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1、浙江大學2001年攻讀碩士學位研究生入學考試題 考試科目:生物化學,編號555 注意:答題必須寫在答題紙上,寫在試卷或草稿紙上均無效 一 是非題1/30 1 酶反應的專一性取決于其輔助因子的結(jié)構(gòu) 2 肽酰轉(zhuǎn)移酶在蛋白質(zhì)合成中催化肽鍵的生成和酯鍵的水解 3 E.coli 連接酶摧化兩條游離單鏈DNA分子形成磷酸二酯鍵 4 通過檸檬酸途徑將乙酰輔酶A轉(zhuǎn)移至胞液中,同時可使NADH上的氫傳遞給NADP 生成NADPH 5 亮氨酸的疏水性比纈氨酸強 6 必需氨基酸是指合成蛋白質(zhì)必不可少的一些氨基酸 7 脯氨酸是α螺旋破壞者 8 維系蛋白質(zhì)三級結(jié)構(gòu)最重要的作用

2、力是氫鍵 9 在DNA變性過程中總是G-C對豐富區(qū)先解鏈 10 真核細胞中DNA只存在于細胞核中 11 DNA雙螺旋的兩條鏈方向一定是相反的 12 酶影響其催化反應的平衡 13 酶促反應的米氏常數(shù)與催化的底物無關 14 維生素E是一種天然的抗氧化劑 15 維生素B1的輔酶形式是TPP 16 ATP是體內(nèi)能量的儲存形式 17 糖酵解過程無需氧氣的參與 18 膽固醇是生物膜的主要成分,可調(diào)節(jié)生物膜的流動性 19 蛋白質(zhì)的生理價值主要取決于必需氨基酸的種類,數(shù)量和比例 20 磷酸吡哆醛只作為轉(zhuǎn)氨酶的輔酶起作用 21 DNA復制時,后滯鏈需多個引物

3、 22 絕緣子和增強子一樣都屬于順式作用元件 23 PCR是包括變性,復性和延伸三個步驟的循環(huán)反應 24 Sanger曾兩獲諾貝爾獎 25 核糖體上有三個與tRNA有關的位點:A位點,P位點,E位點 26 生長激素釋放抑制因子是一個14肽 27 脂肪酸合成酶催化的反應是脂肪酸-β氧化反應的逆反應 28 鐮刀型貧血癥患者血紅蛋白與正常人的血紅蛋白在氨基酸組成上只有2個殘基有差別 29 地球上所有生物中存在的蛋白質(zhì)和核酸的種類總數(shù)都超過1億種 30 中國科學家在今年完成了人類基因組1%的測序任務 二 寫出下列物質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)式1/6 1 Thr 2 D-核糖

4、 3 A 4 GSH 5 尼克酰胺 6 丙酮酸 三 名詞解釋4/24 1 反密碼子 2 操縱基因 3 多肽核酸( peptide nucleic acid ) 4 折疊酶 5 共價調(diào)節(jié) 6 Humen Genome Project 四 綜合題10/40 1 試表述Glu經(jīng)脫氨基,有氧氧化等途徑徹底分解成NH3 , CO2, 和H2O 時的代謝路線,要 求用箭頭表示所經(jīng)過的主要中間產(chǎn)物.計算1摩爾Glu共可產(chǎn)生多少摩爾的NH3,CO2,ATP? 2 以血紅蛋白為例說明蛋白質(zhì)四級結(jié)構(gòu)的含義,比較血紅蛋白與肌紅蛋白結(jié)構(gòu)和功能的異 同 3 請對中心法則加以闡述

5、4 凝膠過濾是分離蛋白質(zhì)混合物最有效的方法之一,請說明其工作原理并簡述用該法分離 蛋白質(zhì)的實驗操作步驟 浙江大學2002年攻讀碩士學位研究生入學考試題 考試科目:生物化學,編號570 注意:答題必須寫在答題紙上,寫在試卷或草稿紙上均無效 一 是非題1/20 1 所謂肽單位就是指組成蛋白質(zhì)的氨基酸殘基 2在競爭性抑制劑存在的情況下,即使加入足夠量的底物,酶仍不能達到其催化的最大反應 速度 3 一級結(jié)構(gòu)決定空間結(jié)構(gòu),所以蛋白質(zhì)合成中新生肽鏈的折疊無須其他蛋白質(zhì)的幫助. 4 Sanger反應(二硝基氟苯法)用以鑒定多肽鏈羧基末端氨基酸,而Edman反應

