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1、微生物標(biāo)本的采集與運(yùn)送,1,在臨床微生物檢驗(yàn)工作中,標(biāo)本的正確選擇、采集和運(yùn)送是保證檢驗(yàn)質(zhì)量的重要環(huán)節(jié),是實(shí)驗(yàn)室工作準(zhǔn)確和有效的基本前提。,早期、無菌、合格,2,標(biāo)本,規(guī)范化采集,不符合要求,污染的標(biāo)本,提供重要臨床感染信息,結(jié)果無意義,誤導(dǎo)臨床,3,常見標(biāo)本的分類,4,一、血液標(biāo)本的采集,5,1、不明原因的發(fā)熱(大于38或低于36) 2、寒戰(zhàn)、休克、僵直 3、嚴(yán)重的局部感染(腦膜炎、心內(nèi)膜炎、肺炎、腎盂腎炎、腹部術(shù)后感染等) 4、白細(xì)胞增多(特別是核左移,未成熟或桿狀核) 5、粒細(xì)胞減少、血小板減少 6、皮膚粘膜出血、多器官衰竭等 7、CRP、PCT升高,(一)采集指征,6,1、抗生素治療之
2、前 若已使用抗生素者,應(yīng)在下次用藥前或血藥濃度最低時(shí)采集標(biāo)本。 2、患者寒戰(zhàn)時(shí) 3、發(fā)熱初期或高峰時(shí) 超過發(fā)熱峰值后,病原菌會(huì)逐漸被機(jī)體免疫系統(tǒng)清除,從而減低檢出率。,(二)采集時(shí)間:,發(fā)熱要做血培養(yǎng), 雙側(cè)雙瓶少漏網(wǎng); 何時(shí)采血要記清, 寒戰(zhàn)前后菌量深;,7,采集前非常關(guān)鍵的一步: 皮膚和瓶子的消毒,特別提示:,8,1、需氧瓶+厭氧瓶 為 一套 注意:每一套血培養(yǎng)應(yīng)當(dāng)從身體的不同部位采集 2、成人: 810ml/瓶 兒童: 35ml/瓶 嬰幼兒: 12ml/瓶 注意:采集靜脈血,(三)采集血量:,9,1、急性感染:分別從兩臂采血,每臂采1套。 2、急性心內(nèi)膜炎:在抗生素治療前1-2h內(nèi),于3
3、個(gè)不同部位采集3套 3、亞急性心內(nèi)膜炎,第1天24h內(nèi),相隔1h分3個(gè)不同部位,連續(xù)采集3套血培養(yǎng)標(biāo)本,若24-48h全部陰性,再采集2-3套血培養(yǎng)標(biāo)本,(四)采集頻率,通常情況,10,4、對(duì)于已進(jìn)行抗生素治療的心內(nèi)膜炎患者,每日采集2套血液標(biāo)本,連續(xù)3天 5、不明原因發(fā)熱,于發(fā)熱期內(nèi)多次采血,如果24h培養(yǎng)為陰性結(jié)果,應(yīng)繼續(xù)采集2-3套或更多套血培養(yǎng)標(biāo)本。,11,血循環(huán)中的細(xì)菌有“暫時(shí)性”、“持續(xù)性” 一過性的菌血癥,細(xì)菌僅在外周血中持續(xù)數(shù)秒 共生菌、復(fù)數(shù)菌 提高檢出率、減少漏檢、判斷病原,為何要多次采血,?,?,?,12,采血套數(shù)與檢出率 J C lin Microbiol.2007;45
