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《儀器分析》課程:第06章 高效液相色譜法

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1、廈門大學精品課程廈門大學精品課程廈門大學精品課程 儀器分析儀器分析儀器分析( ( (含實驗含實驗含實驗) ) )設(shè)計與編寫教師:王秋泉教授設(shè)計與編寫教師:王秋泉教授 Telephone:2181796 Email:Chapter Six High Performance Liquid ChromatographyHigh Performance Liquid Chromatography(HPLCHPLC)第六章 高效液相色譜法廈門大學精品課程廈門大學精品課程廈門大學精品課程 儀器分析儀器分析儀器分析( ( (含實驗含實驗含實驗) ) )設(shè)計與編寫教師:王秋泉教授設(shè)計與編寫教師:王秋泉教授 T

2、elephone:2181796 Email:高效液相色譜法高效液相色譜法 HPLCHigh Performance Liquid Chromatography液相色譜流程圖液相色譜流程圖PUMPDetectorWData station (Recorder) or Collection王秋泉王秋泉 博士博士廈門大學化學系,教育部現(xiàn)代分析科學重點實驗室廈門大學化學系,教育部現(xiàn)代分析科學重點實驗室Tel: 2181796; Email: 2001-2004廈門大學精品課程廈門大學精品課程廈門大學精品課程 儀器分析儀器分析儀器分析( ( (含實驗含實驗含實驗) ) )設(shè)計與編寫教師:王秋泉教授設(shè)計

3、與編寫教師:王秋泉教授 Telephone:2181796 Email:高效液相色譜法高效液相色譜法 HPLCHigh Performance Liquid Chromatography往復(fù)式高壓恒流泵廈門大學精品課程廈門大學精品課程廈門大學精品課程 儀器分析儀器分析儀器分析( ( (含實驗含實驗含實驗) ) )設(shè)計與編寫教師:王秋泉教授設(shè)計與編寫教師:王秋泉教授 Telephone:2181796 Email:高效液相色譜法高效液相色譜法 HPLCHigh Performance Liquid Chromatography注射泵廈門大學精品課程廈門大學精品課程廈門大學精品課程 儀器分析儀器分

4、析儀器分析( ( (含實驗含實驗含實驗) ) )設(shè)計與編寫教師:王秋泉教授設(shè)計與編寫教師:王秋泉教授 Telephone:2181796 Email:高效液相色譜法高效液相色譜法 HPLCHigh Performance Liquid Chromatography梯度洗脫(淋洗)低壓梯度高壓梯度PUMPPUMPPUMP濃度時間廈門大學精品課程廈門大學精品課程廈門大學精品課程 儀器分析儀器分析儀器分析( ( (含實驗含實驗含實驗) ) )設(shè)計與編寫教師:王秋泉教授設(shè)計與編寫教師:王秋泉教授 Telephone:2181796 Email:高效液相色譜法高效液相色譜法 HPLCHigh Perfo

5、rmance Liquid Chromatography液相色譜流程圖液相色譜流程圖PUMPDetectorWData station (Recorder) or Collection正相色譜正相色譜 反相色譜反相色譜 Reverse-phase ChromatographyReverse-phase Chromatography廈門大學精品課程廈門大學精品課程廈門大學精品課程 儀器分析儀器分析儀器分析( ( (含實驗含實驗含實驗) ) )設(shè)計與編寫教師:王秋泉教授設(shè)計與編寫教師:王秋泉教授 Telephone:2181796 Email:液固色譜液固色譜Liquid-Solid Chroma

6、tography廈門大學精品課程廈門大學精品課程廈門大學精品課程 儀器分析儀器分析儀器分析( ( (含實驗含實驗含實驗) ) )設(shè)計與編寫教師:王秋泉教授設(shè)計與編寫教師:王秋泉教授 Telephone:2181796 Email:液固吸附色譜液固吸附色譜Liquid-Solid ChromatographymadadmnMXnMX+以樣品中各組分在固定相上的吸附作用不同來進行分離“相似相溶”原理異構(gòu)體的分離廈門大學精品課程廈門大學精品課程廈門大學精品課程 儀器分析儀器分析儀器分析( ( (含實驗含實驗含實驗) ) )設(shè)計與編寫教師:王秋泉教授設(shè)計與編寫教師:王秋泉教授 Telephone:21

