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1、 第35講　細胞工程 [考綱要求]　1.植物的組織培養(yǎng)(Ⅱ)。2.動物細胞培養(yǎng)與體細胞克隆(Ⅱ)。3.細胞融合與單克隆抗體(Ⅱ)。 考點一　植物細胞工程 1.植物細胞工程的基本技術 (1)植物組織培養(yǎng)技術 ①理論基礎：細胞都具有全能性。 ②培養(yǎng)技術種類 a.植物細胞培養(yǎng)技術：采用的方法主要是細胞懸浮培養(yǎng)。 b.原生質體的培養(yǎng)技術：利用纖維素酶和果膠酶去除植物細胞的細胞壁，就可以獲得具有活力的原生質體。對這些原生質體的培養(yǎng)是植物體細胞雜交和顯微注射技術的基礎。 c.花粉和花藥培養(yǎng)技術：在一年時間里就可以選育出穩(wěn)定遺傳的植株。 d.離體胚培養(yǎng)技術：可以分為幼胚培養(yǎng)與成熟胚

2、培養(yǎng)兩類。這種技術通過使用相應的培養(yǎng)基使離體胚正常地萌發(fā)生長，或誘導其產生愈傷組織，再分化形成完整植株。 ③植物組織培養(yǎng)的含義：指在無菌和人工控制的條件下，將離體的植物器官、組織、細胞，培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上，給予適宜的培養(yǎng)條件，最終誘導產生愈傷組織、叢芽或完整的植株。 (2)植物體細胞雜交技術 ①含義：是將不同種的植物體細胞原生質體在一定條件下融合成雜種細胞，并把雜種細胞培育成完整植物體的技術。 ②原生質體間的融合一般要利用人工誘導的方法，可以分為物理法和化學法兩大類。 (3)植物細胞工程含義：是利用細胞生物學和分子生物學的原理和方法，以植物細胞為基本單位進行培養(yǎng)增殖或按照人們的

3、意愿來改造細胞的某些生物學特性，從而獲得細胞產品的一門綜合技術。 深化拓展　植物體細胞雜交后的遺傳物質分析 (1)遺傳特性：雜種植株中含有兩種植物的遺傳物質，故雜種植株具備兩種植物的遺傳特性。 (2)染色體組數(shù) ①染色體組數(shù)＝兩種植物體細胞內染色體組數(shù)之和。 ②植物體細胞雜交形成的雜種植株，有幾個染色體組就稱為幾倍體。 ③若一植物細胞含有2x條染色體，2個染色體組，基因型為Aabb，另一植物細胞含有2y條染色體，2個染色體組，基因型為ccDd，則新植株應為異源四倍體，其體細胞中染色體數(shù)為(2x＋2y)條，4個染色體組，基因型為AabbccDd。 2.植物細胞工程的應用 (1)植

4、物的微型快速繁殖 ①含義：利用植物的組織或器官，經過組織培養(yǎng)過程，可以在短時間內獲得大量的植物幼苗。 ②應用：現(xiàn)在一些優(yōu)良的觀賞植物、經濟林木等都已經實現(xiàn)利用工廠化微型繁殖來進行大規(guī)模的無性繁殖。 (2)人工種子 ①含義：是一種以植物組織培養(yǎng)得到的胚狀體為主要材料，再在其外面包裹一層有機薄膜制作而成的顆粒體。 ②成分：人工種子的薄膜包含胚狀體萌發(fā)和發(fā)育成幼苗所需的各種養(yǎng)分，還可以緩沖生產、貯存、運輸和種植過程中的碰撞。另外在包裹劑中一般要附加大量的植物生長調節(jié)劑、農藥、抗生素和一些有益的菌種等。 (3)作物脫毒 ①依據(jù)：病毒在植株中的分布是不均一的，成熟的組織和器官中病毒含量高，

5、幼嫩的組織和器官中病毒含量較低，生長點幾乎不含病毒或病毒很少。 ②應用：目前已經有多種作物成功利用莖尖組織培養(yǎng)技術進行脫毒處理，使植物在產量和品質上都有了顯著的提高。 (4)愈傷組織的誘變育種 ①依據(jù)：植物的愈傷組織在培養(yǎng)過程中一直處于分裂增生的狀態(tài)，其遺傳物質極易受到外界因素的影響而發(fā)生變異。 ②過程：育種學家利用植物組織先誘導出愈傷組織，然后對愈傷組織進行誘變處理，從再分化得到的植株中篩選、培育出新的品系或品種。 (5)細胞產物的工廠化生產 ①依據(jù)：植物細胞培養(yǎng)技術可以快速、高效地得到大量的細胞或細胞產物。 ②過程：利用組織培養(yǎng)方法，培養(yǎng)植物的某些器官或愈傷組織，篩選出高產、

6、高合成能力和生長較快的細胞株系，繼而進行大規(guī)模工業(yè)化生產。 (6)拯救瀕危植物 現(xiàn)在科學家正在研究利用植物細胞培養(yǎng)技術來大量培育紅豆杉細胞，希望利用這種方法來大量生產紫杉醇，從而拯救紅豆杉，拯救我們的自然資源。 1.有關細胞全能性與組織培養(yǎng)的判斷 (1)棉花根尖細胞經誘導形成幼苗能體現(xiàn)細胞的全能性(　√　) (2)植物的每個細胞在植物體內和體外都能表現(xiàn)出細胞的全能性(　×　) (3)在誘導離體菊花莖段形成幼苗的過程中，不會發(fā)生細胞的增殖和分化(　×　) (4)愈傷組織是外植體通過脫分化和再分化后形成的(　×　) (5)經植物組織培養(yǎng)得到的胚狀體用人工薄膜包裝后可得到人工種子

7、(　√　) 2.有關植物體細胞雜交技術的判斷 (1)利用物理法或化學法可以直接將兩個植物細胞進行誘導融合(　×　) (2)用纖維素酶和果膠酶水解法獲得的植物原生質體失去了全能性(　×　) (3)再生出細胞壁是原生質體融合成功的標志(　√　) (4)培養(yǎng)草莓脫毒苗所采用的主要技術是細胞雜交(　×　) 據(jù)圖分析植物體細胞雜交過程 (1)植物體細胞雜交依據(jù)的生物學原理是什么？ 提示　細胞膜的流動性、植物細胞的全能性。 (2)如何根據(jù)細胞膜表面熒光判斷該原生質體是由番茄和馬鈴薯融合而成的？ 提示　融合的細胞表面既有紅色熒光又有綠色熒光。 (3)若番茄細胞內有m條染色體，馬

8、鈴薯細胞內有n條染色體，則“番茄—馬鈴薯”細胞在有絲分裂后期含有多少條染色體？ 提示　2(m＋n)條。 (4)若雜種細胞培育成的“番茄—馬鈴薯”植株為四倍體，則此雜種植株的花粉經離體培育得到的植株屬于幾倍體植株？ 提示　單倍體植株。 命題點一　植物組織培養(yǎng)過程的分析 1.某興趣小組擬用組織培養(yǎng)繁殖一種名貴花卉，其技術路線為“取材→消毒→愈傷組織培養(yǎng)→出芽→生根→移栽”。下列有關敘述錯誤的是(　　) A.消毒的原則是既殺死材料表面的微生物，又減少消毒劑對細胞的傷害 B.在愈傷組織培養(yǎng)中加入細胞融合的誘導劑，可獲得染色體加倍的細胞 C.出芽是細胞再分化的結果，受基因選擇性表達的

