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1、化學畢業(yè)論文 女貞樹根中黃酮提取及其清除羥基自由基初探 目錄 摘要 Ⅰ 關鍵詞 Ⅰ Abstract Ⅱ Keywords Ⅱ 前言 1 1 實驗材料、試劑及儀器 2 1.1 實驗材料 2 1.2儀器 2 1.3 試劑 2 2 實驗方法 2 2.1女貞樹根的采集與預處理 2 2.2 女貞樹根黃酮的提取及其定性檢驗 2 2.2.1女貞樹根黃酮的提取..............................................................3 2.2.2提取液的定性檢驗..............................

2、..................................3 2.3蘆丁標準溶液的配制和標準曲線的繪制............................................... 3 2.3.1蘆丁標準溶液的配制..............................................................3 2.3.2測定方法依據(jù)................................................................... 3 2.3.3蘆丁標準溶液最大吸收波長的測定...........

3、..................................... .3 2.3.4蘆丁標準曲線的繪制..............................................................3 2.4 單因素實驗 3 2.4.1乙醇濃度的選擇 3 2.4.2 料液比的選擇 4 2.4.3 回流提取溫度的選擇 4 2.4.4 回流提取時間的選擇 4 2.5 正交實驗 4 2.6比較提取液、蘆丁溶液、BHT溶液對羥基自由基的清除 4 3.實驗結果與分析 5 3.1 女貞根黃酮提取液的定性檢驗 5 3.2 蘆丁和女貞根黃酮提取液最大吸

4、收波長的測定 5 3.3 標準曲線的繪制及其線性回歸方程 5 3.4單因素實驗 5 3.4.1乙醇濃度的選擇 6 3.4.2 料液比的選擇 7 3.4.3 回流提取溫度的選擇 8 3.4.4 回流提取時間的選擇 9 3.5 正交實驗 9 3.6比較提取液、蘆丁溶液、BHT溶液對羥基自由基的清除 10 4.結論..............................................................................11參考文獻 12 致謝 13

5、 女貞樹根中黃酮提取及其清除羥基自由基初探 摘要：采用乙醇回流法提取女貞樹根中的黃酮，以乙醇濃度、提取溫度、提取時間、液料比為考察因素，對女貞樹根黃酮的提取工藝進行單因素及正交實驗，并探究了提取液清除羥基自由基。結果表明，乙醇回流法提取女貞樹根中黃酮的最佳條件為：乙醇濃度70%，溫度75℃，料液比1:15（g/mL），提取時間2.5h，此條件下黃酮提取得率為3.32%。同體積不同濃度的女貞根黃酮提取液與蘆丁溶液和BHT溶液清除羥基自由基的能力，在70～200ug/mL濃度范圍內，

6、強弱順序為蘆丁溶液＞女貞根黃酮提取液＞BHT溶液，表明在70～200ug/mL濃度范圍內，女貞根黃酮提取液能較好的清除羥基自由基。 關鍵詞：女貞樹根；黃酮；提?。磺宄u基自由基 Flavonoids and their scavenging of privet roots Abstract: The flavonoids in the ethanol reflux method to extract privet roots, ethanol concentratio

7、n, extraction temperature, extraction time, liquid feed ratio for the investigated factors privet roots flavonoids extraction process of a single factor and orthogonal experiments, andexplore extract Clear the hydroxyl radical. The results showed that the extract privet roots, ethanol reflux method

8、flavonoids: 70% of the ethanol concentration, temperature 75 C, the solid-liquid ratio of 1:15 (g / mL), extraction time 2.5 h, flavonoids mentioned under this condition achieved was 3.32%. The same size but different concentrations of privet root flavonoid extract and rutin solution and BHT soluti

9、on to remove the ability of the hydroxyl radical, 70 ~ 200ug/mL concentration range, the strength of the order of rutin solution privet root flavonoids extract> BHT solution, indicating that at 70 200ug/mL concentration range, the privet root flavonoid extract better scavenging. Keywords: privet ro