6、(苯異硫氰酸 酯法)則用以鑒定多肽鏈氨基末端氨基酸. 5 與膽固醇的化學結(jié)構(gòu)最相近的維生素是維生素B12. 6 在某些生物中,RNA也可以是遺傳信息的基本攜帶者 7 生長激素釋放抑制因子是一個14肽 8 維生素B1的輔酶形式是TPP 9 地球上所有生物中存在的蛋白質(zhì)和核酸的種類總數(shù)都超過1億種 10 腎上腺素和胰高血糖素都通過cAMP很快地對機體組織發(fā)揮作用 11 呼吸鏈電子載體是按照其標準勢能逐步下降而氧化還原電勢逐步增加的方向排列的 12 CO對氧化磷酸化的影響主要是抑制ATP的形成過程,但不抑制電子傳遞過程 13 花生四烯酸廣泛存在與植物中,它是哺

7、乳動物的必需脂肪酸 14 即使在饑餓狀態(tài)下,肝臟也不利用酮體作為燃料分子,而大腦組織在血糖供應不足時會 利用酮體作為燃料分子供能 15 不同生物對氨基氮的排泄方式不同,如魚類以氨的形式直接將氨基氮排出體外;鳥類以 尿酸形式,植物和動物以尿素形式將氨基氮排出體外 16 紫外輻射引起的DNA損傷可通過光復活作用修復. 光復活酶雖然在生物界分布很廣,從 低等單細胞生物直到鳥類都有,但高等哺乳類中卻沒有 17 逆轉(zhuǎn)錄酶存在與所有RNA病毒中,在RNA病毒復制中起作用 18 遺傳密碼字典在生物界并非完全通用,像原生動物纖毛蟲就有例外 19 糖基化是真核生物蛋白質(zhì)修飾的

8、一種重要方式,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體兩種亞細胞器都能 對蛋白質(zhì)進行糖基化修飾 20 真核生物中同一轉(zhuǎn)錄單位可以通過不同的拼接而產(chǎn)生不同的蛋白質(zhì)合成模板mRNA 二 用化學結(jié)構(gòu)式完成下列酶促反應4/20 1異檸檬酸裂解酶 2 丙酮酸羧化酶 3 磷酸戊糖異構(gòu)酶 4 烯脂酰輔酶A水化酶 5 丙氨酰tRNA合成酶 三 綜合題10/60 1 什么是蛋白質(zhì)的二級結(jié)構(gòu)?穩(wěn)定二級結(jié)構(gòu)的主要作用力是什么?多肽鏈中存在的脯氨酸 對α螺旋的形成有何影響,為什么?哪種蛋白質(zhì)完全由α螺旋構(gòu)成? 2 電泳是分離生物大分子的主要方法之一,簡述其原理;SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳可以測定 蛋白質(zhì)

9、的分子量,其原理是什么? 分子量不同的蛋白質(zhì)在SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳中的遷 移率與其分子量有什么關系? 3 何謂酶促反應動力學?底物濃度,溫度和PH值對酶促反應速度各有什么影響?試分析之. 如果希望反應初速度達到其最大速度的90%,底物濃度應為多大? 4 何謂核酸變性?引起核酸變性的因素有哪些?何謂DNA的熔解溫度(Tm)?其大小與哪些因 素有關? 5從結(jié)構(gòu)和功能兩大方面比較E.coli DNA 聚合酶III和RNA聚合酶 6 Jacob 和Monod在上個世紀60年代初提出乳糖操縱子模型,開創(chuàng)了基因表達調(diào)節(jié)研究的 新領域,具有劃時代意義.請你試述乳糖操縱子理

