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1、專題二 克隆技術(shù)
1.(2009·全國(guó)卷Ⅰ,4)下列關(guān)于植物體細(xì)胞雜交或植物細(xì)胞質(zhì)遺傳的敘述,錯(cuò)誤的是( )
A.利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)可克服生殖隔離的限制,培育遠(yuǎn)源雜種
B.不同種植物原生質(zhì)體融合的過(guò)程屬于植物體細(xì)胞雜交過(guò)程
C.兩個(gè)不同品種的紫茉莉雜交,正交、反交所得F1的表現(xiàn)型一致
D.兩個(gè)不同品種的紫茉莉雜交,F(xiàn)1的遺傳物質(zhì)來(lái)自母本的多于來(lái)自父本的
解析:植物有性雜交過(guò)程中,細(xì)胞核遺傳遵循孟德?tīng)栠z傳規(guī)律,一般正交和反交所得F1的性狀相同,而細(xì)胞質(zhì)遺傳所得F1的性狀一般總是與母本性狀相同。
答案:C
2.要想通過(guò)體細(xì)胞雜交技術(shù)獲得雜種植物,下列各套步驟中正確的是
2、( )
A. 分離原生質(zhì)體→誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合→再生細(xì)胞壁→組織培養(yǎng)→雜種植株
B. 分離原生質(zhì)體→原生質(zhì)體自然融合→再生細(xì)胞壁→組織培養(yǎng)→雜種植株
C. 病毒誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合→組織培養(yǎng)→雜種植株
D. 分離原生質(zhì)體→脫分化→再分化→雜種植株
解析:體細(xì)胞雜交技術(shù)首先要獲得不同生物的體細(xì)胞,用纖維素酶、果膠酶除去細(xì)胞壁得到原生質(zhì)體,再通過(guò)物理或化學(xué)方法誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合,再生細(xì)胞壁成為雜種細(xì)胞,再經(jīng)組織培養(yǎng)形成雜種植株。
答案:A
3.(2010·威海模擬)對(duì)細(xì)胞全能性的表達(dá)正確的是( )
A.離體的植物細(xì)胞均能夠表現(xiàn)出全能性
B.動(dòng)物細(xì)胞融合標(biāo)志著動(dòng)物細(xì)胞全能性的實(shí)現(xiàn)
3、
C.花粉可培育成單倍體植株是細(xì)胞全能性的表現(xiàn)
D.單克隆抗體的制備依據(jù)的原理是細(xì)胞的全能性
解析:離體的植物細(xì)胞要表現(xiàn)出全能性,需要提供合適的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì);動(dòng)物細(xì)胞融合的結(jié)果是形成一個(gè)雜種細(xì)胞,并未形成一新個(gè)體;單克隆抗體的制備利用的是細(xì)胞融合的原理。
答案:C
4.動(dòng)物細(xì)胞融合和植物原生質(zhì)體融合比較,特殊性表現(xiàn)在( )
A.融合的原因 B.融合的優(yōu)點(diǎn)
C.融合的誘導(dǎo)手段 D.融合的過(guò)程
解析:動(dòng)物細(xì)胞融合和植物原生質(zhì)體融合都是為了將兩者的優(yōu)良性狀集于一體,過(guò)程都是先膜融合再質(zhì)融合,最后核融合,即融合的過(guò)程相同;動(dòng)物細(xì)胞融合可以用滅活的病毒誘導(dǎo),而植物原生質(zhì)
4、體融合不能用病毒誘導(dǎo)。
答案:C
5.(2010·濰坊模擬)下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述,正確的是( )
A.培養(yǎng)中的人效應(yīng)T細(xì)胞能產(chǎn)生單克隆抗體
B.培養(yǎng)中的人B細(xì)胞能夠無(wú)限地增殖
C.人的成熟紅細(xì)胞經(jīng)過(guò)培養(yǎng)能形成細(xì)胞株
D.用胰蛋白酶處理肝組織可獲得單個(gè)肝細(xì)胞
