，選擇培養(yǎng)基必須是固體培養(yǎng)基，本題中選擇培養(yǎng)基中的唯一碳源是有機物X，這樣能分解X的微生物能夠從該有機物獲得碳源，其他微生物由于無法獲得碳源而不能生存。 2、常用的接種微生物的方法有稀釋涂布平板法和平板劃線法，稀釋涂布平板法是將菌液進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液涂布到固體瓊脂培養(yǎng)基上，進行培養(yǎng)，在稀釋度足夠高的菌液里，將聚集在一起的微生物分散成單個細胞，獲得由單個細胞繁殖而來的菌落，微生物的計數(shù)通常采用稀釋

28、涂布平板法。 【詳解】（1）氮源是微生物生長需要的一類營養(yǎng)物質(zhì)，是含氮化合物，可為微生物的生長提供氮元素，牛肉膏、蛋白胨來源于動物原料，含有糖、維生素和有機氮等營養(yǎng)物質(zhì)，因此在1號培養(yǎng)基中，可為微生物提供氮源的是牛肉膏、蛋白胨。碳源也是微生物生長所需要的一類營養(yǎng)物質(zhì)，可為微生物的生長提供碳元素，而有機物均含碳元素，II、III號培養(yǎng)基均含有有機物X，因此，II、III號培養(yǎng)基為微生物的生長提供碳源的均為有機物X。 （2）由于II號培養(yǎng)基含有的碳源只有有機物X，因此若將土壤懸浮液接種在II號液體培養(yǎng)基中，培養(yǎng)一段時間后，不能降解X的細菌由于無法獲得碳源而無法增殖導(dǎo)致其比例減少。 （3）微生

29、物的接種方法很多，最常用的有平板劃線法與稀釋涂布平板法，由于稀釋涂布平板法中，稀釋度足夠高的菌液經(jīng)涂布培養(yǎng)后，在培養(yǎng)基表面形成的一個菌落是由菌液中的一個活菌繁殖而來，所以常用來進行微生物的計數(shù)。 （4）丙酮酸參與有氧呼吸的第二階段，能被分解產(chǎn)生能量，且丙酮酸可作為許多物質(zhì)合成的中間產(chǎn)物，因此其可為微生物的生長提供能量和合成其他物質(zhì)的原料。 【點睛】選擇培養(yǎng)基能選擇特定的微生物。微生物的接種方法有多種，其中稀釋涂布平板法常用來進行微生物的計數(shù)。微生物的營養(yǎng)物質(zhì)有水、碳源、氮源、無機鹽等。 19．（2019全國卷II·37）物質(zhì)W是一種含氮有機物，會污染土壤。W在培養(yǎng)基中達到一定量時培養(yǎng)基表

30、現(xiàn)為不透明。某研究小組欲從土壤中篩選出能降解W的細菌（目標(biāo)菌）。回答下列問題。 （1）要從土壤中分離目標(biāo)菌，所用選擇培養(yǎng)基中的氮源應(yīng)該是_________。 （2）在從土壤中分離目標(biāo)菌的過程中，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上甲、乙兩種細菌都能生長并形成菌落（如圖所示）。如果要得到目標(biāo)菌，應(yīng)該選擇________菌落進一步純化，選擇的依據(jù)是________。 （3）土壤中的某些微生物可以利用空氣中的氮氣作為氮源。若要設(shè)計實驗進一步確定甲、乙菌能否利用空氣中的氮氣作為氮源，請簡要寫出實驗思路、預(yù)期結(jié)果和結(jié)論，即_______。 （4）該小組將人工合成的一段DNA轉(zhuǎn)入大腸桿菌，使大腸桿菌產(chǎn)生能降解W的酶（

31、酶E）。為了比較酶E與天然酶降解W能力的差異，該小組擬進行如下實驗，請完善相關(guān)內(nèi)容。 ①在含有一定濃度W的固體培養(yǎng)基上，A處滴加酶E的緩沖液，B處滴加含有相同濃度天然酶的緩沖液，C處滴加_________，三處滴加量相同。 ②一段時間后，測量透明圈的直徑。若C處沒有出現(xiàn)透明圈，說明___________；若A、B處形成的透明圈直徑大小相近，說明___________。 【答案】（1）W （2）乙 乙菌落周圍出現(xiàn)透明圈，說明乙菌能降解W （3）將甲、乙菌分別接種在無氮源培養(yǎng)基上，若細菌能生長，則說明該細菌能利用空氣中的氮氣作為氮源 （4）①緩沖液 ②緩沖液不能降解W

