《高考生物總復(fù)習(xí) 第一章第3節(jié) 測(cè)定微生物的數(shù)量課件 中圖版選修1》由會(huì)員分享，可在線閱讀，更多相關(guān)《高考生物總復(fù)習(xí) 第一章第3節(jié) 測(cè)定微生物的數(shù)量課件 中圖版選修1（39頁(yè)珍藏版）》請(qǐng)?jiān)谘b配圖網(wǎng)上搜索。

1、第第3節(jié)節(jié)測(cè)定微生物的數(shù)量測(cè)定微生物的數(shù)量學(xué)習(xí)導(dǎo)航學(xué)習(xí)導(dǎo)航1.概述微生物計(jì)數(shù)的基本方法。概述微生物計(jì)數(shù)的基本方法。2.運(yùn)用稀釋平板法測(cè)定樣品中微生物的數(shù)量。運(yùn)用稀釋平板法測(cè)定樣品中微生物的數(shù)量。重、難點(diǎn)重、難點(diǎn)新知初探思維啟動(dòng)新知初探思維啟動(dòng)一、直接計(jì)數(shù)法一、直接計(jì)數(shù)法1.常用方法：常用方法：顯微鏡直接計(jì)數(shù)法。顯微鏡直接計(jì)數(shù)法。2.具體步驟：具體步驟：將待測(cè)樣品制成懸液將待測(cè)樣品制成懸液取一定取一定量的懸液放在顯微鏡下進(jìn)行計(jì)數(shù)量的懸液放在顯微鏡下進(jìn)行計(jì)數(shù)觀察并計(jì)觀察并計(jì)算出單位體積內(nèi)的微生物總數(shù)。算出單位體積內(nèi)的微生物總數(shù)。3.優(yōu)點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)4.缺點(diǎn)：缺點(diǎn)：難以計(jì)數(shù)難以計(jì)數(shù)_的細(xì)菌。的細(xì)菌。5.適用

2、范圍：適用范圍：一般適用于純培養(yǎng)懸浮液中各種一般適用于純培養(yǎng)懸浮液中各種_的計(jì)數(shù)。的計(jì)數(shù)。二、間接計(jì)數(shù)法二、間接計(jì)數(shù)法1.常用方法：常用方法：_。所需設(shè)備所需設(shè)備_，可迅速得到結(jié)果，可迅速得到結(jié)果能觀察到微生物的能觀察到微生物的_簡(jiǎn)單簡(jiǎn)單形態(tài)特征形態(tài)特征微小微小單細(xì)胞菌體單細(xì)胞菌體稀釋平板計(jì)數(shù)法稀釋平板計(jì)數(shù)法2.具體步驟：具體步驟：需要將待測(cè)樣品配制成均勻的需要將待測(cè)樣品配制成均勻的_并使其均勻分布于平板中的培并使其均勻分布于平板中的培養(yǎng)基內(nèi)，經(jīng)過(guò)培養(yǎng)后，統(tǒng)計(jì)培養(yǎng)基中出現(xiàn)的養(yǎng)基內(nèi)，經(jīng)過(guò)培養(yǎng)后，統(tǒng)計(jì)培養(yǎng)基中出現(xiàn)的_,即可推算出檢測(cè)樣品中的活菌數(shù)。即可推算出檢測(cè)樣品中的活菌數(shù)。3.優(yōu)點(diǎn)：優(yōu)點(diǎn)：在樣

3、品中含菌數(shù)在樣品中含菌數(shù)_的情形下也的情形下也可以完成計(jì)數(shù)?？梢酝瓿捎?jì)數(shù)。系列稀釋液系列稀釋液菌落數(shù)菌落數(shù)較少較少判一判判一判(1)在用直接計(jì)數(shù)法測(cè)量培養(yǎng)瓶中酵母菌時(shí)，在用直接計(jì)數(shù)法測(cè)量培養(yǎng)瓶中酵母菌時(shí)，應(yīng)在培養(yǎng)液靜置一段時(shí)間后，從瓶底部吸取應(yīng)在培養(yǎng)液靜置一段時(shí)間后，從瓶底部吸取液體樣本。液體樣本。()(2)用稀釋平板計(jì)數(shù)法，通過(guò)觀察菌落，得出用稀釋平板計(jì)數(shù)法，通過(guò)觀察菌落，得出的數(shù)值往往比實(shí)驗(yàn)值要大。的數(shù)值往往比實(shí)驗(yàn)值要大。()(3)在計(jì)數(shù)時(shí)，用于培養(yǎng)的器皿要進(jìn)行滅菌。在計(jì)數(shù)時(shí)，用于培養(yǎng)的器皿要進(jìn)行滅菌。()三、間接計(jì)數(shù)法實(shí)例三、間接計(jì)數(shù)法實(shí)例1.土壤中好氣性細(xì)菌的計(jì)數(shù)土壤中好氣性細(xì)菌的計(jì)數(shù)