9、調控 D.生根時，培養(yǎng)基通常應含α－萘乙酸等生長素類調節(jié)劑 答案　B 解析　植物組織培養(yǎng)中消毒的原則是既殺死材料表面的微生物，又減少消毒劑對培養(yǎng)材料的傷害，A項正確；植物體細胞的雜交需先除去細胞壁得到原生質體，再在細胞融合誘導劑作用下獲得染色體加倍的細胞，B項錯誤；細胞分化的實質是基因的選擇性表達，C項正確；植物組織培養(yǎng)過程中，生根階段的培養(yǎng)基中通常應含有生長素類調節(jié)劑，D項正確。 2.(2018·臨川第一中學模擬)如圖是通過植物細胞工程技術獲得紫杉醇的途徑，下列敘述正確的是(　　) A.該途徑依據(jù)的原理是植物細胞具有全能性 B.過程①需控制好培養(yǎng)基中植物激素的比例 C.經過

10、程①細胞的形態(tài)和結構未發(fā)生變化 D.過程③需使用固體培養(yǎng)基，有利于細胞增殖 答案　B 解析　細胞全能性以細胞發(fā)育成個體為標志，而圖中并沒有形成完整植物體，A項錯誤；過程①是脫分化，而決定植物脫分化和再分化的關鍵因素是培養(yǎng)基中植物激素的種類和比例，因此該過程需控制好培養(yǎng)基中植物激素的比例，B項正確；過程①是脫分化，經該過程細胞的形態(tài)和結構發(fā)生了變化，成為高度液泡化的薄壁細胞，C項錯誤；過程③需使用液體培養(yǎng)基，有利于細胞增殖，D項錯誤。 植物組織培養(yǎng)中生長素和細胞分裂素的比值與效果 生長素/細胞分裂素的比值 作用效果 比值高時 促進根分化、抑制芽形成 比值低時 促進芽分化、

11、抑制根形成 比值適中 促進愈傷組織形成 命題點二　植物體細胞雜交過程分析 3.“白菜—甘藍”是用細胞工程的方法培育出來的蔬菜新品種，它具有生長期短、耐熱性強和易于儲藏等優(yōu)點。如圖是“白菜—甘藍”的雜交過程示意圖。以下說法正確的是(　　) A.除去細胞壁形成原生質體，可運用的酶是纖維素酶、淀粉酶和果膠酶 B.通?？烧T導上述原生質體相互融合的方法是PEG和滅活的病毒誘導 C.雜種細胞形成的標志是誘導產生了新的細胞壁 D.愈傷組織形成“白菜—甘藍”植物體必須經過脫分化和再分化兩個過程 答案　C 解析　除去細胞壁的酶有纖維素酶和果膠酶；誘導植物原生質體融合不能用滅活的病毒；

12、雜種細胞形成的標志是誘導產生了新的細胞壁；愈傷組織形成“白菜—甘藍”植物體屬于再分化過程。 4.下列關于植物體細胞雜交的敘述中，錯誤的是(　　) A.不同種植物原生質體融合的過程屬于植物體細胞雜交過程 B.參與雜種細胞細胞壁形成的細胞器主要是線粒體和核糖體 C.植物體細胞雜交技術可克服生殖隔離的限制，培育遠緣雜交植株 D.雜種植株表現(xiàn)出的性狀是基因選擇性表達的結果 答案　B 解析　植物體細胞雜交就是將不同種的植物體細胞原生質體在一定條件下融合成雜種細胞，并把雜種細胞培育成完整植物體的技術。雜種植株能具有兩種植物的性狀，但是由于基因的選擇性表達，其不能表現(xiàn)兩種植物所有的性狀，細胞壁

13、的主要成分是纖維素和果膠，形成過程與高爾基體有關。 命題點三　植物細胞工程的綜合應用 5.為了獲得植物次生代謝產物，先用植物外植體獲得愈傷組織，然后在液體培養(yǎng)基中懸浮培養(yǎng)。請回答下列問題： (1)外植體經誘導后形成愈傷組織的過程稱為_________________________________。 (2)在愈傷組織懸浮培養(yǎng)時，細胞干重、蔗糖濃度和pH的變化如下圖所示。細胞干重在12 d后下降的原因有__________________；培養(yǎng)液中蔗糖的作用是________________、________________。 (3)多倍體愈傷組織細胞產生的次生代謝產物量常高于二倍

14、體。二倍體愈傷組織細胞經________________處理，會產生染色體加倍的細胞。為檢測愈傷組織細胞染色體數(shù)目，壓片前常用纖維素酶和________酶解離愈傷組織。若愈傷組織細胞(2n)經誘導處理后，觀察到染色體數(shù)為8n的細胞，合理的解釋是_____________________、________________________ _____________________________________。 答案　(1)脫分化　(2)蔗糖濃度下降，pH降低　提供能源　調節(jié)滲透壓　(3)秋水仙素(低溫)　果膠　經加倍到4n的細胞處于有絲分裂后期　經加倍到8n的細胞處于有絲分裂中期 解析　

15、(1)外植體經誘導形成愈傷組織的過程稱為脫分化。 (2)觀察圖示可知，12 d后蔗糖濃度和pH都下降到較低水平，影響能量的供應和酶的活性，導致細胞干重下降。另外，培養(yǎng)液中的蔗糖還具有調節(jié)滲透壓的作用。 (3)在細胞分裂過程中，用低溫或秋水仙素處理，都可抑制紡錘體的形成，使染色體不能移向兩極，從而使細胞中染色體數(shù)目加倍。愈傷組織的細胞之間含有纖維素和果膠，欲將其分散成單個細胞，壓片前需用纖維素酶和果膠酶處理。愈傷組織細胞經誘導處理后，有的細胞染色體數(shù)目加倍(4n)，有的細胞染色體數(shù)目未加倍(2n)，也可能有的細胞在連續(xù)分裂中每次都因低溫或秋水仙素抑制了紡錘體的形成，導致細胞中染色體數(shù)目連續(xù)加

16、倍，出現(xiàn)染色體數(shù)目為8n的細胞。所以染色體數(shù)目加倍到4n的細胞處于有絲分裂后期時染色體數(shù)目為8n，染色體數(shù)目加倍到8n的細胞處于有絲分裂中期時染色體數(shù)目也為8n。 6.利用相關工程技術可以獲得抗黑腐病雜種黑芥—花椰菜植株，已知野生黑芥具有黑腐病的抗性基因，而花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病，技術人員用一定劑量的紫外線處理黑芥原生質體可使其染色體片段化，并喪失再生能力，再利用此原生質體作為部分遺傳物質的供體與完整的花椰菜原生質體融合，流程如下圖。據(jù)圖回答下列問題： (1)該過程用到的工程技術有________________和________________。 (2)過程①所需的酶是

