《凍干粉針劑車間培養(yǎng)基模擬灌裝驗(yàn)證方案》由會(huì)員分享，可在線閱讀，更多相關(guān)《凍干粉針劑車間培養(yǎng)基模擬灌裝驗(yàn)證方案（12頁(yè)珍藏版）》請(qǐng)?jiān)谘b配圖網(wǎng)上搜索。

1、 凍干粉針劑車間培養(yǎng)基模擬灌裝驗(yàn)證 編訂人＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿ 編訂日期＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿ 會(huì) 簽 部 門 職 務(wù) 姓 名 日 期 生產(chǎn)負(fù)責(zé)人 質(zhì)量負(fù)責(zé)人 凍干粉針劑車間 設(shè)備工程管理部 質(zhì)量管理部 生產(chǎn)管理部 總經(jīng)理 質(zhì)量副總 車間主任 設(shè)備工程管理部經(jīng)理

2、質(zhì)量管理部經(jīng)理 生產(chǎn)管理部經(jīng)理 批準(zhǔn)人＿＿＿＿＿＿＿＿ 批準(zhǔn)日期＿＿＿＿＿＿＿＿＿ 文件名稱 凍干粉針劑車間培養(yǎng)基模擬灌裝驗(yàn)證方案 文件編號(hào) JB-ZYZ-004-A 編 制 人 編制日期 年 月 日 復(fù)制份數(shù) 審 核 人 審核日期 年 月 日 頒發(fā)部門 質(zhì)量管理部 批 準(zhǔn) 人 批準(zhǔn)日期 年 月 日 生效日期 分發(fā)

3、部門 質(zhì)量管理部、設(shè)備工程管理部、凍干粉針劑車間 編制依據(jù) 《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》 目 的：建立一個(gè)凍干粉針培養(yǎng)基模擬灌裝工藝再驗(yàn)證方案，以規(guī)范凍干粉針車間培養(yǎng)基模擬灌裝工藝驗(yàn)證工作，證明所生產(chǎn)的無(wú)菌產(chǎn)品可以在規(guī)定的環(huán)境、工藝和操作下能有效防止微生物污染，同時(shí)確定無(wú)菌灌裝室內(nèi)允許的最多人員數(shù)量，使生產(chǎn)的注射劑符合產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，尤其符合無(wú)菌標(biāo)準(zhǔn)要求。 范 圍：凍干粉針生產(chǎn)線無(wú)菌工藝的驗(yàn)證。 責(zé) 任：設(shè)備工程管理部經(jīng)理、質(zhì)量管理部經(jīng)理、質(zhì)控主管、質(zhì)保主管 內(nèi) 容： 1.概述 培養(yǎng)基模擬灌裝是在與實(shí)際生產(chǎn)相同的工藝條件和操作方法下，模擬灌裝經(jīng)除菌過濾的胰酪

4、胨大豆胨肉湯培養(yǎng)基適量到抗生素瓶中，壓塞后，在3~6℃條件下凍干，軋蓋后，按規(guī)定條件進(jìn)行培養(yǎng)，以確認(rèn)無(wú)菌灌裝工藝的可靠性。在此驗(yàn)證之前,空氣系統(tǒng)、水處理系統(tǒng)、滅菌系統(tǒng)等驗(yàn)證工作均已完成。 2.驗(yàn)證目的 通過培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)證明，在無(wú)菌灌裝過程中所采用的各種方法和規(guī)程，可使微生物污染的水平達(dá)到可接受的合格標(biāo)準(zhǔn)的能力，并提供保證所生產(chǎn)產(chǎn)品的無(wú)菌性的置信度達(dá)到可接受的合格標(biāo)準(zhǔn)的證據(jù)。對(duì)整個(gè)無(wú)菌灌裝過程進(jìn)行驗(yàn)證試驗(yàn)，根據(jù)驗(yàn)證結(jié)果來評(píng)估生產(chǎn)線正常運(yùn)轉(zhuǎn)時(shí)對(duì)微生物控制的狀況，判斷生產(chǎn)過程的可靠性，利用培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)來證明，在正常狀態(tài)下，生產(chǎn)過程是可靠的，滿足當(dāng)產(chǎn)品污染的概率為0.10%時(shí)，無(wú)菌性的