10、ots; flavonoids; extract; scavenging II 女貞樹根中黃酮提取及其清除羥基自由基初探 前 言 黃酮類化合物（flavonoes compounds）泛指兩個苯環(huán)(A與B)通過三個碳原子相互聯(lián)結而成的一系列化合物[1] 。黃酮類化合物廣泛存在于植物中,而且生理活性多種多樣,在花、葉、果等組織中,一般多以苷的形式存在[2]。黃酮類化合物具有廣泛的生物活性，包括抗氧化，抗衰老，抗菌，抗腫瘤等，此外，黃酮類化合物還具有降壓、降血脂﹑增加冠脈流量、強心、抗心律不齊等藥理作用[3]。 女貞（L igu strum lucidum）是木犀科女貞屬常綠喬

11、木, 廣泛分布于亞洲國家。查閱相關資料，知目前提取黃酮的方法有水提法﹑有機溶劑提取法﹑堿性水或堿性稀醇提取法﹑微波提取法﹑超聲波提取法﹑酶解法﹑超臨界流體萃取法﹑雙水相萃取分離法[4]。有研究表明用乙醇水溶液提取女貞子中的黃酮，浸出率高, 且能夠回收乙醇,極大降低了成本[5]。故本實驗采用乙醇水溶液提取女貞根中黃酮含量的提取。劉曉庚等對女貞果實進行了抗氧化性研究[6]，但對女貞根中黃酮類化合物的提取及清除羥基自由基研究尚未有報道，為了充分利用女貞資源，本論文從兩方面進行探究：一通過單因素及正交實驗，確定最佳提取條件；二初步探究女貞根黃酮提取液清除羥基自由基的能力，為進一步開發(fā)和利用作一些參考。

12、 1實驗材料、試劑及儀器 1.1 實驗材料 女貞樹根（采集于楚雄師院老校區(qū)實驗室后） 1.2儀器 儀器：722-S型可見分光光度計（上海菁華科技儀器有限公司）；HH-S2S恒溫水浴鍋（金壇市大地自動化儀器廠）；CP214C電子天平（奧豪斯儀器有限公司制造）； SHZ-ⅢA型循環(huán)水式真空泵（鞏義市予華儀器有限責任公司）；新型密封式粉碎機（廣州市大祥電子機械設備有限公司）；回流冷凝裝置。 1.3試劑 蘆?。║SP）、BHT、無水乙醇、氫氧化鈉、硝酸鋁、亞硝酸鈉、三氯化鐵、三氯化鋁、濃鹽酸、鋅粉、水楊酸、過氧化氫（30%）（以上均為國

13、產分析純），實驗室自制的蒸餾水和超純水。 2實驗方法 2.1女貞樹根的采集與預處理 女貞根→洗凈→曬干→粉碎 2.2女貞樹根黃酮的提取及其定性檢驗 2.2.1女貞樹中根黃酮的提取 稱取3.0g女貞根粉置于100mL的圓底燒瓶中，加入60mL70%的乙醇溶液，在80℃的恒溫水浴鍋中回流2h，過濾，用70%的乙醇溶液反復洗滌圓底燒瓶，將濾液定容至100.00mL，制得提取液。 2.2.2提取液的定性檢驗 （1）鹽酸—鎂粉反應：取1.0mL提取液于試管中加適量鎂粉搖勻，再加入濃鹽酸5滴，觀察其泡沫顏色。若提取液中含有黃酮類化合物，則顯橙紅色[7]。 （2）三氯化鋁反應：用膠頭滴管滴

14、3滴提取液在濾紙上，滴加2滴1%的三氯化鋁乙醇溶液，觀察顏色變化。若提取液中含有黃酮類化合物，則顯黃色[7]。 （3）三氯化鐵反應：用膠頭滴管滴3滴提取液在白色點滴板上，加2滴1%的三氯化鐵乙醇溶液，觀察顏色變化。若提取液中含有黃酮類化合物，則顯墨綠色[7]。 （4）氫氧化鈉反應：用膠頭滴管滴3滴提取液在濾紙上，滴加2滴4%的氫氧化鈉溶液，觀察顏色變化。若提取液中含有黃酮類化合物，則顯黃色[7]。 2.3蘆丁標準溶液的配制和標準曲線的繪制 2.3.1蘆丁標準溶液的配制 將蘆丁置于干燥箱中，在120℃下干燥1.5h，冷卻后準確稱取蘆丁標準品10mg，用70%的乙醇溶液溶解，并定容至50

