《北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院考博真題整理0226》由會員分享，可在線閱讀，更多相關(guān)《北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院考博真題整理0226（48頁珍藏版）》請在裝配圖網(wǎng)上搜索。

1、中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué) 細(xì)胞生物學(xué)歷年考博真題 2002年協(xié)和醫(yī)大細(xì)胞生物學(xué)博士試題 1、細(xì)胞連接包括幾種類型，及其各自的特點 動物細(xì)胞的細(xì)胞連接按其功能分三大類：緊密連接、錨定連接和通訊連接。 緊密連接的主要作用是封閉相鄰細(xì)胞間的接縫，防止溶液中的分子沿細(xì)胞間隙滲入體內(nèi)，從而保證了機體內(nèi)環(huán)境的相對穩(wěn)定；特點是通過跨膜蛋白相連。錨定連接通過細(xì)胞的骨架系統(tǒng)將細(xì)胞或細(xì)胞與基質(zhì)相連成一個堅挺、有序的細(xì)胞群體，使細(xì)胞間、細(xì)胞與基質(zhì)間具有抵抗機械張力的牢固粘合。參與錨定連接的骨架系統(tǒng)可分兩種不同形式，與中間纖維相連的錨定連接主要包括橋粒和半橋粒；與肌動蛋白纖維相連的錨定連接主要包括粘合帶與粘合斑

2、。間隙連接是動物細(xì)胞間最普遍的細(xì)胞連接，是在相互接觸的細(xì)胞之間建立的有孔道的、由連接蛋白形成的親水性跨膜通道，允許無機離子、第二信使及水溶性小分子量的代謝物質(zhì)從中通過，從而溝通細(xì)胞達(dá)到代謝與功能的統(tǒng)一。 2、核纖層的形態(tài)結(jié)構(gòu)，及其同中間纖維的共同點 核纖層纖維的直徑為10nm左右，縱橫排列整齊，呈正交狀編織成網(wǎng)絡(luò)，分布于內(nèi)層核膜與染色質(zhì)之間。一般認(rèn)為核纖層結(jié)構(gòu)整體觀呈一球狀或籠狀網(wǎng)絡(luò)，切面觀 呈片層結(jié)構(gòu)。在分裂期細(xì)胞，核纖層解體，以單體形式存在于胞質(zhì)中。核纖層是位于細(xì)胞核內(nèi)層核膜下的纖維蛋白片層或纖維網(wǎng)絡(luò)，核纖層由1至3種核纖層蛋白多肽組成。核纖層與中間纖維有許多共同點：(1)兩者均

3、形成10nm纖維；(2)兩者均能抵抗高鹽和非離子去垢劑的抽提；(3)某些抗中間纖維蛋白的抗體能與核纖層發(fā)生交叉反應(yīng)，說明中間纖維蛋白與核纖層蛋白分子存 在相同的抗原決定簇(Osborn＆ Weber， 1987)；(4)兩者在結(jié)構(gòu)上有密切聯(lián)系，核纖層成為核骨架與中間纖維之間的橋梁 3、泛素降解蛋白的途徑 4、核糖體中蛋白組分同RNA的功能 rRNA具有肽酰轉(zhuǎn)移酶的活性；為tRNA提供結(jié)合位點(A位點、P位點和E位點)；為多種蛋白質(zhì)合成因子提供結(jié)合位點；在蛋白質(zhì)合成起始時參與同mRNA選擇性地結(jié)合以及在肽鏈的延伸中與mRNA結(jié)合； 核糖體大小亞單位的結(jié)合、校正閱讀(p

4、roofreading)、無意義鏈或框架漂移的校正、以及抗菌素的作用等 都與rRNA有關(guān)。 5、一群細(xì)胞死亡，試舉三個以上證據(jù)，證明它們是調(diào)亡而非壞死（不能超過400字，否則扣分 2003年博士研究生入學(xué)考試試題細(xì)胞生物學(xué)試題（本人懷疑是生化題） 一、名詞解釋（1-5每題2分，6-9每題2.5分，共20分） 1、α互補 現(xiàn)在使用的許多載體都帶有一個E.coli DNA的短區(qū)段，其中含有β-半乳糖苷酶的-α肽基因（lacZ’）的調(diào)控序列和頭146個氨基酸的編碼信息。這個編碼區(qū)中插入了一個MCS，它并不破壞 讀框，但是可使少數(shù)幾個氨基酸插入到β-半乳糖苷酶的氨基端而不影響功能，這種載

5、體適用于編碼β-半乳糖苷酶C端部分序列的宿主細(xì)胞，雖然宿主和質(zhì)粒編碼 的片段各自都沒有酶活性，但它們可融為一體，形成具有酶活性的蛋白，從而實現(xiàn)互補。 2、RT-PCR 3、親和層析 親和層析是一種吸附層析，抗原（或抗體）和相應(yīng)的抗體（或抗原）發(fā)生特異性結(jié)合，而這種結(jié)合在一定的條件下又是可逆的。所以將抗原（或抗體）固相化后，就可以使存在液相中的相應(yīng)抗體（或抗原）選擇性地結(jié)合在固相載體上，借以與液相中的其他蛋白質(zhì)分開，達(dá)到分離提純的目的。 4、偏愛密碼子 5、同工酶 （isoenzyme）是指催化的化學(xué)反應(yīng)相同，酶蛋白的分子結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)乃至免疫學(xué)性質(zhì)不同的一組酶。這類酶存在于生

6、物的同一種屬或同一個體的不同組 織、甚至同一組織或細(xì)胞中。 翻譯并且解釋名詞 6、chromatin chromosome 7、nuclear matrix 用核酸酶與高鹽溶液對細(xì)胞核進(jìn)行處理，將DNA、組蛋白和RNA抽提后，殘留纖維蛋白的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。 8、gene cluster 指基因家族中的各成員緊密成簇排列成大串的重復(fù)單位，定于染色體的的特殊區(qū)域。他 們屬于同一個祖先的基因擴增產(chǎn)物。也有一些基因家族的成員在染色體上排列并不緊密，中間還含有一些無關(guān)序列。但總體是分布在染色體上相對集中的區(qū)域。 9、transformation 二、填空（每空1分，共15分） 3

7、、協(xié)和生物化學(xué)系主任吳憲(1893-1959)對我國的科學(xué)事業(yè)貢獻(xiàn)巨大。 4、科學(xué)家1928年格里非斯（P．Griffith）首次證明DNA是遺傳物質(zhì),該證明實驗是肺炎雙球菌感染小家鼠的實驗。 5、能夠進(jìn)行可逆磷酸化的氨基酸是(3個)Ser、Thr__________。 6、維持DNA雙螺旋的力是堿基堆積力和氫鍵。 8、真核細(xì)胞核糖體大亞基的18S rRNA與原核細(xì)胞16S rRNA 同源。 9、Plindromatic sequence 又叫----------,定義是:--------------------。 三、判斷并改錯（每題2.5分，共5分） 1、細(xì)菌的操縱基因總在啟

8、動子的后面。 2、乳酸操縱子模型中,阻遏蛋白與RNA聚合酶結(jié)合阻止啟動子啟動。 四、簡答（每題5分，共20分） 1、CAMP激活蛋白激酶的分子機制? 2、核酸和蛋白質(zhì)分子為什么具有方向性? 核酸鏈具有方向性，有兩個末端分別是5’末端與3’末端。5’ 末端含磷酸基團(tuán)，3’末端含羥基。核酸鏈內(nèi)的前一個核苷酸的3’羥基和下一個核苷酸的5’磷酸形成3’,5’磷酸二酯鍵，故核酸中的核苷酸被稱為核苷酸殘基。 3、紫外線造成皮膚細(xì)胞DNA何種損傷?如何修復(fù)? 4、使肽鍵形成的酶叫什么名字?其化學(xué)本質(zhì)是什么?存在于細(xì)胞的什么位置? 五 論述（每題20分，共40分） 1、何謂限制性內(nèi)切酶