4、(1)制備土壤稀釋液制備土壤稀釋液取土壤表層取土壤表層_處的土樣。準(zhǔn)確稱處的土樣。準(zhǔn)確稱取取1 g土樣，放入盛有土樣，放入盛有_ mL無(wú)菌水的錐形瓶無(wú)菌水的錐形瓶中，振蕩中，振蕩20 min后制成后制成102倍的稀釋液。然后倍的稀釋液。然后進(jìn)行系列稀釋，得到進(jìn)行系列稀釋，得到103、104、105、106的的系列稀釋菌液。系列稀釋菌液。5 cm10 cm99(2)取樣及倒平板：每個(gè)號(hào)碼設(shè)置取樣及倒平板：每個(gè)號(hào)碼設(shè)置_個(gè)重復(fù)。個(gè)重復(fù)。(3)培養(yǎng)。培養(yǎng)。(4)觀察記錄觀察記錄計(jì)數(shù)時(shí)對(duì)于細(xì)菌、放線菌、酵母菌以每個(gè)計(jì)數(shù)時(shí)對(duì)于細(xì)菌、放線菌、酵母菌以每個(gè)培養(yǎng)皿內(nèi)有培養(yǎng)皿內(nèi)有_個(gè)菌落為宜。霉菌以個(gè)菌落為宜。

5、霉菌以每個(gè)培養(yǎng)皿內(nèi)有每個(gè)培養(yǎng)皿內(nèi)有_個(gè)菌落為宜。個(gè)菌落為宜。330300101002.檢測(cè)天然水源中細(xì)菌總數(shù)和大腸菌群數(shù)檢測(cè)天然水源中細(xì)菌總數(shù)和大腸菌群數(shù)(1)細(xì)菌總數(shù)通常是指細(xì)菌總數(shù)通常是指1 g或或1 mL檢測(cè)樣品中檢測(cè)樣品中所含所含_的總數(shù)的總數(shù),單位用單位用cfu/g(mL)表表示。示。細(xì)菌菌落細(xì)菌菌落(2)大腸菌群數(shù)通常是指每大腸菌群數(shù)通常是指每100 g或或100 mL檢檢測(cè)樣品中所含大腸菌群的實(shí)驗(yàn)數(shù)值，以測(cè)樣品中所含大腸菌群的實(shí)驗(yàn)數(shù)值，以(MPN)表示。大腸菌群是指在表示。大腸菌群是指在_條件下，條件下，24 h內(nèi)內(nèi)能發(fā)酵能發(fā)酵_，產(chǎn)酸產(chǎn)氣的一類，產(chǎn)酸產(chǎn)氣的一類_氧或氧或_氧型革

6、蘭氏陰性無(wú)芽孢桿菌的總稱。氧型革蘭氏陰性無(wú)芽孢桿菌的總稱。大腸菌群數(shù)的檢測(cè)，常用大腸菌群數(shù)的檢測(cè)，常用_法，使用法，使用乳糖膽鹽蛋白胨培養(yǎng)基、乳糖膽鹽蛋白胨培養(yǎng)基、_瓊脂培瓊脂培養(yǎng)基養(yǎng)基(EMB培養(yǎng)基培養(yǎng)基)和乳糖發(fā)酵管。和乳糖發(fā)酵管。37 乳糖乳糖需需兼性厭兼性厭多管發(fā)酵多管發(fā)酵伊紅美藍(lán)伊紅美藍(lán)3.土壤中分解尿素細(xì)菌的計(jì)數(shù)土壤中分解尿素細(xì)菌的計(jì)數(shù)有些細(xì)菌含有有些細(xì)菌含有_酶，能將尿素瓊脂酶，能將尿素瓊脂培養(yǎng)基中的尿素分解生成氨，氨溶于水變成培養(yǎng)基中的尿素分解生成氨，氨溶于水變成氫氧化銨，導(dǎo)致培養(yǎng)基變成氫氧化銨，導(dǎo)致培養(yǎng)基變成_性，使酚紅性，使酚紅指示劑呈現(xiàn)指示劑呈現(xiàn)_色。色。尿素分解尿素分解