32、 酶E與天然酶降解W的能力相近 【解析】 【分析】篩選培養(yǎng)基是指根據(jù)某種微生物的特殊營養(yǎng)要求或?qū)δ承┗瘜W(xué)、物理因素的抗性而設(shè)計的，能選擇性地區(qū)分這種微生物的培養(yǎng)基。利用選擇培養(yǎng)基，可使混合菌群中的目標(biāo)菌種變成優(yōu)勢種群，從而提高該種微生物的篩選效率。 【詳解】（1）該研究小組的目標(biāo)菌是能夠降解物質(zhì)W的細菌，而物質(zhì)W是一種含氮有機物，故可作篩選培養(yǎng)基中的氮源。 （2）研究小組的目標(biāo)菌，是能夠降解物質(zhì)W的細菌，培養(yǎng)基中乙菌落的周圍出現(xiàn)透明圈，說明乙菌落能夠降解物質(zhì)W，故乙菌落為該小組的目標(biāo)細菌。 （3）目標(biāo)菌能夠利用空氣中的氮氣作為氮源，故選用的篩選培養(yǎng)基不添加氮源，能夠在無氮源的培養(yǎng)基上

33、生存的細菌便是目的細菌，故實驗操作為：將甲、乙菌分別接種在無氮源培養(yǎng)基上，若細菌能生長，則說明該細菌能利用空氣中的氮氣作為氮源。 （4）①C處作為空白對照，要排除作為溶劑的緩沖液對實驗可能造成的影響，故需要在C處滴加緩沖液，且保持滴加量相同；②培養(yǎng)基中的透明圈表示物質(zhì)W被降解的情況，若C處不出現(xiàn)透明圈，則說明緩沖液不能降解物質(zhì)W；若A、B處形成的透明圈直徑大小相近，說明物質(zhì)W被降解的程度相近，即酶E與天然酶降解物質(zhì)W的能力相近。 【點睛】本題考查篩選培養(yǎng)基的配置和使用，針對不同要求的目標(biāo)菌種，選擇不同物質(zhì)配制不同篩選作用的培養(yǎng)基。并且要求學(xué)生理解識別目標(biāo)菌種篩選的現(xiàn)象，判斷篩選結(jié)果。 2

34、0．（2019全國卷III·37）回答下列與細菌培養(yǎng)相關(guān)的問題。 （1）在細菌培養(yǎng)時，培養(yǎng)基中能同時提供碳源、氮源的成分是______________________（填“蛋白胨”“葡萄糖”或“NaNO3”）。通常，制備培養(yǎng)基時要根據(jù)所培養(yǎng)細菌的不同來調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH，其原因是________。硝化細菌在沒有碳源的培養(yǎng)基上______（填“能夠”或“不能”）生長，原因是______________________________。 （2）用平板培養(yǎng)細菌時一般需要將平板____________（填“倒置”或“正置”）。 （3）單個細菌在平板上會形成菌落，研究人員通?？筛鶕?jù)菌落的形狀、大小、

35、顏色等特征來初步區(qū)分不同種的微生物，原因是________________________________________。 （4）有些使用后的培養(yǎng)基在丟棄前需要經(jīng)過___________________處理，這種處理可以殺死丟棄物中所有的微生物。 【答案】（1）蛋白胨 不同細菌生長繁殖所需的最適pH不同 能夠 硝化細菌可以利用空氣中的CO2作為碳源 （2）倒置 （3）在一定的培養(yǎng)條件下，不同種微生物表現(xiàn)出各自穩(wěn)定的菌落特征 （4）滅菌 【解析】 【分析】1、微生物培養(yǎng)基的營養(yǎng)構(gòu)成：①各種培養(yǎng)基的具體配方不同，但一般都含有水、碳源、氮源和無機鹽；②不同培

36、養(yǎng)基還要滿足不同微生物對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。 2、配制牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的注意事項：①倒平板的溫 度一般50℃左右適宜，溫度過高會燙手，過低培養(yǎng)基又會凝固；②平板需倒置，這樣既可使培養(yǎng)基表面的水分更好地揮發(fā)，又可防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。 【詳解】（1）葡萄糖只能為細菌提供碳源，硝酸鈉為細菌提供無機鹽，而蛋白胨既可以為細菌碳源，也可以為細菌提供氮源；由于不同的細菌生長繁殖的最適宜pH是不同的，因此制備培養(yǎng)基時要根據(jù)所培養(yǎng)的細菌的不同來調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH；硝化細菌屬于化能自養(yǎng)型微生物，其可以利用氨氧化釋放的能量將空氣中的二氧化碳固定為有機物，因此硝化細菌可以在無碳