9、的星活性?影響因素是什么? 所謂星活性又稱Star活性。是指由于反應(yīng)條件不同而產(chǎn)生的切斷與識別位點相似但不完全相同的序列。 導(dǎo)致星號活性的因素： 1.較高的甘油濃度（>5% v/v）； 2.酶與底物DNA比例過高（不同的酶情況不同，通常為>100 U/g）； 3.低鹽濃度（<25 mM） 4.高pH值（>pH 8.0） 5.存在有機溶劑（如DMSO、乙醇(9)、乙烯乙二醇、二甲基乙酰胺、二甲基甲酰胺、sulphalane等） 6.用其他二價離子替代鎂離子（如Mn2+，Cu2+，Co2+，Zn2+等） 抑制星號活性的方法： 1.盡量用較少的酶進(jìn)行完全消化反應(yīng)

10、。這樣可以避免過度消化以及過高的甘油濃度。 2.盡量避免有機溶劑（如制備DNA時引入的乙醇）的污染。 3.將離子濃度提高到100-150 mM（若酶活性不受離子強度影響）。 4.將反應(yīng)緩沖液的pH值降到7.0。 5.二價離子用Mg2+。 2、已知一個蛋白質(zhì)的全長CDNA,設(shè)計一個實驗步驟從CDNA開始提純此蛋白。 2004年協(xié)和考博細(xì)胞生物學(xué)試卷 名解（不全） 1.芽孢 細(xì)胞質(zhì)高度濃縮脫水所形成的一種抗逆性很強的球形或橢圓形的休眠體。 二、問答（不全） 1.細(xì)胞核線粒體,高爾基體的分離 2.述NO的信號通路 3.怎樣分離細(xì)胞骨架，MAR的生理功能 mat

11、rinassociation region(MAR) 核骨架結(jié)合序列 5.腫瘤發(fā)生是一個多基因多步驟的過程,從癌基因和抑癌基因方面用簡單的示意圖說明腫瘤 的發(fā)生機制 一、名詞解釋（每題5分，共20分） 1、米倫反應(yīng)（Mliion reaction）：蛋白質(zhì)溶液中加入米倫試劑（亞硝酸汞、硝酸汞及硝酸的混合液），蛋白質(zhì)首先沉淀，加熱則變?yōu)榧t色沉淀，此反應(yīng)為酪氨酸的酚核所特有的 反應(yīng)，因此含有酪氨酸的蛋白質(zhì)均呈米倫反應(yīng)。 2、核內(nèi)基質(zhì) 3、核定位信號 4、星體 形體微管 二、判斷（每題1分，共10分） 一種周期蛋白與一種CDK相作用。 三、填空（每空1分，共20分） 1、

12、線蟲發(fā)育過程中有1090個細(xì)胞,其中凋亡了131個細(xì)胞，有14個基因與凋亡相關(guān)、ced-3和ced-4那兩個基因于凋亡密切相關(guān), ced-3基因抑制凋亡。 2、電境包埋劑有那四個特點高倍放大不顯示本身結(jié)構(gòu)、聚合時不發(fā)生明顯的收縮、有良好的機械性，鯉魚切片、易被電子穿透。 3、MAR核骨架結(jié)合序列有那四個特點富含AT、富含DNA解旋元件、富含重復(fù)序列、含有轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點。 4、G蛋白_α_亞基和_GDP_結(jié)合時,G蛋白無活性 5、過氧化物酶體,有兩種酶,一種以FAD為輔基,產(chǎn)生H2O2、另一種是過氧化氫酶酶,分解H2O2生成水和氧氣。 6、根據(jù)著絲粒的位置，染色體可分那四種中著絲粒染

13、色體、亞中著絲粒染色體、亞端著絲粒染色體、端著絲粒染色體。 四、問答題（每題10分，共50分） 1、簡述ATP合成酶合成ATP的過程。 2、敘述信號肽的結(jié)構(gòu)及作用。 3、親核蛋白如何入核的? 4、如何用抗體對特異抗原進(jìn)行定位,定性? 5、P53與凋亡的關(guān)系。 2005年攻讀博士研究生入學(xué)考試細(xì)胞生物學(xué)試題 （回憶型） 一、填空：（每題2分，共20分） 1、龜?shù)男詣e決定受溫度的影響低溫雄性高溫雌性。 2、核孔復(fù)合體有四部分：孔環(huán)顆粒、周邊顆粒、中央顆粒和無定形物質(zhì)組成 3、細(xì)胞生長分化因子都包括 ， ， ， ，

14、，細(xì)胞生長分化因子又稱 。 4、目前推測R蛋白的功能有三個對rRNA折疊成有功能的三維結(jié)構(gòu)是十分重要的、在蛋白質(zhì)合成過程中，核糖體的空間構(gòu)象發(fā)生一系列的變化，某些r蛋白質(zhì)隊核糖體起“微調(diào)”作用、rRNA和r蛋白質(zhì)共同行使核糖體上的結(jié)合位點和催化作用中心。 5、酪氨酸信號通路的受體有兩個 ， 。 9、溶酶體的標(biāo)志酶酸性磷酸酶。其膜蛋白通過膜蛋白高度糖基化方式防止自身被水解。 二、判斷（每題1分，共10分） 1、核小體蛋白與DNA的結(jié)合是有選擇性的。 2、吞噬泡的形成需要網(wǎng)格蛋白。 3、線粒體的分裂方式 酵母和撅類主要是通過內(nèi)縮。 三、名詞解釋（

15、每題2分，共20分） 1、亞線粒體小泡 用超聲波把線粒體破碎，線粒體內(nèi)膜碎片可形成顆粒朝外的小膜泡。 2、隱蔽mRNA 一般情況下，存在于未受精卵細(xì)胞中并不用以翻譯蛋白質(zhì)，為早期蛋白質(zhì)合成提供模板， 在卵細(xì)胞中與抑制蛋白質(zhì)結(jié)合而失去活性的mRNA。 3、死亡酶 即apopain催化poly（ADP-ribose）Polymerase（PARP），即聚（ADP-核糖）聚合酶的裂解執(zhí)，行著與線蟲中的ced3相同的功能，導(dǎo)致細(xì)胞的凋亡。 4、易位子 位于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上的與新合成的多肽進(jìn)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)有關(guān)的蛋白復(fù)合物，其本質(zhì)是一種通道蛋白。 5、核仁相隨染色質(zhì) 分為兩部分，一部分位于核仁周圍

16、，成為核仁周染色質(zhì)，即異染色質(zhì)；一部分位于核仁內(nèi)，為常染色質(zhì)，即核仁組織區(qū)，是rDNA所在的位置。 6、傳代培養(yǎng) 將培養(yǎng)細(xì)胞從培養(yǎng)器中取出，把一部分移至新的培養(yǎng)器中再進(jìn)行培養(yǎng)，這種培養(yǎng)方式稱為傳代培養(yǎng)。 7、第二信史 四、簡答（每題10分，共50分） 1、什么是細(xì)胞工程 并舉兩例說明之。 以細(xì)胞為對象，應(yīng)用生命科學(xué)理論，借助工程學(xué)原理與技術(shù)，有目的地利用或改造生物遺傳特性，以獲得特定的細(xì)胞、組織產(chǎn)品或新型物種的一門綜合性科學(xué)技術(shù)。 細(xì)胞融合技術(shù)和細(xì)胞雜合技術(shù)、單克隆技術(shù) 2、高爾基體的結(jié)構(gòu)和功能。 高爾基體是由數(shù)個扁平囊泡堆在一起形成的高度有極性的細(xì)胞器。常

17、分布于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)與細(xì)胞膜之間，呈弓形或半球形，凸出的一面對著內(nèi)質(zhì)網(wǎng)稱為形成面 （forming face）或順面（cis face）。凹進(jìn)的一面對著質(zhì)膜稱為成熟面（mature face）或反面（trans face）。順面和反面都有一些或大或小的運輸小泡，在具有極性的細(xì)胞中，高爾基體常大量分布于分泌端的細(xì)胞質(zhì)中。高爾基體的主要功能將內(nèi)質(zhì)網(wǎng)合成的蛋白質(zhì)進(jìn)行加工、分類、與包裝，然后分門別類地送到細(xì)胞特 定的部位或分泌到細(xì)胞外。 1、蛋白質(zhì)的糖基化N-連接的糖鏈合成起始于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，完成與高爾基體。 2、參與細(xì)胞分泌活動負(fù)責(zé)對細(xì)胞合成的蛋白質(zhì)進(jìn)行加工，分類，并運出，其過程是SER上合成蛋白

