2022年高三生物第一輪總復(fù)習(xí) 第一編 考點(diǎn)過關(guān)練 考點(diǎn)43 DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)
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1、2022年高三生物第一輪總復(fù)習(xí) 第一編 考點(diǎn)過關(guān)練 考點(diǎn)43 DNA和蛋白質(zhì)技術(shù) 1.[xx·江蘇高考] 下列關(guān)于“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)敘述,錯誤的是( ) A.酵母和菜花均可作為提取DNA的材料 B.DNA既溶于2 mol/L NaCl溶液也溶于蒸餾水 C.向雞血細(xì)胞液中加蒸餾水?dāng)嚢?,可見玻棒上有白色絮狀? D.DNA溶液加入二苯胺試劑沸水浴加熱,冷卻后變藍(lán) 解析:酵母和菜花都含DNA物質(zhì),都可用來提取DNA,A項正確。DNA在0.14 mol/L的NaCl溶液中溶解度最小,所以DNA在2 mol/L的NaCl溶液或者蒸餾水中都能溶解,B項正確。雞血細(xì)胞加水?dāng)嚢?,?xì)胞吸水
2、漲破釋放出DNA,DNA存在于溶液中,C項錯誤。DNA與二苯胺在沸水浴條件下反應(yīng),冷卻后變藍(lán),D項正確。 答案:C 2.[xx·江蘇高考]某同學(xué)用洋蔥進(jìn)行DNA 粗提取和鑒定實(shí)驗(yàn),操作錯誤的是( ) A.加入洗滌劑后用力進(jìn)行快速、充分的研磨 B.用蛋白酶純化過濾后的研磨液中的 DNA C.加入酒精后用玻璃棒輕緩攪拌 D.加二苯胺試劑搖勻后沸水浴加熱 解析:加入洗滌劑后研磨動作要輕緩、柔和,否則容易產(chǎn)生大量的泡沫,不利于后續(xù)步驟的操作,A錯誤;利用蛋白酶分解雜質(zhì)蛋白,從而使提取的DNA與蛋白質(zhì)分開,起到純化的作用,B正確;加入酒精溶液,靜置溶液中出現(xiàn)的白色絲狀物就是粗提取的DNA
3、,用玻璃棒沿一個方向輕緩攪拌,防止斷裂,C正確;用二苯胺鑒定DNA需要水浴加熱,D正確。 答案:A 3.[xx·江蘇高考]下列關(guān)于“DNA 粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)”的敘述,正確的是( ) A.洗滌劑能瓦解細(xì)胞膜并增加DNA在NaCl溶液中的溶解度 B.將DNA絲狀物放入二苯胺試劑中沸水浴后變藍(lán) C.常溫下菜花勻漿中有些酶類會影響DNA 的提取 D.用玻棒緩慢攪拌濾液會導(dǎo)致DNA 獲得量減少 解析:本題考查DNA提取和鑒定。DNA溶解度與洗滌劑無關(guān),DNA與二苯胺在沸水浴條件下反應(yīng),冷卻后變藍(lán);用玻璃棒攪拌,使DNA吸附在玻璃棒上,且DNA量不會減少。 答案:C 1.[xx·上
4、海普陀一模]下列有關(guān)蛋白質(zhì)和DNA的提取和分離的說法,正確的是( ) A.可用蒸餾水漲破細(xì)胞的方法從豬紅細(xì)胞中提取DNA和蛋白質(zhì) B.提取DNA時,可用不同濃度的NaCl溶液反復(fù)溶解以析出蛋白質(zhì) C.透析法分離蛋白質(zhì)的依據(jù)是蛋白質(zhì)不能通過半透膜 D.用玻璃棒快速攪拌有利于提取DNA 解析:哺乳動物的成熟的紅細(xì)胞沒有細(xì)胞核,不能提取到DNA;不同濃度的NaCl溶液反復(fù)溶解去除雜質(zhì),并在0.14 mol/L時,溶解度最小,析出DNA;用玻璃棒快速攪拌容易使DNA斷裂,不利于DNA的提取。 答案:C 2.[xx·安徽蚌埠檢測]下列關(guān)于操作過程的敘述中錯誤的是( ) A.PCR反應(yīng)
5、中使用的微量離心管、槍頭、緩沖液以及蒸餾水等在使用前必須進(jìn)行高壓滅菌 B.PCR所用的緩沖液和酶應(yīng)分裝成小份,并在-20 ℃儲存 C.PCR所用的緩沖液和酶從冰箱拿出之后,迅速融化 D.在微量離心管中添加反應(yīng)成分時,每吸取一種試劑后,移液器上的吸液槍頭都必須更換 解析:為了防止外源DNA等因素的污染,PCR反應(yīng)中所用的微量離心管、槍頭、緩沖液及蒸餾水等,在使用前要進(jìn)行高壓滅菌;還要將所用的緩沖液和酶分裝成小份;并且使用一次性吸液槍頭,則A、B、D三項都正確。在使用前,將PCR所需試劑從冰箱內(nèi)拿出后,應(yīng)放在冰塊上緩慢融化,則C項錯誤。 答案:C 3.[xx·江蘇揚(yáng)州中學(xué)檢測]下列有關(guān)