37、培養(yǎng)基中生長。 （2）用平板培養(yǎng)細菌時，一般需要將平板倒置培養(yǎng)，以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。 （3）由于每一大類微生物都有其獨特的細胞形態(tài)，因而其菌落形態(tài)特征也各異，因此根據(jù)菌落的形態(tài)、大小、顏色等特征來初步區(qū)分不同種的微生物。 （4）有些使用后的培養(yǎng)基丟棄前一定要進行滅菌處理，以免污染環(huán)境。 【點睛】解答本題的關(guān)鍵是識記微生物培養(yǎng)基的成分、培育條件、培養(yǎng)過程以及注意事項，能夠根據(jù)不同微生物的代謝類型判斷其所需營養(yǎng)成分的種類，進而結(jié)合題干要求分析答題。 21．（2019浙江4月選考·32）回答下列（一）小題： （一）回答與果膠和果膠酶有關(guān)的問題： （1）通常從腐爛

38、的水果上分離產(chǎn)果膠酶的微生物，其原因除水果中果膠含量較高外，還因為______。 （2）為了獲得高產(chǎn)果膠酶微生物的單菌落，通常對分離或誘變后的微生物懸液進行______。 （3）在某種果汁生產(chǎn)中，用果膠酶處理顯著增加了產(chǎn)量，其主要原因是果膠酶水解果膠使______。果汁生產(chǎn)中的殘渣果皮等用于果膠生產(chǎn)，通常將其提取液濃縮后再加入______。使之形成絮狀物，然后通過離心、真空干燥等步驟獲得果膠制品。 （4）常用固定化果膠酶處理含果膠的污水，其主要優(yōu)點有______和可連續(xù)處理等。在建立和優(yōu)化固定化果膠酶處理工藝時，除考慮果膠酶的活性和用量、酶反應(yīng)的溫度、pH、作用時間等環(huán)境因素外，還需考慮

39、的主要有______和______。 【答案】（一）（1）腐爛的水果中含產(chǎn)果膠酶的微生物較多 （2）涂布分離（或劃線分離） （3）水果組織軟化疏松及細胞受損 95%乙醇 （4）提高果膠酶的穩(wěn)定性 固定化的方法 固定化所用的介質(zhì) 【解析】 【分析】 （一）果膠是植物細胞壁的主要成分，果膠起著將植物細胞粘合在一起的作用，去掉果膠，就會使植物組織變得松散；果膠不溶于乙醇，是鑒別果膠的一種簡易方法。 【詳解】（一） （1）腐爛的水果通常細胞壁被分解較多，所以含有能產(chǎn)生果膠酶的微生物較多； （2）獲取單菌落的方式有劃線分離法和涂布分離法兩

40、種，本題中兩種方式均可； （3）果膠酶的作用是水解果膠，果膠位于植物細胞壁中，故水解果膠會使得水果組織軟化疏松及使細胞受損；果膠不溶于酒精，故提取回收果膠需要使用95%乙醇，使果膠形成絮狀物回收； （4）固定化的果膠酶在處理含果膠的污水時，可提高果膠酶的穩(wěn)定性并可連續(xù)處理；在建立和優(yōu)化固定化果膠酶處理工藝時，除考慮果膠酶的活性和用量、酶反應(yīng)的溫度、pH、作用時間等環(huán)境因素外，還需考慮的因素有固定化的方法和固定化所用的介質(zhì)。 22．（2018全國Ⅲ卷·37）回答下列與酵母菌有關(guān)的問題： （1）分離培養(yǎng)酵母菌通常使用____________（填“牛肉膏蛋白胨”“MS”或“麥芽汁瓊脂”）培養(yǎng)

41、基，該培養(yǎng)基應(yīng)采用________滅菌法滅菌。若將酵母菌劃線接種在平板上，培養(yǎng)一段時間后會觀察到菌落，菌落的含義是_______________。 （2）酵母菌液體培養(yǎng)時，若通入氧氣，可促進______________（填“菌體快速增殖”、“乙醇產(chǎn)生”或“乳酸產(chǎn)生”）；若進行厭氧培養(yǎng)，可促進_________（填“菌體快速增殖”、“乙醇產(chǎn)生”或“乳酸產(chǎn)生”）。 （3）制作面包時，為使面包松軟通常要在面粉中添加一定量的酵母菌，酵母菌引起面包松軟的原因是______________________。 【答案】（1）麥芽汁瓊脂　　高壓蒸汽　　由一個細胞繁殖而來的肉眼可見的子細胞群體