5、可信限為95%的要求。 驗(yàn)證過程應(yīng)嚴(yán)格按照本方案規(guī)定的內(nèi)容進(jìn)行，若因特殊原因確需變更時(shí)，應(yīng)填寫驗(yàn)證方案變更申請(qǐng)及批準(zhǔn)書，報(bào)驗(yàn)證領(lǐng)導(dǎo)小組批準(zhǔn)。 3. 驗(yàn)證分工 3.1驗(yàn)證小組 3.1.1負(fù)責(zé)驗(yàn)證方案的審批。 3.1.2負(fù)責(zé)驗(yàn)證的協(xié)調(diào)工作，以保證本驗(yàn)證方案規(guī)定項(xiàng)目的順利實(shí)施。 文件名稱 凍干粉針劑車間培養(yǎng)基模擬灌裝驗(yàn)證方案 文件編號(hào) JB-ZYZ-004-A 3.1.3負(fù)責(zé)驗(yàn)證數(shù)據(jù)及結(jié)果的審核。 3.1.4負(fù)責(zé)驗(yàn)證報(bào)告的審批。 3.1.5負(fù)責(zé)發(fā)放驗(yàn)證證書。 3.1.6負(fù)責(zé)再驗(yàn)證周期的確認(rèn)。 3.2設(shè)備工程部 3.2.1負(fù)責(zé)組織驗(yàn)證所需廠房、設(shè)施、設(shè)備、儀

6、器的驗(yàn)證。 3.2.2負(fù)責(zé)儀器、儀表、量具等的校正。 3.2.3負(fù)責(zé)設(shè)備的維護(hù)保養(yǎng)。 3.3 質(zhì)量管理部 3.3.1負(fù)責(zé)擬訂驗(yàn)證方案 3.3.2負(fù)責(zé)取樣及對(duì)樣品的檢驗(yàn)。 3.3.3負(fù)責(zé)收集各項(xiàng)驗(yàn)證、試驗(yàn)記錄，并對(duì)試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析后，填寫驗(yàn)證報(bào)告，報(bào)驗(yàn)證小組批準(zhǔn)。 3.4凍干粉針劑車間 3.4.1負(fù)責(zé)驗(yàn)證方案的實(shí)施。 3.4.2負(fù)責(zé)設(shè)備的操作。 3.4.3負(fù)責(zé)收集各項(xiàng)驗(yàn)證、試驗(yàn)記錄，并對(duì)試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析后，填寫驗(yàn)證報(bào)告，報(bào)驗(yàn)證小組批準(zhǔn)。 成 員 職 責(zé) 黎士柱 負(fù)責(zé)整個(gè)驗(yàn)證過程的規(guī)劃指導(dǎo)和生產(chǎn)安排 蔡萍、耿艷、張宏 負(fù)責(zé)整個(gè)驗(yàn)證過程的生產(chǎn)工藝和質(zhì)量控制 張為

7、民 負(fù)責(zé)整個(gè)驗(yàn)證過程的設(shè)備管理 于久紅、孫明、修應(yīng)清 負(fù)責(zé)對(duì)驗(yàn)證過程進(jìn)行監(jiān)督及驗(yàn)證文件的整理 佟艷杰、秦曉紅 負(fù)責(zé)制備培養(yǎng)基 負(fù)責(zé)培養(yǎng)基灌裝及工藝控制點(diǎn)的控制 孫明、呂艷玲 負(fù)責(zé)樣品培養(yǎng)、陰陽(yáng)對(duì)照實(shí)驗(yàn)及無(wú)菌灌裝室內(nèi)沉降菌、浮游菌、塵埃粒子數(shù)的監(jiān)測(cè) 4.驗(yàn)證實(shí)施的必要條件 4.1系統(tǒng)保證要求：培養(yǎng)基模擬灌裝驗(yàn)證實(shí)施之前，必須完成以下驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)： 4.1.1公用工程：⑴空氣凈化系統(tǒng)驗(yàn)證 ⑵純化水系統(tǒng)驗(yàn)證 ⑶注射用水及純蒸汽系統(tǒng)驗(yàn)證（4）壓縮空氣系統(tǒng)驗(yàn)證 文件名稱 凍干粉針劑車間培養(yǎng)基模擬灌裝驗(yàn)證方案 文件編號(hào) JB-ZYZ-004-A 4.1.2滅菌系

8、統(tǒng)：⑴干熱滅菌驗(yàn)證 ⑵濕熱滅菌驗(yàn)證 ⑶臭氧滅菌驗(yàn)證 4.1.3無(wú)菌環(huán)境保持系統(tǒng)驗(yàn)證：灌裝區(qū)域、環(huán)境內(nèi)無(wú)微生物污染。 4.1.4設(shè)備驗(yàn)證及設(shè)備清潔驗(yàn)證：相關(guān)設(shè)備驗(yàn)證及設(shè)備清潔驗(yàn)證全部完成且符合要求。 4.2 使用的主要設(shè)備 序號(hào) 設(shè) 備 名 稱 型 號(hào) 數(shù)量 生 產(chǎn) 廠 家 1 濃 配 罐 V＝0.1m3 1 長(zhǎng)春可之爾生物技術(shù)有限公司 2 稀 配 罐 V＝0.3m3 1 長(zhǎng)春可之爾生物技術(shù)有限公司 3 緩 沖 罐 V＝01m3 1 長(zhǎng)春可之爾生物技術(shù)有限公司 4 濕法超聲波膠塞清洗機(jī) KJCS-4 1 溫州亞光制藥機(jī)械有限公司 5

