《2019版高考生物一輪總復(fù)習(xí) 生物技術(shù)實(shí)踐 專題1、2 傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用、微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用課件 選修1 .ppt》由會(huì)員分享，可在線閱讀，更多相關(guān)《2019版高考生物一輪總復(fù)習(xí) 生物技術(shù)實(shí)踐 專題1、2 傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用、微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用課件 選修1 .ppt（65頁(yè)珍藏版）》請(qǐng)?jiān)谘b配圖網(wǎng)上搜索。

選修1專題1 2 生物技術(shù)實(shí)踐傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用 考綱導(dǎo)讀 一 傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用 無(wú)氧 30 35 有氧 1 果酒 果醋 腐乳和泡菜的制作原理 常溫 2 酒精的檢測(cè) 重鉻酸鉀 灰綠 1 方法 可用 檢測(cè)酒精 2 原理 在酸性條件下 重鉻酸鉀與酒精反應(yīng)呈現(xiàn) 色 對(duì)氨基苯磺酸 玫瑰紅 標(biāo)準(zhǔn)顯色液 3 亞硝酸鹽含量測(cè)定的原理 在鹽酸酸化條件下 亞硝酸鹽與 發(fā)生重氮化反應(yīng)后 與N 1 萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合 形成 色染料 將顯色后的樣品與 進(jìn)行目測(cè)比較 可大致估算出泡菜中亞硝酸鹽的含量 二 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用1 培養(yǎng)基 1 培養(yǎng)基是人們按照微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的不同要求 配制 出供其 的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) 生長(zhǎng)繁殖 2 根據(jù)物理狀態(tài)的不同分為半液體培養(yǎng)基 液體培養(yǎng)基和 培養(yǎng)基 固體 選擇 3 根據(jù)培養(yǎng)基的功能可分為基礎(chǔ)培養(yǎng)基 培養(yǎng)基 和鑒別培養(yǎng)基 碳源 氮源 pH 4 每種培養(yǎng)基一般都含有水 無(wú)機(jī)鹽 另外要滿足微生物對(duì) 特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)及氧氣的要求 2 無(wú)菌技術(shù) 70 75 15 1 巴氏消毒法在 煮30min或者在80 煮 min 可以殺死牛奶中的微生物 并且使牛奶的營(yíng)養(yǎng) 成分不被破壞 灼燒 干熱 芽孢和孢子 2 接種環(huán)常用 滅菌 需要干燥且耐高溫的物品可采用 滅菌 另外還可以用高壓蒸汽滅菌 3 滅菌和消毒最主要的區(qū)別是是否殺死 3 微生物培養(yǎng)的基本技術(shù) 接種環(huán) 涂布器 1 配制培養(yǎng)基 計(jì)算 稱量 溶化 調(diào)pH 分裝 包扎 2 滅菌 高壓蒸汽滅菌鍋加水 將培養(yǎng)基放入鍋內(nèi) 密封 排冷氣 維持壓力 取出倒平板 或擱置斜面 3 接種 平板劃線法 稀釋涂布平板法 接種過(guò)程 洗凈雙手 點(diǎn)燃酒精燈 接種 貼標(biāo)簽 接種工具 包括 接種方法 4 培養(yǎng) 接種后的培養(yǎng)皿放入恒溫箱內(nèi)培養(yǎng) 4 土壤中分解尿素細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù) 