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1、第一章浮游植物的采集、計數(shù)與定量方法,浮游植物(Phytoplankon)又稱浮游藻類,是水中懸浮生活的若干種藻類的總稱。 浮游植物及其生產(chǎn)力是水生態(tài)系統(tǒng)的重要成員與重要功能之一,是魚類天然餌料的重要組成部分。由于浮游植物對環(huán)境的變化十分敏感,故在環(huán)境監(jiān)測中,也有重要作用。 我國淡水養(yǎng)殖的主要對象是鰱、鳙魚類,它們的天然餌料常以浮游植物為主。我們知道,不同類型的水體或同一水體的不同季節(jié),藻類的組成是不相同的,各種藻類的相對量在不斷地變化。這種變化是有一定的趨勢的,這以后要專題介紹。就鰱鳙而言,藻類又有易消化種類和不易消化種類之分,一般說來,硅藻門、金藻門、甲藻門中種類易于消化,而藍(lán)藻門、綠藻門
2、、裸藻門中的多數(shù)種類難于消化。因此,在魚類生長季節(jié),研究水中藻類組成和現(xiàn)存量(Standing crop),可為養(yǎng)殖魚類的合理投放提供重要的科學(xué)依據(jù)。同時為水生態(tài)研究及利用提供了有用的資料。 浮游植物的現(xiàn)存量,指的是某一瞬間單位水體中所存在的浮游植物的量。這個量有兩種表示方法,用數(shù)目單位表示成為密度,一般用萬個升為單位,五、六十年代用之;用重量單位(mg/L)表示的現(xiàn)存量稱為生物量(Biomass)。70年代以來被廣泛使用。,在以往的調(diào)查中,人們往往只注重浮游植物的種類或數(shù)量,對其生物量則重視不夠。其原因在于:1、浮游植物生物量測算繁瑣;2、對生物量與數(shù)量之間的本質(zhì)差別認(rèn)識不足。由于不同水體,
3、不同種類的藻類在個體上有很大差異,僅僅用數(shù)量就很難評價不同水體餌料生物的豐欠。這就要求,浮游植物的定量工作,必須以測算生物量為目標(biāo)。 不同的調(diào)查方法,有時會得出不同的結(jié)果。關(guān)于浮游生物的采集、計數(shù)與定量方法采用下列方法。,一、采樣: 1 采水器:各種采水器均可,一般淺水(<10m)湖泊可用玻璃瓶采水器,深水 湖泊或水庫必須用顛倒采水器。北原式采水器或有機(jī)玻璃采水器。 2采樣點(diǎn)的選擇及采樣層次的確定 選擇采樣點(diǎn)的原則是,采樣點(diǎn)在平面上的分布要有代表性。一般要求湖心、庫心、江心必須采樣,有條件時采樣點(diǎn)可適當(dāng)多設(shè)一些,如大的湖灣、庫灣、河流的上、中、下游水體的沿岸帶、淺水區(qū)等也要設(shè)點(diǎn)采集。 凡
4、水深不超過2米者,可于采樣點(diǎn)水下0.5m處采水,水深210米以內(nèi),應(yīng)距底0.5米處另采一個樣,水深超過10米時。應(yīng)于中層增采一個水樣。一般來說池塘、水庫、湖泊、河流的樣點(diǎn)及采水層次可總結(jié)如下:,池塘:樣點(diǎn)可設(shè)在距岸邊1m處。水深小于2m時采一中層水樣。若水深大于2m時,最好采上、中、下層水樣。 亞表層:水下20cm左右。 中 層:水體中間部分。 下 層:離底20cm左右。 水庫及河流:樣點(diǎn)可設(shè)在上、中、下游。 上游:設(shè)十個點(diǎn)(亞表層或中層) 中游:水在23米深時設(shè)一個點(diǎn),采2個樣(上中層和中下層) 下游:設(shè)23個樣點(diǎn)。中心點(diǎn)3個樣(上、中、下層),兩測點(diǎn)各一個樣(中層) 湖泊:中心區(qū)設(shè)一點(diǎn)。進(jìn)
