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2019-2020年高考生物二輪復 專題九　生物技術實踐 限實規(guī)范訓練 新人教版 一、單項選擇題(本題包括8小題，每小題2分，共16分) 1．如下圖所示，在適宜的溫度條件下，在下列裝置中都放入干酵母(內有活酵母菌)，其中適于產生酒精的裝置是 (　　) 2．下列關于腐乳制作的敘述，錯誤的是 (　　) A．含水量大于85%的豆腐利于保持濕度，適宜制作腐乳 B．在腐乳制作過程中必須有能產生蛋白酶的微生物參與 C．鹵湯中的酒應控制在12%左右 D．裝瓶時，應將瓶口通過酒精燈火焰 3．在果酒、果醋和腐乳制作中，都要防止微生物污染，有關敘述正確的是 (　　) A．果醋發(fā)酵階段應封閉充氣口，防止雜菌進入 B．腌制腐乳的鹵湯中應含有12%左右的酒精以抑制細菌的增殖 C．利用自然菌種發(fā)酵果酒時，將封有葡萄汁的發(fā)酵瓶進行高壓滅菌 D．將長滿毛霉的豆腐放在瓶中，并逐層加鹽，接近瓶口部分的鹽要鋪薄一些 4．下列關于生物技術實踐的敘述中，錯誤的是 (　　) A．加酶洗衣粉中添加的酶包括纖維素酶、脂肪酶、淀粉酶和堿性蛋白酶等 B．與斐林試劑檢測相比，用尿糖試紙檢測尿液中的葡萄糖，特異性更強、靈敏度更高 C．利用PCR技術擴增目的基因時，引物Ⅰ和引物Ⅱ的堿基序列應互補 D．腐乳制作過程中，添加料酒、香辛料和鹽，均可以抑制雜菌的生長 5．雞的輸卵管細胞能合成卵清蛋白，紅細胞能合成β—珠蛋白，胰島細胞能合成胰島素。用編碼上述蛋白質的基因分別做探針，對三種細胞中提取的總DNA用限制酶切割形成的片段進行雜交實驗；另用同樣的三種基因探針，對上述三種細胞中提取的總RNA進行雜交實驗，上述實驗結果如下表(“＋”表示雜交過程中有雜合雙鏈“—”表示雜交過程沒有雜合的雙鏈)： 細胞總DNA 細胞總RNA 輸卵管 細胞 紅細胞 胰島 細胞 輸卵管 細胞 紅細胞 胰島 細胞 卵清蛋 白基因 ＋ ① ＋ ＋ ② － β－珠蛋 白基因 ③ ＋ ＋ ④ ＋ － 胰島素 基因　 ＋ ＋ ⑤ － － ⑥ 下列是表中①到⑥中填寫的內容，其中正確的是 (　　) A．＋＋＋－－－ B．＋－＋－＋＋ C．＋－＋＋＋＋ D．－－－－＋＋ 6．稀釋涂布平板法是微生物培養(yǎng)中的一種常用的接種方法。下列相關敘述錯誤的是 (　　) A．操作中需要將菌液進行一系列的濃度梯度稀釋 B．需將不同稀釋濃度的菌液分別涂布到固體培養(yǎng)基表面 C．不同濃度的菌液均可在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落 D．操作過程中對培養(yǎng)基和涂布器等均需進行嚴格滅菌處理 7．下列有關生物技術的敘述錯誤的是 (　　) A．制作果醋時需向發(fā)酵裝置不斷地補充氧氣 B．可根據凝膠珠的顏色和形狀來判斷是否合格 C．固定化酶和固定化細胞都能反復使用，但酶活性迅速下降 D．凝膠色譜法是根據相對分子質量的大小分離蛋白質的方法 8．下表有關“DNA的粗提取和鑒定”的相關操作中所選取的試劑，不正確的是 (　　) 相關操作 選取的試劑 A 破碎雞血細胞 蒸餾水 B 溶解核內DNA 2 mol/L NaCl溶液 C 提取雜質較少的DNA 冷卻的95%的酒精 D DNA的鑒定 雙縮脲試劑 二、雙項選擇題(本題包括2小題，每小題3分，共6分) 9.下列有關“血紅蛋白提取和分離”的相關敘述中，正確的是 (　　) A．用生理鹽水進行紅細胞的洗滌，其目的是去除細胞表面雜蛋白 B．將血紅蛋白溶液進行透析，其目的是去除相對分子質量較大的雜質 C．血紅蛋白釋放時加入有機溶劑，其目的是使血紅蛋白溶于有機溶劑 D．整個過程不斷用磷酸緩沖液處理，是為了維持血紅蛋白的結構 10．固定化酶是從20世紀60年代迅速發(fā)展起來的一種技術?？蒲腥藛T用海藻酸鈉作為包埋劑來固定小麥酯酶，以研究固定化酶的相關性質和最佳固定條件。酶活性為酶催化化學反應的總效率。下圖甲、乙、丙為部分研究結果。下列有關敘述中，錯誤的是 (　　) A．由甲圖可知，固定化酯酶比游離酯酶對溫度變化適應性更強 B．由乙圖可知，濃度為4%的海藻酸鈉包埋效果最好 C．由丙圖可知，固定化酯酶一般可重復使用3次，之后若繼續(xù)使用則酶活力明顯下降 D．固定化酶的酶活力較高，主要原因是增加了酶與底物的接觸面積 三、非選擇題(本題包括9小題，共78分) 11．