1 種菌篩選 尿素 稀釋涂布平板法 培養(yǎng)基 選擇培養(yǎng)基 顯微鏡直接計(jì)數(shù)法 特點(diǎn) 是唯一氮源 2 統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的方法 3 設(shè)置對(duì)照的主要目的 排除實(shí)驗(yàn)組中 對(duì) 實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響 非測(cè)試因素 5 分解纖維素的微生物的分離 纖維素分解菌的篩選 1 實(shí)驗(yàn)原理 透明圈 纖維素酶的催化原理 篩選纖維素分解菌的原理即可根據(jù)是否產(chǎn)生 來(lái)篩選纖維素分解菌 2 過(guò)程土壤取樣 選擇富含纖維素的環(huán)境中的土壤 選擇培養(yǎng) 用選擇培養(yǎng)基培養(yǎng) 以增加纖維素分解菌的數(shù)量 梯度稀釋 微生物 倒平板 挑選產(chǎn)生透明圈的菌落 葡萄糖 判斷正誤 1 在家庭中用鮮葡萄制作果酒時(shí) 應(yīng)向發(fā)酵罐中持續(xù)通入 空氣 2 腐乳的制作利用了毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶和脂肪 酶 3 用稀釋涂布平板法純化大腸桿菌時(shí) 只要稀釋度足夠高 一般就能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落 答案 1 2 3 考點(diǎn)一 微生物與發(fā)酵原理 考點(diǎn)梳理 1 與傳統(tǒng)發(fā)酵有關(guān)的幾種微生物的比較 2 果酒 果醋 腐乳 泡菜的制作過(guò)程及注意事項(xiàng) 1 果酒 果醋 制作過(guò)程 挑選葡萄 沖洗 榨汁 酒精發(fā)酵 果酒 挑選葡萄 沖洗 榨汁 酒精發(fā)酵 醋酸發(fā)酵 果醋 注意事項(xiàng) a 材料的選擇與處理 選擇新鮮的葡萄 榨汁前 先將葡 萄洗干凈再去除枝梗 b 防止發(fā)酵液被污染 榨汁機(jī)要清洗干凈并晾干 發(fā)酵瓶要清洗干凈 并用體積分?jǐn)?shù)為70 的酒精消毒 或用洗滌劑洗滌 裝入葡萄汁后 封閉充氣口 c 控制好發(fā)酵的條件 葡萄汁裝入發(fā)酵瓶時(shí) 要留有1 3的空間 其目的是先讓酵母菌進(jìn)行有氧呼吸快速繁殖 增加菌種 耗盡氧氣再進(jìn)行酒精發(fā)酵 控制好溫度 果酒制作時(shí) 溫度控制在18 25 果醋制作時(shí) 溫度嚴(yán)格控制在30 35 注意是否需要通氣 果醋發(fā)酵時(shí) 需要適時(shí)通過(guò)充氣口充氣 2 腐乳 制作過(guò)程 讓豆腐上長(zhǎng)出毛霉 加鹽腌制 加鹵湯裝瓶 密封腌制 注意事項(xiàng) a 控制好材料中鹽 酒的用量 鹽和酒精過(guò)少 不足以抑制微生物的生長(zhǎng) 酒精含量過(guò)多 則會(huì)延長(zhǎng)腐乳成熟的時(shí)間 b 防止雜菌污染 用來(lái)腌制腐乳的玻璃瓶要洗涮干凈并用沸水消毒 裝瓶時(shí) 操作要迅速小心 封瓶時(shí) 最好將瓶口通過(guò)酒精燈的火焰 防止瓶口被污染 c 注意發(fā)酵時(shí)的溫度 3 泡菜 制作過(guò)程 選擇原料 修整 洗滌 晾曬 切分成條狀或片狀 配制泡菜鹽水 把處理后的原料 鹽水等其他調(diào)味料裝入瓶中 發(fā)酵 成品 注意事項(xiàng) a 泡菜壇的選擇 選用無(wú)裂紋 無(wú)砂眼 壇沿深 蓋子吻 合好的泡菜壇 b 材料的選擇及用量 蔬菜應(yīng)新鮮 若放置的時(shí)間過(guò)長(zhǎng) 蔬菜中的硝酸鹽易被還原成亞硝酸鹽 清水與鹽的質(zhì)量比是4 1 鹽水要煮沸后冷卻待用 煮沸鹽水可達(dá)到殺菌和去除氧氣的作用 c 氧氣的控制 壇蓋邊沿的水槽中要注滿水 發(fā)酵過(guò)程中 要及時(shí)補(bǔ)充蒸發(fā)掉的水分 