17、____________________________，過程②PEG的作用是________________，經過②操作后，需篩選出融合的雜種細胞，顯微鏡下觀察融合的活細胞中有供體的葉綠體存在可作為初步篩選雜種細胞的標志。 (3)原生質體培養(yǎng)液中需要加入適宜濃度的甘露醇以保持一定的滲透壓，其作用是__________________________。原生質體經過細胞壁再生，進而分裂和脫分化形成________________________________________________________________________。 (4)若分析再生植株的染色體變異類型，應剪取再生植

18、株和雙親植株的根尖，制成裝片，然后在顯微鏡下觀察比較染色體的______________；將雜種植株栽培在含有________________的環(huán)境中，可篩選出具有高抗性的雜種植株。 答案　(1)植物體細胞雜交　植物組織培養(yǎng)　(2)纖維素酶和果膠酶　促進原生質體的融合　(3)保持原生質體完整性　愈傷組織　(4)形態(tài)和數(shù)目　黑腐病菌 解析　(1)據(jù)圖可知，該流程圖表示先去掉兩種植物細胞的細胞壁，然后誘導融合獲得雜種細胞，通過植物組織培養(yǎng)獲得雜種植株，該過程是植物體細胞雜交。(2)植物細胞細胞壁的成分是纖維素和果膠，因此采用纖維素酶和果膠酶去掉植物細胞的細胞壁；聚乙二醇(PEG)的作用是促進原

19、生質體的融合。(3)去掉細胞壁后獲得的原生質體需要放在適宜濃度的甘露醇溶液中，保持原生質體完整性，避免失水或吸水；在植物組織培養(yǎng)中，經過脫分化后形成愈傷組織。(4)由于染色體在顯微鏡下能看見，因此可以制作臨時裝片，觀察染色體的形態(tài)和數(shù)目，以確定是否發(fā)生染色體變異；對雜種植物進行鑒定最簡單的方法是從個體水平上進行檢測，即接種黑腐病菌，觀察植物的性狀。 植物體細胞雜交過程中雜種細胞類型及檢測方法 (1)誘導產生的細胞(假設用于雜交的兩種植物細胞分別為A、B) ①未融合的細胞：A和B。 ②兩兩融合的細胞：AA、BB和AB。 ③多細胞融合體。 (2)檢測方法：對誘導產生的細胞進行植物組

20、織培養(yǎng)，然后根據(jù)得到的植物性狀進行判斷。 ①若得到的是一種植物的性狀，說明是未融合細胞。 ②若得到的是具有兩種親本性狀的植物，說明是雜種植株。 ③若得到的是具有兩種親本性狀的植物，且一種植物的性狀得到加強，則是多細胞融合體。 ④若得到的是一種植物的性狀且效果得到加強，則是同種細胞融合的結果。 考點二　動物細胞工程 1.動物細胞工程的主要技術 動物細胞工程就是應用細胞學的方法，按照我們人類的需要和預定的設計，有目的、有計劃地保存、改變動物細胞和創(chuàng)造新的動物細胞，進而培育成新的物種或者品種的一門科學技術。 動物細胞工程包括很多種常用的技術，如動物細胞培養(yǎng)、動物細胞融合、單克隆抗

21、體和動物體細胞克隆等。 (1)哺乳動物細胞培養(yǎng)技術 ①動物細胞培養(yǎng)條件 a.動物細胞都要在液體培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)。培養(yǎng)液的營養(yǎng)成分主要包括葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素和動物血清等。 b.培養(yǎng)容器中必須有足夠的氧氣和一定的二氧化碳，以保證細胞代謝活動的進行。 c.動物細胞培養(yǎng)環(huán)境的溫度與動物體內的溫度要保持一致。 ②動物細胞培養(yǎng)流程 a.取材：一般都取自動物的胚胎或幼齡動物的組織或器官。 b.過程 i.在無菌條件下，從動物體內取出組織塊并剪碎，然后加入適量的胰蛋白酶或膠原纖維酶消化以使細胞分散。 ii.經過濾、離心后將動物細胞再接種到無菌的培養(yǎng)液中，在適宜的條件下進行靜止或慢

22、速轉動培養(yǎng)，這個過程稱為原代培養(yǎng)。 iii.出現(xiàn)接觸抑制的細胞按一定的比例分散到另外的培養(yǎng)瓶內，并加入新的培養(yǎng)液，細胞就會解除接觸抑制、恢復生長，這種分瓶培養(yǎng)稱為傳代培養(yǎng)。 ③細胞生長特點：貼壁生長、接觸抑制。 ④細胞株與細胞系 細胞株是指一般可以傳到40～50代的細胞。 細胞系是指遺傳物質發(fā)生了改變，可以無限制地傳代下去，成為“長生不老”的細胞。 深化拓展　植物組織培養(yǎng)與動物細胞培養(yǎng)的比較 比較項目 植物組織培養(yǎng) 動物細胞培養(yǎng) 理論基礎 植物細胞的全能性 細胞增殖 前處理 無菌、離體 無菌；用胰蛋白酶處理，使組織細胞相互分散開 取材 植物較幼嫩的部位或花藥等

23、 動物胚胎或出生不久的幼齡動物的器官或組織 培養(yǎng)基性質 固體 液體 培養(yǎng)基成分 水、礦質元素、蔗糖、維生素、植物激素、瓊脂等 葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素、動物血清等 結果 最終產生新個體，體現(xiàn)了細胞的全能性 細胞培養(yǎng)產生大量細胞，不形成新個體，不能體現(xiàn)細胞的全能性 相同點 ①都需人工條件下的無菌操作；②都需要適宜的溫度、pH等條件；③都進行有絲分裂，都不涉及減數(shù)分裂 (2)細胞融合與單克隆抗體技術 ①細胞融合 a.含義：是在一些融合因子的作用下，將兩個或兩個以上的細胞合并成為一個細胞的技術。 b.誘導因素：如利用聚乙二醇、電流刺激或病毒等。 c.原理：

24、在誘導因素的作用下，細胞膜會發(fā)生一定程度的損傷，從而細胞就可以實現(xiàn)相互粘連而融合在一起。 深化拓展　植物體細胞雜交與動物細胞融合比較 植物體細胞雜交 動物細胞融合 培養(yǎng)條件 營養(yǎng)物質(水、無機鹽、蔗糖、氨基酸和有機酸等)、激素(細胞分裂素、生長素等)及其他條件(無菌、適宜的溫度和pH等) 葡萄糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素、血清或血漿等天然成分 細胞融 合原理 細胞膜的流動性、細胞的全能性 細胞膜的流動性、細胞增殖 細胞融 合方法 用纖維素酶、果膠酶去除細胞壁后誘導原生質體融合 用胰蛋白酶或膠原纖維酶使細胞分散成單個細胞后，誘導細胞融合 誘導手段