(7分)(xx全國高考Ⅰ，34)下列是與微生物培養(yǎng)有關的問題，請回答： (1)某細菌固體培養(yǎng)基的組成成分是KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4、葡萄糖、尿素、瓊脂和蒸餾水，其中凝固劑是________，碳源是__________，氮源是__________。已知只有能合成脲酶的細菌才能在該培養(yǎng)基上生長，故該培養(yǎng)基屬于__________培養(yǎng)基。按照化學成分分類，該培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基。從同化作用類型上看，用該培養(yǎng)基培養(yǎng)的細菌屬于__________。 (2)將少量細菌接種到一定體積的液體培養(yǎng)基中，適宜條件下培養(yǎng)，定時取樣測定菌體數目，以時間為橫坐標，以細菌數目的對數為縱坐標，可得到細菌的__________曲線。該曲線中以菌體數目的對數作為縱坐標的原因是 ___________________________________________________________________________。 實驗室中，為了獲得形態(tài)和生理特征一致的菌體，一般應在__________期取材；在生產中，常搜集培養(yǎng)至__________期的細菌用于次級代謝產物的提取。 12．(8分)(xx山東卷，34)生物柴油是一種可再生的清潔能源，其應用在一定程度上能夠減緩人類對化學燃料的消耗?？茖W家發(fā)現，在微生物M產生的脂肪酶作用下，植物油與甲醇反應能夠合成生物柴油(如下圖)。 (1)用于生產生物柴油的植物油不易揮發(fā)，宜選用　　　　、　　　　方法從油料作物中提取。 (2)篩選產脂肪酶的微生物M時，選擇培養(yǎng)基中添加的植物油為微生物生長提供　　　　，培養(yǎng)基滅菌采用的最適方法是　　　法。 (3)測定培養(yǎng)液中微生物數量，可選用　　　　法直接計數；從微生物M分離提取的脂肪酶通常需要檢測　　　　，以確定其應用價值；為降低生物柴油生產成本，可利用　　　　技術使脂肪酶能夠重復使用。 (4)若需克隆脂肪酶基因，可應用耐熱DNA聚合酶催化的 技術。 13．(9分)目前，加酶洗衣粉中的蛋白酶主要是中溫蛋白酶，最適酶活溫度在50℃左右，由于日常洗滌用水的溫度達不到該溫度，導致蛋白酶活性受到影響。適冷蛋白酶是從適冷魚類體內分離純化或由深海適冷菌分泌出的酶類，最適酶活溫度在20℃左右，用其作為洗衣粉添加劑可在較低的溫度下達到理想的洗滌效果。下圖為分離可分泌蛋白酶的適冷菌的操作步驟，據圖回答問題： (1)在將配制好的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基分裝到三角瓶中時，為避免培養(yǎng)基沾到瓶口，必須使用______________進行分裝，并及時進行____________操作。 (2)將擴大培養(yǎng)后的深海微生物用________________法接種到含酪蛋白的固體培養(yǎng)基表面，在適宜條件下培養(yǎng)一段時間，挑出形成透明圈的菌落，即為初選出的適冷菌。 (3)為進一步檢測分離出的適冷菌分泌的適冷蛋白酶的最適酶活溫度，將該菌按上圖所示分7組進行培養(yǎng)，這7組實驗間形成了______________，__________________組所對應的溫度為最適酶活溫度。 (4)由操作過程可知該適冷菌的代謝類型為__________________。 (5)若將分離到的適冷菌接種到一定容積的牛肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基中，置于適宜條件下振蕩培養(yǎng)，細菌數量將呈__________增長，其環(huán)境容納量主要取決于________。 14．(7分)現在大力提倡無紙化辦公，但是每年仍然不可避免的產生了大量廢紙，其主要成分是木質纖維，人類正努力將其轉化為一種新的資源——乙醇。下圖是工業(yè)上利用微生物由纖維素生產乙醇的基本工作流程，請回答相關問題： (1) 從生物體內提取出來的酶，將其分離提純的最簡便易行的方法是 技術，其原理 是根據蛋白質分子的　　　　　　大小和所帶　　　　　　　　　　多少分離蛋白質。 (2)上述工作流程中①環(huán)節(jié)需要的微生物大多分布在　　　　　　 的環(huán)境中。