以保證乳酸菌發(fā)酵的無(wú)氧環(huán)境 高考探究 考向 微生物與發(fā)酵原理 典例1 2017年江蘇卷 下列關(guān)于 腐乳的制作 實(shí)驗(yàn)的敘 述 正確的是 A 控制發(fā)酵溫度的主要目的是腐乳調(diào)味B 腐乳制作后期加入香辛料和料酒有防腐作用C 毛霉的主要作用是分解脂肪和淀粉D 成品腐乳表面的黏性物質(zhì)主要由細(xì)菌產(chǎn)生 解析 溫度通過(guò)影響酶的活性影響腐乳發(fā)酵 控制發(fā)酵的溫度主要有利于毛霉等微生物的生長(zhǎng)和腐乳發(fā)酵 A錯(cuò)誤 香辛料和料酒都能抑制微生物的生長(zhǎng) 具有防腐作用 B正確 毛霉的主要作用是產(chǎn)生蛋白酶和脂肪酶 將蛋白質(zhì)和脂肪分解成小分子化合物 C錯(cuò)誤 成品腐乳表面的黏性物質(zhì)主要是毛霉產(chǎn)生的 毛霉屬于真菌 D錯(cuò)誤 答案 B 考向預(yù)測(cè) 1 2017年新課標(biāo) 卷 豆豉是大豆經(jīng)過(guò)發(fā)酵制成的一種食品 為了研究影響豆豉發(fā)酵效果的因素 某小組將等量的甲 乙兩菌種分別接入等量的A B兩桶煮熟大豆中并混勻 再將兩者置于適宜條件下進(jìn)行發(fā)酵 并在32h內(nèi)定期取樣觀測(cè)發(fā)酵效果 回答下列問(wèn)題 1 該實(shí)驗(yàn)的自變量是 2 如果發(fā)現(xiàn)發(fā)酵容器內(nèi)上層大豆的發(fā)酵效果比底層的好 說(shuō)明該發(fā)酵菌是 3 如果在實(shí)驗(yàn)后 發(fā)現(xiàn)32h內(nèi)的發(fā)酵效果越來(lái)越好 且隨發(fā)酵時(shí)間呈直線上升關(guān)系 則無(wú)法確定發(fā)酵的最佳時(shí)間 若要確定最佳發(fā)酵時(shí)間 還需要做的事情是 4 從大豆到豆豉 大豆中的成分會(huì)發(fā)生一定的變化 其中 蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)變?yōu)?脂肪轉(zhuǎn)變?yōu)?解析 1 該實(shí)驗(yàn)的自變量是菌種 發(fā)酵時(shí)間 2 如果發(fā)現(xiàn)發(fā)酵容器內(nèi)上層大豆的發(fā)酵效果比底層的好 說(shuō)明該發(fā)酵菌是好氧菌 3 如果在實(shí)驗(yàn)后 發(fā)現(xiàn)32h內(nèi)的發(fā)酵效果越來(lái)越好 且隨發(fā)酵時(shí)間呈直線上升關(guān)系 則無(wú)法確定發(fā)酵的最佳時(shí)間 若要確定最佳發(fā)酵時(shí)間 還需要做的事情是延長(zhǎng)發(fā)酵時(shí)間 觀測(cè)發(fā)酵效果 最好的發(fā)酵效果所對(duì)應(yīng)的時(shí)間即為最佳發(fā)酵時(shí)間 4 從大豆到豆豉 大豆中的成分會(huì)發(fā)生一定的變化 其中 蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)變?yōu)榘被岷投嚯?脂肪轉(zhuǎn)變?yōu)橹舅岷透视?答案 1 菌種 發(fā)酵時(shí)間 2 好氧菌 3 延長(zhǎng)發(fā)酵時(shí)間 觀測(cè)發(fā)酵效果 最好的發(fā)酵效果所對(duì)應(yīng)的時(shí)間即為最佳發(fā)酵時(shí)間 4 氨基酸和多肽 脂肪酸和甘油 2 乙醇等 綠色能源 的開發(fā)備受世界關(guān)注 利用玉米秸 稈生產(chǎn)燃料酒精的大致流程為 1 玉米秸稈預(yù)處理后 應(yīng)該選用 酶和 酶形成纖維二糖 再使用 酶使之轉(zhuǎn)化為發(fā)酵所需的葡萄糖 2 從以下哪些微生物中可以提取上述酶 多選 A 釀制果醋的醋酸菌B 生長(zhǎng)在腐木上的霉菌C 制作酸奶的乳酸菌 D 反芻動(dòng)物瘤胃中生存的某些微生物 3 若從土壤中分離產(chǎn)生這種酶的微生物 所需要的培養(yǎng)基為 按功能分 