9、 多功能鋁蓋清洗機(jī) DQXL-2 1 溫州亞光制藥機(jī)械有限公司 6 立式超聲波洗瓶機(jī) QCL80 1 長(zhǎng)沙楚天科技有限公司 7 殺菌干燥機(jī) SZA620/43 1 長(zhǎng)沙楚天科技有限公司 8 灌裝加塞機(jī) DGS12A 1 長(zhǎng)沙楚天科技有限公司 9 軋蓋機(jī) ZG300C 1 長(zhǎng)沙楚天科技有限公司 10 凍干機(jī) Lyo-8 1 上海車家龍科技有限公司 11 機(jī)動(dòng)門脈動(dòng)真空滅菌器 XG1.DWX-0.36B 1 山東新華醫(yī)療器械股份公司 4.3使用的物料準(zhǔn)備（依據(jù)模擬灌裝的批量核定下述材料數(shù)量） 4.3.1 生產(chǎn)批量的確定： 4.

10、3.2 使用的物料信息 品 名 批 號(hào) 數(shù) 量 生 產(chǎn) 商 抗生素瓶（ ml） 丁基膠塞 鋁塑復(fù)合蓋 胰酪胨大豆肉湯培養(yǎng)基 4.4 驗(yàn)證所需文件 《配劑稱量崗位操作規(guī)程》、《配劑崗位稀配操作規(guī)程》、《灌封崗位操作規(guī)程》、《潔凈區(qū)沉降菌 文件名稱 凍干粉針劑車間培養(yǎng)基模擬灌裝驗(yàn)證方案 文件編號(hào) JB-ZYZ-004-A 落測(cè)定操作規(guī)程》、《進(jìn)入潔凈區(qū)的物料清潔操作規(guī)程》、《培養(yǎng)基配制操作規(guī)程》、《凍干粉針劑車間 監(jiān)控管理規(guī)程》 4.5模擬灌裝過程操作規(guī)程及操作人員控制 4.5.1所有參加模擬試驗(yàn)的操作

11、人員均應(yīng)經(jīng)過GMP、無(wú)菌操作、無(wú)菌更衣程序技術(shù)等相關(guān)知識(shí)的培訓(xùn)并經(jīng)考核合格。 4.5.2參加模擬試驗(yàn)的操作人員數(shù)及人員構(gòu)成應(yīng)嚴(yán)格控制，非規(guī)定的驗(yàn)證小組成員嚴(yán)禁在模擬試驗(yàn)過程中進(jìn)入模擬試驗(yàn)現(xiàn)場(chǎng)，模擬試驗(yàn)現(xiàn)場(chǎng)人員數(shù)不得超過5人，人員的進(jìn)入及退出應(yīng)嚴(yán)格執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)操作程序，減少不必要的人員進(jìn)入及進(jìn)退出次數(shù)。 4.5.3 模擬灌裝試驗(yàn)中使用的抗生素瓶和膠塞的清洗、滅菌；設(shè)備的清洗、消毒；與產(chǎn)品接觸的灌裝設(shè)備部件的清洗、滅菌；灌裝過程必須遵循與實(shí)際生產(chǎn)操作相同的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程。 4.5.4 在培養(yǎng)基灌裝設(shè)計(jì)中，工藝條件的選擇應(yīng)選取合理的“最差條件”，用最差條件來對(duì)工藝流程、設(shè)備和整個(gè)系統(tǒng)進(jìn)行挑戰(zhàn)。最差條

12、件如下： 4.5.4.1 在準(zhǔn)備階段將物料、灌裝部件和待灌裝的容器按照工藝要求在無(wú)菌條件下保存到被允許的最長(zhǎng)時(shí)間， 4.5.4.2 培養(yǎng)基在灌裝前保存在儲(chǔ)罐中的時(shí)間挑戰(zhàn)至最長(zhǎng)工藝允許時(shí)間， 4.5.4.3 灌裝時(shí)在關(guān)鍵區(qū)域保留最多的人員， 4.5.4.4 用促生長(zhǎng)的培養(yǎng)基來代替實(shí)際生產(chǎn)時(shí)要灌裝的物料， 4.5.4.5 灌裝機(jī)灌裝速度保持略低于生產(chǎn)時(shí)灌裝速度（根據(jù)全批量的操作時(shí)間而定）， 4.5.4.6 每個(gè)容器灌裝培養(yǎng)基的量不需要和實(shí)際生產(chǎn)時(shí)完全一樣?？梢愿鶕?jù)容器大小來確定灌裝量，但必須保證灌裝后將容器來回翻轉(zhuǎn)，培養(yǎng)基可以完全接觸到容器和密封件內(nèi)表面， 4.5.4.7 漏液：

