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2019-2020年高中生物 專題1.2 基因工程的基本操作程序知能演練輕巧奪冠 新人教版選修3 1．基因工程的基本操作程序有：①使目的基因與運載體相結(jié)合；②將目的基因?qū)胧荏w細胞；③檢測目的基因的表達是否符合特定性狀要求；④提取目的基因。正確的操作順序是(　　) A．③②④①　　　　　　　　 B．②④①③ C．④①②③ D．③④①② 解析：選C。平常要熟記基因工程的“四步曲”：目的基因的獲取、基因表達載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)胧荏w細胞、目的基因的檢測和鑒定。 2. 如圖為表達載體的模式圖，若結(jié)構(gòu)X是表達載體所必需的，則X最可能是(　　) A．氨芐青霉素抗性基因 B．啟動子 C．限制酶 D．DNA連接酶 解析：選B。啟動子是該表達載體所必需的，功能是啟動插入基因的轉(zhuǎn)錄過程。氨芐青霉素抗性基因可以作為標記基因，但不是必須用它作標記基因。限制酶和DNA連接酶都不是表達載體所需要的。 3．下列關(guān)于圖中P、Q、R、S、G的描述，正確的是(　　) A．P代表的是質(zhì)粒RNA，S代表的是外源DNA B．Q表示限制酶的作用，R表示RNA聚合酶的作用 C．G是RNA與DNA形成的重組質(zhì)粒 D．G是重組質(zhì)粒DNA 解析：選D。質(zhì)粒是小型環(huán)狀DNA分子，因此P是質(zhì)粒DNA，S是外源DNA，G是質(zhì)粒和外源DNA通過DNA連接酶連接而成的重組質(zhì)粒；質(zhì)粒和外源DNA需經(jīng)過同一種限制酶切割出相同的黏性末端。 4．(xx高考廣東卷)利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)羧酸酯酶(CarE)制劑的流程如圖所示，下列敘述正確的是(雙選)(　　) A．過程①需使用逆轉(zhuǎn)錄酶 B．過程②需使用解旋酶和PCR獲取目的基因 C．過程③使用的感受態(tài)細胞可用NaCl溶液制備 D．過程④可利用DNA分子雜交鑒定目的基因是否已導入受體細胞 解析：選AD。A項，過程①是通過逆轉(zhuǎn)錄獲取DNA，逆轉(zhuǎn)錄過程需要用到逆轉(zhuǎn)錄酶。B項，過程②指的是從cDNA文庫中獲取目的基因，不需要利用PCR技術(shù)，也用不到解旋酶。C項，過程③中使用的感受態(tài)細胞要用CaCl2溶液制備，而不是用NaCl溶液制備。D項，過程④鑒定目的基因是否已經(jīng)導入受體細胞，可以用標記的目的基因為探針來檢測受體細胞中是否存在目的基因，即利用DNA分子雜交鑒定。 5．(xx湖南長沙高二檢測)DNA探針是利用放射性同位素等標記的特定DNA片段。當DNA探針與待測的非標記單鏈DNA(或RNA)按堿基順序互補結(jié)合時，形成標記DNA—DNA(或標記DNA—RNA)的雙鏈雜交分子，可檢測雜交反應結(jié)果。用某人的胰島素基因制成DNA探針，能與之形成雜交分子的是(　　) ①該人胰島A細胞中的DNA?、谠撊艘葝uB細胞中的mRNA?、墼撊艘葝uA細胞中的mRNA?、茉撊烁渭毎械腄NA A．①③④ B．①②③ C．①②④ D．②③④ 解析：選C。DNA單鏈能與其互補鏈及其轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的mRNA分子互補配對而形成雜交分子；人體細胞中都有胰島素基因，但此基因只有在胰島B細胞中才能得到表達。 6．(xx高考新課標全國卷Ⅱ)植物甲具有極強的耐旱性，其耐旱性與某個基因有關(guān)。若從該植物中獲得該耐旱基因，并將其轉(zhuǎn)移到耐旱性低的植物乙中，有可能提高后者的耐旱性。 回答下列問題： (1)理論上，基因組文庫含有生物的________基因；而cDNA文庫中含有生物的________基因。 (2)若要從植物甲中獲得耐旱基因，可首先建立該植物的基因組文庫，再從中________出所需的耐旱基因。 (3)將耐旱基因?qū)朕r(nóng)桿菌，并通過農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將其導入植物________的體細胞中，經(jīng)過一系列的過程得到再生植株。要確認該耐旱基因是否在再生植株中正確表達，應檢測此再生植株中該基因的______________，如果檢測結(jié)果呈陽性，再在田間試驗中檢測植株的________是否得到提高。 (4)假如用得到的二倍體轉(zhuǎn)基因耐旱植株自交，子代中耐旱與不耐旱植株的數(shù)量比為3∶1時，則可推測該耐旱基因整合到了________________________________________________________________________ (填“同源染色體的一條上”或“同源染色體的兩條上”)。 解析：(1)基本組文庫含有生物的全部基因，而cDNA文庫中含有生物的部分基因。(2)植物甲具有極強的耐旱 性，其耐旱性與某個基因有關(guān)，若要從植物甲中獲得耐旱基因，可首先建立該植物的基因組文庫，包含該生物的所有基因，然后再從中篩選出所需的耐旱基因。(3)若從植物甲中獲得該耐旱基因，并將其轉(zhuǎn)移到耐旱性低的植物乙中，通常采用的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。將耐旱基因?qū)胫参镆业捏w細胞后，經(jīng)過植物組織培養(yǎng)得到再生植株。要確認該耐旱基因是否在再生植株中正確表達，應檢測該耐旱基因是否合成了相應的蛋白質(zhì)，即檢測此再生植株中該基因的表達產(chǎn)物，如果檢測結(jié)果呈陽性，說明已經(jīng)合成了相應的蛋白質(zhì)，這時再進行個體生物學檢測，即在田間試驗中檢測植株的耐旱性是否得到提高。(4)假如用得到的二倍體轉(zhuǎn)基因耐旱植株自交，子代中耐旱和不耐旱植株的數(shù)量比為3∶1，符合基因的分離定律，說明得到的二倍體轉(zhuǎn)基因耐旱植株為雜合子，因此可推測該耐旱基因只整合到了同源染色體的一條上。 答案：(1)全部　部分　(2)篩選　(3)乙　表達產(chǎn)物 耐旱性　(4)同源染色體的一條上 1．獲取目的基因的常用方法有：從基因文庫中獲取目的基因和利用PCR技術(shù)擴增目的基因。 2．基因表達載體的構(gòu)建是基因工程的核心，一個基因表達載體的組成，除了目的基因外，還必須有啟動子、終止子及標記基因。 3．將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法。 4．培育轉(zhuǎn)基因動物時，受體細胞一般是受精卵，目的基因的導入方法常用顯微注射技術(shù)。 5．檢測目的基因是否導入和轉(zhuǎn)錄，常用分子雜交技術(shù)；檢測目的基因是否翻譯，常用抗原—抗體雜交技術(shù)；有的還需個體生物學水平的接種實驗檢測其活性。