18、質(zhì)→進(jìn)入ER腔→以出芽形成囊泡→進(jìn)入CGN→在 medial Gdgi中加工→在TGN形成囊泡→囊泡與質(zhì)膜融合、排出。 3、進(jìn)行膜的轉(zhuǎn)化功能高爾基體的膜無論是厚度還是在化學(xué)組成上都處于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和質(zhì)膜之間，因此高爾基體在進(jìn)行著膜轉(zhuǎn)化的功能，在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上合成的新膜轉(zhuǎn)移至高 爾基體后，經(jīng)過修飾和加工，形成運輸泡與質(zhì)膜融合，使新形成的膜整合到質(zhì)膜上。 4、將蛋白水解為活性物質(zhì)如將蛋白質(zhì)N端或C端切除，成為有活性的物質(zhì)（胰島素C端）或?qū)⒑卸鄠€相同氨基序列的前體水解為有活性的多肽。 5、參與形成溶酶體。 6、參與植物細(xì)胞壁的形成。 7、合成植物細(xì)胞壁中的纖維素和果膠質(zhì)

19、。 3、線粒體蛋白的合成和轉(zhuǎn)運方式。 構(gòu)成線粒體的蛋白主要是核基因編碼的，少量是線粒體基因編碼的，無論是核基因還是線粒體基因編碼的蛋白質(zhì)都要轉(zhuǎn)運定位。線粒體有四個組成部分，其中有兩層 膜，所以由細(xì)胞質(zhì)核糖體合成的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)運到線粒體基質(zhì)必須穿過兩層膜障礙。 大部分線粒體蛋白質(zhì)在細(xì)胞質(zhì)核糖體上合成時,其N端都帶有一肽段,稱為導(dǎo)肽,內(nèi)含定向運往線粒體的信息。導(dǎo)肽的長短與被引導(dǎo)的蛋白質(zhì)定位在線粒體的不同部 位有一定的關(guān)系。定位于基質(zhì)中的蛋白質(zhì)一般具有較短的導(dǎo)肽。 線粒體蛋白質(zhì)分別定位于外膜、內(nèi)膜、基質(zhì)以及內(nèi)外膜間隙。線粒體基質(zhì)蛋白，除極少數(shù)外， 都是游離核糖體合成， 并通過轉(zhuǎn)運肽轉(zhuǎn)運進(jìn)來的，轉(zhuǎn)

20、運過程十分復(fù)雜。線粒體膜間隙蛋白，如細(xì)胞色素c的定位需要兩個導(dǎo)向序列，位于N端最前面的為基質(zhì)導(dǎo)向序列（matrix-targeting sequence），其后還有第二個導(dǎo)向序列，即膜間隙導(dǎo)向序列（intermembrane-space-targeting sequence），功能是將蛋白質(zhì)定位于內(nèi)膜或膜間隙，這類蛋白有兩種轉(zhuǎn)運定位方式。 線粒體膜間隙蛋白的轉(zhuǎn)運 　　線粒體膜間隙蛋白，如細(xì)胞色素c的定位需要兩個導(dǎo)向序列，位于N端最前面的為基質(zhì)導(dǎo)向序列 （matrix-targeting sequence），其后還有第二個導(dǎo)向序列，即膜間隙導(dǎo)向序列（intermembrane-space-t

21、argeting sequence），功能是將蛋白質(zhì)定位于內(nèi)膜或膜間隙，這類蛋白有兩種轉(zhuǎn)運定位方式。［醫(yī)學(xué)　教育網(wǎng) 搜集整理］ 　　保守性尋靶（conservative targeting） 前體蛋白在N-端的基質(zhì)導(dǎo)向序列引導(dǎo)下采用與線粒體基質(zhì)蛋白同樣的運輸方式，將前體蛋白轉(zhuǎn)運到線粒體基質(zhì)，在基質(zhì)中由轉(zhuǎn)肽酶切除基質(zhì)導(dǎo)向序列后， 膜間隙導(dǎo)向序列就成了N端的導(dǎo)向序列， 它能夠識別內(nèi)膜的受體和轉(zhuǎn)運通道蛋白，引導(dǎo)蛋白質(zhì)穿過內(nèi)膜，進(jìn)入線粒體膜間隙，然后由線粒體膜間隙中的轉(zhuǎn)肽酶將膜間隙導(dǎo)向序列切除（圖7-15）。 非保守性尋靶（nonconservative targeting） 　　與保守 性尋

22、靶不同，蛋白質(zhì)的非保守性尋靶首先在線粒體基質(zhì)導(dǎo)向序列的引導(dǎo)下，通過線粒體的外膜和內(nèi)膜，但是疏水的膜間隙導(dǎo)向序列作為停止轉(zhuǎn)運序列（stop- transfer sequence） 錨定在內(nèi)膜上，從而阻止了蛋白質(zhì)的C-末端穿過內(nèi)膜進(jìn)入線粒體基質(zhì)；然后通過蛋白質(zhì)的擴散作用，錨定在內(nèi)膜上的蛋白逐漸離開轉(zhuǎn)運通道，最后在轉(zhuǎn)肽酶的作用 下，將膜間隙導(dǎo)向序列切除，蛋白質(zhì)釋放到膜間隙，結(jié)合血紅素后，蛋白質(zhì)折疊成正確的構(gòu)型。 4、舉例說明CDK的功能。 5、什么是基因組印記，并舉例說明。 基因組印記是指同一等位基因根據(jù)其是母方還是父方的來源進(jìn)行選擇性差異表達(dá)的現(xiàn)象. 基因組印記可以是共價標(biāo)記（DNA甲

23、基化）上的，也可以是非共價標(biāo)記（DNA-蛋白質(zhì)和DNA-RNA互作，核基因組定位），印記方法包括在整個細(xì)胞周期中維持雙親表觀記號的特化的核內(nèi)酶的作用機制。 基因印記與動物克隆技術(shù) 基因印記 (imprinting) 對核移植后基因組重新編程的影響?；蛴∮洭F(xiàn)象在哺乳動物 的發(fā)育過程中普遍存在，它是指基因的表達(dá)與否取決于它們是在父源染色體上還是母源染色體上。有些印記基因只從母源染色體上表達(dá)，而有些則只從父源染色體上 表達(dá)?；蛴∮浥c動物克隆技術(shù)的成功及不足有何關(guān)系值得深入研究?；蚪M印記病主要表現(xiàn)為過度生長、生長遲緩、智力障礙、行為異常。目前在腫瘤的研究中認(rèn) 為印記缺失是引起腫瘤

24、最常見的遺傳學(xué)因素之一。 2007年博士研究生入學(xué)考試細(xì)胞生物學(xué)專業(yè)試題 一、填空（每空0.5分，共20分） 1、使細(xì)胞膜破損分離細(xì)胞器的常用方法桿狀玻璃勻漿器法、高速組織搗碎機法、超聲波處理法、化學(xué)裂介法、反復(fù)凍融法。 2、染色質(zhì)DNA包括 蛋白編碼序列、編碼rRNA，tRNA，snRNA和組蛋白的串列重復(fù)序列、重復(fù)序列的DNA。 3、微管蛋白附屬結(jié)構(gòu)的作用________ ________ _________ _________。 4、NO分子通過與________結(jié)合，產(chǎn)生__________。 5、CDK激酶有兩個亞基__________和 _________，通過使蛋白

25、_________發(fā)揮作用，受_________負(fù)調(diào)節(jié)。 6、細(xì)胞外基質(zhì)包括參與 8、生物大分子的裝配方式大體可分為自我組裝、協(xié)助組裝 和直接組裝 以及更為復(fù)雜的細(xì)胞結(jié)構(gòu)及結(jié)構(gòu)體系之間的裝配。 9、核骨架結(jié)合蛋白轉(zhuǎn)錄因子具有嚴(yán)格的DNA序列特異性，包括DNA復(fù)制；復(fù)制起始點是MAR，DNA聚合酶與核骨架結(jié)合而被激活、活性基因和RNA聚合酶結(jié)合于核骨架上，RNA合成在核骨架上進(jìn)行、與病毒的復(fù)制有關(guān)、參與染色體的構(gòu)建。 10、細(xì)胞的決定與記憶有關(guān)，而細(xì)胞記憶可通過兩種方式實現(xiàn)，一是正反饋途徑：細(xì)胞接受信號刺激后，活化轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子，該因子不僅誘導(dǎo)自身基因的表達(dá)，還誘導(dǎo)其他組織特異性基因的表達(dá)