42、（2）菌體快速增殖　　乙醇產(chǎn)生 （3）酵母菌分解葡萄糖會產(chǎn)生CO2，CO2使面包松軟 【解析】（1）麥芽汁瓊脂培養(yǎng)基的碳氮比較高，而且含糖量高，更適合酵母菌；該培養(yǎng)基應(yīng)采用高壓蒸汽滅菌法滅菌；若將酵母菌劃線接種在平板上，培養(yǎng)一段時間后可觀察到由一個細胞繁殖而來的肉眼可見的子細胞群體，這就是菌落。 （2）酵母菌液體培養(yǎng)時，若通入氧氣，進行有氧呼吸產(chǎn)生H2O和CO2，釋放能量多，細胞增殖快；若進行無氧培養(yǎng)，進行無氧呼吸，產(chǎn)生酒精和CO2，釋放能量少，增殖慢。 （3）制作面包時，在面粉中添加一定量的酵母菌，因酵母菌可以分解面粉中的葡萄糖，產(chǎn)生二氧化碳，二氧化碳是氣體，遇熱膨脹而形成小

43、孔，使得面包松軟多孔。 23．（2018海南卷·30）葡萄酒是葡萄汁經(jīng)酵母菌發(fā)酵而成的。釀制葡萄酒的兩個簡易裝置如圖所示。 回答下列問題： （1）試管中的X溶液有助于維持甲裝置的瓶中氣壓相對穩(wěn)定，與乙裝置相比，用甲裝置釀制葡萄酒的優(yōu)點是__________________________（答出兩點即可）。 （2）葡萄汁裝入甲裝置時，要留有約1/3的空間，這種做法的目的是__________________________（答出兩點即可）。 （3）某同學(xué)若用乙裝置進行發(fā)酵，并設(shè)置兩個不同處理組（乙A和乙B），乙A裝置中保留一定量的氧氣，乙B裝置中沒有氧氣。在其他條件相同且適宜的情況

44、下，測得一段時間內(nèi)乙A和乙B中酒精含量的變化趨勢及乙A中氧氣含量的變化趨勢如曲線圖所示。 圖中曲線①、②、③依次表示__________________、____________________、_________________含量的變化趨勢。 （4）從細胞呼吸類型看，酵母菌屬于__________________________生物；從同化作用的類型看，酵母菌屬于__________________________（填“自養(yǎng)”或“異養(yǎng)”）生物。 【答案】（1）不需要開蓋放氣；避免了因開蓋引起的雜菌污染 （2）為酵母菌大量繁殖提供適量的氧氣；防止發(fā)酵旺盛時汁液溢出 （3）乙A中的氧

45、氣　　乙B中的酒精　　乙A中的酒精 （4）兼性厭氧　　異養(yǎng) 【解析】（1）試管中的X溶液有助于維持甲裝置的瓶中氣壓相對穩(wěn)定，與乙裝置相比，用甲裝置釀制葡萄酒的優(yōu)點是不需要開蓋放氣；避免了因開蓋引起的雜菌污染。 （2）葡萄汁裝入甲裝置時，要留有約1/3的空間，這種做法的目的是為酵母菌大量繁殖提供適量的氧氣；防止發(fā)酵旺盛時汁液溢出。 （3）分析題意可知，圖中曲線①、②、③依次表示乙A中的氧氣、乙B中的酒精、乙A中的酒精含量的變化趨勢。 （4）從細胞呼吸類型看，酵母菌屬于兼性厭氧生物；從同化作用的類型看，酵母菌屬于異養(yǎng)生物。 24．（2018全國Ⅱ卷·37）在生產(chǎn)、生活和科研實踐中，經(jīng)常

46、通過消毒和滅菌來避免雜菌的污染?；卮鹣铝袉栴}： （1）在實驗室中，玻璃和金屬材質(zhì)的實驗器具________（填“可以”或“不可以”）放入干熱滅菌箱中進行干熱滅菌。 （2）牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高溫瞬時消毒法，與煮沸消毒法相比，這兩種方法的優(yōu)點是__________________________________。 （3）密閉空間內(nèi)的空氣可采用紫外線照射消毒，其原因是紫外線能________，在照射前，適量噴灑_________，可強化消毒效果。 （4）水廠供應(yīng)的自來水通常是經(jīng)過________（填“氯氣”“乙醇”或“高錳酸鉀”）消毒的。 （5）某同學(xué)在使用高壓蒸汽滅菌鍋時，若壓

47、力達到設(shè)定要求，而鍋內(nèi)并沒有達到相應(yīng)溫度，最可能的原因是__________________________。 【答案】（1）可以 （2）在達到消毒目的的同時，營養(yǎng)物質(zhì)損失較少 （3）破壞DNA結(jié)構(gòu)　　消毒液 （4）氯氣 （5）未將鍋內(nèi)冷空氣排盡 【解析】（1）能耐高溫的、需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培養(yǎng)皿）和金屬用具等可以放入干熱滅菌箱中進行干熱滅菌。 （2）煮沸消毒法即在100 ℃時煮沸5~6 min可以殺死微生物細胞和一部分芽孢；巴氏消毒法即在70~75 ℃時煮30 min或在80 ℃時煮15 min，可以殺死微生物，并且保證營養(yǎng)物質(zhì)不被破壞。