培養(yǎng)基中的碳源為 微生物在純化培養(yǎng)時(shí)常用方法是 和 4 發(fā)酵階段需要的菌種是 生產(chǎn)酒精時(shí)要控制的必要條件是 答案 1 C1 CX 葡萄糖苷 2 BD 3 選擇培養(yǎng)基 纖維素 平板劃線法 稀釋涂布平板法 4 酵母菌 無(wú)氧 密封或密閉 3 下圖是泡菜的制作及測(cè)定亞硝酸鹽含量的實(shí)驗(yàn)流程示意 圖 請(qǐng)據(jù)圖分析 回答下列問(wèn)題 1 制作泡菜宜選用新鮮的蔬菜或其他原料 原因是 2 制備泡菜的鹽水中 清水與鹽的質(zhì)量比為 鹽水煮沸的目的是為了殺滅雜菌 冷卻后再使用的目的是為了保證 等微生物的生命活動(dòng)不受影響 3 泡菜的制作方法不當(dāng) 很容易造成泡菜變質(zhì) 甚至發(fā)霉變味 發(fā)霉主要與 有關(guān) 4 測(cè)定亞硝酸鹽含量的方法是 2 4 1 乳酸菌 答案 1 亞硝酸鹽含量低 3 霉菌 4 比色法 考點(diǎn)二 微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng) 考點(diǎn)梳理 1 微生物的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)及功能 微生物的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)主要有碳源 氮源 無(wú)機(jī)鹽和水這四大類 此外還要滿足不同微生物生長(zhǎng)對(duì)pH 特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的需求 1 微生物最常利用的碳源是糖類 尤其是葡萄糖 最常利 用的氮源是銨鹽 硝酸鹽 2 對(duì)異養(yǎng)微生物來(lái)說(shuō) 含C H O N的化合物既是碳源 又是氮源 能源 3 有些培養(yǎng)基不需要添加特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) 生物自己能合成 如大腸桿菌能合成某些維生素作為特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) 2 培養(yǎng)基的種類 續(xù)表 續(xù)表 1 加入培養(yǎng)基中的凝固劑 如瓊脂 一般不能被微生物利 用 只起到凝固作用 2 選擇培養(yǎng)基一般只生長(zhǎng)具有特定目的的微生物 鑒別培養(yǎng)基中可以存在其他微生物 而且能鑒別特定的微生物 3 消毒與滅菌 續(xù)表 注 消毒與滅菌最大的區(qū)別是芽孢和孢子是否存活 4 常用的微生物接種方法 1 接種方法的比較 續(xù)表 2 倒平板的注意事項(xiàng) 培養(yǎng)基滅菌后 需冷卻至50 左右 才能用來(lái)倒平板 整個(gè)操作過(guò)程需在酒精燈火焰旁進(jìn)行 避免雜菌污染 平板冷凝后要倒置的原因 防止皿蓋上的冷凝水珠落入 培養(yǎng)基 造成污染 高考探究 考向 微生物的培養(yǎng) 典例2 2014年四川卷 有機(jī)農(nóng)藥苯磺隆是一種除草劑 長(zhǎng)期使用會(huì)污染環(huán)境 研究發(fā)現(xiàn) 苯磺隆能被土壤中某些微生物降解 分離降解苯磺隆的菌株和探索其降解機(jī)制的實(shí)驗(yàn)過(guò)程如下圖甲 乙所示 甲 乙 1 微生物生長(zhǎng)繁殖所需的主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)有碳源 水 四類 該實(shí)驗(yàn)所用的選擇培養(yǎng)基只能以苯磺隆作為唯一碳源 其原因是 2 與微生物培養(yǎng)基相比 植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基常需添加生長(zhǎng)素和 這些植物激素一般需要事先單獨(dú)配置成 保存?zhèn)溆?3 純化菌株時(shí) 通常使用的劃線工具是 