7、堿堿紅紅想一想想一想土壤有土壤有“微生物的天然培養(yǎng)基微生物的天然培養(yǎng)基”之稱，為什之稱，為什么？么？【提示提示】由于土壤具備了各種微生物生長(zhǎng)由于土壤具備了各種微生物生長(zhǎng)所需的營(yíng)養(yǎng)、水分、空氣、酸堿度、滲透壓所需的營(yíng)養(yǎng)、水分、空氣、酸堿度、滲透壓和溫度等條件，是微生物生活的良好環(huán)境。和溫度等條件，是微生物生活的良好環(huán)境。對(duì)微生物來(lái)說(shuō)，是微生物的對(duì)微生物來(lái)說(shuō)，是微生物的“大本營(yíng)大本營(yíng)”；對(duì)；對(duì)人類來(lái)說(shuō)，是最豐富的人類來(lái)說(shuō)，是最豐富的“菌種資源庫(kù)菌種資源庫(kù)”。要點(diǎn)突破講練互動(dòng)要點(diǎn)突破講練互動(dòng)要點(diǎn)一要點(diǎn)一直接計(jì)數(shù)法和間接計(jì)數(shù)法的比較直接計(jì)數(shù)法和間接計(jì)數(shù)法的比較1.顯微鏡直接計(jì)數(shù)法顯微鏡直接計(jì)數(shù)法(1)

8、原理：利用特定細(xì)菌計(jì)數(shù)板或血細(xì)胞計(jì)數(shù)原理：利用特定細(xì)菌計(jì)數(shù)板或血細(xì)胞計(jì)數(shù)板，在顯微鏡下計(jì)算一定容積的樣品中微生板，在顯微鏡下計(jì)算一定容積的樣品中微生物的數(shù)量。物的數(shù)量。(2)方法：用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。計(jì)數(shù)板是特制的載方法：用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。計(jì)數(shù)板是特制的載玻片，其上有特定的面積為玻片，其上有特定的面積為1 mm2，高為，高為0.1 mm的計(jì)數(shù)室，一個(gè)計(jì)數(shù)室又被分成的計(jì)數(shù)室，一個(gè)計(jì)數(shù)室又被分成25個(gè)個(gè)(或或16個(gè)個(gè))中格，每個(gè)中格再被劃分成中格，每個(gè)中格再被劃分成16個(gè)個(gè)(或或25個(gè)個(gè))小格，每個(gè)計(jì)數(shù)室都由小格，每個(gè)計(jì)數(shù)室都由400個(gè)小格組個(gè)小格組成。成。(3)操作：將稀釋的樣品滴在計(jì)數(shù)板上，蓋上操作：將

9、稀釋的樣品滴在計(jì)數(shù)板上，蓋上蓋玻片，然后在顯微鏡下計(jì)數(shù)蓋玻片，然后在顯微鏡下計(jì)數(shù)45個(gè)中格中個(gè)中格中的細(xì)菌數(shù)，并求出每個(gè)小格所含細(xì)菌的平均的細(xì)菌數(shù)，并求出每個(gè)小格所含細(xì)菌的平均數(shù)，再按計(jì)算公式求出每毫升樣品中所含的數(shù)，再按計(jì)算公式求出每毫升樣品中所含的細(xì)菌數(shù)。細(xì)菌數(shù)。(4)計(jì)算公式計(jì)算公式每毫升原液所含細(xì)菌數(shù)每小格平均細(xì)菌數(shù)每毫升原液所含細(xì)菌數(shù)每小格平均細(xì)菌數(shù)40010000稀釋倍數(shù)稀釋倍數(shù)(5)缺點(diǎn)：不能區(qū)分死菌與活菌。缺點(diǎn)：不能區(qū)分死菌與活菌。2.間接計(jì)數(shù)法間接計(jì)數(shù)法(活菌計(jì)數(shù)法活菌計(jì)數(shù)法)(1)原理：當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基原理：當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落，來(lái)