13、 4.5.4.8 倒瓶的處理： 4.5.4.9 故障維修： 4.5.4.10 生產(chǎn)活動(dòng)頻率最高： 5.驗(yàn)證內(nèi)容及記錄 5.1相關(guān)物料的預(yù)處理 5.1.1胰酪胨大豆胨肉湯培養(yǎng)基的準(zhǔn)備 每批灌裝應(yīng)≥5000瓶，按每瓶灌裝胰酪胨大豆胨肉湯培養(yǎng)基2.5ml計(jì)，除去損耗，約需胰酪胨大豆胨肉湯培養(yǎng)基粉末0.6Kg（配置成20L）。三批共需培養(yǎng)基粉末1.8Kg。 5.1.2抗生素瓶的清洗滅菌 5.1.2.1超聲波清洗后，310℃ ，≥10分鐘干熱滅菌。滅菌后做無(wú)菌檢查，應(yīng)符合規(guī)定。 文件名稱 凍干粉針劑車間培養(yǎng)基模擬灌裝驗(yàn)證方案 文件編號(hào) JB-ZYZ-004-A 5.1.2.

14、2執(zhí)行《細(xì)菌內(nèi)毒素檢查標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程》，每瓶用20ml內(nèi)毒素檢查用水蕩洗后做內(nèi)毒素檢查， 應(yīng)≤0.25EU/ml。 5.1.3膠塞的清洗滅菌 5.1.3.1膠塞清洗滅菌后做無(wú)菌檢查，應(yīng)符合規(guī)定。 5.1.3.2執(zhí)行《細(xì)菌內(nèi)毒素檢查標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程》，取膠塞40只，加入100ml內(nèi)毒素檢查用水震蕩后，做細(xì)菌內(nèi)毒素檢查，應(yīng)≤0.25EU/ml。 5.2相關(guān)實(shí)驗(yàn) 5.2.1培養(yǎng)基靈敏性試驗(yàn) 5.2.1.1菌種：培養(yǎng)基靈敏度檢查所用的菌株傳代次數(shù)不得超過5代（從菌種保存中心獲得的冷凍干燥菌種為第0代）,并采用適宜的菌種保藏技術(shù),以保證試驗(yàn)菌株的生物學(xué)特性，選擇以下三種菌種（菌種來源：黑龍江省食

15、品藥品檢驗(yàn)檢測(cè)所） 金黃色葡萄球菌 [CMCC(B) 26003] 銅綠假單胞菌 [CMCC(B) 10104] 枯草芽孢桿菌 [CMCC(B) 63501] 白色念珠菌 [CMCC(F) 98001] 黑曲霉菌 [CMCC(F) 98003] 5.2.1.2 試驗(yàn)用設(shè)備及材料：冰箱、恒溫培養(yǎng)箱、高壓真空滅菌鍋、恒溫干燥箱、刻度吸管、90mm培養(yǎng)皿、大試管、小試管、試管架、天平、接種環(huán)、酒精燈、潔凈工作臺(tái)、培養(yǎng)基、滅菌生理鹽水。 5.2.1.3 菌液制備：接種金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌的新鮮培養(yǎng)物至營(yíng)養(yǎng)肉湯中，30—

16、35℃培養(yǎng)18-24小時(shí)；接種白色念珠菌的新鮮培養(yǎng)物至改良馬丁培養(yǎng)基中，23—28℃培養(yǎng)24-48小時(shí)，上述培養(yǎng)物用0.9%無(wú)菌氯化鈉溶液制成每1ml含菌數(shù)小于100cfu（菌落形成單位）的菌懸液；接種 黑曲霉菌的新鮮培養(yǎng)物至改良馬丁培養(yǎng)基上，23—28℃培養(yǎng)5-7天。加入3-5ml 0.9%無(wú)菌氯化鈉溶液，將孢子洗脫。然后，吸出孢子懸液（用管塞有適量疏松的無(wú)菌棉花或紗布能過濾菌絲的無(wú)菌毛細(xì)吸管）至無(wú)菌試管內(nèi)，用0.9%無(wú)菌氯化鈉溶液制成每1ml含孢子數(shù)小于100cfu的孢子懸液。 5.2.1.4培養(yǎng)基接種：取每管裝量15ml胰酪胨大豆肉湯培養(yǎng)基，分別接種金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草

17、芽孢桿菌各2支，每支接種菌量1ml（菌量小于100cfu），另一支不接種，作為空白對(duì)照，30—35℃培養(yǎng)5天。取每管裝量為15ml的胰酪胨大豆肉湯培養(yǎng)基5支，分別接種白色念珠菌、黑曲霉菌各2支，每支接種菌量為1ml（菌量小于100cfu），另一支不接種，作為空白對(duì)照，23—28℃培養(yǎng)5天。逐日觀察結(jié)果。 5.2.1.5結(jié)果判斷：空白對(duì)照管應(yīng)無(wú)菌生長(zhǎng)，若加菌的培養(yǎng)基管均生長(zhǎng)良好，則該培養(yǎng)基的靈敏度檢查符合規(guī)定。 文件名稱 凍干粉針劑車間培養(yǎng)基模擬灌裝驗(yàn)證方案 文件編號(hào) JB-ZYZ-004-A 5.2.2 完整性測(cè)試：將挑戰(zhàn)菌株接種在不少于1000ml的大豆胰蛋白胨液體培養(yǎng)基中培

