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1、第第2講講生物技術在其他方面的應用生物技術在其他方面的應用考綱要求考綱要求三年考情三年考情命題趨勢命題趨勢(1)酶的存在與簡單制作酶的存在與簡單制作方法方法(2)酶活力測定的一般原酶活力測定的一般原理和方法理和方法(3)酶在食品制造和洗滌酶在食品制造和洗滌等方面的應用等方面的應用(4)制備和應用固定化酶制備和應用固定化酶2013海南、海南、江蘇江蘇2012廣東、廣東、江蘇江蘇2011江蘇江蘇1.趨勢分析：聯(lián)系果汁生產(chǎn)、加趨勢分析：聯(lián)系果汁生產(chǎn)、加酶洗衣粉等生產(chǎn)生活實例，考查酶洗衣粉等生產(chǎn)生活實例，考查酶特性探究的實驗分析與設計，酶特性探究的實驗分析與設計，植物組織培養(yǎng)的操作程序。植物組織培養(yǎng)的

2、操作程序。2備考指南：備考指南：(1)利用實例分析利用實例分析法，理解果膠酶在果汁生產(chǎn)中的法，理解果膠酶在果汁生產(chǎn)中的作用。作用。(2)利用列表比較法突破直接使用利用列表比較法突破直接使用酶、固定化酶和固定化細胞的內(nèi)酶、固定化酶和固定化細胞的內(nèi)容。容。(3)聯(lián)系生長素和細胞分裂素的作聯(lián)系生長素和細胞分裂素的作用分析兩者在植物組織培養(yǎng)中的用分析兩者在植物組織培養(yǎng)中的作用。作用。(1)植物的組織培養(yǎng)植物的組織培養(yǎng)(2)蛋白質(zhì)的提取和分離蛋白質(zhì)的提取和分離(3)DNA的粗提取和鑒定的粗提取和鑒定(4)PCR技術的基本操作技術的基本操作和應用和應用2012江蘇、江蘇、山東山東2011廣東、廣東、江蘇、

3、上海江蘇、上海纖維素和果膠纖維素和果膠溫度、溫度、pH、酶的抑制劑酶的抑制劑蛋白酶、脂肪酶蛋白酶、脂肪酶 通洗衣粉與加酶通洗衣粉與加酶洗衣粉洗衣粉一類化學反應一類化學反應細胞的全能性細胞的全能性脫分化和再分化脫分化和再分化pH、溫度、光照、溫度、光照蛋白質(zhì)的各種特性蛋白質(zhì)的各種特性凝膠色譜法和電泳法凝膠色譜法和電泳法DNA熱變性熱變性變性變性復性復性延伸延伸1固定化細胞在使用上有什么要求？固定化細胞在使用上有什么要求？因為固定化細胞使用的是活細胞，因而要定期提供全面的營因為固定化細胞使用的是活細胞，因而要定期提供全面的營養(yǎng)物質(zhì)，供細胞生長、繁殖。養(yǎng)物質(zhì)，供細胞生長、繁殖。2凝膠色譜法的原理是什

4、么？凝膠色譜法的原理是什么？根據(jù)相對分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì)。根據(jù)相對分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì)。考點一考點一酶的應用酶的應用 (2013高考江蘇卷高考江蘇卷)下列有關固定化酶和固定化細胞下列有關固定化酶和固定化細胞的敘述，正確的是的敘述，正確的是()A可用包埋法制備固定化酵母細胞可用包埋法制備固定化酵母細胞B反應產(chǎn)物對固定化酶的活性沒有影響反應產(chǎn)物對固定化酶的活性沒有影響C葡萄糖異構酶固定前后專一性不同葡萄糖異構酶固定前后專一性不同D固定化細胞可以催化各種反應底物的一系列反應固定化細胞可以催化各種反應底物的一系列反應自主嘗試自主嘗試_ 【解析解析】體積大的細胞難以被吸附或結合，固定化細胞多采體