25、①物理法：離心、振動、電刺激等 ②化學法：聚乙二醇(PEG) ①物理、化學法：與植物體細胞雜交的相同 ②生物法：滅活的病毒 結果 獲得雜種植株 獲得雜種細胞，以生產細胞產品 用途 克服不同生物遠緣雜交不親和的障礙 制備單克隆抗體、病毒疫苗、干擾素等 ②單克隆抗體 a.含義：由一個B淋巴細胞增殖形成的細胞群所產生的單一型抗體分子。 b.應用：用單克隆抗體可以快捷、準確地診斷和治療一些疾病。 c.制備：用小鼠體內的B淋巴細胞和一種營養(yǎng)缺陷型的骨髓瘤細胞作為實驗材料，利用聚乙二醇為融合劑，使兩種細胞發(fā)生融合。然后利用只有雜交瘤細胞才能生長的選擇培養(yǎng)液來篩選出雜交瘤細胞使

26、之產生特異性抗體。 (3)動物體細胞克隆技術 ①多莉的培育過程 利用細胞核移植技術，將饑餓處理過的羊乳腺上皮細胞與去核卵細胞電脈沖融合后，實現(xiàn)體細胞的核轉移到無核的卵細胞中。然后，融合細胞借助于卵的發(fā)育能力，由體細胞核主導而發(fā)育形成新的個體。 ②存在的問題：克隆羊多莉和其他一些克隆動物在培養(yǎng)和生長歷程中出現(xiàn)的一系列異常表明，動物體細胞克隆技術仍然存在著一些不足和缺陷，我們對克隆技術的探索仍然是任重道遠。 2.動物細胞工程的應用 (1)快速繁殖優(yōu)良品種。 (2)克隆轉基因動物。 (3)拯救瀕臨滅絕的動物。 (4)培育人造器官。 1.有關哺乳動物細胞培養(yǎng)技術的判斷 (1)

27、制備肝細胞懸液時先用剪刀剪碎肝組織，再用胃蛋白酶處理(　×　) (2)肝細胞培養(yǎng)過程中通常在培養(yǎng)液中通入5%的CO2刺激細胞呼吸(　×　) (3)在25 ℃的實驗條件下可順利完成大鼠神經細胞的培養(yǎng)(　×　) (4)培養(yǎng)保留接觸抑制的細胞在培養(yǎng)瓶壁上可形成多層細胞(　×　) (5)克隆培養(yǎng)法培養(yǎng)過程中多數(shù)細胞的基因型會發(fā)生改變(　×　) (6)二倍體細胞的傳代培養(yǎng)次數(shù)通常是無限的(　×　) 2.有關植物體細胞雜交與動物細胞融合的判斷 (1)植物原生質體融合與動物細胞融合原理是相同的(　√　) (2)體細胞雜交技術可用于克隆動物和制備單克隆抗體(　×　) (3)小鼠骨髓瘤細胞的染

28、色體數(shù)為40，B淋巴細胞的染色體數(shù)為46，融合后形成的雜交瘤細胞DNA分子數(shù)為86(　×　) (4)雜交瘤細胞進行體內培養(yǎng)，是為了獲得能產生單克隆抗體的胚胎(　×　) (5)B淋巴細胞和骨髓瘤細胞經細胞融合后有三種細胞類型(若僅考慮兩兩融合的情況)(　√　) 3.有關動物體細胞克隆技術的判斷 (1)動物細胞核移植的受體細胞必須是卵細胞(　×　) (2)克隆動物的性狀與供體動物完全相同(　×　) (3)與“多莉”羊等克隆哺乳動物相關的技術有胚胎移植、細胞培養(yǎng)和核移植(　√　) (4)用于核移植的供體細胞一般都選用10代以內的培養(yǎng)細胞(　√　) 1.如圖為動物細胞培養(yǎng)過程中細胞

29、增殖情況的變化曲線，圖中B、E兩點表示經篩選、分裝后繼續(xù)培養(yǎng)。據(jù)圖分析： (1)原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)的分界點是哪個？ 提示　B點之前的培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)，之后的培養(yǎng)稱為傳代培養(yǎng)。 (2)AB段和DE段繁殖速度緩慢的原因是什么？ 提示　AB段發(fā)生了接觸抑制；DE段細胞大部分衰老失去分裂能力。 (3)E點后的細胞大多數(shù)具有異倍體核型，這樣的細胞有什么特點？ 提示　E點后的細胞屬于細胞系，能無限增殖。 2.下圖為制備單克隆抗體和多克隆抗體的示意圖，據(jù)圖分析： (1)與多克隆抗體相比，單克隆抗體的優(yōu)點有哪些？ 提示　單克隆抗體的優(yōu)點是特異性強、靈敏度高，可大量制備。 (2)圖中

30、第一次篩選和第二次篩選的目的有何不同？ 提示　第一次篩選的目的是篩選出雜交瘤細胞，第二次篩選的目的是篩選出能產生所需單克隆抗體的雜交瘤細胞。 命題點一　動物細胞培養(yǎng)過程的分析 1.下列有關動物細胞培養(yǎng)的敘述，正確的是(　　) A.動物細胞培養(yǎng)過程中，可用胃蛋白酶處理使細胞分散開 B.通過動物細胞培養(yǎng)獲得大量細胞，可證明動物細胞具有全能性 C.動物細胞培養(yǎng)技術是其他動物細胞工程技術的基礎 D.動物細胞培養(yǎng)選用的培養(yǎng)材料大多是動物的受精卵 答案　C 解析　動物細胞培養(yǎng)過程中，應用胰蛋白酶或膠原纖維酶處理使細胞分散開，A項錯誤；通過動物細胞培養(yǎng)獲得大量細胞，沒有獲得完整個體，不

31、能證明動物細胞具有全能性，B項錯誤；動物細胞培養(yǎng)選用的培養(yǎng)材料大多是幼齡動物的組織或細胞，D項錯誤。 2.回答下列有關動物細胞培養(yǎng)的問題： (1)在動物細胞培養(yǎng)過程中，當貼壁細胞分裂生長到細胞表面______________時，細胞會停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細胞的____________。此時，瓶壁上形成的細胞是________層。要使貼壁的細胞從瓶壁上分離下來，需要用酶處理，用到的酶是____________。 (2)隨著細胞傳代次數(shù)的增多，絕大部分細胞分裂停止，進而出現(xiàn)__________________現(xiàn)象；但極少數(shù)細胞可以連續(xù)增殖，其中有些細胞會因遺傳物質發(fā)生改變而獲得____

32、____，該種細胞的黏著性________，細胞膜表面蛋白質(糖蛋白)的量________。 (3)現(xiàn)用某種大分子染料對細胞進行染色時，觀察到死細胞被染色，而活細胞不被染色，原因是_______________________________________________________________________。 (4)檢查某種毒物是否能改變細胞染色體的數(shù)目，最好選用分裂________期的細胞在顯微鏡下進行觀察。 (5)在細胞培養(yǎng)過程中，通常在________條件下保存細胞。因為在這種條件下，細胞中________的活性降低，細胞______________速率降低。 答案