18、養(yǎng)以制備試驗(yàn)菌懸液。使用前菌懸液中挑戰(zhàn)菌濃度不低于每毫升106CFU。將100個(gè)挑戰(zhàn)瓶倒置于試驗(yàn)菌懸液中，并應(yīng)確保瓶身、瓶頸和瓶蓋外表面浸沒于菌懸液中。浸沒時(shí)間不應(yīng)少于4 小時(shí)。浸侵結(jié)束后將挑戰(zhàn)瓶取出并將外表面擦拭干凈。然后將每瓶容器來回翻轉(zhuǎn)，確保容器的內(nèi)表面和膠塞內(nèi)表面跟培養(yǎng)基完全接觸。然后在陽(yáng)性對(duì)照相同條件下培養(yǎng)至少7 天后目視檢查。如果陽(yáng)性對(duì)照生長(zhǎng)良好而挑戰(zhàn)瓶?jī)?nèi)無(wú)生長(zhǎng)，表明無(wú)菌容器系統(tǒng)的完整性測(cè)試通過。 5.2.3培養(yǎng)基無(wú)菌性試驗(yàn) 將剛剛灌裝的100支培養(yǎng)基，蓋塞、封口。其中50支放于30～35℃下培養(yǎng)14天，同時(shí)將另外50支放于23～28℃下培養(yǎng)14天。14天內(nèi)各試管培養(yǎng)基中應(yīng)無(wú)任

19、何微生物生長(zhǎng)。 5.2.4培養(yǎng)基陽(yáng)性對(duì)照 在模擬灌裝過程的前、中、后段，隨機(jī)抽取100支，1/2接種小于100CFU的枯草桿菌芽胞，另外1/2接種小于100CFU的白色念珠菌，分別在30～35℃和23～28℃條件下各培養(yǎng)7天，7天內(nèi)至少有50%的接種抗生素瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基中有明顯的接種微生物生長(zhǎng)，并以此作為陽(yáng)性對(duì)照。 5.3生產(chǎn)環(huán)境、人員及設(shè)備檢查 5.3.1無(wú)菌灌裝試驗(yàn)的操作環(huán)境 對(duì)無(wú)菌區(qū)墻壁、門、設(shè)備以及操作人員可能接觸的各種表面進(jìn)行無(wú)菌檢驗(yàn)。其取樣方法、取樣點(diǎn)、取樣頻率見取樣計(jì)劃。在進(jìn)行取樣時(shí)其取樣面積應(yīng)保持在25cm2。檢驗(yàn)結(jié)果應(yīng)符合下表規(guī)定。 5.3.2無(wú)菌灌裝操作人員衛(wèi)生檢

20、查： 檢查參加模擬試驗(yàn)的操作人員潔凈服和手套：每批無(wú)菌試驗(yàn)抽取無(wú)菌灌裝間操作人員2人做此 項(xiàng)檢查。操作工手套每只取1個(gè)樣，每個(gè)樣用無(wú)菌棉簽擦拭25cm2面積，全部檢出菌數(shù)應(yīng)﹤1CFU，；操作過程穿的無(wú)菌服每人取兩只前臂及前胸共3個(gè)樣，每個(gè)樣用無(wú)菌棉簽擦拭25cm2面積，每個(gè)取樣點(diǎn)﹤5CFU。 潔凈度 級(jí)別 塵粒最大允許數(shù)/ m3 微生物最大允許數(shù) 表面微生物 潔服 ≥0.5μm ≥5μm 浮游菌/m3 沉降菌/皿 接觸（f55mm） cfu /碟 5指手套 cfu /手套 25cm2 百級(jí) ≤3,500 0 ≤5 ≤1(4h) ≤1 ≤1

21、 ﹤5CFU 萬(wàn)級(jí) ≤350000 ≤2000 ≤100 ≤3 ≤5 ≤5 5.3.3設(shè)備清潔檢查 文件名稱 凍干粉針劑車間培養(yǎng)基模擬灌裝驗(yàn)證方案 文件編號(hào) JB-ZYZ-004-A 對(duì)一側(cè)內(nèi)墻壁，無(wú)菌灌裝區(qū)內(nèi)門把手，膠塞清洗機(jī)開門螺旋，灌裝機(jī)上塞料斗，西林瓶滅菌烘 干隧道出口處、理瓶轉(zhuǎn)盤，灌裝機(jī)控制面板，物料周轉(zhuǎn)桶、周轉(zhuǎn)托盤等取樣點(diǎn)取樣做無(wú)菌檢查，應(yīng) 符合規(guī)定。 5.3.4取樣計(jì)劃： 監(jiān)測(cè)項(xiàng)目 取樣方法 取樣頻率 取樣要求 操作人員無(wú)菌性檢查 棉簽擦拭法 模擬試驗(yàn)開始前，試驗(yàn)進(jìn)行一半時(shí)間，試驗(yàn)結(jié)束后，分別對(duì)操作人員進(jìn)行取樣監(jiān)測(cè) 取樣時(shí)，被