7、81796 Email:液液分配色譜液液分配色譜Liquid-Liquid ChromatographyaqorgiiKiStationary phaseMobile phase固定液易流失 化學鍵合固定相廈門大學精品課程廈門大學精品課程廈門大學精品課程 儀器分析儀器分析儀器分析( ( (含實驗含實驗含實驗) ) )設(shè)計與編寫教師:王秋泉教授設(shè)計與編寫教師:王秋泉教授 Telephone:2181796 Email:化學鍵合相色譜化學鍵合相色譜Bonded Phase ChromatographySiO H+ ROHSiOR + H2OSiO H+ R3SiClSiOSiR3 + H C l1

8、 功能基團的引入方法功能基團的引入方法廈門大學精品課程廈門大學精品課程廈門大學精品課程 儀器分析儀器分析儀器分析( ( (含實驗含實驗含實驗) ) )設(shè)計與編寫教師:王秋泉教授設(shè)計與編寫教師:王秋泉教授 Telephone:2181796 Email:SO C l2C lR MgC lRSiOHSiClSOCl2RM gClSiR化學鍵合相色譜化學鍵合相色譜Bonded Phase Chromatography廈門大學精品課程廈門大學精品課程廈門大學精品課程 儀器分析儀器分析儀器分析( ( (含實驗含實驗含實驗) ) )設(shè)計與編寫教師:王秋泉教授設(shè)計與編寫教師:王秋泉教授 Telephone:

9、2181796 Email:化學鍵合相色譜化學鍵合相色譜Bonded Phase ChromatographyR-C4, -C8, -C18-C6H5, -CN, -NH2-SO3H, -COOH, -NR4Cl-廈門大學精品課程廈門大學精品課程廈門大學精品課程 儀器分析儀器分析儀器分析( ( (含實驗含實驗含實驗) ) )設(shè)計與編寫教師:王秋泉教授設(shè)計與編寫教師:王秋泉教授 Telephone:2181796 Email:化學鍵合相色譜化學鍵合相色譜Bonded Phase Chromatography2正相色譜正相色譜3 反相色譜反相色譜 RP-HPLCRP-HPLC4 反相離子對色譜反相

10、離子對色譜 RP-Ion-Pair HPLCRP-Ion-Pair HPLCNSO3HONSO3HOM2+NSO3HOHNM(HQS)n2-n廈門大學精品課程廈門大學精品課程廈門大學精品課程 儀器分析儀器分析儀器分析( ( (含實驗含實驗含實驗) ) )設(shè)計與編寫教師:王秋泉教授設(shè)計與編寫教師:王秋泉教授 Telephone:2181796 Email:反相離子對色譜反相離子對色譜 RP-Ion-Pair HPLCRP-Ion-Pair HPLCMinutes02468101214Volts-0.10.00.10.20.30.4Volts-0.10.00.10.20.30.4 MgCdZnCh

11、romatogram of Mg, Cd and Zn separation廈門大學精品課程廈門大學精品課程廈門大學精品課程 儀器分析儀器分析儀器分析( ( (含實驗含實驗含實驗) ) )設(shè)計與編寫教師:王秋泉教授設(shè)計與編寫教師:王秋泉教授 Telephone:2181796 Email:化學鍵合相色譜化學鍵合相色譜Bonded Phase Chromatography5 離子交換色譜離子交換色譜COOHCOO-COO-COOHCOOHCOOHCOOHCOOHCOO-COO-COO-COO-COOHCOO-Figure Interaction between REE-species and t

12、he carboxylic groupsof the ion exchangerREE3+REE3+nHmLj-REE(HmL)n(3-nj)+Mobile phase flown廈門大學精品課程廈門大學精品課程廈門大學精品課程 儀器分析儀器分析儀器分析( ( (含實驗含實驗含實驗) ) )設(shè)計與編寫教師:王秋泉教授設(shè)計與編寫教師:王秋泉教授 Telephone:2181796 Email:Minutes051015202530mAU0246mAU02461 1.088 29.872 11.048 44.48 3 18.948 25.661: 658 nm, 8 nm430Soil-D20-3

13、000Pk #Retention TimeArea Percent化學鍵合相色譜化學鍵合相色譜Bonded Phase Chromatography廈門大學精品課程廈門大學精品課程廈門大學精品課程 儀器分析儀器分析儀器分析( ( (含實驗含實驗含實驗) ) )設(shè)計與編寫教師:王秋泉教授設(shè)計與編寫教師:王秋泉教授 Telephone:2181796 Email:Distribution of different REEs species inthe soluble extract of the soil sample29. 87%44. 48%25. 66%化學鍵合相色譜化學鍵合相色譜Bonde