48、因此，與煮沸消毒法相比，牛奶消毒常采用的巴氏消毒法或高溫瞬時消毒法的優(yōu)點是達到消毒目的的同時，營養(yǎng)物質(zhì)損失較少。 （3）因紫外線能破壞DNA結(jié)構(gòu)，所以密閉空間內(nèi)的空氣可采用紫外線照射消毒。在照射前，適量噴灑消毒液，可強化消毒效果。 （4）通常乙醇消毒是75%的酒精，有氣味，影響水質(zhì)，不適宜消毒自來水；高錳酸鉀本身有顏色，消毒后溶液呈紫紅色，無法使用；因此水廠供應(yīng)的自來水通常是經(jīng)過氯氣消毒的。 （5）采用高壓蒸汽滅菌時，鍋內(nèi)的水加熱煮沸，將其中原有的冷空氣徹底排除后才能將鍋密閉。如果未將鍋內(nèi)冷空氣排盡，則會出現(xiàn)壓力達到設(shè)定要求，而鍋內(nèi)并沒有達到相應(yīng)溫度的現(xiàn)象。 25．（2018全國

49、Ⅰ卷·37）將馬鈴薯去皮切塊，加水煮沸一定時間，過濾得到馬鈴薯浸出液。在馬鈴薯浸出液中加入一定量蔗糖和瓊脂，用水定容后滅菌，得到M培養(yǎng)基。 回答下列問題： （1）M培養(yǎng)基若用于真菌的篩選，則培養(yǎng)基中應(yīng)加入鏈霉素以抑制_______的生長，加入了鏈霉素的培養(yǎng)基屬于____________培養(yǎng)基。 （2）M培養(yǎng)基中的馬鈴薯浸出液為微生物生長提供了多種營養(yǎng)物質(zhì)，營養(yǎng)物質(zhì)類型除氮源外還有__________ （答出兩點即可）。氮源進入細胞后，可參與合成的生物大分子有______（答出兩點即可）。 （3）若在M培養(yǎng)基中用淀粉取代蔗糖，接種土壤濾液并培養(yǎng)，平板上長出菌落后可通過加入顯色劑篩選出能產(chǎn)

50、淀粉酶的微生物。加入的顯色劑是____________，該方法能篩選出產(chǎn)淀粉酶微生物的原理是_____________。 （4）甲、乙兩位同學(xué)用稀釋涂布平板法測定某一土壤樣品中微生物的數(shù)量，在同一稀釋倍數(shù)下得到以下結(jié)果： 甲同學(xué)涂布了3個平板，統(tǒng)計的偏落數(shù)分別是110、140和149，取平均值133； 乙同學(xué)涂布了3個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是27、169和176，取平均值124。 有人認為這兩位同學(xué)的結(jié)果中，乙同學(xué)的結(jié)果可信度低，其原因是____________。 【答案】（1）細菌　　選擇 （2）碳源、無機鹽　　蛋白質(zhì)、核酸 （3）碘液　　淀粉遇碘液顯藍色，產(chǎn)淀

51、粉酶的菌落周圍淀粉被水解，形成透明圈 （4）乙同學(xué)的結(jié)果中，1個平板的計數(shù)結(jié)果與另2個相差懸殊，結(jié)果的重復(fù)性差 【解析】（1）M培養(yǎng)基若用于真菌的篩選，說明M培養(yǎng)基能滿足真菌的生長，而能抑制其它微生物的生長，鏈霉素是一種抗生素，可以抑制細菌的生長。加入了鏈霉素的培養(yǎng)基能篩選出真菌，該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。 （2）微生物生長需要多種營養(yǎng)物質(zhì)除氮源外，還需要碳源、無機鹽、水以及特殊營養(yǎng)物質(zhì)等。氮元素是蛋白質(zhì)和核酸等生物大分子的組成元素，因此氮源進入細胞后,可參與合成的生物大分子有蛋白質(zhì)和核酸。 （3）淀粉與碘液會變成藍色，篩選產(chǎn)淀粉酶的微生物，依據(jù)淀粉遇碘液顯藍色，產(chǎn)淀粉酶的菌落周圍淀粉被