劃線的某個(gè)平板培養(yǎng)后 第一劃線區(qū)域的劃線上都不間斷地長(zhǎng)滿了菌 第二劃線區(qū)域的第一條線上無(wú)菌落 其他劃線上有菌落 造成劃線無(wú)菌落可能的操作失誤有 4 為探究苯磺隆的降解機(jī)制 將該菌種的培養(yǎng)液過(guò)濾離心 取上清液做圖乙所示實(shí)驗(yàn) 該實(shí)驗(yàn)的假設(shè)是 該實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)是否合理 為什么 解析 1 微生物生長(zhǎng)所需要的主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)包括碳源 氮源 水和無(wú)機(jī)鹽 使用選擇培養(yǎng)基是因?yàn)槠湓试S特定的微生物生長(zhǎng) 同時(shí)又能抑制或阻止其他微生物的生長(zhǎng) 2 植物組織培養(yǎng)常需要添加的植物激素有生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素 MS培養(yǎng)基的成分一般先分別配制成母液備用 3 平板劃線法接種時(shí)通常 用接種環(huán)劃線 第二區(qū)域只有第一條線無(wú)菌落 而其他的劃線都有菌落 很可能是因?yàn)榻臃N環(huán)在灼燒后未冷卻 第一次劃線時(shí)將菌種燙死 而后接種環(huán)冷卻 能正常劃線 也可能是第一次劃線時(shí)劃線未從第一區(qū)域末端開始 使接種環(huán)上無(wú)菌種 4 題中實(shí)驗(yàn)為取得菌種培養(yǎng)液過(guò)濾離心后取上清液 加入蛋白酶處理后 測(cè)得其對(duì)苯磺隆的降解率 由此可判定實(shí)驗(yàn)假設(shè)是目的菌株通過(guò)分泌某種蛋白質(zhì)來(lái)降解苯磺隆 但由于缺乏空白對(duì)照 不能比較蛋白酶的處理是否降低苯磺隆降解率 該實(shí)驗(yàn)不能得出相應(yīng)結(jié)論 答案 1 氮源和無(wú)機(jī)鹽 確保只有能利用苯磺隆的微生物 能正常生長(zhǎng)和繁殖 2 細(xì)胞分裂素 母液 接種環(huán)灼燒后未冷卻 劃線未從第一區(qū)域 3 接種環(huán)末端開始 不合理 缺少空 4 目的菌株能分泌降解苯磺隆的蛋白質(zhì)白對(duì)照 1 每次劃線前和劃線后 接種環(huán)都要進(jìn)行灼燒滅菌 因此需要灼燒接種環(huán)6次 其中第一次灼燒是為了防止雜菌污染 每次劃線前灼燒是為了殺死殘留菌種 保證每次劃線菌種來(lái)自上次劃線末端 最后一次灼燒是為了防止接種的微生物擴(kuò)散 造成新的污染 2 下一次劃線的菌種來(lái)源是上一次劃線的最末端 所以前幾次劃線都是上一次的尾和下一次的首相連的 但是第五次劃線不與第一次劃線相連 3 在第五次劃線上的菌落往往是由一個(gè)細(xì)菌繁殖形成的 4 實(shí)際上菌落數(shù)都要小于細(xì)菌數(shù) 因?yàn)橛械木涫莾蓚€(gè)或 多個(gè)細(xì)菌形成的 考向預(yù)測(cè) 4 2017年江西贛中南五校聯(lián)考 下表是某公司研發(fā)的一種培養(yǎng)大腸桿菌菌群的培養(yǎng)基配方 請(qǐng)根據(jù)表格和所學(xué)知識(shí)回答下列相關(guān)問(wèn)題 1 從生態(tài)系統(tǒng)的成分上看 大腸桿菌屬于 2 若根據(jù)用途劃分 該培養(yǎng)基屬于 填 選擇 或 鑒別 培養(yǎng)基 若要用上述培養(yǎng)基來(lái)篩選出土壤中的尿素分解菌 培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)成分必需怎樣更改 并用 作為指示劑 3 在微生物培養(yǎng)的過(guò)程中 為防止雜菌污染 需要對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行 操作者的雙手需要進(jìn)行清洗和 4 