14、d Phase Chromatography廈門大學精品課程廈門大學精品課程廈門大學精品課程 儀器分析儀器分析儀器分析( ( (含實驗含實驗含實驗) ) )設(shè)計與編寫教師:王秋泉教授設(shè)計與編寫教師:王秋泉教授 Telephone:2181796 Email:空間排斥(阻)色譜空間排斥(阻)色譜Size Exclusion Chromatography硅膠型、聚苯乙烯型、葡聚糖凝膠型硅膠型、聚苯乙烯型、葡聚糖凝膠型廈門大學精品課程廈門大學精品課程廈門大學精品課程 儀器分析儀器分析儀器分析( ( (含實驗含實驗含實驗) ) )設(shè)計與編寫教師:王秋泉教授設(shè)計與編寫教師:王秋泉教授 Telephone

15、:2181796 Email:空間排斥(阻)色譜空間排斥(阻)色譜Size Exclusion ChromatographyM.W.tR廈門大學精品課程廈門大學精品課程廈門大學精品課程 儀器分析儀器分析儀器分析( ( (含實驗含實驗含實驗) ) )設(shè)計與編寫教師:王秋泉教授設(shè)計與編寫教師:王秋泉教授 Telephone:2181796 Email:空間排斥(阻)色譜空間排斥(阻)色譜Size Exclusion ChromatographyM.W.tR廈門大學精品課程廈門大學精品課程廈門大學精品課程 儀器分析儀器分析儀器分析( ( (含實驗含實驗含實驗) ) )設(shè)計與編寫教師:王秋泉教授設(shè)計與

16、編寫教師:王秋泉教授 Telephone:2181796 Email:空間排斥(阻)色譜空間排斥(阻)色譜Size Exclusion ChromatographyM.W.tR廈門大學精品課程廈門大學精品課程廈門大學精品課程 儀器分析儀器分析儀器分析( ( (含實驗含實驗含實驗) ) )設(shè)計與編寫教師:王秋泉教授設(shè)計與編寫教師:王秋泉教授 Telephone:2181796 Email:空間排斥(阻)色譜空間排斥(阻)色譜Size Exclusion ChromatographyM.W.tR廈門大學精品課程廈門大學精品課程廈門大學精品課程 儀器分析儀器分析儀器分析( ( (含實驗含實驗含實驗)

17、 ) )設(shè)計與編寫教師:王秋泉教授設(shè)計與編寫教師:王秋泉教授 Telephone:2181796 Email:空間排斥(阻)色譜空間排斥(阻)色譜Size Exclusion ChromatographyM.W.tR廈門大學精品課程廈門大學精品課程廈門大學精品課程 儀器分析儀器分析儀器分析( ( (含實驗含實驗含實驗) ) )設(shè)計與編寫教師:王秋泉教授設(shè)計與編寫教師:王秋泉教授 Telephone:2181796 Email:Conditions: Column, Vydac C18, 5-mm, 30 nm (1 mm ID100 mm) Flow rate, 40 mL/min Mobil

18、e phase, A: 0.05% Formic Acid in Water B: 0.05% Formic Acid in Acetonitrile Linear gradient programmed from 20% B to 100% B over 25 min,hold at 100% B for 5 minSample: mixture of 9 protein standards; 5-mL loopDetection: SCIEX TAGA 6000E triple quadrupole mass spectrometry equipped with ionspray atmo

19、spheric pressure ion source in positive ion mode1, substance P(1-9),MW=1104, 900 pmoles; 2, neurotensin, 1673, 150;3, angiotensin, 1296, 385; 4, somatostatin, 1638, 600; 5, bovine insulin,5732, 130; 6, bovine glucagon, 3482, 720; 7, mellitin, 2846, 175; 8, myo-Globin, 16950, 20; 9, lactoglobulin-B,

20、18277, 245.m m-HPLC-Mass Spectrometry -HPLC-Mass Spectrometry of Peptides and Proteinsof Peptides and Proteins廈門大學精品課程廈門大學精品課程廈門大學精品課程 儀器分析儀器分析儀器分析( ( (含實驗含實驗含實驗) ) )設(shè)計與編寫教師:王秋泉教授設(shè)計與編寫教師:王秋泉教授 Telephone:2181796 Email:m m-HPLC-Mass Spectrometry -HPLC-Mass Spectrometry of Peptides and Proteinsof Pepti