5、積大的細胞難以被吸附或結合，固定化細胞多采用包埋法，用包埋法，A項正確；反應產(chǎn)物積累會影響酶的活性，項正確；反應產(chǎn)物積累會影響酶的活性，B項錯項錯誤；葡萄糖異構酶在固定前后都是催化葡萄糖轉(zhuǎn)化成果糖，誤；葡萄糖異構酶在固定前后都是催化葡萄糖轉(zhuǎn)化成果糖，故專一性相同，故專一性相同，C項錯誤；固定化細胞固定的是一系列的酶項錯誤；固定化細胞固定的是一系列的酶,可以催化一系列的反應，但不是催化各種反應底物的反應，可以催化一系列的反應，但不是催化各種反應底物的反應，D項錯誤。項錯誤?！敬鸢复鸢浮緼【鏈接提升鏈接提升】1酶活性不等同于酶促反應速度酶活性不等同于酶促反應速度同等條件下的酶促反應速度的快慢可以表

6、示酶活性的高低，同等條件下的酶促反應速度的快慢可以表示酶活性的高低，但酶活性與酶促反應速度仍然是兩個完全不同的概念，其影但酶活性與酶促反應速度仍然是兩個完全不同的概念，其影響因素也不完全相同，如酶的濃度、反應物的濃度可以影響響因素也不完全相同，如酶的濃度、反應物的濃度可以影響反應速度，但不能影響酶的活性。反應速度，但不能影響酶的活性。2海藻酸鈉溶液的濃度對包埋酵母細胞數(shù)量的影響海藻酸鈉溶液的濃度對包埋酵母細胞數(shù)量的影響(1)海藻酸鈉溶液濃度過高，將很難形成凝膠珠；海藻酸鈉溶液濃度過高，將很難形成凝膠珠；(2)濃度過低，形成的凝膠珠所包埋的酵母細胞的數(shù)量少。濃度過低，形成的凝膠珠所包埋的酵母細胞

7、的數(shù)量少。3配制海藻酸鈉溶液的注意事項配制海藻酸鈉溶液的注意事項(1)海藻酸鈉溶化時要用小火或間斷加熱，避免海藻酸鈉發(fā)生海藻酸鈉溶化時要用小火或間斷加熱，避免海藻酸鈉發(fā)生焦煳；焦煳；(2)將溶化后的海藻酸鈉先冷卻至室溫，再與酵母細胞混合，將溶化后的海藻酸鈉先冷卻至室溫，再與酵母細胞混合，避免高溫殺死酵母細胞；避免高溫殺死酵母細胞；(3)固定化酵母細胞時，應將海藻酸鈉與酵母細胞的混合液用固定化酵母細胞時，應將海藻酸鈉與酵母細胞的混合液用注射器緩慢滴加到注射器緩慢滴加到CaCl2溶液中，而不是注射，以免影響凝溶液中，而不是注射，以免影響凝膠珠的形成。膠珠的形成。跟蹤訓練跟蹤訓練果膠酶主要用于果膠的

8、分解，在果汁的生產(chǎn)等方果膠酶主要用于果膠的分解，在果汁的生產(chǎn)等方面被廣泛應用。面被廣泛應用。(1)霉菌發(fā)酵生產(chǎn)的果膠酶是食品加工業(yè)中使用量最大的酶制霉菌發(fā)酵生產(chǎn)的果膠酶是食品加工業(yè)中使用量最大的酶制劑。某科研小組為了篩選出果膠酶的高產(chǎn)菌株，進行了相關劑。某科研小組為了篩選出果膠酶的高產(chǎn)菌株，進行了相關實驗。實驗。第一步：取樣。如果你是該小組的成員，你會從果園中的第一步：取樣。如果你是該小組的成員，你會從果園中的_中去取樣分離產(chǎn)果膠酶的菌株。中去取樣分離產(chǎn)果膠酶的菌株。土壤或腐爛的水果土壤或腐爛的水果第二步：制備培養(yǎng)基。篩選果膠酶高產(chǎn)菌株的培養(yǎng)基，主要第二步：制備培養(yǎng)基。篩選果膠酶高產(chǎn)菌株的培養(yǎng)