圖1和圖2是培養(yǎng)某細(xì)菌的結(jié)果圖 其對(duì)應(yīng)的接種方法分別是 和 這兩種方法接種后培養(yǎng)基上都可以得到由單個(gè)細(xì)胞繁殖所形成的 圖1所用的接種方法可用來(lái)對(duì)活菌進(jìn)行計(jì)數(shù) 此外 測(cè)定微生物數(shù)目的另一種方法是 圖1 圖2 5 以下過(guò)程中所利用的主要微生物的細(xì)胞結(jié)構(gòu)與大腸桿菌較相似的有 A 制作果酒C 制作泡菜 B 由果酒制作果醋D 制作腐乳 解析 1 大腸桿菌只能從環(huán)境中攝取有機(jī)物 不能自己合成有機(jī)物 屬于分解者 2 該培養(yǎng)基中含有指示劑 屬于鑒別培養(yǎng)基 尿素分解菌可以分解尿素 而其他微生物不能 因此可將培養(yǎng)基中的蛋白胨改為尿素用于篩選土壤中的尿素分解菌 并用酚紅作為指示劑 尿素分解菌分解尿素產(chǎn)生的NH3可使酚紅變紅 3 培養(yǎng)微生物時(shí) 培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿需要滅菌 操作者雙手需要進(jìn)行消毒 4 圖1采用的是稀釋涂布平板法 圖2采用的是平板劃線法 單個(gè)微生物細(xì)胞繁殖所形成的細(xì)胞群叫菌落 5 A B C D中所用到的主要微生物分別是酵母菌 醋酸菌 乳酸菌 毛霉 醋酸菌 大腸桿菌和乳酸菌都是原核細(xì)胞 結(jié)構(gòu)相似 答案 1 分解者 2 鑒別將蛋白胨改成尿素 酚紅 3 滅菌 消毒 4 稀釋涂布平板法 平板劃線法 菌落 顯微鏡直接計(jì)數(shù)法 或 血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)法 5 BC 5 無(wú)菌操作是微生物接種技術(shù)的關(guān)鍵 傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)和微生物分離 純化 應(yīng)用過(guò)程及植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中 均要無(wú)菌操作 回答下列相關(guān)問(wèn)題 1 消毒和滅菌是兩個(gè)不同的概念 滅菌是指徹底殺滅微生物使其永遠(yuǎn)喪失生長(zhǎng)繁殖的能力 消毒指僅殺死一部分對(duì)人體有害的病原菌而對(duì)被消毒的物體基本無(wú)害 下列哪些事物適用于消毒處理 皮膚 飲用水 牛奶 注射器 培養(yǎng)皿 接種環(huán) 培養(yǎng)基 果汁 醬油 手術(shù)刀 A C B D 以上全部 2 配制培養(yǎng)基時(shí)各種成分在溶化后分裝前必須進(jìn)行 接種前要進(jìn)行 在整個(gè)微生物的分離和培養(yǎng)中 一定注意要在無(wú)菌條件下進(jìn)行 3 在微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)中 獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是 上圖是利用 法進(jìn)行大腸桿菌接種 把聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面 為達(dá)到這一目的 操作上應(yīng)注意 每次劃線前要 冷卻后從上一區(qū)劃線末端開始劃 首尾區(qū) 4 培養(yǎng)大腸桿菌時(shí) 在接種前需要檢測(cè)培養(yǎng)基是否被污染 對(duì)固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測(cè)方法是 觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生 5 利用培養(yǎng)基不僅可以分離培養(yǎng)大腸桿菌 也可以進(jìn)行植物組織培養(yǎng) 與大腸桿菌培養(yǎng)明顯不同的是 