2019屆高考生物一輪復(fù)習(xí) 第十二單元 生物技術(shù)實(shí)踐 隨堂真題演練40 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用.doc
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隨堂真題演練40 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用 (2016高考全國(guó)卷Ⅰ)空氣中的微生物在重力等作用下,可以一定程度地沉降。某研究小組欲用平板收集教室空氣中的微生物,以了解教室內(nèi)不同高度空氣中微生物的分布情況。實(shí)驗(yàn)步驟如下: ①配制培養(yǎng)基(成分:牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H2O); ②制作無(wú)菌平板; ③設(shè)置空白對(duì)照組和若干實(shí)驗(yàn)組,進(jìn)行相關(guān)操作; ④將各組平板置于37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)一段時(shí)間,統(tǒng)計(jì)各組平板上菌落的平均數(shù)。 回答下列問(wèn)題: (1)該培養(yǎng)基中微生物所需的氮來(lái)源于______________________________________________。 若要完成步驟②,該培養(yǎng)基中的成分X通常是________。 (2)步驟③中,實(shí)驗(yàn)組的操作是__________________________________________________ ________________________________________________________________________?! ? (3)若在某次調(diào)查中,某一實(shí)驗(yàn)組平板上菌落平均數(shù)為36個(gè)/平板,而空白對(duì)照組的一個(gè)平板上出現(xiàn)了6個(gè)菌落,這種結(jié)果說(shuō)明在此次調(diào)查中出現(xiàn)了________現(xiàn)象。若將30(即36-6)個(gè)/平板作為本組菌落數(shù)的平均值,該做法________(填“正確”或“不正確”)。 解析:(1)牛肉膏和蛋白胨都含有蛋白質(zhì)的水解產(chǎn)物,都可以作為氮源;觀察菌落需利用固體培養(yǎng)基,因此可推知若要完成步驟②,該培養(yǎng)基中的成分X通常是凝固劑,如瓊脂。(2)實(shí)驗(yàn)組的各組構(gòu)成對(duì)比實(shí)驗(yàn),設(shè)計(jì)要依據(jù)單一變量原則,結(jié)合實(shí)驗(yàn)?zāi)康模河闷桨迨占淌铱諝庵械奈⑸?,以了解教室?nèi)不同高度空氣中微生物的分布情況,可知步驟③中,實(shí)驗(yàn)組的操作是將各實(shí)驗(yàn)組平板分別放置在教室不同高度的位置上,開(kāi)蓋暴露一段時(shí)間。(3)若在某次調(diào)查中,某一實(shí)驗(yàn)組平板上菌落平均數(shù)為36個(gè)/平板,而空白對(duì)照組的一個(gè)平板上出現(xiàn)了6個(gè)菌落,這種結(jié)果說(shuō)明在此次調(diào)查中出現(xiàn)了污染現(xiàn)象。該污染菌可能對(duì)空氣中的其他微生物的生長(zhǎng)無(wú)影響也可能有影響,因此將30(即36-6)個(gè)/平板作為本組菌落數(shù)的平均值,該做法不正確。 答案:(1)牛肉膏、蛋白胨 瓊脂 (2)將各實(shí)驗(yàn)組平板分別放置在教室不同高度的位置上,開(kāi)蓋暴露一段時(shí)間 (3)污染 不正確 (2015高考全國(guó)卷Ⅰ)已知微生物A可以產(chǎn)生油脂,微生物B可以產(chǎn)生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生產(chǎn)。回答有關(guān)問(wèn)題: (1)顯微觀察時(shí),微生物A菌體中的油脂通??捎胈_______染色。微生物A產(chǎn)生的油脂不易揮發(fā),可選用________(填“萃取法”或“水蒸氣蒸餾法”)從菌體中提取。 (2)為了從自然界中獲得能產(chǎn)生脂肪酶的微生物B的單菌落,可從含有油料作物種子腐爛物的土壤中取樣,并應(yīng)選用以________為碳源的固體培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。 (3)為了確定微生物B產(chǎn)生的脂肪酶的最適溫度,某同學(xué)測(cè)得相同時(shí)間內(nèi),在35 ℃、40 ℃、45 ℃溫度下降解10 g油脂所需酶量依次為4 mg、1 mg、6 mg,則上述三個(gè)溫度中,________℃條件下該酶活力最小。為了進(jìn)一步確定該酶的最適溫度,應(yīng)圍繞________℃設(shè)計(jì)后續(xù)實(shí)驗(yàn)。 解析:(1)生物組織中的油脂能被蘇丹Ⅲ(或蘇丹Ⅳ)染成橘黃色(或紅色)。(2)為了篩選出能產(chǎn)生脂肪酶的微生物B的單菌落,我們應(yīng)選用只能讓該菌落生長(zhǎng)的選擇性培養(yǎng)基,因此只能選用以油脂作為唯一碳源的固體培養(yǎng)基。(3)溫度影響酶的活性,在三個(gè)溫度中,45 ℃時(shí)需酶量最高,說(shuō)明酶活性最低;在三個(gè)溫度實(shí)驗(yàn)中40 ℃時(shí)所需酶量最少,35 ℃時(shí)和45 ℃時(shí)所用酶量多,說(shuō)明酶的最適溫度介于35 ℃和45 ℃之間,因此應(yīng)圍繞40 ℃設(shè)計(jì)不同溫度梯度,進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。 答案:(1)蘇丹Ⅲ(或蘇丹Ⅳ) 萃取法 (2)油脂 (3)45 40 (高考全國(guó)卷Ⅱ)為了調(diào)查某河流的水質(zhì)狀況,某研究小組測(cè)定了該河流水樣中的細(xì)菌含量,并進(jìn)行了細(xì)菌分離等工作。回答下列問(wèn)題: (1)該小組采用稀釋涂布平板法檢測(cè)水樣中的細(xì)菌含量。在涂布接種前,隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時(shí)間,這樣做的目的是_____________________________________;然后,將1 mL水樣稀釋100倍,在3個(gè)平板上用涂布法分別接入0.1 mL稀釋液;經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后,3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為39、38和37。據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為_(kāi)_______。 (2)該小組采用平板劃線法分離水樣中的細(xì)菌。操作時(shí),接種環(huán)通過(guò)________滅菌,在第二次及以后的劃線時(shí),總是從上一次劃線的末端開(kāi)始劃線。這樣做的目的是________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 (3)示意圖A和B中,________表示的是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。 (4)該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻,一部分進(jìn)行靜置培養(yǎng),另一部分進(jìn)行振蕩培養(yǎng)。結(jié)果發(fā)現(xiàn):振蕩培養(yǎng)的細(xì)菌比靜置培養(yǎng)的細(xì)菌生長(zhǎng)速度快。分析其原因是:振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液中________的含量,同時(shí)可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸,提高_(dá)_______的利用率。 解析:(1)為了確定培養(yǎng)基的滅菌是否合格,微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)一般會(huì)設(shè)置空白對(duì)照:隨機(jī)取若干滅菌后的不接種的培養(yǎng)基在相同條件下培養(yǎng)一段時(shí)間,觀察培養(yǎng)基上是否有菌落生成,若無(wú)菌落生成說(shuō)明滅菌合格;0.1 mL稀釋液中平均有(39+38+37)/3=38個(gè)活菌,則每毫升稀釋液中活菌的數(shù)目為38/0.1=380,則稀釋前每毫升水樣中活菌數(shù)目為380100=3.8104,則每升水樣中活菌數(shù)目為3.81041 000=3.8107。