15、.00mL,制得濃度為0.20mg/mL的蘆丁溶液。 2.3.2測定方法依據(jù) 以蘆丁標準液為對照品測定女貞樹根中總黃酮的提取得率，黃酮與Al3+進行絡合反應，在堿性條件形成絡合物[8]，在可見光區(qū)能獲得穩(wěn)定的特征吸收峰，吸光度值與黃酮濃度服從朗伯—比爾定律，可通過比色法進行測量[9]。 2.3.3蘆丁標準溶液最大吸收波長的選擇 用移液管精確移取蘆丁標準溶液0.50mL,置于25.00mL的比色管中，加入0.30mL 5%的亞硝酸鈉溶液,混勻，放置6min；再加入0.30mL 10%的硝酸鋁溶液，混勻，放置6min；再加入4.00mL 4%的氫氧化鈉溶液，混勻，放置6min；再用濃度為

16、70%的乙醇定容至10.00mL，搖勻，放置6min后，以試劑空白做參比，在450～570nm的波長范圍內，每隔10nm測定吸光度,確定最大吸收波長（此后的吸光度均在該波長下測定）。用同樣的方法測定女貞根黃酮提取液的吸光度。 2.3.4蘆丁標準曲線的繪制 精確吸取蘆丁標準溶液0.00、0.50、1.00、1.50、2.00、2.50﹑3.00 mL于7支25.00mL的比色管中，顯色方法同2.3.3，在波長為510nm處測定吸光度（以第一支為空白溶液）。以蘆丁溶液濃度為橫坐標，吸光度為縱坐標，繪制標準曲線。 2.4單因素實驗 2.4.1乙醇濃度的選擇 各稱取3.0g女貞根粉置于5個1

17、00mL的圓底燒瓶中，分別加入60mL不同濃度的乙醇溶液，在80℃的恒溫水浴鍋中回流2h，過濾，用相應濃度的乙醇溶液反復洗滌圓底燒瓶，濾液定容至100.00mL。然后用移液管精確移取女貞根黃酮提取溶液0.50ml,置于25.00mL的比色管中，顯色方法同2.3.3，在波長為510nm處測定吸光度，平行實驗三組。再把吸光度值帶入蘆丁標準曲線的線性回歸方程，計算出提取液的黃酮濃度。最后計算出女貞樹根總黃酮提取得率。 總黃酮提取得率的計算公式： 提取得率＝（CnV）／m100% 其中：C為稀釋以后提取液的濃度(mg/mL)，n為稀釋倍數(shù)，V為提取液定溶后的體積(mL)，m為樣品質量（mg）。

18、 2.4.2料液比的選擇 各稱取5份不同質量的女貞根粉置于5個100mL的圓底燒瓶中，分別加入60mL70%的乙醇溶液在，80℃的恒溫水浴鍋中回流2h，提取液的處理方法同2.4.1，顯色方法同2.3.3，在波長為510nm處測定其吸光度，平行實驗三組，最后計算出女貞樹根總黃酮提取得率。 2.4.3回流提取溫度的選擇 稱取3.0g女貞樹根粉置于5個100mL的圓底燒瓶中圓底燒瓶中，分別加入60mL70%的乙醇溶液在不同溫度下恒溫提取2h,提取液的處理方法同2.4.1，顯色方法同2.3.3，在波長為510nm處測定其吸光度，平行實驗三組，最后計算出女貞樹根總黃酮提取得率。 2.4.4回流提

19、取時間的選擇 稱取3.0g女貞樹皮粉置于5個100mL的圓底燒瓶中圓底燒瓶中圓底燒瓶中，分別加入60mL70%的乙醇溶液，在80℃的恒溫水浴鍋中回流不同的時間，提取液的處理方法同2.4.1，顯色方法同2.3.3，在波長為510nm處測定其吸光度，平行實驗三組，最后計算出女貞樹根總黃酮提取得率。 2.5正交試驗（四水平三因素） 在單因素實驗基礎上，進行L9（34）正交實驗，確定最佳提取條件。 2.6比較提取液、蘆丁溶液、BHT溶液對羥基自由基的清除 參照Fenton反應的方法建立反應體系模型。利用H2O2與亞鐵離子反應生成OH自由基，即Fe2++ H2O2→Fe3++OH+OH-，由于