33、　(1)相互接觸　接觸抑制　單(或一)　胰蛋白酶(或膠原纖維酶)　(2)衰老甚至死亡　不死性　降低　減少　(3)活細胞的細胞膜具有選擇透過性，大分子染料不能進入活細胞內(或死細胞的細胞膜喪失了選擇透過性，大分子染料能夠進入死細胞內而著色)　(4)中 (5)冷凍(或超低溫、液氮)　酶　新陳代謝 解析　(1)細胞接觸抑制是指細胞表面相互接觸時，細胞就會停止分裂增殖的現(xiàn)象?；谏鲜鎏匦?，瓶壁上形成的細胞是單層排列的。需要用胰蛋白酶將貼壁的細胞從瓶壁上分離下來。(2)隨著細胞傳代次數(shù)的增多，絕大部分細胞分裂停止，進而出現(xiàn)衰老甚至死亡現(xiàn)象，但極少數(shù)細胞可以連續(xù)增殖，其中有些細胞會因遺傳物質發(fā)生改變而

34、變成不死性細胞。該種細胞由于細胞表面糖蛋白減少，其黏著性降低。(3)活細胞的細胞膜具有選擇透過性，大分子染料不能通過，所以活細胞不被染色；死細胞的細胞膜失去了選擇透過性，大分子染料可以通過，所以死細胞能被大分子染料染色。(4)有絲分裂中期時染色體的著絲點排列在赤道板上，染色體形態(tài)固定、數(shù)目清晰，是觀察染色體數(shù)目的最佳時期。(5)在細胞培養(yǎng)過程中，通常在冷凍(或超低溫、液氮)條件下保存細胞。因為在這種條件下，細胞中酶的活性降低，細胞新陳代謝的速率降低。 動物細胞培養(yǎng)的2個易錯點 (1)動物細胞培養(yǎng)時選用幼齡動物組織或胚胎進行細胞培養(yǎng)，因為其分化程度低，增殖能力強，更易于培養(yǎng)。 (2)動

35、物細胞培養(yǎng)時加入CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH；O2 的作用是促進細胞有氧呼吸。 命題點二　細胞融合與單克隆、抗體制備過程分析 3.關于下面制備單克隆抗體過程示意圖的敘述，不正確的是(　　) A.①表示已免疫的B淋巴細胞和骨髓瘤細胞均是從小鼠的脾臟中提取的 B.②促進細胞融合的方法可以利用聚乙二醇作介導 C.④中的篩選是通過抗原—抗體反應進行的 D.⑤可以無限增殖 答案　A 解析　已免疫的B淋巴細胞可以從小鼠的脾臟中提取，也可以從血漿中提取，骨髓瘤細胞是從小鼠的骨髓中提取的。單克隆抗體是利用已免疫的B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合形成的雜交瘤細胞得到的，融合方法可以用化學方法

36、——聚乙二醇，生物方法——滅活的病毒等。如果要篩選能產生特定抗體的細胞群，可以通過檢測抗原—抗體反應，如果有反應說明產生了抗體。融合細胞具有雙親的特點，既能無限增殖又能產生單一抗體。 4.(2017·平羅中學第一次月考)類風濕性關節(jié)炎(RA)是一種自身免疫病，致殘性強。研究表明，該病的致病機理與腫瘤壞死因子－α(TNF－α)密切相關，而一種人鼠嵌合的抗TNF－α單克隆抗體能有效治療RA。如圖為該單克隆抗體制備過程示意圖，請據(jù)圖回答下列問題： (1)單克隆抗體的制備涉及細胞工程中的____________、____________技術。 (2)圖中抗原A是______________，

37、HAT培養(yǎng)基的作用是________________。將B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合后的雜種細胞具有的特點是____________________________________。 (3)醫(yī)療上，把單克隆抗體與化學藥物或細胞毒素相結合制成“______________”，借助抗體的定向作用將藥物帶到病變細胞并將其殺死。 (4)克隆動物是指用______________方法得到的動物。 (5)單克隆抗體的特點是____________、____________、____________。 答案　(1)動物細胞融合(或雜交瘤)　動物細胞培養(yǎng)　(2)腫瘤壞死因子－α(或TNF－α)　篩選出雜

38、交瘤細胞　既能大量增殖，又能產生特異性抗體　(3)生物導彈　(4)(動物體細胞)核移植　(5)特異性強　靈敏度高　并可大量制備 解析　(1)單克隆抗體的制備涉及動物細胞培養(yǎng)和動物細胞融合技術。(2)圖中刺激免疫動物產生抗TNF－α單克隆抗體的抗原是腫瘤壞死因子－α(或TNF－α)。HAT培養(yǎng)基的作用是篩選出雜交瘤細胞。雜交瘤細胞既能無限增殖，又能產生特異性抗體。(3)醫(yī)療上，把單克隆抗體與化學藥物或細胞毒素相結合制成“生物導彈”，借助抗體的定向作用將藥物帶到病變細胞并將其殺死。(4)克隆動物是指用核移植方法得到的動物。(5)單克隆抗體的特點是：特異性強、靈敏度高，并可大量制備。 5.(20

39、17·合肥三模)下圖表示細胞工程的流程圖(a、b表示過程)，請據(jù)圖回答下列問題： (1)若圖示為動物細胞融合的過程，則a特有的誘導劑是______________________。以動物細胞融合為基礎發(fā)展起來的雜交瘤技術為制造單克隆抗體開辟了新途徑，通過把能產生抗體的____________細胞與能在體外大量增殖的________________細胞進行融合，得到既能迅速大量繁殖，又能產生專一抗體的雜交瘤細胞。 (2)若圖示為植物體細胞雜交過程，則在甲、乙融合之前，需要用__________________(填酶)制備________。這項工程的意義是_________________

40、_____________。 (3)由甲、乙融合得到丙細胞的基本原理是______________________。 答案　(1)滅活的病毒　B淋巴(漿)　骨髓瘤　(2)纖維素酶和果膠酶　原生質體　克服遠緣雜交不親和的障礙，擴大親本組合的范圍　(3)細胞膜的流動性 解析　(1)若a是誘導動物細胞融合，則特有的誘導劑是滅活的病毒。在單克隆抗體的制備過程中，利用已免疫的B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合，形成雜交瘤細胞，該細胞既可以迅速大量增殖，又可以產生專一的抗體。(2)在植物體細胞雜交過程中，需要對甲、乙細胞先用纖維素酶和果膠酶去除細胞壁，然后再誘導甲、乙的原生質體融合。該技術可以克服遠緣雜交不

41、親和的障礙，擴大親本組合的范圍。(3)甲、乙細胞融合形成丙細胞，利用了細胞膜的流動性。 命題點三　動物體細胞克隆過程的分析 6.如圖是某克隆羊培育過程模式圖，試分析獲得該克隆羊的生殖方式、該克隆羊的基因型以及該克隆羊發(fā)育成熟時所分泌的性激素依次是(　　) A.無性生殖、Aa、雌激素 B.無性生殖、aa、雄激素 C.有性生殖、aa、雄激素 D.有性生殖、AA、雌激素 答案　B 解析　克隆羊是利用了細胞核移植技術，其生殖方式為無性生殖；該克隆羊繼承了B羊的全部的細胞核基因和A羊的細胞質基因，因此其基因型為aa；由于B羊為雄性，因此該克隆羊亦為雄性，故該克隆羊發(fā)育成熟時分泌的性激