9、基，主要營養(yǎng)成分有水、果膠、硝酸鉀、高碘酸營養(yǎng)成分有水、果膠、硝酸鉀、高碘酸(果膠的降解產(chǎn)物可以果膠的降解產(chǎn)物可以溶于高碘酸而在培養(yǎng)基上形成透明圈溶于高碘酸而在培養(yǎng)基上形成透明圈)等。在該配方中，硝酸等。在該配方中，硝酸鉀是微生物需要的鉀是微生物需要的_。為了便于分離純化目的菌株，培養(yǎng)基中除了加入上述物質(zhì)外為了便于分離純化目的菌株，培養(yǎng)基中除了加入上述物質(zhì)外,還必須加入還必須加入_。培養(yǎng)基滅菌采用的最適方法是。培養(yǎng)基滅菌采用的最適方法是_法。法。第三步：培養(yǎng)及篩選。培養(yǎng)基上接種后，在第三步：培養(yǎng)及篩選。培養(yǎng)基上接種后，在30 恒溫箱中培恒溫箱中培養(yǎng)養(yǎng)48 h，挑選出，挑選出_的菌落作為生產(chǎn)果膠

10、的菌落作為生產(chǎn)果膠酶的菌種。從篩選出的微生物中分離提取的果膠酶通常需要酶的菌種。從篩選出的微生物中分離提取的果膠酶通常需要檢測檢測_，以確定其應用價值。，以確定其應用價值。氮源和無機鹽氮源和無機鹽瓊脂瓊脂高壓蒸汽滅菌高壓蒸汽滅菌周圍形成透明圈最大周圍形成透明圈最大酶的活性酶的活性(2)在利用篩選出的霉菌進行生產(chǎn)時，科研人員發(fā)現(xiàn)影響果在利用篩選出的霉菌進行生產(chǎn)時，科研人員發(fā)現(xiàn)影響果膠酶生產(chǎn)的因素有很多，并且它們之間還可能相互影響。膠酶生產(chǎn)的因素有很多，并且它們之間還可能相互影響。他們首先研究了溫度對酶產(chǎn)量的影響，實驗結果如圖甲，他們首先研究了溫度對酶產(chǎn)量的影響，實驗結果如圖甲，然后又分別研究了碳

11、源、氮源濃度然后又分別研究了碳源、氮源濃度(各五個水平各五個水平)對生產(chǎn)的影對生產(chǎn)的影響，得到圖乙和丙。響，得到圖乙和丙?？蒲腥藛T在研究碳源濃度對酶產(chǎn)量的影響時，應設定的培科研人員在研究碳源濃度對酶產(chǎn)量的影響時，應設定的培養(yǎng)溫度是養(yǎng)溫度是_，如果將溫度控制在，如果將溫度控制在5 ，能否得到圖乙，能否得到圖乙所示圖象？所示圖象？_，原因是，原因是_。在生產(chǎn)中他們根據(jù)上述研究結果，將各個變量都設定為最在生產(chǎn)中他們根據(jù)上述研究結果，將各個變量都設定為最適條件，卻發(fā)現(xiàn)酶的產(chǎn)量不是最高的，要想繼續(xù)探究最佳的適條件，卻發(fā)現(xiàn)酶的產(chǎn)量不是最高的，要想繼續(xù)探究最佳的培養(yǎng)條件，他們該如何進一步進行實驗：培養(yǎng)條件，

12、他們該如何進一步進行實驗：_。30 不能不能溫度太低導致酶的活性過低溫度太低導致酶的活性過低將各種影響因素的不同水平逐一組合，依次實驗將各種影響因素的不同水平逐一組合，依次實驗【解析解析】(1)果園的土壤或腐爛的水果中霉菌數(shù)量較多，可從果園的土壤或腐爛的水果中霉菌數(shù)量較多，可從中取樣分離產(chǎn)果膠酶的菌株。硝酸鉀中取樣分離產(chǎn)果膠酶的菌株。硝酸鉀(KNO3)可以提供微生物可以提供微生物生長需要的無機鹽和氮源。分離純化目的菌株時需要使用固生長需要的無機鹽和氮源。分離純化目的菌株時需要使用固體培養(yǎng)基，所以培養(yǎng)基中除了加水、果膠、硝酸鉀、高碘酸體培養(yǎng)基，所以培養(yǎng)基中除了加水、果膠、硝酸鉀、高碘酸等外還需要

