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1、活性污泥中微生物分離及生長量檢測(cè),實(shí)驗(yàn)性質(zhì)：綜合 實(shí)驗(yàn)類別：本科基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn) 實(shí)驗(yàn)學(xué)時(shí)：4 實(shí)驗(yàn)教師：,一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?（1）通過對(duì)活性污泥中微生物（主要是細(xì)菌） 生長量的檢測(cè)實(shí)驗(yàn)，對(duì)微生物菌落形態(tài)特征、細(xì)菌生長曲線特點(diǎn)及測(cè)定原理有所了解。 （2）夠熟練使用分光光度計(jì)，掌握培養(yǎng)基制備及無菌操作方法、微生物純種分離，學(xué)會(huì)用比濁法測(cè)定細(xì)菌的生長曲線。,二、儀器與材料,實(shí)驗(yàn)儀器：高壓滅菌鍋 721分光光度計(jì) 比色杯 恒溫?fù)u床 實(shí)驗(yàn)材料：活性污泥 肉膏蛋白胨培養(yǎng)基（固體和液體） 無菌水,,三、實(shí)驗(yàn)原理,采用涂布法將菌液（活性污泥）分散在平板培養(yǎng)基表面，經(jīng)培養(yǎng)后獲得單菌落。 由于細(xì)菌菌懸液的

2、濃度與光密度（OD值）成正比，本實(shí)驗(yàn)采用比濁法，利用分光光度計(jì)測(cè)定菌懸液的光密度來推知菌液的濃度，并將所測(cè)的OD值與其對(duì)應(yīng)的培養(yǎng)時(shí)間作圖，即可繪出該菌在一定條件下的生長曲線，從而了解各菌的生長規(guī)律。,四、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容,（1）細(xì)菌培養(yǎng)基（固體和液體）的制備及滅菌； （2）細(xì)菌純種分離； （3）細(xì)菌菌落形態(tài)觀察； （4）分光光度計(jì)的使用及細(xì)菌生長（比濁法）的測(cè)定。,五、實(shí)驗(yàn)步驟,LB培養(yǎng)基（固體和液體）的制備及滅菌。 活性污泥中微生物分離,,,,,,,,,,活性污泥梯度稀釋,制作平板,滅菌,分裝,包扎,稱量藥品,調(diào)pH,溶化,細(xì)菌菌落形態(tài)觀察,37恒溫培養(yǎng)24小時(shí),涂平板,五、實(shí)驗(yàn)步驟,活性污泥生長量檢測(cè),接入,,,,,10mL活性污泥,繪制生長曲線,每隔2h測(cè)定培養(yǎng)液OD值,37振蕩培養(yǎng),100mL液體培養(yǎng)基,六、實(shí)驗(yàn)報(bào)告,實(shí)驗(yàn)結(jié)果 細(xì)菌生長量的測(cè)定： 細(xì)菌生長曲線繪制： 以細(xì)菌培養(yǎng)時(shí)間為橫坐標(biāo)，以所測(cè)得的細(xì)菌培養(yǎng)液OD（吸光度）值為縱坐標(biāo)繪制細(xì)菌生長曲線。 分析與討論 對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果與存在的問題進(jìn)行總結(jié)與簡要分析。,