5、水口和出水口也應(yīng)設(shè)點(diǎn)。,3采樣量及采樣次數(shù) 每一個采樣點(diǎn)應(yīng)采水1000ml。若系一般性調(diào)查,可將各層采的水等量混合,取1000ml混合水樣固定;或者分層采水,分別計數(shù)后取平均值。分層采水可以了解每一采樣點(diǎn)各層水中浮游植物的數(shù)量和種類。 采得水樣后立即加入1015ml魯哥氏液(Lugols solution)固定,魯哥氏液即將6克碘化鉀溶于20ml水中,待其完全溶解后,加入4克碘充分搖動,待碘全部溶解后定容到100ml即配成魯哥氏液。泥沙多時沉淀后再取水樣。 采樣次數(shù)可多可少。有條件時還可逐月采樣一次,一般情況可下及采樣一次,最低限度應(yīng)在春季、夏季末、秋初各采樣一次。,,,,,,二、沉淀濃縮:
6、上述水樣,搖勻后倒入1000ml圓柱形沉淀器中沉淀24小時,沉淀器可用1000ml的瓶子代替。用虹吸管小心抽出上面不含藻類的“清液”。剩下3050ml沉淀物轉(zhuǎn)入50ml的定量瓶中;再用上述虹吸出來的“清液”少許沖洗三次沉淀器,沖洗液轉(zhuǎn)入定量瓶中。凡以碘液固定的水樣固定的水樣,瓶塞要擰緊。還要加入24的甲醛固定液(福爾馬林),即每100ml樣品需另加4ml福爾馬林,以利于長期保存。濃縮時切不可攪動底部,萬一動了應(yīng)重新靜止沉淀,為不是漂浮水面的某些微小生物等進(jìn)入虹吸管內(nèi),管口應(yīng)始終低于水面,虹吸時流速流量不可過大,吸至澄清液13時,應(yīng)控制流速,使其成滴緩慢留下為宜。 采水時,每瓶樣品必須貼上標(biāo)簽,
7、標(biāo)簽上藥劑在采集的時間、地點(diǎn)、采水體積等,其他詳細(xì)內(nèi)容應(yīng)另行做好記錄,以備查對,避免錯誤。 濃縮的體積視浮游植物的多少而定。也可根據(jù)水的肥瘦確定濃縮體積。如下面的濃縮體積與水透明度(體現(xiàn)水的肥瘦)之間關(guān)系大致如下,僅供參考。 瘦中肥 透明度 1m50cm30cm 老水 特老水 <30cm <20cm 濃縮的標(biāo)準(zhǔn)是以每個視野里有十幾個藻類為宜。,1000ml 30 ml 50 ml 100 ml,不濃縮稀釋,三、計數(shù)方法 將濃縮沉淀后水樣充分搖勻后,立即用0.1ml吸量管吸出0.1ml樣品,注入0.1ml計數(shù)框內(nèi)(計數(shù)框的表面積最好是20202),小心蓋上蓋玻片(22222),
8、在蓋蓋玻片時,要求計數(shù)框內(nèi)沒有氣泡,樣品不溢出計數(shù)框。然后在1440或1640倍顯微鏡下計數(shù)。即在400600倍顯微鏡下計數(shù)。每瓶標(biāo)本計數(shù)兩片取其平均值,每片大約計算50100個視野,但視野數(shù)可按浮游植物的多少而酌情增減,如平均每個視野不超過12個時,要數(shù)200個視野以上,如果平均每個視野有56個時要數(shù)100個視野,如果平均每個視野有十幾個時數(shù)50個視野就可以了。同一樣品的兩片計算結(jié)果和平均數(shù)之差如不大于其均數(shù)的15,其均數(shù)視為有效結(jié)果,否則還必須測第三篇,直至三片平均數(shù)與相近兩數(shù)之差不超過均數(shù)的15為止,這兩個相近值的平均數(shù),即可視為計算結(jié)果。 在計數(shù)過程中,常碰到某些個體一部分在視野中,另