22、取樣的操作人員應(yīng)離開灌裝機(jī)，在灌裝室的一角將雙臂平伸，靜止不動(dòng)，取樣人員按棉簽擦拭取樣法在最短時(shí)間內(nèi)取樣。每次對(duì)同一操作人員進(jìn)行取樣監(jiān)測(cè)時(shí)，其取樣點(diǎn)應(yīng)不相同。 無(wú)菌灌裝區(qū)無(wú)菌性檢查 棉簽擦拭法 模擬試驗(yàn)開始前，試驗(yàn)進(jìn)行一半時(shí)間，試驗(yàn)結(jié)束后，分別根據(jù)取樣點(diǎn)要求對(duì)無(wú)菌區(qū)進(jìn)行取樣監(jiān)測(cè) 根據(jù)取樣點(diǎn)要求取樣，取樣面積固定，每次取樣面積為25cm2。每次應(yīng)選擇不同位置取樣，其重點(diǎn)為操作者可能接觸的各種表面。 空氣微生物數(shù)量監(jiān)測(cè) 沉降平皿法 每小時(shí)取樣一次 根據(jù)取樣點(diǎn)分布圖布置培養(yǎng)皿，各取樣點(diǎn)每小時(shí)更換取樣皿進(jìn)行檢測(cè)。灌裝機(jī)附近設(shè)置四個(gè)以上的取樣平皿連續(xù)暴露取樣。另有一個(gè)平皿應(yīng)放置于微生物監(jiān)

23、測(cè)室情況最差的部位。 浮游菌采樣 每30分鐘監(jiān)測(cè)一次 取樣操作時(shí)應(yīng)由專人進(jìn)行 塵埃粒子監(jiān)測(cè) 粒子計(jì)數(shù)器 每30分鐘監(jiān)測(cè)一次 監(jiān)測(cè)應(yīng)由專人按標(biāo)準(zhǔn)操作程序進(jìn)行 取樣注意事項(xiàng)： ①、操作人員無(wú)菌性檢查取樣點(diǎn)：操作人員的無(wú)菌服、手套、胸前、前臂等部位。 ②、無(wú)菌灌裝區(qū)無(wú)菌性檢查取樣點(diǎn)：其取樣重點(diǎn)為無(wú)菌灌裝區(qū)內(nèi)墻壁、門、設(shè)備表面以及操作人員可能接觸的各種表面。每次取樣應(yīng)包括：一側(cè)內(nèi)墻壁，無(wú)菌灌裝區(qū)內(nèi)門把手，膠塞清洗機(jī)開門螺旋，灌裝機(jī)上塞料斗，西林瓶滅菌烘干隧道出口處理瓶轉(zhuǎn)盤，灌裝機(jī)控制面板，物料周轉(zhuǎn)桶、周 文件名稱 凍干粉針劑車間培養(yǎng)基模擬灌裝驗(yàn)證方案 文件編號(hào) JB-Z

24、YZ-004-A 轉(zhuǎn)托盤等處。 ③、空氣微生物數(shù)量監(jiān)測(cè)沉降平皿法取樣點(diǎn)：取樣點(diǎn)見附件《凍干粉針劑培養(yǎng)基無(wú)菌灌裝模擬 試驗(yàn)空氣微生物監(jiān)測(cè)沉降菌平皿取樣點(diǎn)分布圖》。 ④、空氣微生物數(shù)量監(jiān)測(cè)浮游菌測(cè)試取樣點(diǎn)：按無(wú)菌灌裝區(qū)面積等分進(jìn)行取樣，每個(gè)測(cè)試點(diǎn)距離1米，測(cè)試點(diǎn)距內(nèi)墻面0.5米，另外在灌裝面、膠塞清洗機(jī)膠塞出口處、西林瓶滅菌烘干隧道出口處分別增加一個(gè)測(cè)試點(diǎn)。 ⑤、塵埃粒子監(jiān)測(cè)取樣點(diǎn)：按無(wú)菌灌裝區(qū)面積等分進(jìn)行取樣，每個(gè)測(cè)試點(diǎn)距離1米，測(cè)試點(diǎn)距內(nèi)墻面0.5米，另外在灌裝面、膠塞清洗機(jī)膠塞出口處、西林瓶滅菌烘干隧道出口處分別增加一個(gè)測(cè)試點(diǎn)。 5.4培養(yǎng)基模擬無(wú)菌灌裝試驗(yàn)操作 上述相關(guān)物料的

