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選修37題4練(B) 1.(2018河北衡水中學(xué)十五模,37)請回答下列有關(guān)生物技術(shù)實踐方面的問題: (1)培養(yǎng)基配制的步驟為:計算-稱量-　　　　-　　　　-倒平板;為統(tǒng)計樣品中活菌的數(shù)目,在37 ℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)適當(dāng)時間后形成菌落,一般選擇菌落數(shù)在　　　　個的平板進行計數(shù)。 (2)泡菜雖然好吃,但其中的亞硝酸鹽會危害人體健康。亞硝酸鹽在特定條件下會轉(zhuǎn)變成　　　　,這是一種致癌物,測定亞硝酸鹽含量的原理是在　　　　條件下,亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸反應(yīng)后,與N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰紅色染料。 (3)腐乳制作的流程是:讓豆腐上長出毛霉→加鹽腌制→加鹵湯裝瓶→密封腌制。配制鹵湯時,要使鹵湯中酒的含量控制在　　　　左右。 (4)某同學(xué)釆用血細(xì)胞計數(shù)板計數(shù)(規(guī)格為1625,0.1 mm3),統(tǒng)計4個中方格中的細(xì)菌數(shù),計算出每個小格所含細(xì)菌的平均數(shù)為2個,則每毫升樣品中的細(xì)菌數(shù)是(稀釋倍數(shù)為103)　　　　個。 (5)對于頻繁使用的菌種可將試管放入　　　　保藏。 2.(2018江西八所重點中學(xué)聯(lián)考,37)牛奶中富含蛋白質(zhì),長期飲用有助于增強體質(zhì),但牛奶同時也是多種疾病的傳播載體。國家標(biāo)準(zhǔn)是每毫升牛奶中細(xì)菌數(shù)小于30 000個,以下是牛奶消毒及細(xì)菌檢測實驗。 (1)圖中步驟①稱為　　　　消毒法,步驟②是　　　　　。 (2)進行步驟③操作時,應(yīng)選用下列中的哪種工具?　　　　　　　。為了避免雜菌污染,此步驟應(yīng)在　　　　　　　附近進行。 (3)將接種后的培養(yǎng)基和作為對照的　　　　　　　　　同時放入37 ℃恒溫培養(yǎng)箱中,培養(yǎng)36小時。取出后統(tǒng)計各平板的菌落數(shù),結(jié)果如下表所示。應(yīng)該選擇其中稀釋倍數(shù)為　　　　的平板進行計數(shù),經(jīng)過消毒后的牛奶,細(xì)菌數(shù)　　　　(是/否)符合國家標(biāo)準(zhǔn)。該法測得的細(xì)菌數(shù)一般比實際結(jié)果偏　　　　,原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。 牛奶稀釋倍數(shù) 102 103 104 平板1菌落數(shù) 87 10 1 平板2菌落數(shù) 83 12 1 平板3菌落數(shù) 85 10 0 3.(2018山東、湖北重點中學(xué)沖刺五,37)從土壤中分離尿素分解菌和纖維素分解菌,具有下列類似的操作過程: (1)在過程④的選擇培養(yǎng)基是　　　　培養(yǎng)基,過程⑧的選擇培養(yǎng)基是　　　　培養(yǎng)基(填“固體”或“液體”)。④的具體措施是　　　　　　　　　　　　　　;⑧的選擇措施是　　　　　　　　　　　　　　　　　。 (2)在過程③樣品梯度稀釋后,一般只將稀釋度為104~106倍的菌液分別接種到3個平板培養(yǎng)基上。接種的常用方法為　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。 (3)過程⑩采用　　　　　　　　　　　　的鑒別方法較簡單。周圍出現(xiàn)透明圈但不能100%確定為纖維素分解菌的菌落,原因是:　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。 4.(2018河北衡水中學(xué)十七模,37)青蒿素是一種無色針狀晶體,易溶于有機溶劑,不溶于水,不易揮發(fā),60 ℃以上易分解,主要從黃花蒿中提取。近年來又發(fā)現(xiàn)青蒿素具有較強的抗腫瘤作用,某科研小組按如下步驟進行了相關(guān)實驗: ①從黃花蒿中提取青蒿素; ②將等量癌細(xì)胞分別接種到4組培養(yǎng)瓶中,適宜條件下培養(yǎng)24 h后除去上清液; ③向4組培養(yǎng)瓶中分別加入等量含2、4、8、16 μmol/L青蒿素的培養(yǎng)液,適宜條件下繼續(xù)培養(yǎng); ④72 h后統(tǒng)計并計算各組的細(xì)胞增殖抑制率。 回答下列問題: (1)提取青蒿素時不宜使用水蒸氣蒸餾法,原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　;根據(jù)青蒿素　　　　　　　　　　的特點,可采用有機溶劑萃取的方法,現(xiàn)有四氯化碳(沸點76.5 ℃)和乙醚(沸點34.5 ℃)兩種溶劑,應(yīng)選用　　　　作為萃取劑,不選用另外一種的理由是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。 (2)萃取青蒿素的過程應(yīng)采用　　　　加熱;加熱時常在加熱瓶口安裝回流冷凝裝置,目的是　 。 (3)科研小組進行上述②~④步驟實驗的目的是　　　　　　　　　　　　　　　。步驟③中需要設(shè)罝對照組,對照組的處理方法為　　　　　　　　　　　　　　　　　。 答案全解全析 1.答案　(1)溶化　滅菌　30~300　(2)亞硝胺　鹽酸酸化　(3)12%　(4)8109　4 ℃冰箱 解析　(1)制作培養(yǎng)基時,首先按配方計算培養(yǎng)基中各種成分的用量,然后稱量→溶化→滅菌→倒平板;選擇菌落數(shù)在30~300的平板進行計數(shù)。(2)亞硝酸鹽轉(zhuǎn)變?yōu)閬喯醢?對人體有害。在鹽酸酸化條件下亞硝酸與對氨基苯磺酸反應(yīng)后,再與N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰紅色染料;(3)在鹵湯中加酒,一般要控制在12%左右。(4)血細(xì)胞計數(shù)板計數(shù)(規(guī)格為1625,0.1 mm3),每個小格所含細(xì)菌的平均數(shù)為2個,稀釋倍數(shù)為103,則每毫升樣品中的細(xì)菌數(shù)為216250.11000103=8109(個)。(5)對于頻繁使用的菌種,可以采用臨時保藏的方法,將裝有已長成的菌落的試管放入4 ℃冰箱中保藏。 2.答案　(1)巴氏　系列稀釋(或梯度稀釋)　(2)B　酒精燈火焰 (3)一個未接種的培養(yǎng)基　102　是　少　當(dāng)兩個或多個細(xì)菌連在一起時,平板上觀察到的是一個菌落 解析　(1)圖中步驟①利用80 ℃、15 min對牛奶進行消毒,此種方法稱為巴氏消毒法;步驟②是系列稀釋(或梯度稀釋)。(2)步驟③表示采用稀釋涂布平板法對微生物進行接種,因此操作時應(yīng)選用B選項所示的涂布器。為了避免雜菌污染,此步驟應(yīng)在酒精燈火焰附近進行。(3)將接種后的培養(yǎng)基和作為對照的一個未接種的培養(yǎng)基同時放入37 ℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)36小時。