13、加入瓊脂。配制好的培養(yǎng)基可以使用高壓蒸汽滅等外還需要加入瓊脂。配制好的培養(yǎng)基可以使用高壓蒸汽滅菌法來進行滅菌。由于霉菌將果膠降解后其產(chǎn)物可以溶于高菌法來進行滅菌。由于霉菌將果膠降解后其產(chǎn)物可以溶于高碘酸而在培養(yǎng)基上形成透明圈，所以培養(yǎng)基中形成的透明圈碘酸而在培養(yǎng)基上形成透明圈，所以培養(yǎng)基中形成的透明圈越大，菌株產(chǎn)果膠酶量越大。從篩選出的微生物中分離提取越大，菌株產(chǎn)果膠酶量越大。從篩選出的微生物中分離提取的果膠酶通常需要檢測酶的活性，以確定其應用價值。的果膠酶通常需要檢測酶的活性，以確定其應用價值。(2)從圖甲可知從圖甲可知30 時酶產(chǎn)量相對值最大，所以科研人員在時酶產(chǎn)量相對值最大，所以科研人員

14、在研究碳源濃度對酶產(chǎn)量的影響時，應將培養(yǎng)溫度設定在研究碳源濃度對酶產(chǎn)量的影響時，應將培養(yǎng)溫度設定在30 。如果將溫度控制在如果將溫度控制在5 ，不能得到圖乙所示圖象，因為溫度，不能得到圖乙所示圖象，因為溫度太低導致酶的活性過低。太低導致酶的活性過低。考點二考點二植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng) (2012高考新課標全國卷高考新課標全國卷)為了探究為了探究6BA和和IAA對某對某菊花品種莖尖外植體再生叢芽的影響，某研究小組在菊花品種莖尖外植體再生叢芽的影響，某研究小組在MS培養(yǎng)培養(yǎng)基中加入基中加入6BA和和IAA，配制成四種培養(yǎng)基，配制成四種培養(yǎng)基(見下表見下表)，滅菌后，滅菌后分別接種數(shù)量相同、生長狀

15、態(tài)一致、消毒后的莖尖外植體，分別接種數(shù)量相同、生長狀態(tài)一致、消毒后的莖尖外植體，在適宜條件下培養(yǎng)一段時間后在適宜條件下培養(yǎng)一段時間后,統(tǒng)計再生叢芽外植體的比率統(tǒng)計再生叢芽外植體的比率(m),以及再生叢芽外植體上的叢芽平均數(shù)以及再生叢芽外植體上的叢芽平均數(shù)(n)，結果如下表。，結果如下表。培養(yǎng)基編號培養(yǎng)基編號濃度濃度/mgL1m/%n/個個6BAIAA10.5076.73.120.177.46.130.266.75.340.560.05.0回答下列問題：回答下列問題：(1)按照植物的需求量，培養(yǎng)基中無機鹽的元素可分為按照植物的需求量，培養(yǎng)基中無機鹽的元素可分為_和和_兩類。上述培養(yǎng)基中，兩類。上

16、述培養(yǎng)基中，6BA屬于屬于_類生長調(diào)節(jié)劑。類生長調(diào)節(jié)劑。(2)在該實驗中在該實驗中,自變量是自變量是_，因變量是，因變量是_，自變量的取值范圍是自變量的取值范圍是_。(3)從實驗結果可知，誘導叢芽總數(shù)最少的培養(yǎng)基是從實驗結果可知，誘導叢芽總數(shù)最少的培養(yǎng)基是_號號培養(yǎng)基。培養(yǎng)基。(4)為了誘導該菊花試管苗生根，培養(yǎng)基中一般不加入為了誘導該菊花試管苗生根，培養(yǎng)基中一般不加入_(填填“6BA”或或“IAA”)。大量元素大量元素微量元素微量元素細胞分裂素細胞分裂素再生叢芽外再生叢芽外植體的比率植體的比率(m)和再生叢芽外植體上的叢芽平均數(shù)和再生叢芽外植體上的叢芽平均數(shù)(n)00.5 mgL116BAI