25、預(yù)處理、相關(guān)實(shí)驗(yàn)、生產(chǎn)環(huán)境、人員及設(shè)備檢查均已完成，按每批不少于5000瓶的批量進(jìn)行培養(yǎng)基模擬無(wú)菌灌裝。 5.4.1確定每個(gè)灌裝室內(nèi)的房屋面積及可能允許的最多人數(shù)：5ml： m2大約容納5人。 2ml無(wú)菌灌裝室內(nèi)先允許包括操作工在內(nèi)的6名人員進(jìn)入，30min后監(jiān)測(cè)其沉降菌、浮游菌及塵埃粒子數(shù)。 5.4.2啟動(dòng)粉針聯(lián)動(dòng)生產(chǎn)線，模擬實(shí)際生產(chǎn)的條件下，將胰酪胨大豆胨肉湯培養(yǎng)基灌裝到7ml抗生素瓶中，裝量2.5ml/支，蓋塞，然后放到傳送帶上，自動(dòng)傳送至軋蓋間。在軋蓋機(jī)上軋蓋，已軋蓋的樣品，放入不銹鋼托盤內(nèi)，每一個(gè)托盤均應(yīng)粘貼托盤標(biāo)記，明確標(biāo)示以下內(nèi)容：托盤編號(hào)、生產(chǎn)起始時(shí)間與結(jié)束時(shí)間、

26、備注等。備注應(yīng)特別標(biāo)記生產(chǎn)過程中修機(jī)前后托盤，以便于調(diào)查其污染原因。并記錄。然后，將托盤按編號(hào)順序依次放到凍干機(jī)中，冷凍溫度不得低于3℃。凍干時(shí)間設(shè)定為24小時(shí)，抽真空（真空度： ）、全壓塞后按生產(chǎn)工藝要求進(jìn)行鋁蓋密封作業(yè)。至此供試品已全部制備完成。 5.5微生物培養(yǎng) 5.5.1 每瓶在培養(yǎng)前和培養(yǎng)中間階段都要來回翻轉(zhuǎn)，這樣確保容器的內(nèi)表面和膠塞內(nèi)表面跟培養(yǎng)基完全接觸，模擬灌裝生產(chǎn)的全部樣品在適宜的溫度下培養(yǎng)14天，先在較低溫度（23～28℃）下培養(yǎng)7天，然后在較高溫度（30～35℃）下培養(yǎng)7天。在第三天和第七天之間至少觀察培養(yǎng)基灌裝品的微生物生長(zhǎng)情況一次，并且在檢測(cè)期間的最后一天至少

27、再觀察一次，并對(duì)污染瓶中的微生物進(jìn)行總結(jié)其特點(diǎn)。 5.5.2結(jié)果判定：經(jīng)試驗(yàn)灌裝好的培養(yǎng)基按以上要求培養(yǎng)14天后，應(yīng)將每瓶培養(yǎng)基對(duì)著燈光仔細(xì)目測(cè)。透明、澄清、無(wú)混濁的培養(yǎng)基判為無(wú)微生物生長(zhǎng)；培養(yǎng)基混濁或有懸浮的菌絲或菌落，則需 做進(jìn)一步的微生物生長(zhǎng)檢查，以確定培養(yǎng)基是否真正染菌。一旦確認(rèn)染菌，應(yīng)明確記錄瓶號(hào)、瓶數(shù)， 文件名稱 凍干粉針劑車間培養(yǎng)基模擬灌裝驗(yàn)證方案 文件編號(hào) JB-ZYZ-004-A 同時(shí)應(yīng)檢查鋁蓋、膠塞的密封情況；若有破損應(yīng)記錄并檢查其破損原因。對(duì)微生物污染的樣品應(yīng)進(jìn) 行鑒別試驗(yàn)，鑒別的內(nèi)容至少應(yīng)包括菌落、細(xì)胞形態(tài)學(xué)及革蘭氏染色特性等。 6.試驗(yàn)結(jié)果評(píng)價(jià)

28、 評(píng)價(jià)無(wú)菌模擬灌裝試驗(yàn)結(jié)果的主要指標(biāo)之一是微生物污染水平，如果試驗(yàn)結(jié)果證明其污染水平超過規(guī)定的合格限度（灌裝2996~4742瓶時(shí)，允許陽(yáng)性數(shù)量為0瓶，灌裝4743~6294瓶時(shí)，允許陽(yáng)性數(shù)量為1瓶），則應(yīng)立即停止生產(chǎn)，調(diào)查并記錄污染產(chǎn)生的原因。在調(diào)查結(jié)束并采用相應(yīng)的措施后應(yīng)重復(fù)進(jìn)行培養(yǎng)基無(wú)菌模擬灌裝試驗(yàn)。 原因調(diào)查至少應(yīng)包括如下項(xiàng)： a、生產(chǎn)環(huán)境微生物監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)； b、生產(chǎn)環(huán)境懸浮粒子監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)； c、人員污染的監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)； d、HEPA過濾器的完整性檢測(cè)、粒子、風(fēng)速等； e、操作間的空氣流向、壓差； f、操作人員的操作方法、培訓(xùn)情況； g、模擬灌裝試驗(yàn)過程中的異常情況； h、無(wú)