52、水解，形成透明圈，再根據(jù)透明圈，來篩選產(chǎn)淀粉酶的微生物。 （4）乙同學(xué)結(jié)果不合理，因為1個平板的計數(shù)結(jié)果與另2個相差懸殊，結(jié)果的重復(fù)性差，不能簡單的用其平均數(shù)作為最終結(jié)果。 26．（2018江蘇卷·31）酵母的蛋白質(zhì)含量可達自身干重的一半，可作為飼料蛋白的來源。有些酵母可以利用工業(yè)廢甲醇作為碳源進行培養(yǎng)，這樣既可減少污染又可降低生產(chǎn)成本。研究人員擬從土壤樣品中分離該類酵母，并進行大量培養(yǎng)。下圖所示為操作流程，請回答下列問題： （1）配制培養(yǎng)基時，按照培養(yǎng)基配方準(zhǔn)確稱量各組分，將其溶解、定容后，調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的__________________________，及時對培養(yǎng)基進行分裝，并進

53、行__________________________滅菌。 （2）取步驟②中不同梯度的稀釋液加入標(biāo)記好的無菌培養(yǎng)皿中，在步驟③中將溫度約__________________________（在25 ℃、50 ℃或80 ℃中選擇）的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿混勻，冷凝后倒置培養(yǎng)。 （3）挑取分離平板中長出的單菌落，按步驟④所示進行劃線。下列敘述合理的有__________________________。 a．為保證無菌操作，接種針、接種環(huán)使用前都必須滅菌 b．劃線時應(yīng)避免劃破培養(yǎng)基表面，以免不能形成正常菌落 c．挑取菌落時，應(yīng)挑取多個菌落，分別測定酵母細胞中甲醇的含量 d．可以通過逐步提高

54、培養(yǎng)基中甲醇的濃度，獲得甲醇高耐受株 （4）步驟⑤中，為使酵母數(shù)量迅速增加，培養(yǎng)過程中需保證充足的營養(yǎng)和_________________________供應(yīng)。為監(jiān)測酵母的活細胞密度，將發(fā)酵液稀釋1 000倍后，經(jīng)等體積臺盼藍染液染色，用25×16型血細胞計數(shù)板計數(shù)5個中格中的細胞數(shù)，理論上__________________________色細胞的個數(shù)應(yīng)不少于__________________________，才能達到每毫升3×109個活細胞的預(yù)期密度。 【答案】（1）pH 高壓蒸汽（濕熱） （2）50 ℃ （3）a、b、d （4）氧氣 無 30 【解析】（1）配

55、制培養(yǎng)基的操作步驟為稱量→溶化→定容→調(diào)pH→培養(yǎng)基的分裝→包扎→滅菌，因此微生物的培養(yǎng)基配制好后應(yīng)該先調(diào)節(jié)pH，再分裝。常見的滅菌方法有：干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌、灼燒滅菌。培養(yǎng)基適宜用高壓蒸汽滅菌法進行滅菌。 （2）在步驟③中，待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時進行倒平板。 （3）在劃線過程中，接種針、接種環(huán)使用前都必須滅菌，以防止雜菌污染，a正確；劃線時應(yīng)避免劃破培養(yǎng)基表面，否則將不能形成正常菌落，b正確；該實驗的目的是獲得利用工業(yè)廢甲醇作為碳源的酵母菌，不需要測定酵母菌中的甲醇含量，c錯誤；培養(yǎng)基中的甲醇濃度越高，此種培養(yǎng)基中得以生存的酵母菌利用甲醇的能力越強，因此可以通過逐步提高培養(yǎng)基中甲

56、醇的濃度，獲得甲醇高耐受株，d正確。 （4）酵母菌通過有氧呼吸大量繁殖，因此為使酵母數(shù)量迅速增加，培養(yǎng)過程中需保證充足的營養(yǎng)和氧氣供 應(yīng)；臺盼藍是大分子物質(zhì)，不能將活細胞染色，再根據(jù)25×16型的血球計數(shù)板：1毫升懸液中待測標(biāo)本（菌體）總數(shù)=80小方格內(nèi)菌體數(shù)/80×400×104×稀釋倍數(shù)。而臺盼藍與菌液等體積加入，因此要達到每毫升3×109個活細胞的預(yù)期密度，理論上無色細胞數(shù)應(yīng)該不少于（3×109）÷（1000×2×104×400÷80）=30個。 27．（2017海南卷·30） 綠藻A是某種單細胞綠藻，能夠合成物質(zhì)W。某小組為探究氮營養(yǎng)缺乏對綠藻A增殖及物質(zhì)W累計的影響，將等量的