解析:動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)目前主要的應(yīng)用是制備單克隆抗體,抗體是由雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生,T細(xì)胞不產(chǎn)生;人的B細(xì)胞不能無(wú)限增殖;人的成熟的紅細(xì)胞無(wú)細(xì)胞核,失去了細(xì)胞的完整性,不能進(jìn)行細(xì)胞分裂;將所選用的動(dòng)物組織取出后,首先用胰蛋白酶等處理,使組織分散成單個(gè)細(xì)胞,然后配制成一定濃度的細(xì)胞懸浮液,再將該懸浮液放入培養(yǎng)瓶中,在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
5、細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中貼壁生長(zhǎng),隨著細(xì)胞越來(lái)越多,當(dāng)貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到表面相互接觸時(shí)就停止分裂增殖,這種現(xiàn)象叫做接觸抑制。所以,需要定期用胰蛋白酶使細(xì)胞從瓶壁上脫離下來(lái),進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
答案:D
6.利用細(xì)胞工程方法,以SARS病毒核衣殼蛋白為抗原制備出單克隆抗體。下列相關(guān)敘述正確的是( )
A.用純化的核衣殼蛋白反復(fù)注射到小鼠體內(nèi),產(chǎn)生的血清抗體為單克隆抗體
B.體外培養(yǎng)單個(gè)漿細(xì)胞可以獲得大量針對(duì)SARS病毒的單克隆抗體
C.將等量漿細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞混合,經(jīng)PEG誘導(dǎo)融合后的細(xì)胞不一定為雜交瘤細(xì)胞
D.利用該單克隆抗體與SARS病毒核衣殼蛋白特異性結(jié)合的方法不一定能診斷出SA病毒
6、感染者
解析:?jiǎn)慰寺】贵w是由免疫的B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合后的雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的,其制備過(guò)程是先用SARS病毒核衣殼蛋白刺激機(jī)體產(chǎn)生相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞,將B淋巴細(xì)胞(不能無(wú)限增殖但能產(chǎn)生專一性的抗體)與骨髓瘤細(xì)胞(能無(wú)限增殖但不能產(chǎn)生專一性的抗體)相融合,經(jīng)過(guò)篩選,去掉相同細(xì)胞的融合體,再經(jīng)抗原—抗體檢測(cè),得到既能無(wú)限增殖又能產(chǎn)生專一抗體的雜交瘤細(xì)胞,經(jīng)體內(nèi)培養(yǎng)或體外培養(yǎng)就可獲得相應(yīng)的單克隆抗體。通過(guò)單克隆抗體與病毒特異性結(jié)合可診斷是否被病毒感染。
答案:C
7.(2009·山東卷,34)人參是一種名貴中藥材,其有效成分主要是人參皂苷。利用細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)人參皂苷的大致流程如下:
請(qǐng)
7、回答:
(1)配制誘導(dǎo)愈傷組織的固體培養(yǎng)基,分裝后要進(jìn)行________。接種前,要對(duì)人參根進(jìn)行________。
(2)用于離體培養(yǎng)的根切塊,叫做________。培養(yǎng)幾天后發(fā)現(xiàn)少數(shù)培養(yǎng)基被污染,若是有顏色的絨毛狀菌落,屬于________污染;若是有光澤的黏液狀菌落,屬于________污染。
(3)用少量________酶處理愈傷組織,獲取單細(xì)胞或小細(xì)胞團(tuán),在液體培養(yǎng)基中進(jìn)行懸浮培養(yǎng),可有效提高人參皂苷合成量。