9、一部分在視野外,這時可規(guī)定出在視野上半圈者計數(shù),出現(xiàn)在下半圈者不計數(shù)。數(shù)量最好用細(xì)胞表示,對不宜用細(xì)胞數(shù)表示的群體或絲狀體,可求出其平均細(xì)胞數(shù)。 計算時優(yōu)勢種類盡可能鑒別到屬,注意不要把浮游植物當(dāng)作雜質(zhì)而漏計。 計數(shù)時可按下列格式記錄,然后再進(jìn)行整理計算。 視野數(shù) 種 類 第一片 第二片 正 小球藻 正正 正正 正 衣 藻 正 正 正正 小環(huán)藻 正 正,四、數(shù)量與生物量的計算: 1一升水中的浮游植物的數(shù)量(N)可用下列公式計算: 式中:Cs 計數(shù)框體積(2),一般為4002。 Fs 每個視野的面積(2),R2,視野半徑r可用臺微尺測出(一定倍數(shù)下)。
10、 Fn 計數(shù)過的視野數(shù)。 V 一升水樣經(jīng)沉淀濃縮后的體積(ml) U 計數(shù)框的體積(ml)為0.1ml。 Pn 計數(shù)出的浮游植物個數(shù)。 如果計數(shù)框、顯微鏡固定不變,F(xiàn)n、V、U也固定不變,公式中的( )可視為常數(shù),此常數(shù)用K表示,則上述公式可簡化為:N=KPn。 Pn代表某種藻類的個數(shù),計算結(jié)果N只表示一升水中這種藻類的數(shù)量;Pn若代表各種藻類的總數(shù),計算結(jié)果N則表示一升水中浮游植物的總數(shù)。前者若求浮游植物數(shù)量將各計算結(jié)果相加即可。,2生物量一般按體積來換算。這是因?yàn)楦∮沃参飩€體積小,直接稱重較困難,且其細(xì)胞比重多接近于1??捎眯螒B(tài)相近似的幾何體積公式計算細(xì)胞體積。細(xì)胞體積的毫升數(shù)相當(dāng)于
11、細(xì)胞重量的克數(shù)。這樣體積值(m-3)可直接換算為重量值(109m-3)可直接換算為重量值(109m-31毫克鮮藻重)。 下列體積公式,可供計算生物量時參考: 圓錐體:V=1/3R2h 圓柱體:V=R2h 球 體:V=4/3R3 橢圓體:V4/3ab2(a為長軸半徑,b為短軸半徑) 圓臺體:V1/3H( + ) 長方體與正方體abh或a3 硅藻細(xì)胞的計算通式:V殼面面積帶面平均高度 不規(guī)則性藻類可分可為幾個部分計算。,每種藻類至少隨機(jī)測量20個以上,求出這種藻類個體重的平均值,一般都制成附表供查找。此平均值乘上一升稅種該種藻類的數(shù)量,即得到一升水中這種藻類的生物量(mg/L)。 由于同一種類的細(xì)胞大小可能有較大的差別,同一屬內(nèi)的差別就更大了,因此必須實(shí)測每次水樣中主要種類(即優(yōu)勢種)的細(xì)胞大小并計算平均重量,其他種類可以參考附表計算。 藻類的生物量可直接作為初級生產(chǎn)力的一種指標(biāo),根據(jù)幾次定期測算的現(xiàn)存量之差亦可估計出生產(chǎn)量。 定量結(jié)果應(yīng)列出總生物量、各門生物量、優(yōu)勢種屬。在條件許可時還可以用較簡單的測定葉綠素法,來對照或代替生物量。但葉綠素法不能反映種類組成情況。,