20、自由基一般存活時間比較短，而且具有較高活性的特點，水楊酸能有效的捕捉OH 自由基且產生有色產物〔10〕，該產物在波長為510nm處有強吸收，若加入具有清除OH功能的黃酮類化合物時，黃酮類化合物便會與水楊酸競爭OH，從而使有色產物生成量減少〔11〕。采用固定反應時間法，在波長為510nm處測量含被測物反應液的吸光度，并與空白液比較，通過計算便能得出被測物對OH的清除率。 反應體系為：在10mL比色管中加入2.00mL 9mmol/L的FeSO4溶液，2.00mL 9mmol/L的水楊酸-乙醇溶液，2.00mL 8.8mmol/L的H2O2啟動反應，最后分別加入1.00mL不同濃度的的提取液，加

21、蒸餾水定容，讓反應體系在37℃的水浴中反應30min，以蒸餾水為參比，以試劑空白作比較，在510nm處測定吸光度，考慮到提取液本身的吸光度，在10mL比色管中加入2.00mL 9mmol/L的FeSO4溶液，2.00mL 9mmol/L的水楊酸-乙醇溶液，不同濃度的提取液，加蒸餾水定容，讓反應體系在37℃的水浴中反應30min,作為提取液的本底吸收。均重復實驗三次，以1.00mL不同濃度的蘆丁溶液和BHT（二丁基羥基甲苯）溶液作為對照，比較清除羥自由基的能力。 清除率計算公式: OH清除率/%=[A0-(Ax-Ax0)]/A0100% 式中

22、：A0為空白對照溶液吸光度；Ax為提取液吸光度；Ax0為不加H2O2提取液的本底吸光度。 3實驗結果與分析 3.1女貞根黃酮提取液的定性檢驗 按2.2.2所述的內容進行實驗，結果如表3-1所示： 表3-1女貞根黃酮提取液的定性檢驗結果 反應 鹽酸—鎂粉反應 三氯化鋁反應 三氯化鐵反應 氫氧化鈉反應 現(xiàn)象 橙紅色 淡黃色 墨綠色 淡黃色 表3-1中女貞根提取液與各物質反應產生的現(xiàn)象和黃酮類化合物與這些物質反應產生的現(xiàn)象相吻合，表明女貞根提取液中含有黃酮類化合物。 3.2蘆丁標

23、準液和女貞根黃酮提取液最大吸收波長的測定 按2.3.3所述的內容進行實驗，測定的吸光度結果如圖3-1所示： 圖3-1蘆丁和女貞根黃酮的吸收曲線 從圖3-1可看出，蘆丁溶液和女貞根黃酮提取液在波長為510nm處有最大吸收峰，故選擇510nm為最大吸收波長，此后吸光度均在該波長下測定。 3.3蘆丁標準曲線及其線性回歸方程 按2.3.4所述的內容進行實驗，在510nm處測定其結果如表3-2所示： 表3-2蘆丁濃度與吸光度的關系 濃度C（mg/mL） 0.00 0.01 0.02 0.03 0.04 0.05 0.06 吸光度A

24、0.00 0.109 0.218 0.325 0.443 0.561 0.666 以表3-2中蘆丁濃度為橫坐標，吸光度為縱坐標，繪制得的標準曲線如圖3-2所示： 圖3-2蘆丁標準曲線 根據(jù)標準曲線得線性回歸方程：A= 11.16786 C -0.00332，相關系數(shù)R = 0.99986，結果表明，蘆丁溶液在0.00 ～ 0.06 mg／mL范圍內，吸光度與質量濃度呈良好的線性關系。 3.4單因素實驗 3.4.1乙醇濃度的選擇 按2.4.1所述內容進行實驗，在510nm處測不同濃度的乙醇提取女貞根中總黃酮，其提取得率如圖3-3所示： 圖3-3

25、乙醇濃度與吸光度的關系 由圖3-3可以看出，當其他影響因素一定的條件下，女貞根中黃酮提取得率隨乙醇濃度的增大而增大，當乙醇濃度到達70%時提取得率最大，此后隨著乙醇濃度的增大，女貞根中總黃酮提取得率反而減小。這主要是由黃酮類物質的相對極性決定的，黃酮類化合物一般具有酚羥基和糖苷鏈，有一定的極性和親水性，用較大極性的溶劑提取效果較好。另外，大量的水有效地膨脹了女貞根組織，增大了溶質與溶劑的接觸面積，降低了溶劑的黏度，加速了溶質的擴散。當乙醇體積分數(shù)超過70％ 時，高濃度的乙醇反而會導致女貞根細胞膜性狀改變而使得總黃酮難以從細胞中提出，從而導致黃酮提取得率降低[12]。選擇濃度為70%的乙醇為宜