10、源于樣品稀釋液中表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落，來(lái)源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌，通過(guò)統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，就的一個(gè)活菌，通過(guò)統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，就能推測(cè)出樣品中大約含有多少活菌。能推測(cè)出樣品中大約含有多少活菌。(2)操作操作設(shè)置重復(fù)組設(shè)置重復(fù)組,增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說(shuō)服力與準(zhǔn)確性。增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說(shuō)服力與準(zhǔn)確性。將待測(cè)樣品經(jīng)一系列將待測(cè)樣品經(jīng)一系列10倍稀釋，然后選擇三倍稀釋，然后選擇三個(gè)稀釋度的菌液，分別取個(gè)稀釋度的菌液，分別取0.1 mL接種到已制接種到已制備好的平板上，然后用無(wú)菌涂布器將菌液涂備好的平板上，然后用無(wú)菌涂布器將菌液涂布在整個(gè)平板表面，放在適宜的溫度下培養(yǎng)布在整個(gè)平板表面，放在適宜的溫度下培養(yǎng)計(jì)數(shù)菌落數(shù)。為

11、使結(jié)果接近真實(shí)值，可將同計(jì)數(shù)菌落數(shù)。為使結(jié)果接近真實(shí)值，可將同一稀釋度菌液加到三個(gè)或三個(gè)以上的平板上一稀釋度菌液加到三個(gè)或三個(gè)以上的平板上,經(jīng)涂布、培養(yǎng)，計(jì)算出菌落平均數(shù)。經(jīng)涂布、培養(yǎng)，計(jì)算出菌落平均數(shù)。為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，要選擇一個(gè)合適的稀為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，要選擇一個(gè)合適的稀釋倍數(shù)，且同一稀釋倍數(shù)的各個(gè)重復(fù)組菌落釋倍數(shù)，且同一稀釋倍數(shù)的各個(gè)重復(fù)組菌落數(shù)要相近，若設(shè)置的重復(fù)組中結(jié)果相差太遠(yuǎn)數(shù)要相近，若設(shè)置的重復(fù)組中結(jié)果相差太遠(yuǎn),意味著操作有誤，需重新實(shí)驗(yàn)。意味著操作有誤，需重新實(shí)驗(yàn)。(3)優(yōu)點(diǎn)：能觀察菌落特征。優(yōu)點(diǎn)：能觀察菌落特征。 在探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量變?cè)谔骄颗囵B(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量變化

12、的實(shí)驗(yàn)中，需利用計(jì)數(shù)板對(duì)微生物細(xì)胞進(jìn)化的實(shí)驗(yàn)中，需利用計(jì)數(shù)板對(duì)微生物細(xì)胞進(jìn)行直接計(jì)數(shù)。計(jì)數(shù)板是一個(gè)特制的可在顯微行直接計(jì)數(shù)。計(jì)數(shù)板是一個(gè)特制的可在顯微鏡下觀察的載玻片，樣品就滴在計(jì)數(shù)室內(nèi)。鏡下觀察的載玻片，樣品就滴在計(jì)數(shù)室內(nèi)。計(jì)數(shù)室由計(jì)數(shù)室由2516400個(gè)小室組成，容納液體個(gè)小室組成，容納液體總體積為總體積為0.1 mm3。某同學(xué)操作時(shí)將。某同學(xué)操作時(shí)將1 mL酵酵母菌樣品加母菌樣品加99 mL無(wú)菌水稀釋，用無(wú)菌吸管無(wú)菌水稀釋，用無(wú)菌吸管吸取少許使其自行滲入計(jì)數(shù)室，蓋上蓋玻片吸取少許使其自行滲入計(jì)數(shù)室，蓋上蓋玻片并用濾紙吸去多余菌液，進(jìn)行觀察計(jì)數(shù)。并用濾紙吸去多余菌液，進(jìn)行觀察計(jì)數(shù)。例例1(