10、論. 浙江大學2003年攻讀碩士學位研究生入學考試題 考試科目:生物化學 注意:答題必須寫在答題紙上,寫在試卷或草稿紙上均無效 一 是非題1/20 1 氧化磷酸化作用是ATP的生成基于與相偶聯(lián)的磷酸化作用.( ) 2 酶的化學本質(zhì)是蛋白質(zhì).( ) 3 多肽鏈結(jié)構(gòu)中,一個氨基酸殘基就是一個肽單位.( ) 4 FMN和FAD的組成中有核黃素.( ) 5 在細菌的復制中起主要作用的是DNA聚合酶I( ) 6 DNA變性后其粘度增大( ) 7乙醛酸循環(huán)在所有的高等植物中都存在.( ) 8 EMP途徑本身只產(chǎn)生還原劑,而不產(chǎn)生高能中間產(chǎn)物.( ) 9酶促反應的能量效應

11、是降低反應的活化能.( ) 10 與膽固醇的化學結(jié)構(gòu)最相近的維生素是維生素B12.( ) 11 CoQ只能作為電子傳遞的中間載體.( ) 12 DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性主要來自堿基對之間的氫鍵( ) 13 組成蛋白質(zhì)的所有氨基酸中,由于含有的α-碳原子屬于不對稱碳原子,因此都具有旋 光性.( ) 14 mRNA的3`端polyA結(jié)構(gòu)是由DNA的非編碼區(qū)轉(zhuǎn)錄的.( ) 15 糖酵解的限速酶為丙酮酸激酶.( ) 16 乙酰輔酶A是進入TCA循環(huán)還是生成酮體,主要由草酰乙酸濃度調(diào)控.( ) 17 E.coli RNA 聚合酶的 σ亞基與轉(zhuǎn)錄的終止識別有關.( ) 18 氧化還原電

12、對中,電子從電勢較低的電對流向電勢較高的電對,這是自由能降低的現(xiàn)象 .( ) 19 葡萄糖和果糖都具有還原性.( ) 20 如果加入足夠量的底物,即使有競爭性抑制劑存在,酶催化的最大反應速度Vmax是可以 達到的( ) 二 寫出下列物質(zhì)的結(jié)構(gòu)式2/10 1 Ser 2 U 3 草酰乙酸 4 ATP 5 D-glucose 三 寫出下列酶催化的生化反應式( 不要求寫結(jié)構(gòu)式)3/30 1 磷酸果糖激酶 2 磷酸甘油變位酶 3 丙酮酸脫氫酶系 4 順烏頭酸酶 5 異檸檬酸裂解酶 6 脂酰輔酶A脫氫酶 7 谷丙轉(zhuǎn)氨酶 8 鳥氨酸轉(zhuǎn)氨甲酰酶 9 DNA合成酶 10 氨酰tRNA合

13、成酶 四 綜合題15/90 1 簡述SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳的基本原理,你使用該技術分離和檢測過何種物質(zhì)?主要操作步驟有哪些? 2 質(zhì)粒是基因工程中最常用的載體,為獲得某質(zhì)粒(如pUC18)DNA,請你設計一個簡單的實驗過程(步驟). 3 談談你所了解的生物化學近年來的新進展. 4 DNA雙螺旋模型是哪年由誰提出的?簡述其基本內(nèi)容.為什么說該模型的提出是分子生物學發(fā)展史上的里程碑,具有劃時代的貢獻? 5 何謂變性,那些因素可以引起蛋白質(zhì)的變性?何謂別構(gòu)(變構(gòu))?舉一例說明. 6 試述三羧酸循環(huán)是如何溝通糖類,脂類和蛋白質(zhì)三大有機物的代謝的? 浙江大學2004年攻讀碩士學位研

14、究生入學考試題 考試科目:生物化學 名詞解釋50) 1 埃德曼降解 2 抗體 3 誘導契合學說 4 熱力學第二定律 5 補救途徑 6 荷爾蒙 7 競爭性抑制 8 細胞膜 9 DNA聚合酶 10 基因表達 問答題: 1 根據(jù)國際分類法將酶分成哪幾大類,分別敘述它們的酶反應特征 (15) 2 對生物體轉(zhuǎn)錄和復制的特征進行說明比較 (15) 還有幾份數(shù)學試卷,可不知道怎么上傳壓縮文件,如果想要,望告之方法 3 敘述基因文庫和cDNA文庫的制作步驟并進行它們的特征比較 (20) 4 用圖表示說明生物體內(nèi)三羧酸循環(huán)ATP產(chǎn)生的途徑和它們的調(diào)控機理 (20) 5 比