26、；，二是染色體結(jié)構(gòu)變化的信息傳到子代細(xì)胞。 11、癌基因編碼的蛋白主要包括生長因子、生長因子受體、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中分子、基因轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子、細(xì)胞凋亡蛋白、DNA修復(fù)相關(guān)蛋白、細(xì)胞周期調(diào)控蛋白等幾大類。 二、名詞解釋（每題4分，共40分） 1、核被膜 內(nèi)外兩層平行但不連續(xù)的單位膜組成，面向核質(zhì)的一層是內(nèi)核膜，面向胞質(zhì)的是外核膜。 2、不朗棘輪模型 指線粒體前體蛋白從粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)轉(zhuǎn)運到線粒體內(nèi)膜是由于前體蛋白的擺動性（即布朗運動），可能會剛進(jìn)入線粒體內(nèi)膜即出膜，所以有mhsp（內(nèi)膜熱休克蛋 白）70與蛋白的N-導(dǎo)肽結(jié)合從而固定在內(nèi)膜的表面，N-導(dǎo)肽在前體蛋白成熟后會由特定水解酶將水解掉。 3

27、、GTP活化蛋白 4、隱蔽mRNA 5、微管相關(guān)蛋白 各種組織中提純微管蛋白可以發(fā)現(xiàn)還存在一些其他蛋白成分（5%-20%），這些蛋白具有組織特異性，表現(xiàn)出從相同αβ二聚體聚合形成的微管具有獨特的性質(zhì)，已從人類不同組織中發(fā)現(xiàn)了多種α及β微管蛋白，并追蹤微管基因表現(xiàn)出部分基因家族，某些基因被認(rèn)為是編碼獨特的微管蛋白。 6、G2期檢驗點 主要檢驗S期DNA是否有損傷，細(xì)胞體積是否夠大，是否可以順利進(jìn)入細(xì)胞分裂期。 7、泛素化 8、多潛能性 指細(xì)胞經(jīng)分裂和分化后仍具有產(chǎn)生完整機體的潛能或特征 9、腫瘤病毒 三、問答及論述題（40分） 1、簡述受體酪氨酸激酶信號通路。 2、核纖層蛋

28、白的分子結(jié)構(gòu)及其與中間纖維的關(guān)系。 3、有絲分裂過程中染色體的運動。 4、細(xì)胞表面黏附分子有幾種？其結(jié)構(gòu)特點及功能？ 5、什么叫基因差次表達(dá)？有什么意義？ 協(xié)和醫(yī)科大學(xué)2007考博 細(xì)胞生物和生化記憶版 名次解釋： LCAT; 卵磷脂膽固醇?；D(zhuǎn)移酶 是參與體內(nèi)脂質(zhì)代謝的主要酶之一, 催化游離膽固醇轉(zhuǎn)變成膽固醇酯, 參與HDL的成熟過程。主要催化卵磷脂S2-2位上的?；溵D(zhuǎn)移至膽固醇上, 分別生成溶血卵磷脂和膽固醇酯。 LDL;低密度脂蛋白 呼吸鏈；又稱電子傳遞鏈，是由一系列電子載體構(gòu)成的，從NADH或FADH2向氧傳遞電子的系統(tǒng)。氫以質(zhì)子形式脫下，電子沿呼吸鏈轉(zhuǎn)移到分子

29、氧，形成粒子型氧，再與質(zhì)子結(jié)合生成水。放出的能量則使ADP和磷酸生成ATP。電子傳遞和ATP形成的偶聯(lián)機 制稱為氧化磷酸化作用 r－谷氨?；h(huán): 是指氨基酸從腸粘膜細(xì)胞吸收，通過定位于膜上的r－谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶催化使吸收的氨基酸與G－SH反應(yīng)，生成r－谷氨?；被岫鴮被徂D(zhuǎn)入細(xì)胞內(nèi)的過 程。由于該過程具有循環(huán)往復(fù)的性質(zhì). klenow片斷 大腸桿菌DNA聚合酶Ⅰ大片段（klenow片段）是完整的DNA聚合酶Ⅰ的一個片段，只有在5’→3聚合酶活性和3’→5’外切酶活性，失去了5’→3外切酶活性。它可用于填補DNA單鏈末端成為雙鏈。 填空 亞氨基酸是Pro；含硫氨基酸有半胱氨酸、

30、胱氨酸、甲硫氨酸；糖原合成酶； 問答 為什么肝硬化的病人不能用堿性利尿藥，為什么不能用堿性液體灌腸。 膽固醇的合成，運輸和去向 酵母發(fā)生變異，從3－p甘油醛轉(zhuǎn)變了3－p甘油酸是否對酵母有利，為什么。 補救合成的途徑，及其意義 為什么文獻(xiàn)里用對應(yīng)于編碼鏈的另一條鏈作為基因的序列，那條鏈又名什么 camp分子的作用機制是什么 2008協(xié)和細(xì)胞生物學(xué)考博試題 一.名詞解釋 彈性蛋白 主要存在于韌帶和脈管壁。彈性纖維與膠原纖維共同存在, 賦予組織以彈性和抗張能力。彈性蛋白由二種類型短肽段交替排列構(gòu)成。一種是疏水短肽賦予分子以彈性；另一種短肽為富丙氨酸及賴氨酸殘基的

31、α螺旋，負(fù)責(zé)在相鄰分子間形成交聯(lián)。 自噬性溶酶體 自噬性溶酶體是一種自體吞噬泡, 作用底物是內(nèi)源性的,即細(xì)胞內(nèi)的蛻變、破損的某些細(xì)胞器或局部細(xì)胞質(zhì)。它們由單層膜包圍，內(nèi)部常含有尚未分解的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、線粒體和高爾基復(fù)合體或脂類、糖原等。正常細(xì)胞中的自噬性溶酶體在消化、 分解、自然更替一些細(xì)胞內(nèi)的結(jié)構(gòu)上起著重要作用。 蛋白質(zhì)分選 主要是指膜結(jié)合核糖體上合成的蛋白質(zhì), 通過信號肽,在翻譯的同時進(jìn)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng), 然后經(jīng)過各種加工和修飾,使不同去向的蛋白質(zhì)帶上不同的標(biāo)記, 最后經(jīng)過高爾基體反面網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行分選,包裝到不同類型的小泡,并運送到目的地, 包括內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體、溶酶體、細(xì)胞質(zhì)膜、細(xì)胞外和核膜等。

32、 雙信使系統(tǒng) I3P 和DAG 核酶 呼吸鏈 核仁組織區(qū) 即rRNA序列區(qū)，它與細(xì)胞間期核仁形成有關(guān)，構(gòu)成核仁的某一個或幾個特定染色體片斷。這一片段的DNA轉(zhuǎn)錄為rRNA。核仁是NOR中的基因活動而形成的可見的球體結(jié)構(gòu)。具有核仁組織區(qū)的染色體數(shù)目依不同細(xì)胞種類而異，人有5對染色體即 13、14、15、21、22號染色體上有核仁組織區(qū)。 基因敲除 基因敲除是基因打靶技術(shù)的一種，類似于基因的同源重組。指外源DNA與受體細(xì)胞基因組中序列相同或相近的基因發(fā)生同源重組，從而代替受體細(xì)胞基因組中的相 同/相似的基因序列，整合入受體細(xì)胞的基因組中，然后從整體觀察實驗動物，推測相應(yīng)基因的功能

33、。 去分化 細(xì)胞改變了原來的分化程序，失去了原來應(yīng)有的結(jié)構(gòu)和功能，成為一個具有未分化細(xì)胞特征的普通細(xì)胞，細(xì)胞還有繼續(xù)分化的能力。 Caspase家族 保守的Asp特異性半胱氨酸蛋白酶(Caspase)家族是哺乳動物細(xì)胞中程序性死亡(PCD)的介導(dǎo)者和執(zhí)行者. 原凋亡信號首先活化不同的Caspase啟始因子，再由啟始因子激活級聯(lián)下游的Caspase效應(yīng)分子，最終由效應(yīng)分子特異地水解細(xì)胞中的一系列底物而導(dǎo)致細(xì)胞解體.Caspase家族是整個PCD過程的關(guān)鍵元件，它們通過與眾多蛋白質(zhì)(激活因子或抑制因子)的相互作用來調(diào)控細(xì)胞的生死存亡. 三.問答： 原位雜交技術(shù)與免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)的原理，