42、素是雄激素，故B項正確。 7.(2017·青島模擬)克隆羊的成功轟動世界，它不僅奠定了疾病克隆性治療的基礎，又解決了器官移植中供體不足的問題，同時也給人類帶來了一些過去尚未遇到的問題。下圖為人類對克隆羊技術的拓展和應用，請據(jù)圖回答： (1)圖中所涉及的現(xiàn)代生物技術有______________________和________________等。若讓動物1能夠產生出人體胰島素，還需要的技術是__________________________________________。 (2)圖中兩個克隆動物長大后，各方面特征與雄性動物相同，這說明____________具有全能性。 (3)

43、使用培養(yǎng)基進行胚胎干細胞培養(yǎng)時，培養(yǎng)基中除了加入一些必要的營養(yǎng)成分外，通常要加入____________等天然成分，除了保證被培養(yǎng)細胞處于無菌、無毒及充足氧氣的環(huán)境中，還需要保證細胞生活所需的____________。 (4)圖中“從內細胞團到胚胎干細胞”的培養(yǎng)過程中，一般用____________處理內細胞團，使之分散成單個細胞。 答案　(1)動物細胞核移植　胚胎移植(或胚胎分割)　基因工程(或DNA重組技術)　(2)體細胞核　(3)動物血清　溫度和pH　(4)胰蛋白酶(或膠原纖維酶) 解析　(1)將細胞核與去核的卵細胞構建成重組細胞，采用了動物細胞核移植技術；將重組細胞培養(yǎng)成早期胚胎

44、，采用了早期胚胎培養(yǎng)技術；將早期胚胎移植到代孕母體，采用了胚胎移植技術；從早期胚胎中分離出內細胞團，進而培育成胚胎干細胞，離不開動物細胞培養(yǎng)技術和胚胎干細胞培養(yǎng)技術的支持；早期胚胎分為胚胎1和2，運用了胚胎分割技術。若讓動物1能夠產生出人體胰島素，需要借助基因工程技術將人的胰島素基因導入相應的受體細胞，進而培育成轉基因動物1。(2)克隆動物的培育成功，說明動物體細胞核具有全能性。(3)使用培養(yǎng)基進行胚胎干細胞培養(yǎng)時，由于人們對細胞所需的營養(yǎng)物質還沒有完全搞清楚，所以培養(yǎng)基中除了加入一些必要的營養(yǎng)成分外，通常要加入動物血清等一些天然成分。除了保證被培養(yǎng)細胞處于無菌、無毒及充足氧氣的環(huán)境中，還需要

45、保證細胞生活所需的溫度和pH。(4)從“內細胞團到胚胎干細胞”的培養(yǎng)過程中，會出現(xiàn)細胞的“接觸抑制”現(xiàn)象，因此常用胰蛋白酶(或膠原纖維酶)處理內細胞團，使之分散成單個細胞。 動物細胞核移植技術中的3個易錯點 (1)動物細胞核移植技術，體現(xiàn)了動物細胞核的全能性而非細胞的全能性。 (2)克隆屬于無性繁殖，產生新個體的性別、絕大多數(shù)性狀與供核親本一致。 (3)核移植技術獲得的動物與供核動物性狀不完全相同的原因：①克隆動物線粒體中的DNA來自去核卵(母)細胞；②性狀受環(huán)境的影響；③在個體發(fā)育過程中有可能發(fā)生基因突變。 矯正易錯　強記長句 1.具有全能性≠體現(xiàn)(實現(xiàn))全能性 具有全

46、能性：理論上，具有細胞核的活細胞都具有全能性；體現(xiàn)(實現(xiàn))全能性：只有發(fā)育成完整個體，才能說明體現(xiàn)(實現(xiàn))了細胞的全能性。 2.有關植物體細胞雜交的3個易錯點 (1)誤認為植物體細胞雜交的結果只是形成雜種細胞。植物體細胞雜交的結果最終要經過組織培養(yǎng)形成雜種植株。 (2)誤認為植物體細胞雜交屬于有性生殖。植物體細胞雜交過程中沒有有性生殖細胞的結合，因此不屬于有性生殖，應為無性生殖。 (3)誤認為雜種植株的變異類型屬于基因重組。雜種植株的染色體數(shù)通常是兩親本細胞染色體數(shù)目之和，屬于異源多倍體，所以變異類型為染色體變異。 3.B淋巴細胞要經過免疫過程，才能產生相應的抗體，所以，與營養(yǎng)缺陷型

47、骨髓瘤細胞融合的B淋巴細胞實際上是漿細胞。 4.在單克隆抗體制備過程中，有兩次篩選：第一次是篩選出雜交瘤細胞(用選擇培養(yǎng)基)；第二次是進一步篩選出能產生人們所需要抗體的雜交瘤細胞(用抗原—抗體結合法)。 1.植物組織培養(yǎng)的過程主要包括脫分化和再分化兩個階段，脫分化的結果是形成愈傷組織，再分化的結果是形成根和芽。 2.植物體細胞雜交需要用酶解法制備原生質體，所用的酶包括纖維素酶和果膠酶。 3.無論是植物體細胞雜交還是動物細胞融合，都需要誘導。 4.植物組織培養(yǎng)需要各種營養(yǎng)成分和植物激素，動物細胞培養(yǎng)也需要各種營養(yǎng)成分及動物血清。 5.植物體細胞雜交可用于作物育種，動物細胞融合可用

48、于單克隆抗體的制備。 6.產生單克隆抗體的細胞是雜交瘤細胞，它既能產生單克隆抗體又能無限增殖。 重溫高考　演練模擬 1.如圖為細胞融合示意圖(只考慮細胞兩兩融合)，若A、B分別是基因型為Hhrr、hhRr兩個煙草品種的花粉，兩對基因獨立遺傳，由于一對隱性純合基因(rr或hh)的作用，在光照強度大于800 lx時，都不能生長。下列敘述正確的是(　　) ①誘導細胞融合的方法是用滅活病毒處理，原理是細胞膜的流動性?、趯嶒為_始時必須用纖維素酶和果膠酶除去不利于原生質體融合的結構?、墼诖笥?00 lx光照下培養(yǎng)，可淘汰5種融合細胞，篩選出基因型為HhRr的雜種細胞?、芾弥参锝M織培養(yǎng)技術可將

49、融合細胞培養(yǎng)成雜種煙草植株，原理是細胞具有全能性 A.①②③④ B.①②③ C.②④ D.②③④ 答案　D 解析　誘導植物原生質體融合的方法沒有滅活的病毒，滅活的病毒只能誘導動物細胞的融合，①錯誤；實驗開始時必須用纖維素酶和果膠酶除去不利于原生質體融合的結構——細胞壁，②正確；根據(jù)基因的自由組合規(guī)律可以看出，A的花粉即配子的基因型為Hr、hr，B的花粉基因型為hR、hr，誘導融合產生的雜種細胞(只考慮兩個原生質體的融合)共有6種基因型，即HHrr、hhrr、hhRR、HhRr、Hhrr、hhRr，在大于800 lx光照下培養(yǎng)，其中HHrr、hhrr、hhRR、Hhrr、hhRr