17、AA濃度濃度 【解析解析】按照植物的需求量，在培養(yǎng)基中加入的無機鹽可分按照植物的需求量，在培養(yǎng)基中加入的無機鹽可分為大量元素和微量元素。為大量元素和微量元素。6BA是細胞分裂素類生長調(diào)節(jié)劑，是細胞分裂素類生長調(diào)節(jié)劑，由于該實驗探究的是由于該實驗探究的是6BA和和IAA對菊花品種莖尖外植體再生對菊花品種莖尖外植體再生叢芽的影響，而叢芽的影響，而6BA的濃度在各實驗組中相同，因此實驗的的濃度在各實驗組中相同，因此實驗的自變量是自變量是IAA濃度，取值范圍是濃度，取值范圍是00.5 mgL1，因變量是再，因變量是再生叢芽外植體的比率及再生叢芽外植體上的叢芽平均數(shù)，即生叢芽外植體的比率及再生叢芽外植體

18、上的叢芽平均數(shù)，即表中的表中的m和和n。再生外植體數(shù)乘以外植體上的叢芽平均數(shù)即為。再生外植體數(shù)乘以外植體上的叢芽平均數(shù)即為叢芽總數(shù)，計算可知誘導叢芽總數(shù)最少的是叢芽總數(shù)，計算可知誘導叢芽總數(shù)最少的是1號培養(yǎng)基。在植號培養(yǎng)基。在植物組織培養(yǎng)中，生長素用于誘導細胞的分裂和根的分化，細物組織培養(yǎng)中，生長素用于誘導細胞的分裂和根的分化，細胞分裂素主要促進細胞分裂和分化出不定芽，因此為了誘導胞分裂素主要促進細胞分裂和分化出不定芽，因此為了誘導生根，培養(yǎng)基中一般不加生根，培養(yǎng)基中一般不加6BA(細胞分裂素類生長調(diào)節(jié)劑細胞分裂素類生長調(diào)節(jié)劑)而而加入加入IAA(生長素類生長調(diào)節(jié)劑生長素類生長調(diào)節(jié)劑)。植物組

19、織培養(yǎng)技術植物組織培養(yǎng)技術花藥培養(yǎng)技術花藥培養(yǎng)技術相同點相同點理論理論依據(jù)依據(jù)基本基本過程過程影響影響因素因素不同點不同點選材選材【鏈接提升鏈接提升】1植物組織培養(yǎng)技術和花藥培養(yǎng)技術的異同植物組織培養(yǎng)技術和花藥培養(yǎng)技術的異同植物細胞的全能性植物細胞的全能性選材、營養(yǎng)、激素、選材、營養(yǎng)、激素、pH、溫度、光照等、溫度、光照等體細胞體細胞生殖細胞生殖細胞(精子精子)2.生長素與細胞分裂素使用順序和用量比例的影響生長素與細胞分裂素使用順序和用量比例的影響(1)使用順序不同，結果不同，具體如下：使用順序不同，結果不同，具體如下：使用順序使用順序?qū)嶒灲Y果實驗結果先使用生長素，后使先使用生長素，后使用細胞

20、分裂素用細胞分裂素有利于細胞分裂，但細有利于細胞分裂，但細胞不分化胞不分化先使用細胞分裂素，先使用細胞分裂素，后使用生長素后使用生長素細胞既分裂又分化細胞既分裂又分化同時使用同時使用分化頻率提高分化頻率提高跟蹤訓練跟蹤訓練辣椒素是辣椒果實中普遍存在的一種生物堿，廣辣椒素是辣椒果實中普遍存在的一種生物堿，廣泛用于食品保建、醫(yī)藥工業(yè)等領域。辣椒素的獲得途徑如下泛用于食品保建、醫(yī)藥工業(yè)等領域。辣椒素的獲得途徑如下圖所示。請回答下列問題。圖所示。請回答下列問題。(1)圖中圖中和和分別表示辣椒組織培養(yǎng)中細胞的分別表示辣椒組織培養(yǎng)中細胞的_和和_過程。過程。(2)所用的所用的MS培養(yǎng)基主要成分應包括培養(yǎng)基