21、des and Proteins廈門大學精品課程廈門大學精品課程廈門大學精品課程 儀器分析儀器分析儀器分析( ( (含實驗含實驗含實驗) ) )設(shè)計與編寫教師:王秋泉教授設(shè)計與編寫教師:王秋泉教授 Telephone:2181796 Email:Mass Spectrum Mass Spectrum of Substance P from Peak 1of Substance P from Peak 1廈門大學精品課程廈門大學精品課程廈門大學精品課程 儀器分析儀器分析儀器分析( ( (含實驗含實驗含實驗) ) )設(shè)計與編寫教師:王秋泉教授設(shè)計與編寫教師:王秋泉教授 Telephone:2181

22、796 Email:Mass Spectrum Mass Spectrum of Bovine Insulin from Peak 5of Bovine Insulin from Peak 5廈門大學精品課程廈門大學精品課程廈門大學精品課程 儀器分析儀器分析儀器分析( ( (含實驗含實驗含實驗) ) )設(shè)計與編寫教師:王秋泉教授設(shè)計與編寫教師:王秋泉教授 Telephone:2181796 Email:Mass Spectrum Mass Spectrum of Bovine Glucagon of Bovine Glucagon ( (胰增血糖素)胰增血糖素)from Peak 6from

23、Peak 6廈門大學精品課程廈門大學精品課程廈門大學精品課程 儀器分析儀器分析儀器分析( ( (含實驗含實驗含實驗) ) )設(shè)計與編寫教師:王秋泉教授設(shè)計與編寫教師:王秋泉教授 Telephone:2181796 Email:Mixed Mass Spectrum from Peak 8Mixed Mass Spectrum from Peak 8廈門大學精品課程廈門大學精品課程廈門大學精品課程 儀器分析儀器分析儀器分析( ( (含實驗含實驗含實驗) ) )設(shè)計與編寫教師:王秋泉教授設(shè)計與編寫教師:王秋泉教授 Telephone:2181796 Email:Separation and det

24、ection of the pigments in narcissus leaves by m m-HPLC-APCI-MS廈門大學精品課程廈門大學精品課程廈門大學精品課程 儀器分析儀器分析儀器分析( ( (含實驗含實驗含實驗) ) )設(shè)計與編寫教師:王秋泉教授設(shè)計與編寫教師:王秋泉教授 Telephone:2181796 Email:Separation and detection of the pigments in narcissus leaves by m m-HPLC-APCI-MS廈門大學精品課程廈門大學精品課程廈門大學精品課程 儀器分析儀器分析儀器分析( ( (含實驗含實驗含實驗

25、) ) )設(shè)計與編寫教師:王秋泉教授設(shè)計與編寫教師:王秋泉教授 Telephone:2181796 Email:Separation and detection of the pigments in narcissus leaves by m m-HPLC-APCI-MS廈門大學精品課程廈門大學精品課程廈門大學精品課程 儀器分析儀器分析儀器分析( ( (含實驗含實驗含實驗) ) )設(shè)計與編寫教師:王秋泉教授設(shè)計與編寫教師:王秋泉教授 Telephone:2181796 Email:Separation and detection of the pigments in narcissus lea

26、ves by m m-HPLC-APCI-MS廈門大學精品課程廈門大學精品課程廈門大學精品課程 儀器分析儀器分析儀器分析( ( (含實驗含實驗含實驗) ) )設(shè)計與編寫教師:王秋泉教授設(shè)計與編寫教師:王秋泉教授 Telephone:2181796 Email:Separation and detection of the pigments in narcissus leaves by m m-HPLC-APCI-MS廈門大學精品課程廈門大學精品課程廈門大學精品課程 儀器分析儀器分析儀器分析( ( (含實驗含實驗含實驗) ) )設(shè)計與編寫教師:王秋泉教授設(shè)計與編寫教師:王秋泉教授 Telephone:2181796 Email:Separation and detection of the pigments in narcissus leaves by m m-HPLC-APCI-MS廈門大學精品課程廈門大學精品課程廈門大學精品課程 儀器分析儀器分析儀器分析( ( (含實驗含實驗含實驗) ) )設(shè)計與編寫教師:王秋泉教授設(shè)計與編寫教師:王秋泉教授 Telephone:2181796 Email:Separation and detection of the pigments in narcissus leaves by m m-HPLC-APCI-MS

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