50、的個體不能生長，只有同時具備了H和R基因才能夠生長，可淘汰5種融合細胞，篩選出基因型為HhRr的雜種細胞，③正確；利用植物組織培養(yǎng)技術可將融合細胞培養(yǎng)成雜種煙草植株，原理是細胞具有全能性，④正確。 2.(2017·武漢調研)應用植物組織培養(yǎng)技術，不僅可實現(xiàn)種苗的快速繁殖、培育無病毒植株，也可加快作物及苗木育種。下面是培育柑橘耐鹽植株的實驗流程： ―→―→ 回答下列問題： (1)愈傷組織是由離體的莖段經____________過程形成的，此時愈傷組織細胞________(填“具有”或“不具有”)細胞的全能性。 (2)對愈傷組織進行了兩次處理，處理1中γ射線照射的目的是________

51、________，用γ射線不直接處理莖段而是處理愈傷組織，原因是__________________________________________；處理2中添加的物質X為________________________________________________________。 (3)植物組織培養(yǎng)技術也被廣泛應用于其他作物的育種中。在培育白菜—甘藍、三倍體無子西瓜、農桿菌介導的遺傳轉化法獲得的抗蟲棉中，必須用到植物組織培養(yǎng)技術的是____________________。 答案　(1)脫分化　具有　(2)誘發(fā)基因突變　愈傷組織細胞分裂能力強，易誘發(fā)基因突變　NaCl(或鹽)　(3)

52、白菜—甘藍、抗蟲棉 解析　(1)離體的莖段經過脫分化過程可形成愈傷組織，此時愈傷組織具有未分化的特點，細胞依然具有較高的全能性。(2)圖中對愈傷組織進行了兩次處理，第一次處理是用γ射線照射誘發(fā)愈傷組織細胞發(fā)生基因突變。愈傷組織細胞分裂能力強，易受到培養(yǎng)條件和外界壓力的影響而發(fā)生基因突變；第二次處理是抗鹽接種實驗，即在培養(yǎng)基中加入NaCl，適應一定濃度鹽的愈傷組織才可以生長，不適應的愈傷組織死亡。(3)作物育種研究中常用農桿菌介導的遺傳轉化法將含抗蟲基因的Ti質粒導入到植物體細胞中，再利用植物組織培養(yǎng)技術獲得抗蟲的農作物。運用細胞工程培育白菜—甘藍雜種植株，需要采用植物組織培養(yǎng)技術將雜種細胞培

53、養(yǎng)成雜種植株。 3.(2013·新課標Ⅱ，40)甲、乙是染色體數(shù)目相同的兩種二倍體藥用植物，甲含有效成分A，乙含有效成分B。某研究小組擬培育同時含有A和B的新型藥用植物。 回答下列問題： (1)為了培育該新型藥用植物，可取甲和乙的葉片，先用________酶和________酶去除細胞壁，獲得具有活力的________，再用化學誘導劑誘導二者融合。形成的融合細胞進一步培養(yǎng)形成________組織，然后經過________形成完整的雜種植株。這種培育技術稱為__________________。 (2)上述雜種植株屬于多倍體，多倍體是指__________________________

54、______。假設甲與乙有性雜交的后代是不育的，而上述雜種植株是可育的，造成這種差異的原因是______________ __________________________________________________________________________。 (3)這種雜種植株可通過制作人工種子的方法來大量繁殖。經植物組織培養(yǎng)得到的__________________________________等為主要材料用人工薄膜包裝后可得到人工種子。 答案　(1)纖維素　果膠　原生質體　愈傷　再分化(分化)　植物體細胞雜交技術 (2)由受精卵發(fā)育來的體細胞中含有三個或三個以上染色體

55、組的個體　在減數(shù)分裂過程中，前者染色體聯(lián)會異常，而后者染色體聯(lián)會正?！?3)胚狀體 解析　(1)該新型藥用植物是通過植物體細胞雜交技術獲得的。要獲得有活力的原生質體才能進行體細胞雜交，因此首先用纖維素酶和果膠酶去掉植物的細胞壁，然后用PEG化學誘導劑(物理方法：離心、振動等)誘導二者的原生質體融合。然后采用植物組織培養(yǎng)技術獲得雜種植株，植物組織培養(yǎng)的主要過程是：先脫分化形成愈傷組織，然后再分化形成植物體，利用了植物細胞的全能性。(2)如果植物甲、乙是兩個物種，二者不能通過有性雜交產生可育后代，原因是甲、乙有性雜交所產生的后代在減數(shù)分裂過程中同源染色體聯(lián)會異常，也就是存在著生殖隔離。但植物甲、

56、乙通過植物體細胞雜交技術產生的后代卻是可育的，因為在減數(shù)分裂過程中同源染色體能完成正常的聯(lián)會，產生正常的配子。(3)將植物組織培養(yǎng)得到的胚狀體等為主要材料用人工薄膜包裝后可得到人工種子。 4.(2016·全國Ⅱ，40)下圖表示通過核移植等技術獲得某種克隆哺乳動物(二倍體)的流程。 回答下列問題： (1)圖中A表示正常細胞核，染色體數(shù)為2n，則其性染色體的組成可為__________________。過程①表示去除細胞核，該過程一般要在卵細胞培養(yǎng)至適當時期再進行，去核時常采用________________的方法。②代表的過程是________________。 (2)經過多次傳代后

57、，供體細胞中________________的穩(wěn)定性會降低。因此，選材時必須關注傳代次數(shù)。 (3)若獲得的克隆動物與供體動物性狀不完全相同，從遺傳物質的角度分析其原因是 ________________________________________________________________________。 (4)與克隆羊“多莉”培養(yǎng)成功一樣，其他克隆動物的成功獲得也證明了 ________________________________________________________________________。 答案　(1)XX或XY　顯微操作(去核法)　胚胎移植　(

58、2)遺傳物質　(3)卵細胞的細胞質中的遺傳物質會對克隆動物的性狀產生影響　(4)動物已分化的體細胞的細胞核具有全能性 解析　(1)因供體的性別不確定，故其細胞核內的性染色體組成為XX或XY；一般將卵細胞培養(yǎng)到減數(shù)分裂Ⅱ中期，用顯微操作法將其細胞核去除；②代表的過程是胚胎移植。(2)傳代培養(yǎng)10代以內的細胞可以保持正常的二倍體核型，超過10代以后，供體細胞中遺傳物質的穩(wěn)定性會降低。(3)克隆動物細胞質中的遺傳物質來自卵細胞的細胞質，細胞質中的遺傳物質對克隆動物的性狀會產生影響。(4)克隆動物的成功可以證明動物已分化的體細胞的細胞核具有全能性。 5.(2014·新課標Ⅰ，40)某研究者用抗原(