21、主要成分應包括:大量元素、微量元素、有大量元素、微量元素、有機物機物(如甘氨酸、煙酸、肌醇、維生素以及如甘氨酸、煙酸、肌醇、維生素以及_等等)，還需，還需要添加多種植物激素，如生長素和細胞分裂素。培養(yǎng)基中的生要添加多種植物激素，如生長素和細胞分裂素。培養(yǎng)基中的生長素和細胞分裂素用量的比值長素和細胞分裂素用量的比值_(填填“高高”或或“低低”)時，時，有利于芽的分化。所用的培養(yǎng)基必須徹底滅菌，一般應采取的有利于芽的分化。所用的培養(yǎng)基必須徹底滅菌，一般應采取的滅菌方法是滅菌方法是_。脫分化脫分化(去分化去分化)再分化再分化蔗糖蔗糖低低高壓蒸汽滅菌高壓蒸汽滅菌(3)培養(yǎng)外植體的培養(yǎng)基一般是固體培養(yǎng)基

22、，需要加入凝固劑培養(yǎng)外植體的培養(yǎng)基一般是固體培養(yǎng)基，需要加入凝固劑_。并且，在培養(yǎng)獲得辣椒脫毒苗的過程中，除無菌。并且，在培養(yǎng)獲得辣椒脫毒苗的過程中，除無菌操作外，還需要注意操作外，還需要注意pH、_、_等條件的控制。等條件的控制。(4)圖中第二條獲得辣椒素途徑：用酶解法將愈傷組織分離成圖中第二條獲得辣椒素途徑：用酶解法將愈傷組織分離成單細胞，再選擇高產(chǎn)細胞系進行培養(yǎng)。分散的細胞能快速增單細胞，再選擇高產(chǎn)細胞系進行培養(yǎng)。分散的細胞能快速增殖，提取的有效成分比從辣椒果實中提取更充分。酶解法用殖，提取的有效成分比從辣椒果實中提取更充分。酶解法用到的酶有到的酶有_酶和酶和_酶。酶。瓊脂瓊脂溫度溫度光

23、照光照果膠果膠纖維素纖維素(5)辣椒素是一種斥水親脂、易溶于乙醇、丙酮等有機溶劑的辣椒素是一種斥水親脂、易溶于乙醇、丙酮等有機溶劑的化合物?？梢圆捎没衔??？梢圆捎胈法提取辣椒素，該方法需要對原法提取辣椒素，該方法需要對原材料進行材料進行_，再用酒精、丙酮等浸泡，并利，再用酒精、丙酮等浸泡，并利用用_加熱方法加熱，加熱瓶口安裝回流冷凝裝置，目加熱方法加熱，加熱瓶口安裝回流冷凝裝置，目的是的是_。通過過濾獲得濾液，若需獲得。通過過濾獲得濾液，若需獲得辣椒素結晶，還需再對濾液加熱蒸發(fā)出有機溶劑，這時可以辣椒素結晶，還需再對濾液加熱蒸發(fā)出有機溶劑，這時可以直接使用直接使用_裝置進行。裝置進行。萃取萃

24、取粉碎、干燥粉碎、干燥水浴水浴防止有機溶劑的揮發(fā)防止有機溶劑的揮發(fā)蒸餾蒸餾考點三考點三DNA和蛋白質(zhì)技術和蛋白質(zhì)技術 (2013高考江蘇卷高考江蘇卷)某同學用洋蔥進行某同學用洋蔥進行DNA 粗提取和粗提取和鑒定實驗，操作錯誤的是鑒定實驗，操作錯誤的是()A加入洗滌劑后用力進行快速、充分的研磨加入洗滌劑后用力進行快速、充分的研磨B用蛋白酶純化過濾后的研磨液中的用蛋白酶純化過濾后的研磨液中的DNAC加入酒精后用玻璃棒輕緩攪拌加入酒精后用玻璃棒輕緩攪拌D加二苯胺試劑搖勻后沸水浴加熱加二苯胺試劑搖勻后沸水浴加熱自主嘗試自主嘗試_【解析解析】加入洗滌劑后研磨動作要輕緩、柔和，否則會產(chǎn)生加入洗滌劑后研磨動