34、用途，異同 受體硌氨酸激酶介導(dǎo)的信號傳導(dǎo)途徑 什么是染色體支架，與核骨架的關(guān)系，有何重要性？ 在染色體包裝時, 為染色質(zhì)提供錨定位點的非組蛋白。為了證明染色體骨架的存在, 分離有絲分裂前的染色體, 接著用試劑溶解組蛋白和大多數(shù)主要的非組蛋白, 然后在電子顯微鏡下觀察可見一完整的染色體結(jié)構(gòu)框架(framework)或支架(scaffold)。在間期, 染色體支架解體, 而構(gòu)成支架的蛋白則作為核基質(zhì)的組成部分起作用。分析表明染色體骨架與核骨架中存在相同的蛋白組分，如DNA拓樸酶II。核骨架的某些組分在細(xì)胞分裂期可能轉(zhuǎn)變?yōu)槿旧w骨架。 細(xì)胞周期的調(diào)控機理

35、 細(xì)胞分化過程中的基因表達(dá)的調(diào)節(jié) 15 細(xì)胞生物學(xué)補充： 1．免疫熒光技術(shù)和免疫電鏡技術(shù)是細(xì)胞體內(nèi)特異性蛋白質(zhì)分子定位研究常用的技術(shù)方法。 2. 與酶連接的細(xì)胞表面受體至少包括5類：受體酪氨酸激酶、受體絲氨酸/蘇氨酸激酶、受體酪氨酸磷酸酯酶、受體尿苷酸環(huán)化酶、酪氨酸蛋白激酶聯(lián)系的受體。 3.V型質(zhì)子泵的功能是利用ATP水解供能從細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中逆H+電化學(xué)梯度泵出H+進(jìn)入細(xì)胞器，以維持細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)pH中性和細(xì)胞器內(nèi)的PH酸性。 4.高爾基體至少由互相聯(lián)系的4個部分組成，它們是_________________________________ .

36、 5.廣義的細(xì)胞骨架包括細(xì)胞核骨架、細(xì)胞質(zhì)骨架、細(xì)胞膜骨架和細(xì)胞外基質(zhì)四部分。 6．染色體中組蛋白和非組蛋白質(zhì)的功能是_________________________________________. 7.BCR能識別________蛋白質(zhì)抗原分子，它識別的表位是__________________. 8.神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞與神經(jīng)原共同起源于胚盤外胚層神經(jīng)上皮組織,而施旺細(xì)胞則來自____________. 9.組織胺主要存在于____________. 10．Dna具有信息載體功能而無酶活性。 11。光學(xué)顯微鏡的光學(xué)放大系統(tǒng)主要由目鏡和物鏡組成。 12.分化基因分類管家基因和奢侈

37、基因，后者又稱組織特異性表達(dá)的基因。 13．改變細(xì)胞所處的位置，僅僅可導(dǎo)致細(xì)胞分化方向的改變，這種現(xiàn)象稱為 .產(chǎn)生該現(xiàn)象的主要原因是 之故。 14．儲存在卵細(xì)胞中沒有翻譯活性的mRNA可稱為隱蔽RNA。 . 論述題： 1． 敘述在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上合成的磷脂轉(zhuǎn)運至其它膜上的兩種主要方式。 2． 在氧化磷酸化機制中最為流行的一種假說，化學(xué)滲透學(xué)說有哪兩種特點。 3． 試述細(xì)胞信號傳遞的基本特征。 4． 簡述染色體結(jié)構(gòu)與基因轉(zhuǎn)錄的關(guān)系。 5． 以原核生物為例，簡述肽鏈合成的基本環(huán)節(jié)與主要

38、步驟。 6． 什么是胚胎干細(xì)胞，通常如何獲得ESC，怎么證明它的全能性？ 中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué) 生物化學(xué)與分子生物學(xué)歷年考博真題 2003年攻讀博士學(xué)位研究生入學(xué)考試生物化學(xué)與分子生物學(xué)試題 一、名詞解釋（每題2分，共10分） 1、糖原脫支酶 2、酮體 在肝臟中，脂肪酸氧化分解的中間產(chǎn)物乙酰乙酸、β-羥基丁酸及丙酮，三者統(tǒng)稱為酮體 3、氧化磷酸化 在呼吸鏈電子傳遞過程中偶聯(lián)ATP的生成。 4、RNA INTERFERENCE 指在進(jìn)化過程中高度保守的、由雙鏈RNA（dsRNA）介導(dǎo)的、由特定酶參與的特異性基因沉默現(xiàn)象,它在轉(zhuǎn)錄水平、轉(zhuǎn)錄后水平和翻譯水平上阻斷基因的表達(dá)

39、。 5、ATTENATOR 在trp mRNA 5，端trp正基因的起始密碼前有一個長162 bp的DNA序列稱為前導(dǎo)區(qū)，其中第123～150位核苷酸如果缺失，trp基因的表達(dá)水平可提高6倍。如在培養(yǎng)基中完全不含色氨酸，則轉(zhuǎn)錄不會終止，這個區(qū)域被稱為弱化子。 二、說明下列酶的作用特點與性質(zhì)（每題2.5分，共10分） 1、DNA連接酶 2、DNA內(nèi)切酶 3、光復(fù)合酶 常見的一種修復(fù)作用就是光復(fù)活作用。生物體細(xì)胞受損傷后能產(chǎn)生光復(fù)合酶，該酶能與受傷的DNA結(jié)合，行使核酸內(nèi)切酶作用，切除突變部分，以另一聯(lián)為母聯(lián)重新合成DNA。該酶在黑暗條件下無活性，光照條件下能激活光復(fù)合酶。 4

40、、大腸桿菌DNA聚合酶Ⅰ 主要有3種作用：①5’→3’的聚合作用。但不是復(fù)制染色體而是修補DNA，填補DNA上的空隙或是切除RNA引物后留下的空隙。②3’→5’的外切酶活性。消除在聚合作用中摻入的錯誤核苷酸。③5’→3’外切酶活性。切除受損傷的DNA。它在切口平移（nick translation）中應(yīng)用。 三、簡答題（每題10分，共50分） 1、PH=8.0時,核酸與蛋白質(zhì)電泳泳動有何不同特點？ 2、1953年4月25，發(fā)生了什么讓生物學(xué)界震動的事情？請說明其意義？ 3、下面兩句話對么？請分別說明理由： 1）Trp操縱子只有衰減作用一種負(fù)調(diào)節(jié)方式。 2）Cro蛋白與λ阻遏蛋白結(jié)

41、合與不同位點調(diào)節(jié)溶菌性循環(huán)與溶源循環(huán)。 4、2002年SCIENCE評出年度十大，說ｍicroRNA是重要發(fā)現(xiàn)，說明ｍicroRNA的意義。 MicroRNA也可以寫做miRNA ，是一種21－25nt長的單鏈小分子RNA。它廣泛存在于真核生物中，是一組不編碼蛋白質(zhì)的短序列RNA，其本身不具有開放閱讀框（ORF）。成熟的miRNA，5′端有一個磷酸基團(tuán)，3′端為羥基。編碼miRNAs的基因最初產(chǎn)生一個長的pri-RNA分子，這種初期分子還必須被剪切成約70-90個堿基大小、具發(fā)夾結(jié)構(gòu)單鏈RNA前體（pre-miRNA）并經(jīng)過Dicer酶加工后生成。成熟的miRNA 5’端的磷酸