用于組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基中還需要加入 6 有位同學(xué)在家制作泡菜時(shí) 為避免雜菌污染而向泡菜壇中加入了青霉素 結(jié)果發(fā)酵失敗 原因可能是 解析 1 應(yīng)采用消毒 應(yīng)采用滅菌 故選A 2 配制培養(yǎng)基時(shí)各種成分在溶化后分裝前必須調(diào)整pH 培養(yǎng)基接種前要進(jìn)行高壓蒸汽滅菌 再進(jìn)行倒平板 3 微生物實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)的關(guān)鍵在于防止雜菌污染 采用平板劃線法接種 需要注意的是連續(xù)劃線時(shí) 每次劃線前要灼燒接種環(huán) 同時(shí)劃線結(jié)束首尾區(qū)不能相連 4 檢測(cè)培養(yǎng)基是否被污染 對(duì)固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測(cè)方法是將未接種 或接種等量無(wú)菌水 的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適當(dāng)時(shí)間 觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生 5 植物組織培養(yǎng)的MS培養(yǎng)基中需要加入植物激素 生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素 6 制作泡菜時(shí) 為避免雜菌污染而向泡菜壇中加入了青霉素 結(jié)果發(fā)酵失敗 原因可能是青霉素殺死了乳酸菌 答案 1 A 2 調(diào)整pH高壓蒸汽滅菌 3 防止外來(lái)雜菌的入侵 平板劃線 灼燒接種環(huán) 不連接 不重疊 4 將未接種 或接種等量無(wú)菌水 的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適當(dāng)時(shí)間 5 植物激素 或生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素 6 青霉素殺死了乳酸菌 考點(diǎn)三 微生物的分離與計(jì)數(shù) 考點(diǎn)梳理 1 分離土壤中分解尿素的細(xì)菌與分離分解纖維素的微生物的比較 續(xù)表 2 統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的方法 1 稀釋涂布平板法 原理 當(dāng)樣品的稀釋濃度足夠高時(shí) 培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落來(lái)源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌 通過(guò)統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù) 就能推測(cè)出樣品中大約含有多少活菌 操作 a 設(shè)置重復(fù)組 增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說(shuō)服力與準(zhǔn)確性 b 為了保證結(jié)果準(zhǔn)確 一般選擇菌落數(shù)在30 300的平板 進(jìn)行計(jì)數(shù) 計(jì)算公式 每克樣品中的菌株數(shù) C V M 其中C代表某一稀釋度下平板上生長(zhǎng)的平均菌落數(shù) V代表涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積 mL M代表稀釋倍數(shù) 2 顯微鏡直接計(jì)數(shù)法 原理 利用特定細(xì)菌計(jì)數(shù)板或血細(xì)胞計(jì)數(shù)板 在顯微鏡 下計(jì)算一定容積的樣品中微生物的數(shù)量 方法 