25、作要輕緩、柔和，否則會產(chǎn)生許多泡沫，不利于后續(xù)步驟的操作，許多泡沫，不利于后續(xù)步驟的操作，A項錯誤；蛋白酶能夠項錯誤；蛋白酶能夠分解蛋白質(zhì)，因此能起到純化分解蛋白質(zhì)，因此能起到純化DNA的目的，的目的，B項正確；加入項正確；加入酒精后用玻璃棒攪拌時，動作要輕緩，以免加劇酒精后用玻璃棒攪拌時，動作要輕緩，以免加劇DNA分子的分子的斷裂，導致斷裂，導致DNA分子不能形成絮狀沉淀，分子不能形成絮狀沉淀，C項正確；對項正確；對DNA進行鑒定時，加入二苯胺試劑搖勻后沸水浴加熱，溶液將變進行鑒定時，加入二苯胺試劑搖勻后沸水浴加熱，溶液將變?yōu)樗{色，為藍色，D項正確。項正確。【答案答案】A【鏈接提升鏈接提升】

26、1DNA的粗提取和鑒定方法的粗提取和鑒定方法(1)材料的選取：選用材料的選?。哼x用DNA含量相對較高的生物組織。含量相對較高的生物組織。(2)破碎細胞：破碎細胞：動物的紅細胞，吸水破裂。動物的紅細胞，吸水破裂。植物細胞：加入洗滌劑、食鹽后研磨。植物細胞：加入洗滌劑、食鹽后研磨。(3)除去雜質(zhì)的方法：除去雜質(zhì)的方法：方法一：利用方法一：利用DNA在不同濃度的在不同濃度的NaCl溶液中溶解度的不同，溶液中溶解度的不同，通過調(diào)節(jié)通過調(diào)節(jié)NaCl溶液的濃度除去溶于和不溶于溶液的濃度除去溶于和不溶于NaCl溶液中的溶液中的雜質(zhì)。雜質(zhì)。方法二：利用方法二：利用DNA對酶的耐受性，直接在濾液中加入嫩肉粉對酶

27、的耐受性，直接在濾液中加入嫩肉粉,反應反應1015 min，嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能夠分解蛋白質(zhì)，嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能夠分解蛋白質(zhì)，而不會破壞而不會破壞DNA。方法三：利用方法三：利用DNA對高溫的耐受性，將濾液放在對高溫的耐受性，將濾液放在6075 的恒溫水浴箱中保溫的恒溫水浴箱中保溫1015 min，使蛋白質(zhì)變性沉淀而，使蛋白質(zhì)變性沉淀而DNA分子還未變性。分子還未變性。(4)DNA的析出：向處理后的濾液中加入與濾液體積相等的、的析出：向處理后的濾液中加入與濾液體積相等的、冷卻的酒精溶液冷卻的酒精溶液(體積分數(shù)為體積分數(shù)為95%)，靜置，靜置23 min，溶液中，溶液中會出現(xiàn)白色絲狀物，用

28、玻璃棒沿一個方向攪拌，卷起絲狀物。會出現(xiàn)白色絲狀物，用玻璃棒沿一個方向攪拌，卷起絲狀物。(5)DNA的鑒定：在沸水浴的條件下，的鑒定：在沸水浴的條件下，DNA遇二苯胺會被染遇二苯胺會被染成藍色。成藍色。2PCR擴增技術擴增技術(1)原理：原理：DNA復制。復制。(2)條件：模板、原料、酶、條件：模板、原料、酶、ATP、引物。、引物。(3)場所：體外場所：體外PCR擴增儀。擴增儀。(4)方向：方向：DNA聚合酶不能從頭開始合成聚合酶不能從頭開始合成DNA，而只能從，而只能從3端延伸端延伸DNA鏈，因此，鏈，因此，DNA復制需要引物。當引物與復制需要引物。當引物與DNA母母鏈通過堿基互補配對結合后