13、1)在實(shí)驗(yàn)中，某同學(xué)的部分實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程是在實(shí)驗(yàn)中，某同學(xué)的部分實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程是這樣的：這樣的：從靜置試管中吸取酵母菌培養(yǎng)液從靜置試管中吸取酵母菌培養(yǎng)液加入計(jì)數(shù)板進(jìn)行計(jì)數(shù)，并記錄數(shù)據(jù)；加入計(jì)數(shù)板進(jìn)行計(jì)數(shù)，并記錄數(shù)據(jù)；把酵把酵母菌培養(yǎng)液放置在冰箱中；母菌培養(yǎng)液放置在冰箱中；第七天再取樣第七天再取樣計(jì)數(shù)，記錄數(shù)據(jù)，統(tǒng)計(jì)分析繪成曲線。計(jì)數(shù)，記錄數(shù)據(jù)，統(tǒng)計(jì)分析繪成曲線。請(qǐng)糾正該同學(xué)實(shí)驗(yàn)操作中的請(qǐng)糾正該同學(xué)實(shí)驗(yàn)操作中的3處錯(cuò)誤：處錯(cuò)誤：_；_；_。(2)在實(shí)驗(yàn)前應(yīng)該對(duì)計(jì)數(shù)板、吸管等器具進(jìn)行在實(shí)驗(yàn)前應(yīng)該對(duì)計(jì)數(shù)板、吸管等器具進(jìn)行_處理。處理。(3)如果一個(gè)小方格內(nèi)酵母菌過(guò)多，難以數(shù)清如果一個(gè)小方格內(nèi)酵母菌過(guò)多，

14、難以數(shù)清,應(yīng)采取的措施是應(yīng)采取的措施是_。(4)如果觀察到如圖所示如果觀察到如圖所示a、b、c、d、e 5個(gè)個(gè)大格共大格共80個(gè)小室內(nèi)共有酵母菌個(gè)小室內(nèi)共有酵母菌48個(gè)，則上述個(gè)，則上述1 mL酵母菌樣品中約有酵母菌酵母菌樣品中約有酵母菌_個(gè)；要個(gè)；要獲得較為準(zhǔn)確的數(shù)值，減少誤差，你認(rèn)為該獲得較為準(zhǔn)確的數(shù)值，減少誤差，你認(rèn)為該怎么做？怎么做？_?！窘馕鼋馕觥?1)在從試管中吸取酵母菌之前在從試管中吸取酵母菌之前,應(yīng)將試管輕輕振蕩幾次，目的是使酵母菌在應(yīng)將試管輕輕振蕩幾次，目的是使酵母菌在培養(yǎng)液中均勻分布。酵母菌的培養(yǎng)液應(yīng)置于培養(yǎng)液中均勻分布。酵母菌的培養(yǎng)液應(yīng)置于適宜溫度下培養(yǎng)，并且每隔適宜溫度

15、下培養(yǎng)，并且每隔24小時(shí)就要統(tǒng)計(jì)小時(shí)就要統(tǒng)計(jì)一次菌落數(shù)目。一次菌落數(shù)目。(2)為了避免雜菌污染，實(shí)驗(yàn)為了避免雜菌污染，實(shí)驗(yàn)中所用吸管、計(jì)數(shù)板等器具需進(jìn)行滅菌處理中所用吸管、計(jì)數(shù)板等器具需進(jìn)行滅菌處理。(3)、(4)解答時(shí)要注意以下兩點(diǎn)解答時(shí)要注意以下兩點(diǎn):統(tǒng)一單統(tǒng)一單位位;注意體積的變化。注意體積的變化。400個(gè)小室共容納液體總體積為個(gè)小室共容納液體總體積為0.1 mm3，則，則80個(gè)小室容納體積為：個(gè)小室容納體積為：2102mm3，含酵母，含酵母菌菌48個(gè)，又因酵母菌培養(yǎng)液總體積為個(gè)，又因酵母菌培養(yǎng)液總體積為100 mL,統(tǒng)一單位后即可求出酵母菌個(gè)數(shù)。統(tǒng)一單位后即可求出酵母菌個(gè)數(shù)。【答案答案