15、較說明SDS-PAGE(SDS-聚丙烯酰胺電泳)和瓊脂糖凝膠電泳的物質(zhì) 分離原理和特點 (30) 2004浙江大學分子試題 1 闡述PCR技術原理 (15) 2 描述一種研究基因表達的方法 (15) 3 闡述蛋白質(zhì)生物合成途徑 (25) 4 闡述一條真核細胞信號轉(zhuǎn)導途徑(從信號接受到調(diào)控基因表達) (25) 5 闡述一條反向遺傳克隆功能基因的途徑 (20) 6 A,B和C三個基因都決定矮牽牛花的花色,當基因型為A-B-C-時表型為紅色,其余為白 色.AaBbCc的個體與三種純系(系1系2和系3)雜交.分別的紅色:白花1:3,1:7 和1:1的分離比.問:系1和系2雜交,F1

16、基因型和表型如何,F2的基因型和表型如何 系3和系2雜交,F1基因型和表型如何,F2的基因型和表型如何 (要寫出分離比) (25) 7 什么是染色體重排和基因重排 它們在發(fā)育中有和作用 它們在進化中有和作用(25) 06浙江大學分子生物學試卷 一、名詞解釋：(25%) 1、RFLP:限制性片段長度多態(tài)性，是由DNA變異(產(chǎn)生新的酶切位點或消除原有的酶切位點)導致在限制性核酸內(nèi)切酶酶切時產(chǎn)生不同的長度片段?？山柚鶶outhern Blotting或PCR的方法進行檢測。 2、SSR：簡章序列重復多態(tài)性，引物是根據(jù)微衛(wèi)星DNA重復序列兩翼的特定短序列設計，用來擴增重復序列本身。

17、由于重復的長度變化極大，所以是檢測多態(tài)性的一種有效方法。其特點包括：一般檢測到的是一個單一的多等位基因位點，共顯性遺傳，故可鑒別雜合子與純合子；得到的結(jié)果重復性很高。 3、EST：表達序列標簽，是指從不同的組織構(gòu)建的cDNA文庫中，隨機挑選不同的克隆，進行克隆的部分測序所產(chǎn)生的cDNA序列。隨著高通量測序技術的進步，使人們越來越相信，大規(guī)模地產(chǎn)生EST，結(jié)合生物信息學的手段，將為人們提供一種快速有效的發(fā)現(xiàn)新基因的方法。 4、STS：序列標簽位點，是由特定引物序列所界定的一類標記的統(tǒng)稱，短的在基因組上是可以被唯一操作的序列，因而可以確定在物理圖譜上的特定位置。 5、CAP: CAP即分解代

18、謝物基因活化蛋白是一種激活蛋白，因為細菌的許多啟動子為弱啟動子，本身與RNA聚合酶的作用較弱，在有CAP蛋白這類激活蛋白存在下，可使RNA聚合酶與啟動子的親和力增強，CAP蛋白的活性強烈依賴cAMP。 6、AFLP：擴增片段長度多態(tài)性，其特點是把RFLP和PCR結(jié)合了起來。其基本步驟是：把DNA進行限制性內(nèi)切酶酶切，然后選擇特定的片段進行PCR擴增(在所有的限制性片段兩端加上帶有特定序列的“接頭”，用與接頭互補的但3?端有幾個隨機選擇的核苷酸的引物進行特異PCR擴增，只有那些與3?端嚴格配對的片段才能得到擴增)，再在有高分辨力的測序膠上分開這些擴增產(chǎn)物，用放射性法、熒光法或銀染染色法均可檢