26、。 3.4.2料液比的選擇 按2.4.2所述內容進行實驗，在510nm處測不同料液比提取女貞根中總黃酮，其提取得率如圖3-4所示： 圖3-4料液比與吸光度的關系 由圖3-4可以看出，當其他影響因素一定的條件下，女貞樹根總黃酮提取得率隨料液比的增大而增大，當料液比達到1:20（mg/mL）時提取得率最大，此后提取得率緩慢減小，這可能是當提取劑的量（60mL）一定的情況下，隨和加入的女貞根粉增多，女貞根粉的溶解達到平衡，故此后提取得率逐漸減少。 3.4.3提取溫度的選擇 按2.4.3所述內容進行實驗，在510nm處測不同溫度提取女貞樹根中總黃酮提取得率，其結果如圖3-5所示：

27、 圖3-5 提取溫度與提取得率的關系 由圖3-5可以看出，當其他影響因素一定的條件下，女貞樹根總黃酮提取得率隨提取溫度的升高而增大，當溫度達到80℃時提取得率最大，此后隨著溫度的升高，女貞樹根總黃酮提取得率反而減小。這是因為在適當?shù)臏囟确秶鷥?，黃酮類化合物在乙醇中的溶解度隨溫度的升高而增大，故提取得率增大[13]，但是溫度過高，一些蛋白質、糖類等物質大量溶出,導致提取液粘性加大，雜質溶出量增加，從而導致提取率下降 [5]，故選擇80℃為回流提取溫度較為適宜。 3.4.4回流提取時間的選擇 按2.4.4所述內容進行實驗，在510nm處測不同回流時間提取女貞樹根中總黃酮提取得率如圖3-6所示

28、： 圖3-6提取時間與提取得率的關系 由圖3-6可以看出，當其他影響因素一定的條件下，女貞樹根總黃酮提取得率隨提取時間的增加而增大，當提取時間達到2.0h時提取得率最大，此后隨著時間的延長提取得率反而減小。這可能是由于提取時間過長,造成了部分黃酮糖苷類物質的水解,導致黃酮檢出量減少,從而提取率下降[5]，因此選擇2.0h的提取時間較為適宜。 3.5正交實驗 按2.5所述進行L9(34)正交實驗，正交因素水平表如表3-2所示： 表3-2正交因素水平表

29、 水平 A乙醇質量分數(shù)（%） B提取溫度（℃） C料液比（g/mL ） D提取時間（h） 1 60 65 1:15 1.5 2 70 70 1:20

30、2.0 3 75 75 1:30 2.5 按L9(34)進行正交實驗，所得結果如表3-3所示 表3-3正交實驗提取黃酮的結果 序號 A溫

31、度（℃） B時間（h） C乙醇濃度（%） D料液比(g/mL) E提取得率（%） 1 75 1.5 60 1:15 2.98 2 75 2.0 70 1:20 3.14 3 75 2.

32、5 80 1:30 2.66 4 80 1.5 70 1:30 2.30 5 80 2.0 80 1:15 2.65 6 80 2.5 60 1:20 2.99 7 85 1.5

33、 80 1:20 2.34 8 85 2.0 60 1:30 2.10 9 85 2.5 70 1:15 3.23 K1 2.927 2.540 2.690 2.953 K2 2.647 2.630 2.89

34、0 2.823 K3 2.557 2.960 2.550 2.353 R 0.370 0.420 0.340 0.600 由表3-3可以看出，乙醇回流法提取女貞樹根的黃酮中料液比的影響最大，其次是時間，再次是溫度，最后是乙醇濃度，最佳提取條件為A1B3C2D1，即溫度75℃

35、，提取時間2.5h，乙醇濃度70%,料液比1:15（g/mL）。 在最佳提取條件提取女貞樹根中的黃酮，平行測定三次，所得的總黃酮提取得率如表3-4所示： 表3-4最佳提取條件平行測定結果 序號 黃酮提取得率（%） 平均黃酮提取得率（%）

36、 1 3.42 2 3.25 3.32 3 3.28 由表3-4可得在最佳提取條件下提取女貞樹根中的黃酮，其提取得率為3.32%。 3.6比較提取液、蘆丁、BHT對羥基自由基的清除 按2.6所述內容進行實驗，提取液