6、血紅蛋白提取和分離的程序的描述,不正確的是( ) A.采血時在采血器皿中加檸檬酸鈉是為了防止血液凝固 B.混合液離心后分為4層,從上往下,第4層是血紅蛋白水溶液 C.經(jīng)過透析可對樣品進(jìn)行粗分離,透析的目的是除去分子量較小的雜質(zhì) D.通過凝膠色譜法可以除去分子量較大的雜蛋白 解析:血液離體后會凝固,采血時在采血器皿中加檸檬酸鹽可以防止凝固;透析袋能使小分子自由出入,而血紅蛋白等大分子則保留在袋內(nèi);通過凝膠色譜法可以將相對分子質(zhì)量大的雜質(zhì)蛋白除去;混合液離心后分為4層,從上往下,第3層是血紅蛋白水溶液。 答案:B 4.[xx·湖北黃岡檢測]已知某樣品中存在甲、乙、丙、丁、戊五種蛋白
7、質(zhì)分子,其分子大小、所帶電荷的性質(zhì)和數(shù)量情況如下圖所示,下列有關(guān)該樣品中蛋白質(zhì)的分離的敘述正確的是( ) A.將樣品裝入透析袋中透析12 h,若分子乙保留在袋內(nèi),則分子丙也保留在袋內(nèi) B.若用凝膠色譜柱分離樣品中的蛋白質(zhì),則分子甲移動速度最快 C.若將樣品以2000 r/min的速度離心10 min,分子戊存在于沉淀中,則分子甲也存在于沉淀中 D.若用SDS -聚丙烯酰胺凝膠電泳分離樣品中的蛋白質(zhì)分子,則分子甲和分子戊形成的電泳帶相距最遠(yuǎn) 解析:分子甲的相對分子質(zhì)量最小,進(jìn)入凝膠內(nèi)部通道而移動速度最慢;分子乙留在透析袋內(nèi),說明其相對分子質(zhì)量比較大,分子丙比分子乙相對分子質(zhì)量大,
8、所以分子丙也留在袋內(nèi);分子戊比分子甲的相對分子質(zhì)量大,故離心后分子甲可能不存在于沉淀物中;SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳中的樣品,其電泳遷移率取決于分子的大小,相對分子質(zhì)量相差越大,形成的電泳帶相距越遠(yuǎn)。 答案:A 5.[xx·安師大附中月考]下列對PCR擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)的描述錯誤的是( ) A.實(shí)驗(yàn)中通過加熱使目的基因DNA解旋,沒有加入解旋酶和ATP B.在設(shè)計2種引物時,需要讓引物和引物之間的堿基序列互補(bǔ) C.緩沖溶液中要提供DNA模板、引物、原料、耐熱的DNA聚合酶 D.為避免外源DNA污染,實(shí)驗(yàn)中的槍頭、緩沖液等在使用前必須高壓滅菌 解析:PCR過程中不需要解旋酶和ATP,A正確
9、;PCR需要DNA模板、引物、原料、耐熱的DNA聚合酶、緩沖溶液等條件,C正確;若外源細(xì)菌、病毒等的DNA隨槍頭、緩沖液等進(jìn)入PCR反應(yīng)體系,將影響PCR反應(yīng),D正確。兩種引物之間不能互補(bǔ),引物自身折疊后也不能互補(bǔ),引物應(yīng)與相應(yīng)的DNA模板連的3′端是互補(bǔ)的,B錯誤。 答案:B 6.[xx·江蘇無錫期末]DNA分子經(jīng)PCR反應(yīng)循環(huán)一次后,新合成的那條子鏈的脫氧核苷酸的序列應(yīng)與( ) A.模板母鏈相同 B.非模板母鏈相同 C.兩條模板母鏈相同 D.兩條模板母鏈都不相同 解析:PCR反應(yīng)的原理是DNA復(fù)制技術(shù),遵循DNA堿基互補(bǔ)配對原則,以DNA的一條鏈為模板合成新的子鏈,新合成的
10、那條鏈的脫氧核苷酸的序列應(yīng)與非模板母鏈相同。 答案:B 7.[xx·山東泰安期末]下列關(guān)于DNA的粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)的相關(guān)敘述,錯誤的是( ) A.可以選擇DNA含量較高的生物組織為材料,如雞的血細(xì)胞 B.DNA不溶于酒精,且在0.14 mol/L的氯化鈉溶液中析出 C.可以利用嫩肉粉把雜質(zhì)多糖和RNA去除 D.洗滌劑可以瓦解細(xì)胞膜,從而獲得含有DNA的濾液 解析:雞血細(xì)胞中含DNA,可作為提取DNA的生物組織材料,但不可選用哺乳動物成熟的紅細(xì)胞;DNA不溶于酒精,NaCl溶液濃度為0.14 mol/L時DNA溶解度最小,此時可大量析出;嫩肉粉中含有蛋白酶,可將蛋白質(zhì)水解,從而除