用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù) 缺點(diǎn) 不能區(qū)分死菌與活菌 高考探究 考向 微生物的分離與純化 典例3 2016年新課標(biāo) 卷 某同學(xué)用新鮮的泡菜濾液為實(shí)驗(yàn)材料純化乳酸菌 分離純化所用固體培養(yǎng)基中因含有碳酸鈣而不透明 乳酸菌產(chǎn)生的乳酸能溶解培養(yǎng)基中的碳酸鈣 回答下列問(wèn)題 1 分離純化乳酸菌時(shí) 首先需要用 對(duì)泡菜濾液進(jìn)行梯度稀釋 進(jìn)行梯度稀釋的理由是 2 推測(cè)在分離純化所用的培養(yǎng)基中加入碳酸鈣的作用有 和 分離純化時(shí)應(yīng)挑選出 的菌落作為候選菌 3 乳酸菌在 20 長(zhǎng)期保存時(shí) 菌液中常需要加入一定量的 填 蒸餾水 甘油 或 碳酸鈣 解析 1 分離純化乳酸菌時(shí) 首先需要用無(wú)菌水對(duì)泡菜濾液進(jìn)行梯度稀釋 進(jìn)行梯度稀釋的理由是在稀釋度足夠高的菌液里 聚集在一起的乳酸菌將被分散成單個(gè)細(xì)胞 從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌落 2 在分離純化所用的培養(yǎng)基中加入碳酸鈣的作用有中和乳酸菌代謝過(guò)程中產(chǎn)生的乳酸和利于乳酸菌的識(shí)別和分離 分離純化時(shí)應(yīng)挑選出在平板上有透明圈的菌落作為候選菌 3 乳酸菌在 20 長(zhǎng)期保存時(shí) 菌液中常需要加入一定量的甘油 泡菜濾液中菌的濃度高 直接培養(yǎng)很難 答案 1 無(wú)菌水分離到單個(gè)菌落 2 中和乳酸菌代謝過(guò)程中產(chǎn)生的乳酸 利于乳酸菌的識(shí) 別和分離 具有透明圈 3 甘油 考向預(yù)測(cè) 6 2014年新課標(biāo) 卷 植物秸稈中的纖維素可被某些微生 物分解 回答下列問(wèn)題 1 分解秸稈中纖維素的微生物能分泌纖維素酶 該酶是由3種組分組成的復(fù)合酶 其中的葡萄糖苷酶可將 分解成 2 在含纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅 CR 時(shí) CR可與纖維素形成 色復(fù)合物 用含有CR的該種培養(yǎng)基培養(yǎng)纖維素分解菌時(shí) 培養(yǎng)基上會(huì)出現(xiàn)以該菌的菌落為中心的 3 為從富含纖維素的土壤中分離獲得纖維素分解菌的單菌落 某同學(xué)設(shè)計(jì)了甲 乙兩種培養(yǎng)基 成分見(jiàn)下表 注 表示有 表示無(wú) 據(jù)表判斷 培養(yǎng)基甲 填 能 或 不能 用于分離和鑒別纖維素分解菌 原因是 培養(yǎng)基乙 填 能 或 不能 用于分離和鑒別纖維素分解菌 原因是 解析 1 纖維素是一種以葡萄糖為單體形成的高分子化合物 纖維素能被土壤中某些微生物分泌的纖維素酶分解 如下圖 2 剛果紅與纖維素形成紅色復(fù)合物 當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后 紅色復(fù)合物無(wú)法形成 出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈 我們可以通過(guò)是否產(chǎn)生透明圈來(lái)篩選纖維素分解菌 3 纖維素分解菌選擇培養(yǎng)基屬于液體培養(yǎng)基 纖維素分解菌鑒別培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基 要分離和鑒別纖維素分解菌 需要以纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基 培養(yǎng)基乙不具有選擇的作用 答案 1 纖維二糖 葡萄糖 2 紅 透明圈 3 不能 纖維素分解菌選擇培養(yǎng)基屬于液體培養(yǎng)基 不能 用于分離單菌落 不能 培養(yǎng)基中沒(méi)有纖維素粉