37、、蘆丁、BHT對羥基自由基的清除結果如圖3-7所示： 圖3-7蘆丁，女貞根黃酮提取液，BHT溶液，蘆丁溶液對羥基自由基的清除率 由圖3-7可以看出，同體積不同濃度的女貞樹根提取液與蘆丁溶液和BHT溶液，在0～70ug/mL的濃度范圍內，清除羥基自由基能力的強弱順序為蘆丁溶液＞BHT溶液＞女貞根黃酮提取液；在70～200ug/mL的濃度范圍內，清除羥基自由基能力的強弱順序為蘆丁溶液＞女貞根黃酮提取液＞BHT溶液，表明在此濃度范圍內，女貞根黃酮提取液能較好的清除羥基自由基。 4結論 實驗研究表明，采用乙醇回流提取女貞樹根中的總黃酮，最佳提取條件為：溫度75℃，時間2.5h，乙醇濃度70

38、%,料液比1:15（g/mL），在該條件下女貞樹根中黃酮的提取得率為3.32%。同體積不同濃度的女貞樹根提取液與蘆丁溶液和BHT溶液，在70～200ug/mL的濃度范圍內，清除羥基自由基能力的強弱順序為蘆丁溶液＞女貞根黃酮提取液＞BHT溶液，表明在此濃度范圍內，女貞根黃酮提取液能較好的清除羥基自由基。 參考文獻 [1]肖崇厚,楊松松,洪筱坤等.中藥化學(第二版)[M].上海科學技術出版社. [2]文廷剛,杜小鳳,郭宇等.女貞子總黃酮的測定及其提取工藝［J］.江蘇農業(yè)科學,2008（2）:186-188. [3]魏朝良,于德紅,安利佳等.黃酮類化合物及清除

39、自由基機制的探討.中成藥,2005（2）:0239-0241. [4]陳從瑾,黃克瀛,李德良等.植物中黃酮類化合物的提取方法研究概況[J].生物化學工程.2007,41（3）:42-46 [5]徐玲花,熊亞青,嚴鎮(zhèn)鈞等.女貞子總黃酮提取工藝的研究［J］.安徽農業(yè)科學,2011,39( 6 ): 3305-3308. [6]劉曉庚,李鳳月,張少青等.女貞果實的抗氧化性測定［J］.食品科學,2010,21（31）:58-60. [7]劉立群.有機理論與藥物分析［M］.北京人民衛(wèi)生出版社,1984:344. [8]魏永生,王永寧,石玉平.分光光度法測定總黃酮含量的實驗條件研究［J］.青海大

40、學學報:自然科學版,2003,21（3）:61-63. [9]詹素瓊,袁定勝,李旭廷等.青刺果總黃酮定性分析及含量測定[J]. 安徽農業(yè)科學, 2010，38(28) : 15580－15582. [10]文美瓊,李璐,楊申明等.彝州野壩子花總黃酮的提取及對氧自由基的清除作用[J].時珍國醫(yī)國藥,2010,21(6). [11]張斐飛,張丹妮,鄭宇強,芹菜葉總黃酮的光譜測定及清除羥基自由基性能［J］.浙江外國語學院學報,2011（3）:54-57. [12]李燕,曾慶華,陳利梅.正交試驗法優(yōu)選紫蘇葉中總黃酮提取工藝[J].食品工程,2011（06）:148-150. [13]李思斯,

41、江波,張濤等.銀杏外種皮總黃酮的提取及其抗氧化活性研究[J].食品工程,2011,08(32):0291-0294. 致謝 在這次做畢業(yè)論文的過程中遇到了很多困難，但是在諸多老師、同學的關心和幫助下，已經(jīng)成功完成。在此我要感謝系領導的支持，衷心感謝管春平老師的精心指導、解疑和幫助，管老師嚴謹?shù)闹螌W態(tài)度、精益求精的工作作風對我影響深遠，在學習生活中不斷的鞭策我要時刻嚴格要求自己，只有高標準的要求才能夠進步。感謝宋建梅老師、李會端老師對我的論文給予寶貴的意見，還要感謝王浩華老師、普翠英老師辛苦勞累提供儀器，最后還要感謝同學們對我的支持和鼓勵。 13