11、去蛋白質(zhì);洗滌劑可以瓦解細(xì)胞膜,從而獲得含有DNA的濾液;故C不正確。 答案:C 8.[xx·河北質(zhì)檢]如圖為“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)的相關(guān)操作。 (1)圖中實(shí)驗(yàn)材料A可以是________等,研磨時加入的B應(yīng)該是________。 (2)通過上述所示步驟得到濾液C后,再向?yàn)V液中加入2 mol/L的NaCl溶液的目的是________________________________________________________________________, 再過濾得到濾液D,向?yàn)V液D中加入蒸餾水的目的是____________________________ _____
12、______________________________________________________________________。 (3)在“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)中,將含有一定雜質(zhì)的DNA絲狀物分別放入體積為2 mL的4種溶液中,經(jīng)攪拌后過濾,獲得如表所示的4種濾液,含DNA最少的是濾液________。 1 B液中 攪拌研磨后過濾 濾液E 2 2 mol/L的NaCl溶液中 攪拌后過濾 濾液F 3 0.14 mol/L的NaCl溶液中 攪拌后過濾 濾液G 4 冷卻的95%的酒精溶液中 攪拌后過濾 濾液H (4)DNA鑒定的原理是_____
13、__________________________________________________。 答案:(1)洋蔥(菜花等) 洗滌劑和食鹽 (2)使DNA溶解 使DNA(溶解度下降而沉淀)析出 (3)H (4)在沸水浴條件下,DNA遇二苯胺呈藍(lán)色 9.[xx·雅禮中學(xué)模擬]某生物興趣小組開展DNA粗提取的相關(guān)探究活動。具體步驟如下: 材料處理:稱取新鮮的花菜、辣椒和蒜黃各2份,每份10 g。剪碎后分成兩組,一組置于20 ℃、另一組置于-20 ℃條件下保存24 h。 DNA的粗提取: 第一步:將上述材料分別放入研缽中,各加入15 mL研磨液,充分研磨。用兩層紗布過濾。取濾液備用。
14、 第二步:先向6只小燒杯中分別注入10 mL濾液,再加入20 mL體積分?jǐn)?shù)為95%的冷酒精溶液,然后用玻璃棒緩緩地向一個方向攪拌,使絮狀物纏繞在玻璃棒上。 第三步:取6支試管,分別加入等量的2 mol/L NaCl溶液溶解上述絮狀物。 DNA檢測:在上述試管中各加入4 mL二苯胺試劑?;旌暇鶆蚝螅糜诜兴屑訜? min,待試管冷卻后比較溶液的顏色深淺,結(jié)果如下表。 材料保存溫度 花菜 辣椒 蒜黃 20 ℃ + + + + + + -20 ℃ + + + + + + + + + 分析上述實(shí)驗(yàn)過程,回答下列問題: (1)該探究性實(shí)驗(yàn)課題名稱是__________
15、__________________________________。 (2)第二步中“緩緩地”攪拌,這是為了減少________________________。 (3)根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果,得出結(jié)論并分析。 ①結(jié)論1:與20 ℃相比,相同實(shí)驗(yàn)材料在-20 ℃條件下保存,DNA的提取量較多。 結(jié)論2:______________________________________________________。 ②針對結(jié)論1,請?zhí)岢龊侠淼慕忉專篲__________________________________________。 (4)氯仿密度大于水,能使蛋白質(zhì)變性沉淀,與水和DNA均不