4、:3546-3548,13,標(biāo)本不夠時(shí),先滿足需氧瓶,(五)采集順序:,需氧瓶,厭氧瓶,采血試管,14,1、 已采集的血培養(yǎng)標(biāo)本必須立即送檢, 2、 如不能立即送檢,可室溫放置,但不超過2小時(shí),不可放冰箱。,(六)運(yùn)送要求:,取后不能及時(shí)送, 常溫放置忌冰凍。,15,二、尿液標(biāo)本的采集,16,1、中段尿 2、導(dǎo)管尿(不能取尿袋內(nèi)的尿液) 3、膀胱穿刺尿 常用:中段尿(晨尿或在膀胱內(nèi)停留4h以上的尿液),(一)尿標(biāo)本種類:,17,1、采集:采樣前,應(yīng)先清潔外陰及尿道口周圍,自然排尿,不間停,截留中段尿,置于無菌尿杯中,一般留取10ml左右 2、運(yùn)送:常溫下2小時(shí)內(nèi)送達(dá)微生物室,4保存不超過24h
5、,(二)中段尿的留取:,尿液培養(yǎng)要計(jì)算, 清洗外陰留中段; 培養(yǎng)長(zhǎng)出多種菌, 辨清污染重新送。,18,三、糞便標(biāo)本的采集,19,1、腹泄、大便3次,糞便性狀異常,如稀便、水樣便、膿血便、血便,可伴惡心、嘔吐、食欲不振、發(fā)熱、腹痛及全身不適等。盡量在用藥前采集 2、傷寒患者于發(fā)病2周后采集糞便 3、懷疑霍亂時(shí)立即采集糞便送檢。 4、糞便涂片鏡檢WBC 5個(gè)/HP,(一)采集指征,20,1、自然排便法:自然排便后,挑取膿血、黏液 便2-3g作常規(guī)性病原菌培養(yǎng);液狀糞便取絮狀物2- 3ml,直接放入無菌杯內(nèi)送檢。 2、直腸拭子法 難以獲得糞便、排便困難者及幼兒用此法,(二)采集方法與送檢:,21,直
6、腸拭子法:將無菌拭子用無菌生理鹽水濕潤(rùn)后插入肛門2-4cm,柔和地旋轉(zhuǎn)拭子采集糞便標(biāo)本。一般不推薦使用拭子做腹瀉病菌的培養(yǎng)。 3、送檢:1小時(shí)內(nèi)送達(dá),志賀菌30分鐘內(nèi)送達(dá) 懷疑弧菌,立即送檢。,大便要取膿血處, 志賀沙門需關(guān)注。,22,四、呼吸道標(biāo)本的采集,23,1、咽拭子采樣:患者先用清水漱口,將患者 的舌頭向外輕拉,用無菌拭子越過舌根到咽后壁或懸 雍垂的后側(cè)(肉眼可見的紅腫或白膜部位)反復(fù)涂抹 數(shù)次,拭子要避免接觸到口腔和舌黏膜。 2、鼻拭子采樣:用無菌拭子伸入鼻腔至少深1cm在鼻內(nèi)病灶邊緣部分,先用力旋轉(zhuǎn)拭子,停留10-15s后取出,插入無菌管中。 3、口腔潰瘍:先用一個(gè)拭子拭去潰瘍或創(chuàng)
7、面淺表分泌物,再用第二個(gè)拭子采集潰瘍邊緣或底部的標(biāo)本。,(一)上呼吸道標(biāo)本:,24,咳出痰、誘導(dǎo)痰、吸出痰、支氣管肺泡灌洗液、支氣管保護(hù)性毛刷、 肺穿刺組織 下面僅介紹:咳出痰 1、抗生素使用前,一般以晨痰為好。,(二)下呼吸道標(biāo)本,25,2、告知患者在留痰前,先用冷開水或無菌生理鹽水反復(fù)漱口,然后再用力咳出深處痰液(可輕拍背部),吐入無菌痰杯中送檢。 3、常規(guī)細(xì)菌培養(yǎng)標(biāo)本兩小時(shí)內(nèi)送檢,疑為流感嗜血桿菌、肺炎鏈球菌時(shí)立即送檢 注意:標(biāo)本內(nèi)切勿混入唾液及鼻咽分泌物,26,4、合格的痰液標(biāo)本: 平均每低倍視野鱗狀上皮細(xì)胞數(shù) 10個(gè) 對(duì)于不合格痰標(biāo)本,檢驗(yàn)科應(yīng)在拒收系統(tǒng)中注明原因,并且打電話臨床科室