59、A)分別免疫3只同種小鼠(X、Y和Z)，每只小鼠免疫5次，每次免疫一周后測定各小鼠血清抗體的效價(能檢測出抗原抗體反應的血清最大稀釋倍數(shù))，結果如下圖所示。 若要制備雜交瘤細胞，需取免疫后小鼠的B淋巴細胞(染色體數(shù)目為40條)，并將該細胞與體外培養(yǎng)的小鼠骨髓瘤細胞(染色體數(shù)目為60條)按一定比例加入試管中，再加入聚乙二醇誘導細胞融合，經篩選培養(yǎng)及抗體檢測，得到不斷分泌抗A抗體的雜交瘤細胞。 回答下列問題： (1)制備融合所需的B淋巴細胞時，所用免疫小鼠的血清抗體效價需達到16 000以上，則小鼠最少需要經過______次免疫后才能有符合要求的。達到要求后的X、Y、Z這3只免疫小鼠中，

60、最適合用于制備B淋巴細胞的是______小鼠，理由是________________________________________________________________________。 (2)細胞融合實驗完成后，融合體系中除含有未融合的細胞和雜交廇細胞外，可能還有____________________________________，體系中出現(xiàn)多種類型細胞的原因是______________________________。 (3)雜交瘤細胞中有________個細胞核，染色體數(shù)目最多是________條。 (4)未融合的B淋巴細胞經多次傳代培養(yǎng)后都不能存活，原因是___

61、_____________________________________________________________________。 答案　(1)4　Y　Y小鼠的血清抗體效價最高　(2)B淋巴細胞相互融合形成的細胞、骨髓瘤細胞相互融合形成的細胞　細胞融合是隨機的，且融合率達不到100% (3)1　100　(4)不能無限增殖 解析　(1)據(jù)圖分析可知，第四次注射后X、Y、Z小鼠的血清抗體效價幾乎都達到16 000以上，小鼠Y的血清抗體的效價最高，最適合用于制備單克隆抗體。(2)融合體系中除了未融合的細胞和雜交瘤細胞之外，還有骨髓瘤細胞的自身融合細胞和B淋巴細胞的自身融合細胞。細胞的

62、融合是隨機的，并且不可能所有的細胞都融合，故體系中會出現(xiàn)多種類型的細胞。(3)動物細胞融合后形成的是具有原來兩個或多個細胞遺傳信息的單核細胞。雜交瘤細胞的細胞核中的染色體數(shù)目最多為40＋60＝100(條)。(4)正常細胞的分裂次數(shù)是有限的，且經過免疫的B淋巴細胞高度分化，不能無限增殖，經多次傳代培養(yǎng)后逐漸衰老死亡。 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 1.下圖表示利用棉花葉肉細胞原生質體培養(yǎng)進行遺傳改良的過程，據(jù)圖分析錯誤的是(　　) A.①過程需在適宜條件下用纖維素酶和果膠酶的混合物處理 B.②過程能定向誘導原生質體產生優(yōu)良性狀的突變 C.③過程中葉肉細胞失去了其特有的結構

63、和功能 D.④過程需用適宜配比的生長素和細胞分裂素處理 答案　B 解析　紫外線照射可誘導原生質體發(fā)生突變，但突變是不定向的。 2.下列有關細胞工程的敘述，正確的是(　　) A.PEG是促細胞融合劑，可直接誘導植物細胞融合 B.用原生質體制備人工種子，要防止細胞破裂 C.骨髓瘤細胞經免疫處理，可直接獲得單克隆抗體 D.核移植克隆的動物，其線粒體DNA來自供卵母體 答案　D 解析　PEG是促細胞融合劑，但植物細胞不能直接融合，需先去壁形成原生質體才能融合，A錯誤；制備人工種子應用完整的植物細胞，不需制備原生質體，B錯誤；骨髓瘤細胞不能產生抗體，C錯誤；核移植克隆的動物，其線粒體

64、來自卵細胞即線粒體DNA來自供卵母體，D正確。 3.(2018·鄭州第一中學月考)下面的簡式表示植物組織培養(yǎng)的大致過程，據(jù)此判斷錯誤的是(　　) ①②③→④ A.若①是來自不同植物體細胞融合的雜種細胞，則④可能出現(xiàn)不同植物的遺傳特性 B.若①是花粉，則④是單倍體植株，經染色體加倍后可得到穩(wěn)定遺傳的品種 C.若①是人參細胞，對②進行擴大培養(yǎng)可提高細胞產物——人參皂甙的產量 D.若①是具有雜種優(yōu)勢的農作物細胞，則用③進行微型繁殖會發(fā)生性狀分離 答案　D 解析　若①是具有雜種優(yōu)勢的農作物細胞，則用③進行微型繁殖進行的是有絲分裂，不會發(fā)生性狀分離。 4.生物技術的發(fā)展速度很快，已滅絕

65、生物的“復生”將不再是神話。如果世界上最后一頭野驢剛死亡，以下提供的“復生”野驢個體的方法中能夠成功的是(　　) A.將野驢的體細胞取出，利用細胞培養(yǎng)技術，可培育成新個體 B.將野驢的體細胞兩兩融合，再經組織培養(yǎng)培育成新個體 C.取出野驢的體細胞核移植到母家驢的去核卵母細胞中，經孕育培養(yǎng)成新個體 D.將野驢的一個基因導入家驢的受精卵中，培育成新個體 答案　C 解析　野驢的體細胞的全能性已經受到限制，不能經過培養(yǎng)形成新個體；將野驢的一個基因導入家驢的受精卵中，培育成的是帶有野驢基因的家驢；野驢的體細胞核中具有發(fā)育成野驢的全部基因，因此通過核移植技術，可使野驢“復生”。 5.用動物細

66、胞工程技術制備單克隆抗體，下列實驗步驟中錯誤的是(　　) A.將抗原注入小鼠體內，獲得能產生抗體的B淋巴細胞 B.用氯化鈣作誘導劑，促使能產生抗體的B淋巴細胞與小鼠營養(yǎng)缺陷型骨髓瘤細胞融合 C.篩選雜交瘤細胞，并從中選出能產生所需抗體的細胞群，培養(yǎng)后提取單克隆抗體 D.該雜交瘤細胞株的增殖方式和產物分別是有絲分裂和單克隆抗體 答案　B 解析　B淋巴細胞與小鼠營養(yǎng)缺陷型骨髓瘤細胞融合需要滅活的病毒、聚乙二醇或物理因素來誘導；氯化鈣不能作為誘導劑，氯化鈣的作用是在基因工程中用于提高細胞壁的通透性，便于重組質粒進入微生物細胞內。 6.藍莓中富含的花青素能有效地改善視力，下面為科學家利用植物組織培養(yǎng)的方法，大量培養(yǎng)藍莓具體流程的文字圖解。請回答下列問題： (1)用于離體培養(yǎng)的藍莓組織叫做____________，該技術的原理是________________。 (2)配制MS培養(yǎng)基時，應加入一定量的瓊脂、蔗糖、無機鹽、維生素、有機物等營養(yǎng)物質，蔗糖除作為碳源外，還具有______________________的功能。常用的培養(yǎng)基有脫分化培養(yǎng)基、生根培養(yǎng)基和生芽培養(yǎng)基，這