19、測之。 7、SNP：單核苷酸多態(tài)性，是一種較為新型的分子標記，其依據(jù)的是一位點的不同等位基因之間常常只有一個或幾個核苷酸的差異，因此在分子水平上對單個核苷酸的差異進行檢測是很有意義的。 8、FISH：熒光原位雜交技術，是一種利用非放射性的熒光信號對原位雜交樣本進行檢測的技術。它將熒光信號的高靈敏度、安全性，熒光信號的直觀性和原位雜交的高準確性結(jié)合起來，通過熒光標記的DNA探針與待測樣本的DNA進行原位雜交，在熒光顯微鏡下對熒光信號進行辨別和計數(shù)，從而對染色體或基因異常的細胞、組織樣本進行檢測和診斷，為各種基因相關疾病的分型、預前和預后提供準確的依據(jù)。 9、Genome：基因組，有機體或細

20、胞中的所有DNA，包括核中的染色體和線粒體中的DNA。 10、RNA in situ hybridization：RNA原位雜交，是利用cDNA為探針來檢測與其互補的mRNA鏈在細菌或其他真核細胞中的位置，是檢測基因組織特性表達的常用方法。 11、單克隆抗體：每個B淋巴細胞有合成一種抗體的遺傳基因。動物脾臟有上百萬種不同的B淋巴細胞系，含遺傳基因不同的B淋巴細胞合成不同的抗體。當機體受抗原刺激時，抗原分子上的許多決定簇分別激活各個具有不同基因的B細胞。被激活的B細胞分裂增殖形成該細胞的子孫，即克隆由許多個被激活B細胞的分裂增殖形成多克隆，并合成多種抗體。如果能選出一個制造一種專一抗體的細胞

21、進行培養(yǎng)，就可得到由單細胞經(jīng)分裂增殖而形成細胞群，即單克隆。單克隆細胞將合成一種決定簇的抗體，稱為單克隆抗體。 12、基因芯片：所謂基因芯片，是指將大量探針分子固定于支持物，上，然后與標記的樣品進行雜交，通過檢測雜交信號的強弱進而判斷樣品中靶分子的數(shù)量。由于用該技術可以將極其大量的探針同時固定于支持物上，所以一次可以對大量的DNA分子或RNA分子進行檢測分析，從而解決了傳統(tǒng)核酸印跡雜交，技術復雜、自動化程度低、檢測目的分子數(shù)量少、效率低，等不足，而且，通過設計不同的探針陣列，，用一定的分析方法，還可以用于序列分析，稱作雜交測序。 二、描述cDNA文庫構(gòu)建原理與方法（25%）：（1）cDNA

22、獲得方法，（2）克隆方法，（3）文庫質(zhì)量定義。 答： cDNA：以mRNA為模板，利用反轉(zhuǎn)錄酶合成與mRNA互補的DNA(complementary DNA，cDNA)，再復制成雙鏈cDNA片段，與適當載體連接后轉(zhuǎn)入受菌體，擴增為cDNA文庫(cDNA library)，然后再采用適當方法從cDNA文庫種篩選出目的cDNA。與基因組DNA文庫類似，由總mRNA制作的cDNA文庫包括了細胞全部mRNA信息，自然也含有我們感興趣的編碼cDNA。當前發(fā)現(xiàn)的大多數(shù)蛋白質(zhì)的編碼基因幾乎都是這樣分離的。 （1） cDNA獲得方法：①Total RNA的提?。虎趍RNA的分離；③cDNA雙鏈合成：Su

23、perscipt II—RT合成第一鏈，cDNA第二鏈的合成，雙鏈cDNA末端補平，EcoR I adaptor 加接，雙鏈cDNA末端的磷酸化及Xho I酶切，膠回收cDNA。 （2） 克隆方法：①載體制備：pBlueScriptII的提取，pBlueScriptII的雙酶切消化，載體去磷酸化，載體效率檢測；②cDNA雙鏈和載體的連接：連接，檢測（PCR方法）；③電轉(zhuǎn)化：電轉(zhuǎn)化感受態(tài)細胞的制備，連接產(chǎn)物純化，電轉(zhuǎn)化；④快速鑒定、菌落PCR⑤pBlueScript cDNA文庫擴增。 （3） 文庫質(zhì)量定義：評價一個文庫是否有實用價值主要在于文庫的含量和插入片段的大小兩個方面。所構(gòu)建

