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1、
鮮食葡萄釀酒酵母的篩選及其活性干酵母制備工藝的研究
我國葡萄產(chǎn)量連年居于世界首位 , 但是葡萄加工產(chǎn)品卻相對落后 , 其中葡萄
酒產(chǎn)量更是遠低于世界平均水平 [1], 而我國又以鮮食葡萄種植為主 ,
鮮食葡萄酒具有很大的市場前景和市場規(guī)模 , 綜合以上問題出發(fā) , 本研究以篩選
出針對鮮食葡萄發(fā)酵的釀酒酵母為主要目的 , 對鮮食葡萄種植園區(qū)中的土壤以及
果皮枝葉中的酵母菌進行分離和鑒定 , 并對其進行發(fā)酵性能的探究。利用氣相色
譜質(zhì)譜聯(lián)用儀(GC-MS)測定不同酵母發(fā)酵酒中香氣化合物的種類和含
2、量 , 結合香
氣活力值( OAV)探究不同發(fā)酵酒的特征性香氣成分 , 并采用感官評定的方法 , 分
析不同發(fā)酵酒的整體接受程度 , 并對發(fā)酵酒風味較好的釀酒酵母進行活性干酵母
的制備工藝研究。
主要研究結果如下 :(1)對采集到的土壤及果皮枝葉樣品中的酵母菌進行分
離鑒定 , 結果表明 : 菌株 S1、S2、S3為釀酒酵母( Saccharomyces cerevisiae ),
菌株 S4 為異常威克漢遜酵母( Wickerhamomy ces anomalus)。分別對其進行發(fā)
酵性能的測定 , 結果表明 , 在
3、 28℃的培養(yǎng)條件下 ,S1 、S2 的生長狀況最為良好 , 在
31℃的生長溫度下 ,S3 、S4 的生長狀況最為良好。
四株酵母菌株在各自的最適溫度下均在 5h 左右進入對數(shù)生長期 , 在 15h左右
進入生長平衡期。(2)利用 GC-MS對不同發(fā)酵酒的香氣化合物進行分析 , 結果表
明 , 相對于對照組的商業(yè)酵母釀造的鮮食葡萄酒 ,S1 和 S2發(fā)酵的鮮食葡萄酒的風
味物質(zhì)中 , 主要是以酯類物質(zhì)為主的風味化合物 , 同時測得的其中的一些醇類和
酸類物質(zhì)的含量 , 也處于相對較高的狀態(tài) , 其分別為苯乙醇、辛酸、癸酸等 ,
4、 通過
菌株 S3 釀造的鮮食葡萄酒的揮發(fā)性成分中 , 乙醇的含量處于最高值 , 且為
S1,S2,S3,S4 以及安琪和帝博仕六種發(fā)酵酒中的最高值 , 通過菌株 S4釀造的鮮食
葡萄酒中的乙酸含量最高 , 為六種發(fā)酵酒中的最高值。
(3)采用 OAV值對發(fā)酵酒的特征性香氣化合物進行分析 , 結果表明 : 菌株 S1
發(fā)酵的鮮食葡萄酒的香氣化合物中 , 癸酸乙酯、苯乙醇等化合物占有較大的貢獻
率 , 同時對 S2 發(fā)酵酒貢獻較大化合物有丁酸乙酯、庚酸乙酯等。菌株 S3 發(fā)酵酒中的主要香氣化合物的分析結果和商業(yè)酵母
5、相似。
(4)結合感官分析 , 對發(fā)酵酒的整體接受度做出評價 , 其結果表明 : 六種發(fā)酵鮮食葡萄酒的整體香氣評價中 , 有三株酵母發(fā)酵酒的整體香氣評價結果分數(shù)高于商業(yè)酵母 , 其分別是 S1、S2、S3, 而其中評價最好并且分數(shù)最高的是菌株 S3 發(fā)酵的鮮食葡萄酒 , 所以綜合以上因素考慮 , 將篩選出的酵母菌株 S3 作為風味最好的酵母 , 對其進行活性干酵母的制備探究。 ( 5)對菌株 S3 進行活性干酵母的制備工藝探究。
結果表明 , 培養(yǎng)基中最優(yōu)底物組成及濃度條件為 : 最優(yōu)碳源物質(zhì)為蔗糖
( 50g/L ), 最優(yōu)的氮源物質(zhì)為酵母膏( 18 g/L
6、 ), 最優(yōu)無機鹽物質(zhì)為磷酸二氫鉀( 4.5 g/L ), 最優(yōu)生長素類物質(zhì)為煙酰胺 (0.12 g/L )。同時 , 在離心工藝參數(shù)中 ,
轉(zhuǎn)速為 5000r/min, 時間為 15min 時, 在此條件下的酵母得率為 92.69%。
酵母凍干粉保護劑單因素實驗中 ,13 種保護劑作用下的凍干粉均無雜菌感
染 , 且有三種保護劑作用下的活菌數(shù)最高 , 分別為葡萄糖( 45.4%)、麥芽糊精
( 41.7%)和山梨醇(32.6%), 最佳的復合保護劑比例及成分組成為 9%葡萄糖 ,5%
山梨醇 ,7%麥芽糊精。(6)酵母凍干粉的復水活化實驗結果表明 :2.5%-4.5% 的凍
干粉添加量 ,4%-6%的蔗糖水溶液以及 39-41 ℃的復水活化溫度 , 分別為復水活化
的單因素最佳實驗參數(shù) ; 采用上述三個參數(shù)進行復水活化的復合實驗 , 結果表明 ,
最佳的復合保護劑比例及成分組成為 3%的凍干粉添加量 ,4%的蔗糖水溶液濃
度 ,40 ℃的復水活化溫度。