42、基團(tuán)和3端羥基則是它與相同長度的功能RNA降解片段的區(qū)分標(biāo)志。 研究表明MiRNAs在物種間具有高度的保守性、時序性和組織特異性——在特定的時間、組織才會表達(dá)。 MiRNA研究與疾病及研究進(jìn)展 RNA干擾 新的研究表明miRNA在從癌癥、心臟病到艾滋病的各種疾病中起到一定的作用，而且有間接的證據(jù)表明如果將兩個miRNA從人類基因組中刪除就會發(fā)生白血病。據(jù)推測，MiRNA能夠調(diào)節(jié)人類的三分之一的基因。有研究表明miRNA能夠調(diào)節(jié)Ras癌基因、干細(xì)胞分化、脊椎動物肢體的形成等。 5、為什么DNA合成必須有引物而RNA合成不需引物可以直接將兩個核苷酸連接？ 四、問答題（每題15分

43、，共30分） 1、近年來人們對真核基因調(diào)控理論有了深入的認(rèn)識，現(xiàn)在大家普遍接受“unified theory”的理論，請你談?wù)勀銓υ摾碚摰睦斫饧澳愕挠^點。 2、用微球菌核酸酶酶解染色質(zhì)，然后進(jìn)行電泳，發(fā)現(xiàn)200bp、400bp、600bp、800bp…的條帶，試問從該現(xiàn)象可以得出什么結(jié)論？圖1所示的條帶不是非常狹窄，試解釋其原因？ 2004年攻讀博士學(xué)位研究生入學(xué)考試 生物化學(xué)與分子生物學(xué)試題 編號：221 一、名詞解釋（每題2分，共30分） 1、復(fù)合脂質(zhì) 含有其他化學(xué)基團(tuán)的脂肪酸酯，體內(nèi)主要含磷脂和糖脂兩種復(fù)合脂質(zhì) 2、糖原脫支酶 為水解糖原中α-1，6-葡糖苷

44、鍵的酶類的總稱。 3、酮體?。╧etone body）：在肝臟中，脂肪酸氧化分解的中間產(chǎn)物乙酰乙酸、β-羥基丁酸及丙酮，三者統(tǒng)稱為酮體 4、氧化磷酸化（oxidative phosphorylation）是指在生物氧化中伴隨著ATP生成的作用。有代謝物連接的磷酸化和呼吸鏈連接的磷酸化兩種類型。即ATP生成方式有兩種。 5、結(jié)構(gòu)域Structural Domain蛋白質(zhì)亞基結(jié)構(gòu)中明顯分開的緊密球狀結(jié)構(gòu)區(qū)域，又稱為轄區(qū)。 6、同工酶isozyme，isoenzyme）廣義是指生物體內(nèi)催化相同反應(yīng)而分子結(jié)構(gòu)不同的酶。按照國際生化聯(lián)合會（IUB）所屬生化命名委員會（CBN）的建議，則只把其中因

45、編碼基因不同而產(chǎn)生的多種分子結(jié)構(gòu)的酶稱為同工酶。 7、染色體核骨架 為DNA的復(fù)制提供支架，DNA是以復(fù)制環(huán)的形式錨定在核骨架上的，是基因轉(zhuǎn)錄加工的場所，RNA的轉(zhuǎn)錄同樣需要DNA錨定在核骨架上才能進(jìn)行，核骨架上有RNA聚合酶的結(jié)合位點，使之固定于核骨架 上，RNA的合成是在核骨架上進(jìn)行的。新合成的RNA也結(jié)合在核骨架上，并在這里進(jìn)行加工和修飾。 8、染色質(zhì)重塑 DNA 復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、修復(fù)、重組在染色質(zhì)水平發(fā)生, 這些過程中, 染色質(zhì)重塑可導(dǎo)致核小體位置和結(jié)構(gòu)的變化, 引起染色質(zhì)變化。 9、核基質(zhì)（nuclear matrix） 亦稱核骨架。有廣義和狹義兩種概念。廣義概念認(rèn)為核基質(zhì)包

46、括核基質(zhì)-核纖層-核孔復(fù)合體結(jié)構(gòu)體系；狹義概念是指真核細(xì)胞核內(nèi)除去核膜、核纖層、染色質(zhì)、核仁以外存在的一個由纖維蛋白構(gòu)成的網(wǎng)架體系。目前較多使用狹義概念。 10、轉(zhuǎn)導(dǎo)transduction）由噬菌體將一個細(xì)胞的基因傳遞給另一細(xì)胞的過程。它是細(xì)菌之間傳遞遺傳物質(zhì)的方式之一。其具體含義是指一個細(xì)胞的DNA或RNA通過病毒載體的感染轉(zhuǎn)移到另一個細(xì)胞中。 11、密碼子的偏嗜性 一個氨基酸具有兩個以上的密碼子就成為密碼簡并 12、基因簇 指基因家族中 的各成員緊密成簇排列成大串的重復(fù)單位，定于染色體的的特殊區(qū)域?；虼厣賱t可以是由重復(fù)產(chǎn)生的兩個相鄰相關(guān)基因所組成，多則可以是幾百個相同基因串

47、聯(lián)排列而成。他們屬于同一個祖先的基因擴增產(chǎn) 物。 13、逆轉(zhuǎn)座子 在基因組內(nèi)存在著通過DNA轉(zhuǎn)錄為RNA后，再經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄成為cDNA并插入到基因組的新位點上的因子。逆轉(zhuǎn)座子的整體結(jié)構(gòu)與整合的逆轉(zhuǎn)錄病毒極為相似，其主要特征之一是在兩端具有長的同向末端重復(fù)序列(Long terminal repeat, LTR)，而兩個末端的每一個末端又各具備一個倒轉(zhuǎn)重復(fù)序列。 14、后基因改變(Epigenitic change) 基因外改變 環(huán)境因子引起細(xì)胞和機體表型的改變可以通過基因型的改變而致,也可以不通過基因型改變而致,后者即基因外改變,它是研究致病機制的一個重要方面. 15、雙向電泳（two-

48、dimensional electrophoresis）是等電聚焦電泳和SDS-PAGE的組合，即先進(jìn)行等電聚焦電泳（按照pI分離），然后再進(jìn)行SDS-PAGE（按照分子大?。?，經(jīng)染色得到的電泳圖是個二維分布的蛋白質(zhì)圖。 二、填空題（每題1分，共5分） 7、脂肪酸氧化限速酶----。乙酰CoA合成酶和肉毒堿脂酰轉(zhuǎn)移酶Ⅰ 8、酶促反應(yīng)速率的影響因素---溫度，PH，酶濃度，激活劑和抑制劑 9. 維持DNA雙螺旋的力是__氫鍵和堿基堆積力 10. 真核細(xì)胞核糖體大亞基___80s____rRNA與原核生物_________同源。 三、簡答題（每題8分，共40分） 5、簡述膽汁酸的生理

49、功能。 膽汁酸為兩性分子，主要起表面活性劑作用。 在膽汁中，膽汁酸可以避免膽固醇結(jié)晶析出。當(dāng)膽汁中膽汁酸、卵磷脂、膽固醇比例失調(diào)時，可形成膽固醇結(jié)石。 在腸道中，膽汁酸有助于脂類物質(zhì)乳化，增強其消化吸收。由于結(jié)合膽汁酸的酸性更強，在腸道的pH環(huán)境中能以離子的形式存在，因此其乳化的作用更強 6、TATA box 及其功能。 是一段DNA序列，位于真核生物和古細(xì)菌的轉(zhuǎn)錄啟動子上，大約位在轉(zhuǎn)錄起始點上游第25個堿基對。 7、tRNA中常出現(xiàn)次黃嘌呤，為什么？（另一種說法：tRNA反密碼子第一個堿基往往是I，為什么？） tRNA反密碼子的第一個堿基（由5`-端向3`-端計數(shù)）常

50、被次黃嘌呤即I所占據(jù)，很少有U，幾乎沒有A。tRNA反密碼子中的第一個堿基與mRNA密碼子中的第三個堿基（由5`-端向3`-端計數(shù)）配對時并不嚴(yán)格遵循堿基互補配對原則，除A-U，G-C可以配對外，反密碼子中的I與密碼子3`-端的U、A、C都能配對， 8、只有偶數(shù)碳原子的脂肪酸氧化時才能產(chǎn)生乙酰輔酶A嗎，為什么？ 脂酸經(jīng)過β-氧化，每次切下兩個c而生成乙酰輔酶A。 偶數(shù)C的脂酸（n個C）最后生成 n/2個 乙酰輔酶A； 奇數(shù)C的脂酸（n個C）最后生成 （n-3）/2 個乙酰輔酶A和一分子丙酰輔酶A 所以無論偶數(shù)還是奇數(shù)C脂酸在氧化降解的時候都產(chǎn)生乙酰輔酶A，但奇數(shù)的多產(chǎn)生丙酰輔酶A