16、相溶,且對DNA影響極小。為了進(jìn)一步提高DNA純度,依據(jù)氯仿的特性,在DNA粗提取第三步的基礎(chǔ)上繼續(xù)操作的步驟是:____________________________,然后用體積分?jǐn)?shù)為95%的冷酒精溶液使DNA析出。 解析:(1)從表格可以看出,該實(shí)驗(yàn)有兩個自變量:材料和溫度。所以該探究性實(shí)驗(yàn)課題名稱為探究不同材料和不同溫度對DNA提取量的影響。低溫抑制了相關(guān)酶的活性,DNA降解速度慢,提取的DNA較多。(2)第二步中用玻璃棒攪拌的目的是獲取DNA絮狀物,所以若速度快,易造成DNA的斷裂。(3)本實(shí)驗(yàn)的結(jié)論可從兩個方面來考慮:①相同材料在不同溫度下的結(jié)論;②不同材料在相同溫度下的結(jié)論。(
17、4)氯仿能使蛋白質(zhì)變性,而對DNA影響極小,所以可將第三步獲得的溶液與氯仿混合,又氯仿密度大于水,所以蛋白質(zhì)沉淀位于溶液下部,DNA位于上清液中。 答案:(1)探究不同材料和不同保存溫度對DNA提取量的影響 (2)DNA的斷裂 (3)①等質(zhì)量的不同實(shí)驗(yàn)材料,在相同的保存溫度下,從蒜黃提取的DNA量最多 ②低溫抑制了相關(guān)酶的活性,DNA降解速度慢 (4)將第三步獲得的溶液與等量的氯仿充分混和,靜置一段時間,吸取上清液 10.[xx·上海普陀區(qū)期末]在基因工程中通常需要利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因,其原理與細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制類似,其特異性依賴于與靶序列兩端互補(bǔ)的寡核苷酸引物。PCR如圖所示,包括三
18、個基本反應(yīng)步驟:①模板DNA的變性:模板DNA經(jīng)加熱至93 ℃左右一定時間后雙鏈解離;②模板DNA與引物的退火(復(fù)性):模板DNA經(jīng)加熱變性成單鏈后,溫度降至55 ℃左右,引物與模板DNA單鏈結(jié)合形成DNA模板-引物結(jié)合物;③引物的延伸:DNA模板-引物結(jié)合物在TaqDNA聚合酶的作用下,合成一條新的與模板DNA 鏈互補(bǔ)的脫氧核苷酸鏈。重復(fù)循環(huán)變性-退火-延伸三過程,就可獲得較多的目的基因。 (1)溫度降至55 ℃左右,引物與模板DNA單鏈結(jié)合形成DNA模板-引物結(jié)合物時所遵循的原則是________。 (2)在PCR技術(shù)中,引物的作用是________________________
19、______。 (3)從理論上推測,第三輪循環(huán)產(chǎn)物中含有引物B的DNA片段所占比例為________。 (4)下圖表示利用PCR技術(shù)獲取目的基因X的第一次循環(huán)產(chǎn)物。則至少需要在第________輪循環(huán)產(chǎn)物中才能開始出現(xiàn)獨(dú)立且完整的X基因。如果經(jīng)過n次循環(huán),則產(chǎn)物中①所示DNA分子數(shù)為________。 解析:分析文字與圖形,獲取信息:與靶序列兩端互補(bǔ)的寡核苷酸引物與靶序列之間通過堿基互補(bǔ)配對原則結(jié)合,并引導(dǎo)子鏈延伸;讀圖可知,1次循環(huán)產(chǎn)物中的DNA分子的兩條鏈不等長;且1個DNA分子含引物A,1個DNA分子含引物B;據(jù)此類推,n次循環(huán)獲得的2n個DNA中:產(chǎn)物中①、②所示DNA分子數(shù)
20、各1個,獨(dú)立且完整的X基因2n-4個;含引物A的DNA分子2n-1個,含引物B的DNA分子2n-1個,含引物A和引物B的DNA分子2n-2個?;蚬こ讨行枰罅磕康幕颍琍CR循環(huán)中獲得的并不都是獨(dú)立完整的X基因。以極少量的目的基因?yàn)槟0澹貜?fù)循環(huán)變性-退火-延伸三過程,就可獲得較多的目的基因。在第3輪循環(huán)產(chǎn)物中開始出現(xiàn)獨(dú)立完整的X基因,隨著循環(huán)次數(shù)的增加,獨(dú)立完整的X基因所占比例越大。DNA模板與引物結(jié)合時遵循堿基互補(bǔ)配對原則;引物能與模板鏈堿基互補(bǔ)配對,引導(dǎo)并作為子鏈合成的起點(diǎn);第三輪循環(huán)產(chǎn)物中含有引物B的DNA片段所占比例為(23-1)/23=7/8;至少需要在第3輪循環(huán)產(chǎn)物中才能開始出