8、,重新采樣,痰液培養(yǎng)雜菌多, 清晨漱口要深咯, 涂片合格繼續(xù)做, 正常致病必掌握。,27,(一)體液標(biāo)本包括:心包液、關(guān)節(jié)液、胸水、腹水、羊膜液、后穹隆等穿刺液 (二)容器:可直接注入血培養(yǎng)瓶,以提高陽性率,可同時(shí)用需氧和厭氧瓶。 (三)標(biāo)本量: 1ml,盡量不使用引流液 (四)運(yùn)送:室溫,15分鐘內(nèi)運(yùn)送至實(shí)驗(yàn)室,五、體液標(biāo)本的采集,28,(一)采集時(shí)間:使用抗生素前 (二)采集方法:采用腰椎穿刺術(shù)無菌采集 (三)采集量與容器:12ml,直接注入血培養(yǎng) (四)運(yùn)送:常溫下立即送檢,一般是15min內(nèi)送至實(shí)驗(yàn)室。若培養(yǎng)腦膜炎奈瑟菌、流感嗜血桿菌等苛養(yǎng)菌時(shí),應(yīng)35保溫送檢或床旁接種。,六、腦脊液標(biāo)
9、本的采集,胸水腹水腦脊液, 放入血瓶陽性多, 條件限制無血瓶, 接種平皿亦認(rèn)可。,29,(一)常用女性生殖道標(biāo)本: 陰道后穹隆、盆腔穿刺液、陰道拭子、子宮頸拭子、前庭大腺吸出液 (二)常用男性生殖道標(biāo)本: 陰囊穿刺液、前列腺按摩液、水皰液、尿道分泌物 以上標(biāo)本均由??漆t(yī)師采集,2小時(shí)內(nèi)送檢,七、生殖道標(biāo)本,30,1、結(jié)膜標(biāo)本:濕拭子,滾動(dòng)采集 2、眼角膜標(biāo)本:在麻醉下,刮取 3、耳部拭子:外耳炎 4、穿刺液:鼓膜穿孔,穿刺抽取深部分泌物 以上標(biāo)本由??漆t(yī)師采集,2小時(shí)內(nèi)送檢,室溫保存不超過24小時(shí)。,八、眼耳標(biāo)本,31,(一)標(biāo)本采集 1、開放性傷口:先以無菌生理鹽水或75%乙醇沖洗擦去表面滲
10、出物,用拭子采集深部傷口或潰瘍基底部分泌物,或剪取深部病損邊緣組織。 燒傷創(chuàng)面,多部位取樣。,九、傷口、膿液及組織標(biāo)本,32,2、封閉性膿腫:消毒膿腫局部皮膚或黏膜表面后,用注射器穿刺抽取膿液3-10ml注入無菌試管內(nèi)送檢。 3、組織:經(jīng)穿刺或手術(shù)活檢獲得標(biāo)本,穿刺組織可放入1.5ml無菌離心管中;,33,4、體表傷口可接收細(xì)菌培養(yǎng)的條件: 鱗狀上皮細(xì)胞數(shù)10個(gè)/低倍視野,并有多形核白細(xì)胞存在 (二)送檢:立即送檢,建議不超過1小時(shí)送達(dá),34,(一)導(dǎo)管頭: 采用無菌性技術(shù),獲取插入患者體內(nèi)最遠(yuǎn)端的導(dǎo)管段約5cm,置于無菌容器送檢;不能置于生理鹽水或轉(zhuǎn)運(yùn)培養(yǎng)基中運(yùn)送。 但,單獨(dú)導(dǎo)管頭培養(yǎng)意義不大,通常送檢導(dǎo)管頭應(yīng)同時(shí)送外周血培養(yǎng)。,十、導(dǎo)管標(biāo)本,35,(二)血液標(biāo)本 對(duì)懷疑導(dǎo)管相關(guān)血流感染,又需保留導(dǎo)管的患者: 1份通過外周靜脈采集 采集2份血液標(biāo)本 1份通過導(dǎo)管采集。,36,早期采集、無菌觀念 正確足量、 及時(shí)送檢,小 結(jié),37,細(xì)菌培養(yǎng)鑒定難, 標(biāo)本留取是關(guān)鍵, 醫(yī)護(hù)人員齊挑擔(dān), 合理用藥百姓贊。,38,謝謝您的聆聽!,39,