57、綠藻A分別接種在氮營養(yǎng)缺乏（實驗組）和氮營養(yǎng)正常（對照組）的兩瓶培養(yǎng)液中，并在適宜溫度和一定光強下培養(yǎng)。定時取樣并檢測細胞濃度和物質(zhì)W的含量，結(jié)果如圖。 （1）從圖甲可知，在氮營養(yǎng)正常培養(yǎng)液的瓶中，綠藻A的種群增長曲線呈___________型。 （2）綜合圖甲和圖乙的信息可知，在生產(chǎn)上，若要用少量的綠藻A獲得盡可能多的物質(zhì)W，可以采取的措施是________。 （3）若物質(zhì)W是類胡蘿卜素，根據(jù)類胡蘿卜素不易揮發(fā)和易于溶于有機溶劑的特點，應(yīng)選擇的提取方法是_________。用紙層析法可以將類胡蘿卜素與葉綠素分開，紙層析法分離的原理是__________________。 （4）在

58、以上研究的基礎(chǔ)上，某人擬設(shè)計實驗進一步研究氮營養(yǎng)缺乏程度對物質(zhì)W積累的影響，則該實驗的自變量是_____________。 （5）與在光照條件下相比，若要使綠藻A在黑暗條件下增殖，需要為其提供_________________（填“葡萄糖”或“纖維素”）作為營養(yǎng)物質(zhì)，原因是___________________。 【答案】（1）S （2）先將少量綠藻放在氮營養(yǎng)正常的培養(yǎng)液培養(yǎng)，等到細胞濃度最高時集中收集，再放在氮營養(yǎng)缺乏的培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng) （3）萃取 類胡蘿卜素和葉綠素在層析液（有機溶劑）中的溶解度不同，溶解度高的隨層析液在濾紙上的擴散速度快，反之則慢，從而將它們分離。

59、 （4）培養(yǎng)基中的氮營養(yǎng)濃度 （5）葡萄糖 在黑暗下，綠藻不能進行光合作用合成糖類（有機物），需要吸收葡萄糖為營養(yǎng)物質(zhì)，而纖維素不能被綠藻吸收利用。 【解析】（1）圖甲，與對照組比較，在氮營養(yǎng)正常培養(yǎng)液的瓶中，綠藻A的種群增長先增加后平穩(wěn)，曲線呈S型。 （2）由甲圖可知，氮營養(yǎng)正常培養(yǎng)液綠藻增殖速度快；由乙圖可知，缺氮營養(yǎng)液W含量高。故若要用少量的綠藻A獲得盡可能多的物質(zhì)W，可以采取的措施是先將少量綠藻放在氮營養(yǎng)正常的培養(yǎng)液培養(yǎng)，等到細胞濃度最高時集中收集，再放在氮營養(yǎng)缺乏的培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。 （3）根據(jù)類胡蘿卜素不易揮發(fā)和易于溶于有機溶劑的特點，應(yīng)選擇的提取方法是萃取。類胡

60、蘿卜素和葉綠素在層析液（有機溶劑）中的溶解度不同，溶解度高的隨層析液在濾紙上的擴散速度快，反之則慢，從而將它們分離，這是紙層析法分離的原理。 （4）實驗?zāi)康氖茄芯康獱I養(yǎng)缺乏程度對物質(zhì)W積累的影響，故自變量培養(yǎng)基中的氮營養(yǎng)濃度。 （5）綠藻黑暗中不能光合作用合成有機物，需要吸收葡萄糖滿足生命活動的需要，而纖維素不能綠藻利用。 【考點定位】光合作用、胡蘿卜素的提取和分離 【名師點睛】善于從曲線中獲取信息是解題關(guān)鍵。 28．（2017新課標(biāo)Ⅰ卷·37） 某些土壤細菌可將尿素分解成CO2和NH3，供植物吸收和利用。回答下列問題： （1）有些細菌能分解尿素，有些細菌則不能，原因是前者能產(chǎn)生

61、________________________。能分解尿素的細菌不能以尿素的分解產(chǎn)物CO2作為碳源，原因是________________________，但可用葡萄糖作為碳源，進入細菌體內(nèi)的葡萄糖的主要作用是________________________（答出兩點即可）。 （2）為了篩選可分解尿素的細菌，在配制培養(yǎng)基時，應(yīng)選擇____________________（填“尿素”“NH4NO3”或“尿素+NH4NO3”）作為氮源，不選擇其他兩組的原因是________________________。 （3）用來篩選分解尿素細菌的培養(yǎng)基含有KH2PO4和Na2 HPO4，其作用有___

62、_____________________（答出兩點即可）。 【答案】（1）脲酶 分解尿素的細菌是異養(yǎng)型生物，不能利用CO2來合成有機物 為細胞生物生命活動提供能量，為其他有機物的合成提供原料 （2）尿素 其他兩組都含有NH4NO3，能分解尿素的細菌和不能分解尿素的細菌都能利用NH4NO3，不能起到篩選作用 （3）為細菌生長提供無機營養(yǎng)，作為緩沖劑保持細胞生長過程中pH穩(wěn)定 【解析】（1）細菌分解尿素是由于細菌體內(nèi)合成脲酶的結(jié)果，尿素是有機物，分解尿素的細菌是分解者，而不是生產(chǎn)者，只能生產(chǎn)者才能利用CO2作為碳源合成有機物。葡萄糖通常既作為碳源，也可作為能源。 （2）篩選分