51、9、寫出一段反式串聯(lián)結(jié)構(gòu)的DNA序列不少于10bp，并畫出二級結(jié)構(gòu)草圖？ 10、大腸桿菌岡崎片斷一般有多少bp,如何連接？ 岡崎片段的大小，在原核生物中約為1000～2000個核苷酸，而在真核生物中約為100個核苷酸。由DNApolI發(fā)揮5′-3′外切酶的功能，切去引物，并有該酶繼續(xù)延長DNA鏈，填補切除引物后形成的空隙，最后由DNA連接酶催化DNA相鄰的5′磷酸基和3′羥基末端之間形成磷酸二酯鍵，使DNA單鏈缺口封合起來。 11．紫外線造成皮膚細(xì)胞DNA何種損傷，如何修復(fù)？ 使相鄰嘧啶堿基間通過共價連接形成嘧啶二聚體。采用光修復(fù)，利用光能使嘧啶二聚體拆開，需要光修復(fù)酶的參與。 12

52、．使肽鍵形成的酶叫什么名字，其化學(xué)本質(zhì)是什么？存在于干細(xì)胞的什么位置？轉(zhuǎn)肽酶即γ—谷氨酰轉(zhuǎn)移酶，是核糖體50S亞基上的一個蛋白質(zhì)組分。 13。已知一個蛋白質(zhì)的全長CDNA，設(shè)計一個實驗步驟從cDNA開始提純此蛋白？ 四、設(shè)計題（共25分） 1、已知一種cDNA的中間一段序列，請設(shè)計一種方法找到其全長。（10分） 2、已知蛋白X是一種胞質(zhì)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)中起作用的蛋白，請設(shè)計幾種策略找與其相互作用的蛋白。（15分） GFP、GST標(biāo)簽、酵母雙雜交系統(tǒng) 五、論述題 給定一個cDNA序列,如何表達(dá),純化到蛋白質(zhì)？ 判斷： 細(xì)菌的操縱基因總是在啟動子的后面。 乳酸操縱子模型中，阻

53、遏蛋白與RNA聚合酶結(jié)合組織啟動子的啟動。錯 阻遏蛋白與操縱基因結(jié)合組織啟動子的啟動 2005年攻讀博士學(xué)位研究生入學(xué)考試 生物化學(xué)與分子生物學(xué)試題 一、 名詞解釋（每題2分，共10分） 1、必需脂肪酸 凡是體內(nèi)不能合成，必須由飼糧供給，或能通過體內(nèi)特定先體物形成，對機體正常機能和健康具有重要保護(hù)作用的脂肪酸稱為必需脂肪酸（essential fatty acids,縮寫EFA）。 2、磷氧比 呼吸過程中無機磷酸（Pi）消耗量和氧消耗量的比值稱為磷氧比。 3、糖異生 由簡單的非糖前體（乳酸、甘油、生糖氨基酸等）轉(zhuǎn)變?yōu)樘?葡萄糖或糖原)的過程。糖異生不是糖酵解的簡單逆轉(zhuǎn)。 4、酮

54、體（ketone body）：在肝臟中，脂肪酸氧化分解的中間產(chǎn)物乙酰乙酸、β-羥基丁酸及丙酮，三者統(tǒng)稱為酮體 5、hnRNA (heterogeneous nuclear RNA,hnRNA)。核內(nèi)不均一RNA 為存在于真核生物細(xì)胞核中的不穩(wěn)定、大小不均的一組高分子RNA（分子量約為105～2107，沉降系數(shù)約為30—100S）之總稱。占細(xì)胞全部RNA之百分之幾，在核內(nèi)主要存在于核仁的外側(cè)。 二、判斷（請判斷對錯并改錯。每題1分，共8分） 1、有氧條件改為無氧條件，葡萄糖的利用速度增加。 2、氰化物阻止了氧化磷酸化。 3、非糖飲食，偶數(shù)脂肪酸比奇數(shù)脂肪酸好。 4、膽固醇增高癥患者

55、，服用谷固醇，會增高血脂之類的。 5、DNA復(fù)制必須有引物，這一特點和復(fù)制的忠實性（或準(zhǔn)確性）有關(guān)。 6、體內(nèi)DNA復(fù)制所需要的能量來自焦磷酸水解釋放的自由能。 7、剪接（小）體的大小為40-60s。 8、真核mRMA前體剪接加工的機制是轉(zhuǎn)酯反應(yīng)，這一過程不需要消耗ATP。 錯 三、填空（每題1分，共15分） 1、血液中的氨的來源 丙氨酸和谷氨酰胺。 2、氨基丁酸的前體 是谷氨酸。 3、體內(nèi)合成1摩尿素要消耗 4個ATP,可以過膜運輸?shù)闹虚g物是瓜氨酸和鳥氨酸，精氨酸水解后生成尿素。 4、連接尿素和TCA循環(huán)的兩中間物為： 延胡索酸和α-酮戊二酸 。 5、糖原合成的關(guān)鍵

56、酶是 糖原合成酶，糖原分解的限素酶是 糖原磷酸化酶。 6、乙酰輔酶A的來源葡萄糖，甘油脂肪酸，酮體，氨基酸 ，去向 三羧酸循環(huán)，合成膽固醇脂肪 ，酮體 ，參與生化反應(yīng) 。 8、Asp氨基酸參與尿嘧啶合成。 9、蛋白質(zhì)組學(xué)是 的學(xué)科。 10、非蛋白N是 。 11、腦的氨的轉(zhuǎn)運形式是 。 12、CPS是 和 的中間產(chǎn)物。 13、 脫羧成為使血管擴張的物質(zhì)。 14、膽固醇的代謝終產(chǎn)物是膽汁酸。 15、脂肪酸進(jìn)入線粒體的載體是 肉毒堿脂酰轉(zhuǎn)移酶。 四、簡答題（8分） 膽汁酸循環(huán)的生化原理和意義。 膽汁酸由肝細(xì)胞分泌,經(jīng)肝左右管-肝總管-膽總管.進(jìn)入十二指腸.參加消化.然后在小腸

57、膽汁酸可被重吸收,經(jīng)肝門靜脈進(jìn)入肝.完成循環(huán). 生理意義:①保證了膽汁酸的量;②增加了膽汁酸的利用率. 五、論述題（每題15分，共45分） 1、根據(jù)圖說明DNA鏈的方向，標(biāo)出核糖C的序號，并畫出另一條相應(yīng)的DNA鏈。 (圖的內(nèi)容是給了一個鏈沒有標(biāo)出方向) 2、已知ddCTP和dCTP的結(jié)構(gòu)示意圖（ddCTP和dCTP的結(jié)構(gòu)式是一個少4位的OH，一個少5位的P），問在DNA復(fù)制反應(yīng)中， （1）如[ddCTP]>>[dCTP]，會出現(xiàn)什么現(xiàn)象？為什么？ （2）[ddCTP]=10%[dCTP]，會出現(xiàn)什么現(xiàn)象？為什么？ （3）dCMP的濃度遠(yuǎn)大于dCTP或只有10％又會怎樣？為什么

58、？ 3、圖示說明大腸桿菌的乳糖操縱子模型的調(diào)控方式。 六、簡述題（每題7分，共14分） 1、有一個四肽，被胰蛋白酶水解后形成兩個二肽，其中一個在280nm處有強光吸收，并且有呱基反應(yīng)，另一個可被HBr水解后釋放一個與茚三酮反應(yīng)后呈黃色的氨基酸。請寫出四肽序列。 2、某組織中含有某種蛋白，但含量低也無法純化，已知蛋白分子量，并有抗體，如何用一種辦法證明該組織確有此蛋白。 協(xié)和醫(yī)科大學(xué)2006年生物化學(xué)與分子生物學(xué)專業(yè)考博試題 一、 填空 （24空24分） 1.1953年，由----Waston---和-----Crick--（英文姓）首次提出了dna的雙螺旋模型，其結(jié)果發(fā)表