用稀釋涂布平板法測定同一樣品中的細(xì)菌數(shù)時,在每一個梯度濃度內(nèi),至少要涂布3個平板,確定對照組無菌后,選擇菌落數(shù)在30~300的平板進行記數(shù),求其平均值。表格信息顯示:當(dāng)牛奶稀釋倍數(shù)為102時,三個平板的菌落數(shù)在80~90之間,其余的牛奶稀釋倍數(shù),三個平板的菌落數(shù)均小于或等于12。可見,取出后統(tǒng)計各平板的菌落數(shù),應(yīng)選擇其中稀釋倍數(shù)為102的平板進行計數(shù),經(jīng)過消毒后的牛奶中,細(xì)菌數(shù)大約是=(87+83+85)3102=8 500(個/mL),而國家標(biāo)準(zhǔn)是每毫升牛奶中細(xì)菌數(shù)小于30 000個,因此經(jīng)過消毒后的牛奶符合國家標(biāo)準(zhǔn)。因當(dāng)兩個或多個細(xì)菌連在一起時,平板上觀察到的是一個菌落,所以該法測得的細(xì)菌數(shù)一般比實際結(jié)果偏少。 3.答案　(1)固體　液體　以尿素為唯一氮源　以纖維素為唯一碳源　(2)稀釋涂布平板(或平板劃線)法　(3)倒平板時加入剛果紅染液　不分解纖維素(或分解剛果紅或淀粉)的微生物菌落也可能出現(xiàn)透明圈 解析　(1)將微生物接種在固體培養(yǎng)基上培養(yǎng),才能形成菌落,可見,過程④的選擇培養(yǎng)基是固體培養(yǎng)基。進行梯度稀釋并接種前要進行過程⑧所示的選擇培養(yǎng),因此過程⑧的選擇培養(yǎng)基是液體培養(yǎng)基。④選擇培養(yǎng)的目的是篩選尿素分解菌,所以具體的措施是應(yīng)以尿素為唯一氮源;⑧選擇培養(yǎng)的目的是篩選纖維素分解菌,所以⑧的選擇措施是以纖維素為唯一碳源。(2)常采用稀釋涂布平板(或平板劃線)法,將稀釋度為104~106倍的菌液分別接種到3個平板培養(yǎng)基上。(3)剛果紅可與纖維素形成紅色復(fù)合物,但并不和纖維素水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生顏色反應(yīng)。當(dāng)纖維素被纖維素酶水解后,剛果紅—纖維素復(fù)合物就無法形成,培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈。可見,過程⑩采用倒平板時加入剛果紅染液的鑒別方法較簡單。由于不分解纖維素(或分解剛果紅或淀粉)的微生物菌落也可能出現(xiàn)透明圈,所以周圍出現(xiàn)透明圈的菌落不能100%確定為纖維素分解菌。 4.答案　(1)青蒿素不易揮發(fā),不能隨水蒸氣蒸餾出來(或水蒸氣蒸餾法適用于蒸餾揮發(fā)性物質(zhì),而青蒿素不易揮發(fā))　易溶于有機溶劑　乙醚　青蒿素在60 ℃以上易分解,應(yīng)選擇低沸點的萃取劑 (2)水浴　防止有機溶劑揮發(fā)　(3)探究青蒿素的濃度與細(xì)胞增殖抑制率的關(guān)系　在另一培養(yǎng)瓶中加入等量的不含青蒿素的培養(yǎng)液,適宜條件下繼續(xù)培養(yǎng) 解析　(1)青蒿素不易揮發(fā),不能隨水蒸氣蒸餾出來,所以提取青蒿素時不宜使用水蒸氣蒸餾法;青蒿素易溶于有機溶劑,所以可采用有機溶劑萃取的方法;由于青蒿素在60 ℃以上易分解,因此應(yīng)選擇低沸點的乙醚作為萃取劑。(2)由于有機溶劑易燃,所以萃取青蒿素的過程應(yīng)采用水浴加熱;為防止有機溶劑揮發(fā),加熱時可在加熱瓶口安裝回流冷凝裝置。(3)②~④步驟實驗的目的是探究青蒿素的濃度與細(xì)胞增殖抑制率的關(guān)系;步驟③中缺少空白對照組,需要設(shè)置一組加入等量的不含青蒿素的培養(yǎng)液,在適宜條件下培養(yǎng)作為對照組,以排除細(xì)胞自身原因的死亡。