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【實(shí)驗(yàn)】檢測生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì)
1、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模? 嘗試用化學(xué)試劑檢測生物組織中糖類、脂肪和蛋白質(zhì)
2.實(shí)驗(yàn)原理
生物組織中某些有機(jī)化合物能與某些化學(xué)試劑產(chǎn)生特定的顏色反應(yīng)。
3.實(shí)驗(yàn)流程
4.注意事項(xiàng)
(1)在鑒定可溶性還原糖的實(shí)驗(yàn)中,加熱試管中的溶液時(shí),應(yīng)該用試管夾夾住試管上部,放入盛50 ℃~65 ℃溫水的大燒杯中加熱。注意試管底部不要接觸燒杯底部;斐林試劑不穩(wěn)定,應(yīng)現(xiàn)用現(xiàn)配。
(2)還原糖、蛋白質(zhì)的鑒定實(shí)驗(yàn)中,在加相應(yīng)試劑鑒定之前,要留出一部分組織樣液,以便與鑒定后的樣液顏色作對比,增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說服力。
(3)在蛋白質(zhì)的鑒定實(shí)驗(yàn)中,如果用
2、蛋清稀釋液作為實(shí)驗(yàn)材料,一定要稀釋到一定程度,否則,與雙縮脲試劑發(fā)生反應(yīng)后會(huì)粘在試管的內(nèi)壁上,使反應(yīng)不徹底,試管也不易洗刷干凈。
(4)脂肪的鑒定中,實(shí)驗(yàn)用的花生種子需提前浸泡3~4 h,浸泡時(shí)間太短,不易切片;浸泡時(shí)間太長,則組織太軟,切下的薄片不易成形。
[特別提醒]
1.實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵——實(shí)驗(yàn)材料的選擇
(1)可溶性還原糖的鑒定實(shí)驗(yàn)中,最理想的實(shí)驗(yàn)材料是含還原糖量較高的生物組織(或器官),而且組織顏色較淺,或近于白色。經(jīng)實(shí)驗(yàn)比較,蘋果、梨等較為理想。
(2)脂肪的鑒定實(shí)驗(yàn)中,實(shí)驗(yàn)材料最好選富含脂肪的種子。
(3)蛋白質(zhì)的鑒定實(shí)驗(yàn)中,最好選用富含蛋白質(zhì)的生物組織,植物材
3、料常用的是大豆,動(dòng)物材料常用的是雞蛋的蛋清。
2.斐林試劑與雙縮脲試劑的比較
斐林試劑
雙縮脲試劑
鑒定成分
還原糖
蛋白質(zhì)
鑒定原理
還原糖中的醛基(—CHO)在加熱條件下能將Cu(OH)2中的Cu2+還原成Cu+,從而生成磚紅色的Cu2O沉淀
雙縮脲(H2NOC—NH—CONH2)在堿性溶液中能與Cu2+結(jié)合生成紫色絡(luò)合物,蛋白質(zhì)分子中含有與雙縮脲結(jié)構(gòu)相似的肽鍵
試劑濃度
甲液:質(zhì)量濃度為0.1 g/mL的NaOH溶液;乙液:質(zhì)量濃度為0.05 g/mL的CuSO4溶液
A液:質(zhì)量濃度為0.1 g/mL的NaOH溶液;
B液:質(zhì)量濃度為0.01 g/mL的CuSO4溶液
使用方法
甲液、乙液混合均勻后,再加入
先加A液造成堿性環(huán)境,再加B液
使用條件
加熱
不加熱
實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象
淺藍(lán)色→棕色→磚紅色
紫色