24、的文庫中必須有足夠多的克隆數(shù), 這樣才能確?；蚪McDNA 中的每一個序列至少有一個拷貝存在于重組文庫中, 為達到這一要求, 文庫的容量應不小于1.7×105 , 同時為保證cDNA片段的完整性, 插入片段的平均大小應不小于1kb。 三、闡述基因突變的概念及引起突變的可能途徑(25%)：（1）化學誘變，（2）物理誘變，（3）T-DNA插入，（4）缺失、插入，（5）無意突變概念，（6）堿基修復概念 答：基因突變 屬分子水平上的變異,是指染色體上個別基因所發(fā)生的分子結(jié)構(gòu)的變化，基因突變在自然界普遍存在。 基因突變的方式很多，主要有：（1）化學誘變，基因突變可以由某些化學物質(zhì)所引起，這些化學物

25、質(zhì)稱為化學誘變劑?，F(xiàn)已知很多的化學誘變劑，它們誘變的機制是不同的。在DNA復制過程由于堿基類似物的取代，堿基的化學修飾以及堿基的插入和缺失都會引起突變。（2）物理誘變，利用物理因素引起基因突變的稱物理誘變，如X射線、紫外線、電離輻射等物理因素可造成 （3）T-DNA插入，改變讀碼或變成假基因。（4）移碼突變：基因中插入或者缺失一個或幾個堿基對，會使DNA的閱讀框架（讀碼框）發(fā)生改變，導致插入或缺失部位之后的所有密碼子都跟著發(fā)生變化，結(jié)果產(chǎn)生一種異常的多肽鏈。移碼突變誘發(fā)的原因是一些像吖啶類染料分子能插入DNA分子，使DNA復制時發(fā)生差錯，導致移碼突變。（5）無意突變，由于一對或幾對堿基對的改變

26、而使決定某一氨基酸的密碼子變成一個終止密碼子的基因突變。（6）堿基修復：DNA損傷的修復系統(tǒng)主要有以下幾個：①損傷堿基的直接修復；②切除修復，包括堿基切除修復、核苷酸切除修復和DNA交鏈的切除修復；③錯配修復；④重組修復，又稱復制后修復；⑤跨損傷DNA合成，這是一種利用損傷核苷酸為模板，通過DNA聚合酶I使堿基摻入到復制終止處進行DNA合成，從而延長DNA鏈的修復。 基因突變的特點為： 　　第一，基因突變在生物界中是普遍存在的。 　　第二，基因突變是隨機發(fā)生的。 　　第三，在自然狀態(tài)下，對一種生物來說，基因突變的頻率是很低的。 　　第四，大多數(shù)基因突變對生物體是有害的，由于任何一種生

27、物都是長期進化過程的產(chǎn)物，它們與環(huán)境條件已經(jīng)取得了高度的協(xié)調(diào)。 第五，基因突變是不定向的。 四、闡述一條反向遺傳克隆功能基因的途徑(25%) 答：反向遺傳學是相對于經(jīng)典遺傳學而言的。經(jīng)典遺傳學是從生物的性狀、表型到遺傳物質(zhì)來研究生命的發(fā)生與發(fā)展規(guī)律。反向遺傳學則是在獲得生物體基因組全部序列的基礎上，通過對靶基因進行必要的加工和修飾，如定點突變、基因插入\缺失、基因置換等，再按組成順序構(gòu)建含生物體必需元件的修飾基因組，讓其裝配出具有生命活性的個體，研究生物體基因組的結(jié)構(gòu)與功能，以及這些修飾可能對生物體的表型、性狀有何種影響等方面的內(nèi)容。 比較典型的反向遺傳克隆功能基因的途徑如RNAi。 RNAi的機制可能是細胞內(nèi)雙鏈RNA在Dicer酶的作用下，可形成-22 bp大小的小干擾RNA(small interfering RNAs，siRNAs)，siRNAs可進一步摻入多組分核酸酶并使其激活，從而精確降解與siRNAs序列相同的mRNA，完全抑制了該基因在細胞內(nèi)的翻譯和表達(下略)。