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1、第1講 微生物的培養(yǎng)和利用
(時間:45分鐘)
A級 基礎(chǔ)演練
1.(經(jīng)典題)平板劃線法和稀釋涂布平板法是純化微生物的兩種常用方法,下列描述正確的是 ( )。
A.都要將菌液進行一系列的梯度稀釋
B.平板劃線法是將不同稀釋度的菌液通過接種環(huán)在固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作
C.稀釋涂布平板法是將不同稀釋度的菌液倒入液體培養(yǎng)基進行培養(yǎng)
D.都會在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落
解析 平板劃線法不需要進行梯度稀釋,稀釋涂布平板法是將不同稀釋度的菌液滴加到固體培養(yǎng)基的表面。平板劃線法和稀釋涂布平板法都能在培養(yǎng)基表面形成單個菌落。
答案 D
2.(2012·合肥
2、四校質(zhì)檢)下列有關(guān)培養(yǎng)基和菌種鑒定的敘述不正確的是 ( )。
A.植物組織培養(yǎng)常用的是固體培養(yǎng)基
B.可利用固體培養(yǎng)基上菌落的特征來判斷和鑒別細菌的類型
C.利用剛果紅培養(yǎng)基上是否形成透明圈來篩選纖維素分解菌
D.在無氮培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑鑒定尿素分解菌
解析 在只含有尿素作為氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑鑒定尿素分解菌。
答案 D
3.下列是關(guān)于“檢測土壤中細菌總數(shù)”實驗操作的敘述,其中錯誤的是
( )。
A.用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基,經(jīng)高溫、高壓滅菌后倒平板
B.取104、105、106倍的土壤稀釋液和無菌水各0.1 mL,
3、分別涂布于各組平板上
C.將實驗組和對照組平板倒置,37 ℃恒溫培養(yǎng)24~48 h
D.確定對照組無菌后,選擇菌落數(shù)在300以上的實驗組平板進行計數(shù)
解析 在細菌計數(shù)時,為保證實驗結(jié)果的準確性,一般選擇菌落數(shù)在30~300的平板進行計數(shù),求出平均數(shù),再根據(jù)對應(yīng)的稀釋度計算出樣品中的細菌數(shù)。
答案 D
4.用稀釋涂布平板法測定同一土壤樣品中的細菌數(shù),在對應(yīng)稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中,得到以下幾種統(tǒng)計結(jié)果,正確的是 ( )。
A.涂布了一個平板,統(tǒng)計的菌落數(shù)是230
B.涂布了兩個平板,統(tǒng)計的菌落數(shù)是215和260,取平均值238
C.涂布了三個平板,統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是2
4、1、212和256,取平均值163
D.涂布了三個平板,統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是210、240和250,取平均值233
解析 在設(shè)計實驗時,一定要涂布至少3個平板作為重復(fù)組,才能增強實驗的說服力與準確性,所以A、B不正確。C項雖涂布了3個平板,但是,其中1個平板的計數(shù)結(jié)果與另兩個相差太遠,說明在操作過程中可能出現(xiàn)了錯誤,此時,不能簡單地將3個平板的計數(shù)值用來求平均值。
答案 D
5.(2013·棗莊???如表所示為分離分解尿素的細菌所用的培養(yǎng)基配方:
KH2PO4
1.4 g
Na2HPO4
2.1 g
MgSO4·7H2O
0.2 g
葡萄糖
10.0 g
尿素
1.0
5、 g
瓊脂
15.0 g
自來水
定容至1 000 mL
請根據(jù)以上配方,回答下列問題。
(1)該培養(yǎng)基含有微生物所需要的________類營養(yǎng)物質(zhì)。其中最主要的碳源是葡萄糖,氮源是尿素。
(2)該培養(yǎng)基按物理性質(zhì)劃分是________培養(yǎng)基;按培養(yǎng)基的作用劃分是選擇培養(yǎng)基,該培養(yǎng)基具有選擇作用的原因是____、____________。
(3)在該培養(yǎng)基中,可通過檢測pH的變化來判斷尿素是否被分解,依據(jù)的原理是_______________________________________________________________。
(4)若用該培養(yǎng)基來鑒定某種細菌是否
6、能夠分解尿素,可在培養(yǎng)基中加入________指示劑,尿素被分解后指示劑變________色。
(5)某同學(xué)嘗試使用罐頭瓶在常溫下制作果酒,開始時向消過毒的罐頭瓶中加入了新鮮的葡萄汁和酵母菌,添加酵母菌的原因是________,添加葡萄汁的目的是為酵母菌的生長發(fā)育提供_________________________。
答案 (1)4
(2)固體 該培養(yǎng)基中唯一的氮源是尿素,只有能分解尿素的微生物才能在該培養(yǎng)基上生長和繁殖
