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動物細胞工程—動物細胞與組織培養(yǎng),,燒傷病人圖片,,異體皮膚移植圖片,動物細胞培養(yǎng),動物細胞融合,單克隆抗體制備,體細胞克隆,細胞核移植,動物細胞工程技術,,,,,,動物細胞工程的基礎,動物細胞培養(yǎng),1、概念（人教版）動物細胞培養(yǎng)就是從動物機體中取出相關的組織，將它分散成單個細胞，然后，放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細胞生長和繁殖。,,討論,1、動物細胞培養(yǎng)的原理是什么？2、從動物機體中要取出哪些相關組織？并解釋原因。,3、組織分散成單個細胞的方法是什么？其理論依據(jù)是什么？4、動物細胞體外培養(yǎng)需要滿足哪些條件？,閱讀課本觀察圖片，簡述動物細胞培養(yǎng)的基本過程,科目三考試科目3實際道路考試技巧、視頻教程,科目四考試科目四模擬考試題C1科目四仿真考試,動物胚胎或幼齡動物的組織、器官,胰蛋白酶,單個細胞,,加培養(yǎng)液,制成,細胞懸浮液,,10代細胞,,部分細胞“癌變”，遺傳物質改變，無限傳代,動物細胞培養(yǎng)不能最終培養(yǎng)成動物體,50代細胞,,原代培養(yǎng),,傳代培養(yǎng),細胞貼壁,剝離、分瓶,,細胞株,,,細胞,,細胞系,2、過程,動物細胞生長特性,細胞貼壁：懸液中分散的細胞很快就貼附在瓶壁上，稱為細胞貼壁。要求：培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿的內表面光滑、無毒、易于貼附。細胞的接觸抑制：當貼壁細胞分裂生長到表面相互接觸時，細胞就會停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細胞的接觸抑制。,,,細胞貼壁過程,,,3.有關概念:,原代培養(yǎng)：從機體取出后立即培養(yǎng)的細胞為原代細胞。培養(yǎng)的第1代細胞與傳10代以內的細胞稱為原代培養(yǎng)。傳代培養(yǎng)：將原代細胞從培養(yǎng)瓶中取出，配制成細胞懸浮液，分裝到兩個或兩個以上的培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)，稱為傳代培養(yǎng)。細胞株：原代細胞一般傳至10代左右細胞生長停滯，大部分細胞衰老死亡，少數(shù)細胞存活到40~50代，這種傳代細胞為細胞株。細胞系：細胞株傳代至50代后又出現(xiàn)細胞生長停滯狀態(tài)，只有部分細胞由于遺傳物質的改變，使其在培養(yǎng)條件下可以無限制傳代，這種傳代細胞為細胞系。細胞株和細胞系的區(qū)別：細胞系的遺傳物質改變，具有癌細胞的特點，失去接觸抑制，容易傳代培養(yǎng)。,如何界定原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)；細胞株和細胞系？,,遺傳物質改變,思考討論,1.動物細胞培養(yǎng)取材時，一般是取胚胎組織或幼齡動物的組織或器官，請解釋原因。,細胞的衰老與動物機體的衰老有著密切的關系，細胞的增殖能力與供體的年齡有關，幼齡動物細胞增殖能力強，有絲分裂旺盛，老齡動物則相反。所以，一般來說幼年動物的組織細胞比老年動物的組織細胞易于培養(yǎng)。同樣，組織細胞的分化程度越低，則增殖能力越強，所以更容易培養(yǎng)。,腫瘤組織或細胞＞正常組織或細胞,拓展---動物組織或細胞培養(yǎng)的難易程度,幼體組織或細胞＞老齡組織或細胞,分化程度低的組織或細胞＞分化程度高的組織或細胞,2、人類一般保存的是哪類細胞呢？為什么？,保存10代以內的細胞，因為其生物學特性未發(fā)生大的變化，最接近于體內組織或細胞的生長特性，很適合用于藥物測試、基因表達等實驗研究。,3、在動物細胞培養(yǎng)過程中，為什么要用胰蛋白酶對取出的動物組織進行處理？,胰蛋白酶處理動物組織，可以使動物組織細胞間的膠原纖維和細胞外的其他成分酶解，獲得單個細胞;成塊的組織細胞靠在一起,彼此限制了細胞的生長和增殖.,①.植物組織培養(yǎng)過程將組織分散成單個細胞的嗎？②.胰蛋白酶的作用是什么呢？由此可說明細胞間的物質是什么成份？③.細胞膜的主要成份是什么？胰蛋白酶能將細胞消化掉嗎？④.既然胰蛋白酶能將細胞消化掉，那將動物組織分散成單個細胞要注意什么問題呢？能夠用胃蛋白酶代替胰蛋白酶嗎？為什么？,進一步思考：,否,胰蛋白酶水解蛋白質,蛋白質,蛋白質和磷脂,能,注意時間的控制,不能，因為兩者的最適PH不同，而正常組織細胞的生存環(huán)境與胰蛋白酶的最適PH較接近,多細胞動物和人體的細胞都生活在內環(huán)境中，根據(jù)你所學的知識，認為體外培養(yǎng)細胞應該模擬內環(huán)境的哪些內容呢？,動物細胞培養(yǎng)條件：,1、無菌、無毒的環(huán)境（添加一定量的抗生素，定期更換培養(yǎng)液）,,2、必須的營養(yǎng)物質（葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素、核酸、嘌呤、嘧啶、激素、生長因子、動物血清等。）