63、解尿素的細菌，通常只能用尿素作為唯一氮源，對于“NH4NO3”或“尿素+NH4NO3”均含有無機氮源。 （3）KH2PO4和Na2 HPO4為微生物提供P元素和無機鹽離子如鉀離子和鈉離子，還可作為緩沖劑保持細胞生長過程中pH穩(wěn)定。 【考點定位】微生物分離，培養(yǎng)，培養(yǎng)基中物質(zhì)作用 【名師點睛】本題考查分解尿素的微生物的分離、培養(yǎng)及培養(yǎng)基中物質(zhì)的作用，要求考生掌握微生物分離須用微生物特定需要的培養(yǎng)基來培養(yǎng)，微生物培養(yǎng)中必須有碳源、氮源、能源、生長因子、水和無機鹽等。 29．（2017新課標(biāo)Ⅱ卷·37） 豆豉是大豆經(jīng)過發(fā)酵制成的一種食品。為了研究影響豆豉發(fā)酵效果的因素，某小組將等量的甲、乙

64、兩菌種分別接入等量的A、B兩桶煮熟大豆中并混勻，再將兩者置于適宜條件下進行發(fā)酵，并在32 h內(nèi)定期取樣觀測發(fā)酵效果?；卮鹣铝袉栴}： （1）該實驗的自變量是____________________、__________________________。 （2）如果發(fā)現(xiàn)發(fā)酵容器內(nèi)上層大豆的發(fā)酵效果比底層的好，說明該發(fā)酵菌是______________________。 （3）如果在實驗后，發(fā)現(xiàn)32 h內(nèi)的發(fā)酵效果越來越好，且隨發(fā)酵時間呈直線上升關(guān)系，則無法確定發(fā)酵的最佳時間；若要確定最佳發(fā)酵時間，還需要做的事情是__________________________。 （4）從大豆到豆豉，大

65、豆中的成分會發(fā)生一定的變化，其中，蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)變?yōu)開______________________，脂肪轉(zhuǎn)變?yōu)開_________________________。 【答案】（1）菌種 發(fā)酵時間 （2）好氧菌 （3）延長發(fā)酵時間，觀測發(fā)酵效果，最好的發(fā)酵效果所對應(yīng)的時間即為最佳發(fā)酵時間 （4）氨基酸和肽 脂肪酸和甘油 【解析】（1）該實驗的自變量是菌種、發(fā)酵時間。（2）如果發(fā)現(xiàn)發(fā)酵容器內(nèi)上層大豆的發(fā)酵效果比底層的好，說明該發(fā)酵菌是好氧菌。（3）如果在實驗后，發(fā)現(xiàn)32 h內(nèi)的發(fā)酵效果越來越好，且隨發(fā)酵時間呈直線上升關(guān)系，則無法確定發(fā)酵的最佳時間；若要確定最佳發(fā)酵時間，還需要做的事情是延長

66、發(fā)酵時間，觀測發(fā)酵效果，最好的發(fā)酵效果所對應(yīng)的時間即為最佳發(fā)酵時間。（4）從大豆到豆豉，大豆中的成分會發(fā)生一定的變化，其中，蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)變?yōu)榘被岷碗?，脂肪轉(zhuǎn)變?yōu)橹舅岷透视汀? 【考點定位】發(fā)酵 【名師點睛】本題為選修實驗題，題型新穎，綜合性強，較好的考查了學(xué)生分析問題、提取信息的能力，第三問考查了學(xué)生的靈活推斷和準(zhǔn)確表述能力。總體難度適中。 30．（2017新課標(biāo)Ⅲ卷·37） 綠色植物甲含有物質(zhì)W，該物質(zhì)為無色針狀晶體，易溶于極性有機溶劑，難溶于水，且受熱、受潮易分解。其提取流程為：植物甲→粉碎→加溶劑→振蕩→收集提取液→活性炭處理→過濾去除活性炭→蒸餾（含回收溶劑）→重結(jié)晶→成品?；卮鹣铝袉栴}： （1）在提取物質(zhì)W時，最好應(yīng)選用的一種原料是___________________（填“高溫烘干”“晾干”或“新鮮”）的植物甲，不宜選用其他兩種的原因是___________________________________。 （2）提取物質(zhì)W時，振蕩的作用是______________________。 （3）活性炭具有很強的吸附能力，在提取過程中，用活性炭處理提取液的目的是__