《動物體細(xì)胞雜交技術(shù)過程》由會員分享，可在線閱讀，更多相關(guān)《動物體細(xì)胞雜交技術(shù)過程（19頁珍藏版）》請?jiān)谘b配圖網(wǎng)上搜索。

1、“番茄馬鈴薯”理想圖,通過長期的實(shí)驗(yàn)，科學(xué)家們采用體細(xì)胞雜交技術(shù)獲得了“番茄馬鈴薯”植株。,雜種植株,篩選融合AB 的原生質(zhì)體,,再生出細(xì)胞壁,脫分化,愈傷組織,,再分化,植物細(xì)胞的融合,植物組織培養(yǎng),植物細(xì)胞A,原生質(zhì)體B,原生質(zhì)體A,,,雜種細(xì)胞AB,,去 壁,去 壁,人 工 誘 導(dǎo),方法？,促進(jìn)融合的方法？,融合完成的 標(biāo)志,植物細(xì)胞B,植物體細(xì)胞雜交技術(shù)過程,原理？,原理？,成果和未解決的問題,成果：克服不同生物遠(yuǎn)緣雜交的障礙，出 現(xiàn)自然界沒有的新品種。,未解決的問題：未能讓雜種植物按照人們 的需要表現(xiàn)出親代的優(yōu)良。,,如果將牛的細(xì)胞與植物細(xì)胞雜交，得到綠色的小奶牛

2、，那豈不是只要曬曬太陽就可以擠出牛奶啦！,動物細(xì)胞也能融合嗎？,一、動物細(xì)胞融合,1、動物融合的過程 請同學(xué)們閱讀課本P52動物融合,不同DNA的兩個細(xì)胞,,滅活病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合,,融合后的細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂,1、動物細(xì)胞融合過程,思考題,1、植物體細(xì)胞雜交時首先應(yīng)用什么方法去掉細(xì)胞壁？,酶解法，如纖維素酶或果膠酶,2、動物細(xì)胞融合時需要進(jìn)行去壁處理嗎？為什么？,無需，因?yàn)閯游锛?xì)胞無細(xì)胞壁,3、植物體細(xì)胞雜交誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合常用的方法有哪些？,離心、電激等物理方法；PEG等化學(xué)方法,4、動物細(xì)胞融合能利用上述兩類方法嗎？還有其他方法嗎？,能 還可以利用滅活的病毒進(jìn)行誘導(dǎo),5、植物體細(xì)胞雜交應(yīng)先進(jìn)

3、行原生質(zhì)體的融合再進(jìn)行組織培養(yǎng)形成完整的雜種個體，動物細(xì)胞融合后能形成雜種動物個體嗎？,不能,6、你能歸納出什么叫做動物細(xì)胞融合嗎？,？,2、動物細(xì)胞融合的概念,動物細(xì)胞融合也稱細(xì)胞雜交，是指兩個或多個動物細(xì)胞形成一個細(xì)胞的過程,主要用于制備,單克隆抗體,獲得雜種植株,用途,物理、化學(xué)方法,（同左）,滅活的病毒,物理（離心、振動、電刺激）,化學(xué)（聚乙二醇）,誘導(dǎo)方法,使細(xì)胞分散后誘,導(dǎo)細(xì)胞融合,去除細(xì)胞壁后誘,導(dǎo)原生質(zhì)體融合,細(xì)胞融合的方法,細(xì)胞膜的流動性,細(xì)胞膜的流動性、,植物細(xì)胞全能性,原理,動物細(xì)胞融合,植物體細(xì)胞雜交,,,,,,,,,,,比較項(xiàng)目,,植物、動物細(xì)胞融合的比較,7、你推測

4、一下動物細(xì)胞融合有哪些方面的應(yīng)用嗎？,思考題,利用動物細(xì)胞融合技術(shù)誘導(dǎo)形成雜交瘤細(xì)胞,,8、在生產(chǎn)實(shí)際中雜交瘤細(xì)胞有怎樣的應(yīng)用？,生產(chǎn)單克隆抗體,1.抗體是由何種細(xì)胞產(chǎn)生的？ 、一個淋巴細(xì)胞(漿細(xì)胞)能分泌多種抗體嗎？ 、一種抗原侵入機(jī)體之后，引起機(jī)體免疫反應(yīng)產(chǎn)生的抗體只有一種嗎？ . 簡述獲得抗體的傳統(tǒng)途徑？ 、這種方法獲得的抗體有什么缺陷？,二、單克隆抗體,,抗體不純,特異性差、純度低；,產(chǎn)量低、反應(yīng)不夠靈敏,傳統(tǒng)血清抗體的制備,,抗原不純,,每個淋巴細(xì)胞只能分泌一種抗體，由一個淋巴細(xì)胞增殖產(chǎn)生的細(xì)胞群分泌的抗體化學(xué)成份是單一的。,如何獲得化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體？,體外培養(yǎng)淋巴細(xì)胞能

5、無限增殖嗎?,體外培養(yǎng)單個淋巴細(xì)胞，提取分泌的抗體,怎樣解決這個問題？,設(shè)計方案： 一個B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體 小鼠骨髓瘤細(xì)胞能無限增殖,,雜種細(xì)胞,二、單克隆抗體,2.制備過程：,誘導(dǎo)其融合的方法有哪些？,融合后培養(yǎng)液中有幾種細(xì)胞,怎樣篩選出雜交瘤細(xì)胞，雜交瘤細(xì)胞有何優(yōu)點(diǎn),注射抗原的目的是什么,,為何要進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和專一抗體檢測，多次篩選,大量增殖雜交瘤細(xì)胞獲得單抗的方法,3.單克隆抗體的應(yīng)用：,在基礎(chǔ)理論研究中具有重要意義,在疾病診斷、治療和預(yù)防方面，具有 特異性高、靈敏度高等優(yōu)越性。,生物導(dǎo)彈,二、單克隆抗體,思考題,制備單克隆抗體時，為什么要選用B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合形成雜交瘤細(xì)胞？,假如你掌握了動物細(xì)胞融合技術(shù)，你想用它來解決什么問題？,B BB B瘤 瘤瘤 瘤,細(xì)胞融合后培養(yǎng)液中有幾種細(xì)胞？,已知細(xì)胞合成DNA有D和S兩條途徑，其中D途徑能被氨基嘌呤阻斷。人淋巴細(xì)胞中有這兩條DNA合成途徑，但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤細(xì)胞中盡管沒有S途徑，但能不斷分裂增殖，將這兩種細(xì)胞在試管中混合，加PEG促融，在篩選培養(yǎng)基上篩選獲得雜種細(xì)胞。,幻燈片 15,,,,