16、】(1)應(yīng)將試管輕輕振蕩幾次再吸應(yīng)將試管輕輕振蕩幾次再吸取酵母菌培養(yǎng)液進(jìn)行計(jì)數(shù)取酵母菌培養(yǎng)液進(jìn)行計(jì)數(shù)應(yīng)將酵母菌培養(yǎng)液放置在適宜溫度下培養(yǎng)應(yīng)將酵母菌培養(yǎng)液放置在適宜溫度下培養(yǎng)應(yīng)連續(xù)七天，每天觀察、取樣計(jì)數(shù)并記錄應(yīng)連續(xù)七天，每天觀察、取樣計(jì)數(shù)并記錄數(shù)據(jù)數(shù)據(jù)(2)滅菌滅菌(3)適當(dāng)稀釋適當(dāng)稀釋(4)2.4108多次計(jì)數(shù)，求平均值多次計(jì)數(shù)，求平均值變式訓(xùn)練變式訓(xùn)練用稀釋平板法測(cè)定同一土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)用稀釋平板法測(cè)定同一土壤樣品中的細(xì)菌數(shù),在對(duì)應(yīng)稀釋倍數(shù)為在對(duì)應(yīng)稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中，得到以下的培養(yǎng)基中，得到以下幾種統(tǒng)計(jì)結(jié)果，正確的是幾種統(tǒng)計(jì)結(jié)果，正確的是()A涂布了涂布了1個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)是

17、個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)是230B涂布了涂布了2個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)是個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)是215和和260，取平均值，取平均值238C涂布了涂布了3個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是21、212和和256，取平均值，取平均值163D涂布了涂布了3個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是210、240和和250，取平均值，取平均值233解析：選解析：選D。在設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)時(shí)，一定要涂布至。在設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)時(shí)，一定要涂布至少少3個(gè)平板，作為重復(fù)組，才能增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的個(gè)平板，作為重復(fù)組，才能增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說(shuō)服力與準(zhǔn)確性，所以說(shuō)服力與準(zhǔn)確性，所以A、B兩項(xiàng)不正確。兩項(xiàng)不正確。C項(xiàng)雖涂布了項(xiàng)雖涂

18、布了3個(gè)平板，但是，其中個(gè)平板，但是，其中1個(gè)平板的個(gè)平板的計(jì)數(shù)結(jié)果與另兩個(gè)相差太遠(yuǎn)，說(shuō)明在操作過(guò)計(jì)數(shù)結(jié)果與另兩個(gè)相差太遠(yuǎn)，說(shuō)明在操作過(guò)程中可能出現(xiàn)了錯(cuò)誤，因此，不能簡(jiǎn)單地用程中可能出現(xiàn)了錯(cuò)誤，因此，不能簡(jiǎn)單地用3個(gè)平板的計(jì)數(shù)值求平均值。個(gè)平板的計(jì)數(shù)值求平均值。要點(diǎn)二要點(diǎn)二間接計(jì)數(shù)法在統(tǒng)計(jì)微生物數(shù)目時(shí)的間接計(jì)數(shù)法在統(tǒng)計(jì)微生物數(shù)目時(shí)的注意事項(xiàng)注意事項(xiàng)1.設(shè)置對(duì)照設(shè)置對(duì)照(1)目的：排除實(shí)驗(yàn)中非測(cè)試因素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果目的：排除實(shí)驗(yàn)中非測(cè)試因素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度。的影響，提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度。(2)方法：取一個(gè)未接種的培養(yǎng)基與接種好的方法：取一個(gè)未接種的培養(yǎng)基與接種好的培養(yǎng)基一起培養(yǎng)

19、。培養(yǎng)基一起培養(yǎng)。2.注意無(wú)菌操作注意無(wú)菌操作(1)建立無(wú)菌觀念，嚴(yán)格控制實(shí)驗(yàn)器材、實(shí)驗(yàn)建立無(wú)菌觀念，嚴(yán)格控制實(shí)驗(yàn)器材、實(shí)驗(yàn)室、實(shí)驗(yàn)操作者的消毒、滅菌。室、實(shí)驗(yàn)操作者的消毒、滅菌。(2)整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程必須保證無(wú)菌操作。整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程必須保證無(wú)菌操作。(3)取樣、稀釋都要在酒精燈火焰附近的無(wú)菌取樣、稀釋都要在酒精燈火焰附近的無(wú)菌環(huán)境中進(jìn)行。環(huán)境中進(jìn)行。(4)規(guī)范操作，防止其他微生物污染，實(shí)驗(yàn)結(jié)規(guī)范操作，防止其他微生物污染，實(shí)驗(yàn)結(jié)束后洗手、消毒。束后洗手、消毒。3.準(zhǔn)確計(jì)數(shù)準(zhǔn)確計(jì)數(shù)(1)在計(jì)算結(jié)果時(shí)，不同的微生物要選擇的稀在計(jì)算結(jié)果時(shí)，不同的微生物要選擇的稀釋倍數(shù)不同。細(xì)菌、放線菌、酵母菌一般以釋倍數(shù)