可利用　　　　　　　　　　　技術，使②中的酶能夠重復利用。 (3)生產中可以滿足④環(huán)節(jié)的常見菌種是　　　　，④過程要注意對接種器材進行　　　　　　。為了確保⑤環(huán)節(jié)成功，后期要注意發(fā)酵裝置　　　　　。 15．(8分)生活中有許多微生物技術的應用，請分析回答： (1)家庭釀酒時先將米煮熟，其目的是_________________________。冷卻到30℃后才能加酒藥的原因是______________________。如果時常開壇蓋取酒，不久酒就會變酸，其原因是________________。 (2)腐乳制備過程中，豆腐相當于微生物生長的______，豆腐變?yōu)槲兜栗r美腐乳的原理是_______________________________________ ____________，寫出制作腐乳的實驗流程： ____________________________________________________________________。 (3)在制作泡菜過程中，主要起作用的微生物是______，欲檢測泡菜中亞硝酸鹽含量，使用對氨基苯磺酸溶液和____________________溶液檢測，泡菜溶液會出現玫瑰紅色。 16．(9分)近幾年我國柑橘大豐收，提取橘皮精油是提高其經濟價值的重要途徑。請分析回答提取過程的有關問題： (1)提取橘皮精油，常采用________________法而不用蒸餾法，原因是 ________________________________________________________________________。 (2)提取橘皮精油時，為了提高出油率，首先將橘皮______________，并用石灰水浸泡，石灰水的作用是___________________________。 (3)壓榨過程，為了使橘皮油易與水分離，常加入____________________________ 。 (4)得到壓榨液后，過濾除去固體物和殘渣，然后______________進一步除去質量較小的殘留固體物，再用分液漏斗或吸管將上層的橘皮精油分離出來。此時，橘皮油中含有少量的水和果蠟，需________________________________使雜質沉淀，用吸管吸出上層澄清橘皮油，其余部分過濾，__________________混合合并后成為最終的橘皮精油。 17．(8分)尿素是一種高濃度氮肥且長期施用沒有不良影響，但尿素只有通過土壤中某些細菌分解為氨后，才能被植物吸收利用。分解尿素的細菌都能合成脲酶，脲酶能催化尿素水解。某同學要分離土壤中能分解尿素的細菌，并統(tǒng)計每克土壤樣品中活菌數目，培養(yǎng)基配方如下： KH2PO4 Na2HPO4 MgSO47H2O 蛋白胨 葡萄糖 尿素 瓊脂 1.4 g 2.1 g 0.2 g 1.0 g 10.0 g 1.0 g 15.0 g (1)根據培養(yǎng)基的成分判斷，該同學能否分離出土壤中分解尿素的細菌？__________(能/不能)，原因是___________________________。 (2)要統(tǒng)計每克土壤樣品中活菌數目，宜采用____________法接種，根據土壤樣品的稀釋倍數和接種稀釋液的體積，統(tǒng)計平板上的____________就能大約推測出樣品中活菌數。 (3)初步分離脲酶通常用________________法，如下圖，試管中收集到的液體最先出現的是__________________________。鑒定分離出的脲酶純化程度，一般采用__________法。 (4)該同學設想：由活性脲酶和尿素混合，制成“加酶尿素”，尿素肥效一定更高。為了提高“加酶尿素”中脲酶的利用率，應當采用 技術。 18．(11分)從自然界獲得純種釀酒酵母菌的基本程序是：配制培養(yǎng)基—接種—培養(yǎng)—觀察記錄—純化培養(yǎng)。請回答下列有關問題： (1)酵母菌的培養(yǎng)最好使用下列哪種培養(yǎng)基？________。 A．牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基 B．麥芽汁瓊脂培養(yǎng)基 C．蛋白胨酵母膏培養(yǎng)基 D．MS培養(yǎng)基 (2)采用平板劃線法接種時，開始接種時要灼燒接種環(huán)，目的是________________。