,保證細胞順利的生長增殖,3、適宜的溫度36.5+（-）0.5度,4、充足的氧氣和適宜的酸堿度O2和CO2（95%空氣和5%CO2）,問題：,1、培養(yǎng)基的類型,,（1）天然培養(yǎng)基：營養(yǎng)價值高，成分復雜（2）合成培養(yǎng)基：成分明確，便于控制試驗條件,2、動物細胞培養(yǎng)液的主要成分是什么？較植物組織培養(yǎng)基有何獨特之處？,主要成分：葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素和動物血清等。,獨特之處有：1、液體培養(yǎng)基（動物體細胞大都生活在液體的環(huán)境）2、成分中有動物血清等,獲得細胞,細胞的全能性,細胞株、細胞系,植物體,培養(yǎng)結果,或細胞產物,快速繁殖、培育無病毒植株等,培養(yǎng)目的,葡萄糖、動物血清,蔗糖、植物激素,培養(yǎng)基特有成分,液體培養(yǎng)基,固體培養(yǎng)基,培養(yǎng)基性質,細胞增殖,原理,動物細胞培養(yǎng),植物組織培養(yǎng),比較項目,植物組織和動物細胞培養(yǎng)的比較,動物細胞培養(yǎng)應用,大規(guī)模培養(yǎng)生產生物制品（病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體）獲得大量自身的皮膚細胞，用于植皮培養(yǎng)的動物細胞可以用于檢測有毒物質，判斷某種物質的毒性為治療和預防癌癥及其他疾病提供理論依據(jù),1、在動物細胞培養(yǎng)過程中遺傳物質發(fā)生改變的細胞是--------------------（）A．細胞系B．細胞株C．原代細胞D．傳代細胞,2、動物細胞工程技術的基礎是------（）A.動物細胞融合B.單克隆抗體C.胚胎移植D.動物細胞培養(yǎng),A,D,課堂反饋練習,3、用于動物細胞培養(yǎng)的組織和細胞大都取自胚胎或出生不久的幼齡動物的器官或組織，其主要原因是這樣的組織細胞（）A.容易產生各種變異B具有更強的全能性C.取材十分方便D分裂增殖的能力強,D,4、下列屬于動物細胞工程中的工具是（）A．限制性內切酶B．DNA連接酶C．胰蛋白酶D．果膠酶,C,5、在動物細胞培養(yǎng)的有關敘述中，正確的是（）A．動物細胞培養(yǎng)的目的就是為了獲得大量的細胞分泌蛋白B．動物細胞培養(yǎng)前要用胰蛋白酶處理使細胞分散C．細胞遺傳物質的改變發(fā)生于原代培養(yǎng)過程中D．培養(yǎng)至50代后繼續(xù)傳代的細胞是細胞株6、在動物細胞培養(yǎng)中有部分細胞可能在培養(yǎng)條件下無限制地傳代下去，這種傳代細胞稱之為（）A．原代培養(yǎng)B．傳代培養(yǎng)C．細胞株D．細胞系,B,D,,7、動物細胞培養(yǎng)的正確過程是（）A.原代培養(yǎng)→傳代培養(yǎng)→細胞株→細胞系B.原代培養(yǎng)→傳代培養(yǎng)→細胞系→細胞株C.傳代培養(yǎng)→細胞系→原代培養(yǎng)→細胞株D.原代培養(yǎng)→細胞系→傳代培養(yǎng)→細胞株8、下列與動物細胞培養(yǎng)有關的表述中，不正確的是（）A．培養(yǎng)液通常含有葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素和動物血清B．原代培養(yǎng)的細胞一般傳至10代左右便會出現(xiàn)生長停滯C．動物細胞培養(yǎng)一般能夠傳到40～50代，但其遺傳物質發(fā)生了改變D．動物細胞培養(yǎng)可用于檢測有毒物質和獲得大量自身健康細胞,A,C,動物細胞體外培養(yǎng)時，通常要在培養(yǎng)基中補充一定濃度的某些物質。右圖是血清對正常細胞和癌細胞培養(yǎng)影響的實驗結果。從該圖提供的信息可以獲得的正確結論有()A．正常細胞與癌細胞的增殖速率相同B．有無血清對正常細胞培養(yǎng)的影響不同C．培養(yǎng)基中補充血清有助于正常細胞的培養(yǎng)D．培養(yǎng)基中是否補充血清對癌細胞的培養(yǎng)影響不大,BCD,9、07年江蘇高考題,10、下圖是動物細胞培養(yǎng)的基本過程示意圖。請據(jù)此圖回答,(1)容器A中放置的是動物器官或組織。它一般取自___________。(2)容器A中的動物器官或組織首先要進行的處理是__________，然后用酶處理，這是為了使細胞分散開來。這樣做的目的是_______________.(3)培養(yǎng)首先在B瓶中進行。瓶中的培養(yǎng)基成分有__________等。在此瓶中培養(yǎng)一段時間后，一般傳到第代，有許多細胞衰老死亡，到這時的培養(yǎng)稱為___________.(4)為了把B瓶中的細胞分裝到C瓶中，用_____處理，然后配置成___________，再分裝。(5)在C瓶中正常培養(yǎng)了一段時間后，發(fā)現(xiàn)細胞全部死亡。原因是_________________________。,幼齡動物的器官或組織、動物胚胎,剪碎,胰蛋白,使每個細胞能與培養(yǎng)液接觸,葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素和動物血清,10,原代培養(yǎng),胰蛋白酶,細胞懸浮液,細胞沒有發(fā)生瘤變,