21、現(xiàn)獨(dú)立且完整的X基因。如果經(jīng)過n次循環(huán),則產(chǎn)物中①所示DNA分子數(shù)為1個。 答案:(1)堿基互補(bǔ)配對 (2)能與模板鏈堿基互補(bǔ)配對,引導(dǎo)并作為子鏈合成的起點(diǎn) (3)7/8 (4)3 1個 1.下列關(guān)于物質(zhì)分離的原理及操作不正確的是( ) A.提取玫瑰精油時直接加熱,提取胡蘿卜素時采用水浴加熱 B.在凝膠色譜法的洗脫過程中,大分子物質(zhì)不能進(jìn)入凝膠內(nèi)部而最先流出 C.SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳過程中,蛋白質(zhì)的電泳遷移率完全取決于分子的大小 D.分離紅細(xì)胞時應(yīng)進(jìn)行低速長時間離心處理 解析:選項A,提取玫瑰精油可直接加熱,胡蘿卜素的提取過程采用水浴加熱,因?yàn)楹笳哂玫氖怯袡C(jī)溶劑,
22、明火加熱容易引起燃燒、爆炸;選項B凝膠實(shí)際上是一些微小的多孔球體,這些小球體大多數(shù)是由多糖類化合物構(gòu)成。在小球內(nèi)部有許多貫穿的通道,當(dāng)相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)通過凝膠時,相對分子質(zhì)量小的蛋白質(zhì)容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道,路程較長,移動速度較慢,而相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)無法進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道,只能在凝膠外部移動,路程較短,移動速度較快。相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)分子因此得以分離;選項C,SDS能與各種蛋白質(zhì)分子形成蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物,SDS所帶負(fù)電荷的量大大超過了蛋白質(zhì)分子原有的電荷量,因而掩蓋了不同種蛋白質(zhì)間的電荷差異,使電泳遷移率完全取決于分子的大?。贿x項D,分離紅細(xì)胞時,應(yīng)進(jìn)行低速短時間離心
23、。 答案:D 2.在利用雞血進(jìn)行“DNA的粗提取與鑒定”的實(shí)驗(yàn)中,相關(guān)敘述正確的是( ) A.用蒸餾水將NaCl溶液濃度調(diào)至0.14 mol/L,濾去析出物 B.調(diào)節(jié)NaCl溶液濃度或加入木瓜蛋白酶,都可以去除部分雜質(zhì) C.將絲狀物溶解在2 mol/L NaCl溶液中,加入二苯胺試劑即呈藍(lán)色 D.切碎的菜花和新鮮的雞血中都需要加入適量檸檬酸鈉溶液 解析:DNA的粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)中,用蒸餾水將NaCl溶液濃度調(diào)至0.14 mol/L,此時析出的絲狀物主要是DNA,過濾后取析出物,棄去濾液;鑒定DNA時需要沸水浴加熱;在用雞血做實(shí)驗(yàn)材料時,加檸檬酸鈉的作用是防止血液凝固。 答案:B 3.下列有關(guān)PCR反應(yīng)的總結(jié)性敘述,正確的是( ) A.需要兩種能與DNA母鏈互補(bǔ)配對的小段DNA作引物 B.PCR反應(yīng)獲得的DNA分子只含有引物Ⅰ或引物Ⅱ C.每次循環(huán)可以分為三個階段 D.DNA在860 nm的紅外線波段有強(qiáng)烈的吸收峰,據(jù)此可以進(jìn)行DNA含量的測定 解析: PCR反應(yīng)的引物可以是小段DNA或小段RNA;PCR反應(yīng)獲得的DNA分子大多數(shù)既含有引物Ⅰ又含有引物Ⅱ,只有極少數(shù)只含有引物Ⅰ或引物Ⅱ;每次循環(huán)可以分為變性、復(fù)性、延伸三個階段;DNA在260 nm的紫外線波段有強(qiáng)烈的吸收峰。 答案:C
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