29、，鏈通過堿基互補配對結合后，DNA聚合酶就能從引物的聚合酶就能從引物的3端開始延伸端開始延伸DNA鏈。因此，鏈。因此，DNA的合成方向總是從子鏈的的合成方向總是從子鏈的5端向端向3端延伸。端延伸。3血紅蛋白的提取和分離血紅蛋白的提取和分離(1)方法及原理：方法及原理：方法方法原理原理凝膠色譜法凝膠色譜法電泳法電泳法根據(jù)相對分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì)根據(jù)相對分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì)各種分子帶電性質(zhì)的差異以及分子本身各種分子帶電性質(zhì)的差異以及分子本身的大小、形狀的不同的大小、形狀的不同粗分離粗分離透析透析(去除小分子雜質(zhì)去除小分子雜質(zhì))純化純化凝膠色譜法進行分離和純化凝膠色譜法進行分離和純化純度鑒定

30、純度鑒定SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳法測定相對分子聚丙烯酰胺凝膠電泳法測定相對分子 質(zhì)量質(zhì)量C【解析解析】血紅蛋白是有色蛋白，因此在凝膠色譜分離時可以血紅蛋白是有色蛋白，因此在凝膠色譜分離時可以通過觀察顏色來判斷什么時候應該收集洗脫液。凝膠色譜法通過觀察顏色來判斷什么時候應該收集洗脫液。凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)的原理是相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)在凝膠顆粒分離蛋白質(zhì)的原理是相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)在凝膠顆粒的間隙移動，路程短，移動速度較快；相對分子質(zhì)量較小的的間隙移動，路程短，移動速度較快；相對分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)容易進入凝膠內(nèi)部的通道蛋白質(zhì)容易進入凝膠內(nèi)部的通道,路程較長，移動速度較慢。路程較長，移動速

31、度較慢。C錯誤錯誤,血紅蛋白的釋放應加入的是蒸餾水和甲苯。血紅蛋白的釋放應加入的是蒸餾水和甲苯。跟蹤訓練跟蹤訓練2在利用雞血進行在利用雞血進行“DNA的粗提取與鑒定的粗提取與鑒定”的實的實驗中，相關敘述正確的是驗中，相關敘述正確的是()A用蒸餾水將用蒸餾水將NaCl溶液濃度調(diào)至溶液濃度調(diào)至0.14 mol/L，濾去析出物，濾去析出物B調(diào)節(jié)調(diào)節(jié)NaCl溶液濃度或加入木瓜蛋白酶，都可以去除部分溶液濃度或加入木瓜蛋白酶，都可以去除部分雜質(zhì)雜質(zhì)C將絲狀物溶解在將絲狀物溶解在2 mol/L NaCl溶液中，加入二苯胺試劑溶液中，加入二苯胺試劑即呈藍色即呈藍色D用菜花代替雞血作為實驗材料，其實驗操作步驟相

32、同用菜花代替雞血作為實驗材料，其實驗操作步驟相同B【解析解析】A項，當項，當NaCl溶液濃度被調(diào)至溶液濃度被調(diào)至0.14 mol/L時，時，DNA在其中的溶解度最小，會大量析出，此時應濾取在其中的溶解度最小，會大量析出，此時應濾取而不是而不是濾去析出物；濾去析出物；B項，利用項，利用DNA在不同濃度的在不同濃度的NaCl溶液中會溶溶液中會溶解或析出的特點，可以除去蛋白質(zhì)等雜質(zhì)，而選用木瓜蛋白解或析出的特點，可以除去蛋白質(zhì)等雜質(zhì)，而選用木瓜蛋白酶，則可借助酶作用的特異性，水解蛋白質(zhì)，進而達到除雜酶，則可借助酶作用的特異性，水解蛋白質(zhì)，進而達到除雜的效果；的效果；C項，描述中缺少沸水浴加熱，不會立即呈現(xiàn)顏色項，描述中缺少沸水浴加熱，不會立即呈現(xiàn)顏色變化；變化；D項，如果實驗材料是植物細胞，需要加入洗滌劑和項，如果實驗材料是植物細胞，需要加入洗滌劑和食鹽研磨。食鹽研磨。