59、在-《自然》---雜志，他們提出的實驗依據(jù)是—A=T-----和------G=C--。 2.蛋白質(zhì)濃度測定在-280nm, 原因是苯基，但有時候也在220nm處測量，原因是肽鍵 3.表皮生長因子受體具有酪氨酸激酶的活性， 4.嗅覺、視覺、味覺和細(xì)胞膜上的G蛋白結(jié)合，這種受體具有7個跨膜α-螺旋的的結(jié)構(gòu)特點，產(chǎn)生的第二信使是cAMP、I3P、DAG。 5. 維持蛋白高級結(jié)構(gòu)的因素氫鍵、離子鍵、范德華力、疏水作用。 二、名詞解釋 （4題16分） 1. CpG island CpG雙核苷酸在人類基因組中的分布很不均一，而在基因組的某些區(qū)段，CpG保持或高于正常概率，這些區(qū)段被稱作

60、CpG島, 2. CTD of RNA Pol II RNA聚合酶II最大亞基末端的羧基端結(jié)構(gòu)域是由以七氨基酸(–Tyr-Ser-Pro-Thr-Ser- Pro-Ser-)為重復(fù)單位的高度保守的重復(fù)序列組成的. 該結(jié)構(gòu)可通過與mRNA加工因子的相互作用而對其加工過程產(chǎn)生直接或間接的影響,在mRNA的轉(zhuǎn)錄和加工的偶聯(lián)過程中具有重要的作用. 3. SiRNA是一種小RNA分子（~21-25核苷酸），由Dicer（RNAase Ⅲ家族中對雙鏈RNA具有特異 性的酶）加工而成。SiRNA是siRISC的主要成員，激發(fā)與之互補的目標(biāo)mRNA的沉默。 4.basic l

61、eucrine zipzag (堿性亮氨酸拉鏈)該結(jié)構(gòu)的特點是蛋白質(zhì)分子的肽鏈上每隔6個氨基酸就有1個亮氨酸殘基，結(jié)果就導(dǎo)致這些亮氨酸殘基都在。 三、問答題 （4題40分） 1. 基因組DNA有時會產(chǎn)生G:T錯配，DNA復(fù)制時有時會發(fā)生A:C錯配，他們產(chǎn)生的原因是什么，各怎么修復(fù)？（12分） 2. 大腸桿菌的啟動子（或操縱子）活性有無強弱之分，如果有，決定其強弱的因素什么？（10分） 動子是一種順式作用(cis-acting)正調(diào)控元件，其強弱決定基因轉(zhuǎn)錄水平的高低，而啟動子中所含有的轉(zhuǎn)錄因子則決定了啟動子的強弱。 在原核生物的啟動子中有4個區(qū)域：轉(zhuǎn)錄起始點、－10區(qū)、－35區(qū)、－1

62、0與－35之間的序列，區(qū)域是啟動子強弱的決定因素。 3. 什么是基因印記（imprinting）,它是怎么遺傳的？舉例說明。（10分） 基因組印記是指來自父方和母方的等位基因在通過精子和卵子傳遞給子代時發(fā)生了修飾，使帶有親代 印記的等位基因具有不同的表達(dá)特性，這種修飾常為DNA甲基化修飾，也包括組蛋白乙?；⒓谆刃揎?。在生殖細(xì)胞形成早期，來自父方和母方的印記將全部被消除，父方等位基因在精母細(xì)胞形成精子時產(chǎn)生新的甲基化模式，但在受精時這種甲基化模式還將發(fā) 生改變；母方等位基因甲基化模式在卵子發(fā)生時形成，因此在受精前來自父方和母方的等位基因具有不同的甲基化模式。 基因印記與動物克隆技術(shù)

63、 基因印記 (imprinting) 對核移植后基因組重新編程的影響?；蛴∮洭F(xiàn)象在哺乳動物的發(fā)育過程中普遍存在，它是指基因的表達(dá)與否取決于它們是在父源染色體上還是母源染色體上。有 些印記基因只從母源染色體上表達(dá)，而有些則只從父源染色體上表達(dá)?；蛴∮浥c動物克隆技術(shù)的成功及不足有何關(guān)系值得深入研究。 4. 為什么說‘ribosome is a ribozyme”? （8分） rRNA為肽酰轉(zhuǎn)移酶(peptidyl transferase)時，催化使肽鍵形成，不需要額外的能量。 四，名詞解釋 4題8分 1.酵母雙雜交 酵母體內(nèi)分析蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用的基因系統(tǒng)，也是一個基于轉(zhuǎn)錄因子

64、模塊結(jié)構(gòu)的遺傳學(xué)方法。典型的真核生長轉(zhuǎn)錄因子， 如GAL4、GCN4、等都含有二個不同的結(jié)構(gòu)域: DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域(DNA-binding domain)和轉(zhuǎn)錄激活結(jié)構(gòu)域(transcription-activating domain)。前者可識別DNA上的特異序列， 并使轉(zhuǎn)錄激活結(jié)構(gòu)域定位于所調(diào)節(jié)的基因的上游， 轉(zhuǎn)錄激活結(jié)構(gòu)域可同轉(zhuǎn)錄復(fù)合體的其他成分作用， 啟動它所調(diào)節(jié)的基因的轉(zhuǎn)錄。 2.細(xì)菌人工染色體 Bacterial artificial chromosome，BAC）是指一種以F質(zhì)粒（F-plasmid）為基礎(chǔ)建構(gòu)而成的細(xì)菌染色體克隆載體，長用來克隆150kb左右大小的DNA片段，

65、最多可保存300kb個堿基對。以BAC為基礎(chǔ)克隆的載體成嵌合體的頻率較低，轉(zhuǎn)化效率高，而且以環(huán)狀結(jié)構(gòu)存在于細(xì)菌體內(nèi)，易于分辨和分離純化。 五，簡述題 2題12分 1. 給定一個組織，簡述如何構(gòu)建Cdna文庫。 2. 簡述基因敲除小鼠模型的策略 利用基因打靶技術(shù)產(chǎn)生轉(zhuǎn)基因動物的程序一般為： 　　ａ．ES細(xì)胞的獲得：現(xiàn)在基因敲除一般應(yīng)用于鼠，而最常用的鼠的種系是129及其雜合體，因為這類小鼠具有自發(fā)突變形成畸胎瘤和畸胎肉瘤的傾向，是基因敲除的理想實驗動物。而其他遺傳背景的胚胎干細(xì)胞系逐漸被發(fā)展應(yīng)用，最近來自于C57BL/6CBN/JNCrjF1小鼠的胚胎干細(xì)胞系成功地用于基因敲除。c5

66、7BL／6小鼠種系等已經(jīng)廣泛的應(yīng)用于免疫學(xué)領(lǐng)域，并以此為背景建立了許多成功的轉(zhuǎn)基因模型。 　?。猓蜉d體的構(gòu)建：把目的基因和與細(xì)胞內(nèi)靶基因特異片段同源的DNA分子都重組到帶有標(biāo)記基因(如neo基因，TK基因等)的載體上，此重組載體即為打靶載體。因基因打靶的目的不同，此載體有不同的設(shè)計方法，可分為替換性載體和插入型載體。如為了把某一外源基因引入染色體DNA的某一位點上，這種情況下應(yīng)設(shè)計的插入型載體要包括外源基因(即目的基因)、同源基因片段及標(biāo)記基因等部分。如為了使某一基因失去其生理功能，這時所要設(shè)計的替換型打靶載體，應(yīng)包括含有此靶基因的啟動子及第一外顯子的DNA片段及標(biāo)記基因等諸成分。 　?。悖畬⒒虼虬休d體通過一定的方式(常用電穿孔法)導(dǎo)入同源的胚胎干細(xì)胞(EScell)中，使外源DNA與胚胎干細(xì)胞基因組中相應(yīng)部分發(fā)生同源重組，將打靶載體中的DNA序列整合到內(nèi)源基因組中從而得以表達(dá)。一般地，顯微注射命中率較高，但技術(shù)難度較大，電穿孔命中率比顯微注射低，但便于使用。 　?。洌眠x擇性培養(yǎng)基篩選已擊中的細(xì)胞：一般地，篩選使用正、負(fù)選擇法，比如用G418篩選所有能表達(dá)n