(4)人參皂苷易溶于水溶性(親水性)有機(jī)溶劑,從培養(yǎng)物干粉中提取人參皂苷宜選用________方法,操作時(shí)應(yīng)采用________加熱。
解析:本題考查植物組織培養(yǎng)技術(shù)的
8、應(yīng)用。為防止雜菌污染,實(shí)驗(yàn)中必須對(duì)植物細(xì)胞培養(yǎng)基、生物材料進(jìn)行滅菌或消毒。植物組織培養(yǎng)中離體的植物組織塊稱為外植體。固體培養(yǎng)基上有顏色的絨毛狀菌落多為真菌(霉菌)菌落。實(shí)驗(yàn)室可以利用果膠酶專一地催化植物細(xì)胞壁的水解,獲取單個(gè)植物細(xì)胞或小細(xì)胞團(tuán)。由于人參皂苷能溶于水溶性有機(jī)溶劑(如乙醇、丙酮等),因此可以利用萃取法提取人參皂苷。
答案:(1)滅菌 消毒 (2)外植體 真菌(霉菌) 細(xì)菌 (3)果膠 (4)萃取(浸取) 水浴
8.科學(xué)家從某些能無(wú)限增殖的細(xì)胞質(zhì)中分離出無(wú)限增殖的調(diào)控基因(prC),該基因能激發(fā)許多動(dòng)物細(xì)胞分裂,這為單克隆抗體的制備提供了更為廣闊的前景。請(qǐng)回答以下問(wèn)題。
(1)
9、利用細(xì)胞融合技術(shù)制備單克隆抗體,促進(jìn)動(dòng)物細(xì)胞融合常用的誘導(dǎo)因素是______________。
(2)利用細(xì)胞融合技術(shù)制備單克隆抗體時(shí)有兩次篩選,第1次篩選的目的是________,第2次篩選的目的是_________________________________________________________。
(3)有人提出,可以直接通過(guò)基因工程導(dǎo)入該調(diào)控基因來(lái)制備單克隆抗體,其思路如圖所示。請(qǐng)回答:
①酶A是指________,酶B是指________。
②對(duì)已導(dǎo)入重組質(zhì)粒的Ⅱ進(jìn)行“檢測(cè)”的目的是______________________;題目中Ⅱ所指的細(xì)胞是______
10、__,Ⅲ所指的細(xì)胞具有的特點(diǎn)是____________________。
(4)也有人提出用細(xì)胞核移植技術(shù)構(gòu)建重組細(xì)胞來(lái)生產(chǎn)單克隆抗體,試用相關(guān)的圖示及文字表示該過(guò)程:
解析:(1)誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法有三種,其中用滅活的病毒是常用方法。(2)在單克隆抗體制備過(guò)程中,融合的細(xì)胞共有3種類型,第1次篩選的目的是選出雜交瘤細(xì)胞,但是雜交瘤細(xì)胞不一定產(chǎn)生所需抗體,所以還必須進(jìn)行第2次篩選。(3)基因工程中用到的酶是限制性(核酸)內(nèi)切酶和DNA連接酶,將重組質(zhì)粒成功導(dǎo)入后,進(jìn)行檢測(cè)的目的是看目的基因是否表達(dá)。題目Ⅱ所指的細(xì)胞是漿細(xì)胞,因?yàn)橹挥袧{細(xì)胞才會(huì)產(chǎn)生抗體,Ⅲ所指的細(xì)胞是導(dǎo)入目的基因的漿細(xì)胞,由于目的基因控制細(xì)胞無(wú)限增殖,所以可用轉(zhuǎn)基因技術(shù)來(lái)生產(chǎn)單克隆抗體。(4)由題干可知,從無(wú)限增殖細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中分離出無(wú)限增殖調(diào)控基因(prG),所以采用核移植技術(shù),應(yīng)將無(wú)限增殖細(xì)胞的核除去,留下細(xì)胞質(zhì),讓其與漿細(xì)胞核融合,則可產(chǎn)生單克隆抗體。
答案:(1)滅活的病毒
(2)篩選出雜交瘤細(xì)胞
篩選出能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞
(3)①限制性(核酸)內(nèi)切酶 DNA連接酶
②檢測(cè)目的基因在受體細(xì)胞中是否進(jìn)行了表達(dá)(或檢測(cè)受體細(xì)胞是否顯示出目的基因控制的性狀) 漿細(xì)胞 既能無(wú)限增殖又能產(chǎn)生特定抗體
(4)如圖