(3)在細菌分解尿素的過程中,細菌合成的脲酶將尿素分解成氨,氨會使培養(yǎng)基的pH升高
(4)酚紅 紅
(5)酵母菌能分解葡萄糖形成酒精(或酵母菌進行無氧呼吸產(chǎn)生酒
7、精) 所需的各種營養(yǎng)物質(zhì)(或碳源、氮源、水、無機鹽和生長因子)
6.(2013·湖北三校聯(lián)考)在日常生活中,一提到細菌、真菌及病毒這些微生物,人們往往首先想到它們的害處,其實,很多微生物對人類是有益的,它們與我們?nèi)祟惖年P(guān)系非常密切,而且人類已經(jīng)應(yīng)用微生物造福于我們的生活。請回答下列問題。
(1)從自然界獲得純種釀酒酵母菌的基本程序:配制培養(yǎng)基→接種→培養(yǎng)→觀察記錄→純化培養(yǎng)。
①采用平板劃線法接種,開始接種時要灼燒接種環(huán),目的是________________________。
②若葡萄汁中含有醋酸菌,在葡萄酒發(fā)酵旺盛時,醋酸菌能否將酒精轉(zhuǎn)變成醋酸?________,原因是______
8、________________________________。
(2)在腐乳的制作過程中,有多種微生物參與了豆腐的發(fā)酵,其中起主要作用的是________。產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的________,________可將脂肪水解為甘油和脂肪酸。
(3)利用纖維素解決能源問題的關(guān)鍵是高性能纖維素酶的獲取??茖W(xué)家利用培養(yǎng)基從土壤中選擇出能分解纖維素的細菌,經(jīng)過大量培養(yǎng)后可以從中提取纖維素酶。土壤中富含各種微生物,將土壤浸出液接種到特定培養(yǎng)基上,可得到能分解纖維素的細菌,實驗室中獲取純凈菌的常用方法有________和________。雖然各種培養(yǎng)基的具體配方不同,但一般都
9、含有水、________。
解析 (1)采用平板劃線法接種,開始接種時要灼燒接種環(huán),目的是滅菌;若葡萄汁中含有醋酸菌,在葡萄酒發(fā)酵旺盛時,醋酸菌不能將酒精轉(zhuǎn)變成醋酸,原因是醋酸菌是好氧菌,葡萄酒發(fā)酵階段的無氧條件抑制了醋酸菌的生長。(2)在腐乳的制作過程中,有多種微生物參與了豆腐的發(fā)酵,其中起主要作用的是毛霉。產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸。脂肪酶可將脂肪水解為甘油和脂肪酸。
答案 (1)①滅菌?、诓荒堋〈姿峋呛醚蹙?,葡萄酒發(fā)酵階段的無氧條件抑制了醋酸菌的生長 (2)毛霉 肽和氨基酸 脂肪酶 (3)平板劃線法 稀釋涂布平板法 無機鹽、碳源、氮源
B級 智能提升
10、
7.急性腸胃炎、手足口病分別是由細菌和病毒通過消化道進入人體導(dǎo)致的。因此檢驗飲用水的細菌含量和病毒含量是有效監(jiān)控疾病發(fā)生的必要措施,請回答下列與檢驗飲用水有關(guān)的問題。
(1)檢驗大腸桿菌的含量時,通常將水樣進行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的水樣用涂布器分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進行培養(yǎng),記錄菌落數(shù)量,這種方法稱為________________________________。在下面所示的四種菌落分布圖中,不可能是用該方法得到的是____________________________________________________________________________
11、______________________________________________________。
(2)用該方法統(tǒng)計樣本菌落數(shù)時是否需要設(shè)置對照組?________。為什么?_____________________________________________________________。
(3)已知大腸桿菌能發(fā)酵乳糖并產(chǎn)酸產(chǎn)氣,現(xiàn)提供足量的已滅菌的乳糖蛋白胨培養(yǎng)液和具塞試管,應(yīng)如何判斷待檢水樣中是否含有大腸桿菌?____________________________________________________________。
解析 純化大腸桿菌的方法—
12、—稀釋涂布平板法和平板劃線法。刪除偏差太大的數(shù)據(jù),對剩下的多個培養(yǎng)數(shù)據(jù)進行平均處理就可以得到水樣中的大腸桿菌數(shù)。大腸桿菌能發(fā)酵乳糖并產(chǎn)酸產(chǎn)氣,通過密封培養(yǎng),大腸桿菌可以進行無氧呼吸產(chǎn)生氣體,以氣泡的形式釋放出來。
答案 (1)稀釋涂布平板法 D (2)需要 因為需要判斷培養(yǎng)基是否被雜菌污染(培養(yǎng)基滅菌是否合格)
(3)通過無菌操作向試管內(nèi)注入一定量待檢水樣,再注入已滅菌的乳糖蛋白胨培養(yǎng)液將試管充滿,塞上塞子,混勻后置于37 ℃恒溫箱培養(yǎng)24 h。若試管內(nèi)有氣泡生成,則說明水樣中有大腸桿菌
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