20、不同。細(xì)菌、放線菌、酵母菌一般以每個(gè)培養(yǎng)皿中有每個(gè)培養(yǎng)皿中有30300個(gè)菌落為宜，而霉個(gè)菌落為宜，而霉菌則以有菌則以有10100個(gè)為宜。個(gè)為宜。(2)要設(shè)置要設(shè)置3個(gè)或個(gè)或3個(gè)以上的重復(fù)組，然后求其個(gè)以上的重復(fù)組，然后求其平均值進(jìn)行計(jì)算。平均值進(jìn)行計(jì)算。(3)每隔每隔24 h統(tǒng)計(jì)一次，最后選取數(shù)目穩(wěn)定時(shí)統(tǒng)計(jì)一次，最后選取數(shù)目穩(wěn)定時(shí)的記錄作為結(jié)果。的記錄作為結(jié)果。特別提醒特別提醒間接計(jì)數(shù)法主要是用來(lái)推測(cè)樣間接計(jì)數(shù)法主要是用來(lái)推測(cè)樣品中大約含有的活菌數(shù)。品中大約含有的活菌數(shù)。統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比實(shí)際的數(shù)目低，因?yàn)榻y(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比實(shí)際的數(shù)目低，因?yàn)楫?dāng)兩個(gè)或兩個(gè)以上微生物在一起時(shí)，平板上當(dāng)兩個(gè)或兩個(gè)以

21、上微生物在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落。觀察到的只是一個(gè)菌落。 在做分離分解尿素的細(xì)菌實(shí)驗(yàn)時(shí)，在做分離分解尿素的細(xì)菌實(shí)驗(yàn)時(shí)，A同學(xué)從對(duì)應(yīng)的培養(yǎng)基上篩選出大約同學(xué)從對(duì)應(yīng)的培養(yǎng)基上篩選出大約150個(gè)菌落個(gè)菌落，而其他同學(xué)只選擇出大約，而其他同學(xué)只選擇出大約50個(gè)菌落。個(gè)菌落。A同學(xué)同學(xué)的結(jié)果產(chǎn)生原因可能有的結(jié)果產(chǎn)生原因可能有()由于土樣不同由于土樣不同由于培養(yǎng)基污染由于培養(yǎng)基污染由由于操作失誤于操作失誤沒(méi)有設(shè)置對(duì)照沒(méi)有設(shè)置對(duì)照ABC D例例2【解析解析】實(shí)驗(yàn)結(jié)論是否正確與是否設(shè)置對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)論是否正確與是否設(shè)置對(duì)照有直接關(guān)系，但實(shí)驗(yàn)結(jié)果與是否設(shè)計(jì)對(duì)照照有直接關(guān)系，但實(shí)驗(yàn)結(jié)果與是否設(shè)計(jì)對(duì)照無(wú)關(guān)。無(wú)關(guān)?！敬鸢复鸢浮緼變式訓(xùn)練變式訓(xùn)練下列調(diào)查活動(dòng)或?qū)嶒?yàn)中，計(jì)算所得數(shù)值與實(shí)下列調(diào)查活動(dòng)或?qū)嶒?yàn)中，計(jì)算所得數(shù)值與實(shí)際數(shù)值相比，可能偏小的是際數(shù)值相比，可能偏小的是()標(biāo)志重捕法調(diào)查灰喜鵲種群密度時(shí)標(biāo)志物標(biāo)志重捕法調(diào)查灰喜鵲種群密度時(shí)標(biāo)志物脫落脫落用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)酵母菌數(shù)量時(shí)只統(tǒng)計(jì)方用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)酵母菌數(shù)量時(shí)只統(tǒng)計(jì)方格內(nèi)菌體格內(nèi)菌體樣方法調(diào)查蒲公英種群密度時(shí)在分布較密樣方法調(diào)查蒲公英種群密度時(shí)在分布較密的地區(qū)取樣的地區(qū)取樣調(diào)查某遺傳病的發(fā)病率時(shí)以患者家系為調(diào)調(diào)查某遺傳病的發(fā)病率時(shí)以患者家系為調(diào)查對(duì)象查對(duì)象A BC D