要把接種后的培養(yǎng)基和一個未接種的培養(yǎng)基同時放入恒溫箱培養(yǎng)，設置“未接種的培養(yǎng)基”做對照的目的是______________________。 (3)將得到的純種釀酒酵母接種到葡萄汁中，經過發(fā)酵可以得到______________。 (4)將酵母菌破碎并提取得到酵母菌的蛋白質，利用聚丙烯酰胺凝膠電泳技術將得到的蛋白質進行分離，在電泳過程中，影響蛋白質遷移速度的因素包括蛋白質分子的________、____________。 (5)把從酵母細胞中提取的淀粉酶固定在尼龍布上制成固定化酶，采用的方法是__________，與傳統(tǒng)酶應用技術相比，此技術最顯著的優(yōu)點是__________________________________________________。 19．(9分)某班同學用新鮮蘋果榨取果汁并制作果酒，其簡要流程如下： 新鮮蘋果→清洗干凈→去掉果核→榨汁機榨汁→果汁 從成品果酒中分離酵母菌→擴大培養(yǎng)→固定化酵母細胞 →發(fā)酵→果酒 (1)實驗過程中，該小組同學發(fā)現榨取的果汁非常渾濁，解決的方法是____________________。 (2)分離酵母菌應使用__________培養(yǎng)基，固定化酵母細胞常采用__________法，若想使這些酵母細胞能反復使用，實驗過程中一定要注意__________________。 (3)在酸性條件下，可用________________來檢測發(fā)酵產物中是否有酒精產生。若想進一步檢測所得果酒中酵母菌的密度，可采用__________________法。 (4)發(fā)酵完成后，該班同學制做的果酒品質非常好，為方便后續(xù)年級使用，可將菌液________________保存。 (5)另一個班的同學用葡萄制做的果酒酒味純正，放置一段時間后，發(fā)現果酒帶有明顯的酸味，請分析出現酸味的原因 _____________________________________________________________________ 。 答案 1．A　2．A　3．B　4．C 5．B　6．C　7．C　8．D　9．AD　10．BD　 11．(1)瓊脂　葡萄糖　尿素　選擇　合成　異養(yǎng)型　 (2)群體生長　培養(yǎng)的細菌以指數形式增殖，取對數便于反映細菌群體的生長規(guī)律　 對數　穩(wěn)定 12．(1)壓榨　萃取　(2)碳源　高壓蒸汽滅菌　(3)顯微鏡直接計數　酶活性(或：酶活力)　固定化酶(或：固定化細胞)　(4)PCR(或：多聚酶鏈式反應，聚合酶鏈式反應) 13．(1)三角漏斗　無菌　(2)稀釋涂布平板 (3)相互對照　透明圈與菌落直徑比值最大　 (4)異養(yǎng)需氧型　(5)S型　營養(yǎng)物質的量(培養(yǎng)液體積和濃度) 14．(1)電泳　相對分子質量　電荷　(2)富含纖維素(其他答案合理給分，如落葉較多等)　固定化酶　(3)酵母菌　滅菌　密閉(或保證無氧條件等) 15. (1)主要為了殺滅其他雜菌 太高的溫度會抑制甚至殺死酵母菌 醋酸菌在有氧條件下，將酒精變?yōu)榇姿? (2)培養(yǎng)基 毛霉等微生物產生的蛋白酶能將豆腐中蛋白質分解成易于吸收的小分子肽和氨基酸，脂肪酶能將豆腐中的脂肪分解成甘油和脂肪酸 讓豆腐上長出毛霉→加鹽腌制→加鹵湯裝瓶→密封腌制　 (3)乳酸菌　N－1－萘基乙二胺鹽酸鹽 16．(1)壓榨　水中蒸餾會導致原料焦糊或有效成分部分水解等問題　(2)干燥去水　破壞細胞結構，分解果膠，防止橘皮壓榨時滑脫，提高出油率　(3)相當于橘皮質量0.25%的NaHCO3和5%的Na2SO4　(4)離心　在5℃～10℃下靜置5～7天　濾液與吸出的上層橘油 17．(1)不能　培養(yǎng)基含蛋白胨，尿素不是唯一氮源，不能選擇出只以尿素為氮源的微生物　 (2)稀釋涂布平板　菌落數目 (3)凝膠色譜　相對分子質量較大的蛋白質　電泳　 (4)固定化酶 18．(1)B　(2)滅菌　檢驗培養(yǎng)基是否被污染　(3)葡萄(果)酒　(4)帶電性質　分子大小　 (5)共價鍵結合法　可以重復使用(產品易純化) 19．(1)用果膠酶處理　(2)選擇　包埋　無菌條件(避免微生物的污染)　(3)重鉻酸鉀　稀釋涂布平板　(4)轉移到甘油中，與甘油充分混勻后，放在－20℃的冷凍箱中　(5)密封不嚴，醋酸菌進行有氧呼吸，將果酒轉變成果醋