29、菌室生產(chǎn)工具及其他用品的儲(chǔ)存狀況； i、鑒別污染微生物的種、屬，以尋找污染源的線索； j、無(wú)菌室的清潔、清潔堆規(guī)程的培訓(xùn)及執(zhí)行情況； k、無(wú)菌生產(chǎn)用設(shè)備的控制系統(tǒng)和監(jiān)測(cè)系統(tǒng)的校正； l、生產(chǎn)前、生產(chǎn)后過濾器的完整性檢測(cè)結(jié)果； m、相關(guān)產(chǎn)品、相關(guān)生產(chǎn)過程存在的問題等。 原因調(diào)查結(jié)束后，應(yīng)根據(jù)調(diào)查所確定的或可能發(fā)生的原因制定糾正或改進(jìn)方案并予以實(shí)施。當(dāng)改進(jìn)方案實(shí)施之后應(yīng)重復(fù)模擬灌裝試驗(yàn)。 7.驗(yàn)證制度及再驗(yàn)證時(shí)間安排 7.1對(duì)于新建的凍干粉針劑生產(chǎn)線在其正式投入生產(chǎn)前必須進(jìn)行培養(yǎng)基無(wú)菌模擬灌裝試驗(yàn)，合格后才可投入生產(chǎn)； 7.2對(duì)于已投入使用的凍干粉針劑灌裝生產(chǎn)線，每年至少進(jìn)行2次

30、培養(yǎng)基無(wú)菌模擬灌裝試驗(yàn)； 7.3每個(gè)在凍干粉針劑灌裝生產(chǎn)線上的工作人員，每年至少參加1次成功的培養(yǎng)基無(wú)菌模擬灌裝試驗(yàn)； 7.4當(dāng)生產(chǎn)用設(shè)備、設(shè)施，從事凍干粉針劑灌裝生產(chǎn)操作的人員結(jié)構(gòu)，工藝方法有重大改動(dòng)時(shí)均必須進(jìn)行培養(yǎng)基無(wú)菌模擬灌裝試驗(yàn)，以證明其改動(dòng)對(duì)已經(jīng)驗(yàn)證了的凍干粉針劑灌裝工藝過程不產(chǎn)生不 文件名稱 凍干粉針劑車間培養(yǎng)基模擬灌裝驗(yàn)證方案 文件編號(hào) JB-ZYZ-004-A 良影響。 8. 驗(yàn)證過程的分析評(píng)價(jià)及總結(jié)方法 8.1 根據(jù)凍干粉針培養(yǎng)基模擬灌裝設(shè)計(jì)方案及技術(shù)參數(shù)、根據(jù)提供的技術(shù)資料及驗(yàn)證情況對(duì)模擬灌裝過程進(jìn)行分析評(píng)價(jià)。擬定再驗(yàn)證周期。 8.2 驗(yàn)證小組

31、根據(jù)綜合分析結(jié)果進(jìn)行總結(jié)，做出驗(yàn)證結(jié)論，起草驗(yàn)證報(bào)告，報(bào)驗(yàn)證小組負(fù)責(zé)人審批。 8.3 驗(yàn)證小組負(fù)責(zé)人對(duì)驗(yàn)證報(bào)告進(jìn)行審批，審核標(biāo)準(zhǔn). 8.3.1 驗(yàn)證試驗(yàn)是否有遺漏,記錄是否完整。 8.3.2 驗(yàn)證過程中驗(yàn)證方案有無(wú)修改,如修改是否經(jīng)批準(zhǔn)。 8.3.3 驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果是否符合標(biāo)準(zhǔn)要求，是否有偏差，如有，偏差的說明是否合理。是否需進(jìn)一步補(bǔ)充試驗(yàn)。 8.3.4 有無(wú)需要改進(jìn)的模擬分裝實(shí)驗(yàn)條件及操作步驟。 9. 變更及審批 驗(yàn)證方案由驗(yàn)證小組負(fù)責(zé)人審核批準(zhǔn),方案一經(jīng)批準(zhǔn)應(yīng)嚴(yán)格按照方案規(guī)定的內(nèi)容進(jìn)行，若因特殊原因，確實(shí)需要變更，應(yīng)填寫驗(yàn)證方案變更申請(qǐng)書，報(bào)驗(yàn)證小組負(fù)責(zé)人批準(zhǔn)。出現(xiàn)偏差，填寫工藝驗(yàn)證偏差處理單，報(bào)驗(yàn)證小組負(fù)責(zé)人審批。 第 12 頁(yè) 共11頁(yè)