(2)接種時(shí)接種環(huán)需要灼燒滅菌;在第二次及以后每次劃線時(shí),總是從上一次的末端開(kāi)始劃線,這樣做的目的是通過(guò)劃線次數(shù)的增加,使每次劃線時(shí)菌體的數(shù)目逐漸減少,以便得到單個(gè)菌落。(3)由題圖可知,B圖菌落分布相對(duì)均勻,應(yīng)為稀釋涂布平板法接種的結(jié)果。(4)振蕩培養(yǎng)可以增加液體培養(yǎng)基的氧氣含量,促進(jìn)好氧型微生物的生長(zhǎng),另外振蕩培養(yǎng)還可以使菌體與培養(yǎng)液充分接觸,提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用率。 答案:(1)檢測(cè)培養(yǎng)基平板滅菌是否合格 3.8107 (2)灼燒 將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個(gè)菌落 (3)B (4)溶解氧 營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) [課時(shí)作業(yè)] 1.(2018武漢調(diào)研)如表所示為培養(yǎng)某種微生物的培養(yǎng)基配方,請(qǐng)回答有關(guān)問(wèn)題: KH2PO4 Na2HPO4 MgSO4 7H2O 葡萄糖 尿素 蒸餾水 1.4 g 2.1 g 0.2 g 10.0 g 1.0 g 定容至 1 000 mL (1)該培養(yǎng)基只允許分解尿素的細(xì)菌生長(zhǎng),這種培養(yǎng)基稱(chēng)為_(kāi)_______培養(yǎng)基。該培養(yǎng)基會(huì)抑制其他種類(lèi)微生物生長(zhǎng),其原因是該培養(yǎng)基________________________________________________________________________。 (2)若要通過(guò)統(tǒng)計(jì)培養(yǎng)基中菌落數(shù)來(lái)估計(jì)樣品中的細(xì)菌數(shù),上述培養(yǎng)基中還需要添加的成分是________,接種時(shí)應(yīng)采用________________法,該方法接種培養(yǎng)后的菌落,不可能是圖中的________。 (3)從土壤中分離出分解尿素的細(xì)菌后,要對(duì)其做進(jìn)一步的鑒定,可在上述培養(yǎng)基中加入________指示劑,培養(yǎng)該菌后,如果指示劑變________,可初步鑒定該種細(xì)菌能夠分解尿素。 (4)某同學(xué)用0.1 mL稀釋液在稀釋倍數(shù)為106的平板中測(cè)得菌落數(shù)的平均值為163,則每毫升樣品中的細(xì)菌數(shù)是________個(gè)。 答案:(1)選擇 以尿素為唯一的氮源 (2)瓊脂 稀釋涂布平板 D (3)酚紅 紅 (4)1.63109 2.(2018黑龍江大慶中學(xué)模擬)回答與微生物實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)有關(guān)的問(wèn)題: (1)在制備固體培養(yǎng)基時(shí)需加入的常用凝固劑是________。若培養(yǎng)基需調(diào)節(jié)pH,則應(yīng)在滅菌之________(填“前”或“后”)調(diào)節(jié)。 (2)為防止外來(lái)雜菌入侵,對(duì)________________等可采用干熱滅菌法進(jìn)行滅菌。 (3)如圖為平板劃線法接種后的示意圖。在劃線接種的整個(gè)操作過(guò)程中,對(duì)接種環(huán)至少需進(jìn)行________次灼燒滅菌。接種后蓋上皿蓋,將平板________放入恒溫箱中培養(yǎng),這樣放置的目的是__________________________。 (4)用稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)活菌數(shù)目時(shí),每隔一個(gè)“時(shí)間間隔”統(tǒng)計(jì)一次菌落數(shù)目,最后選取________________________________________________________________________ 作為結(jié)果,這樣可以防止因培養(yǎng)時(shí)間不足而遺漏菌落的數(shù)目。 解析:(1)制備固體培養(yǎng)基通常加入的凝固劑是瓊脂。培養(yǎng)基若在滅菌后調(diào)pH,可造成污染,故培養(yǎng)基調(diào)pH應(yīng)在滅菌前進(jìn)行。(2)滅菌的方法通常有高壓蒸汽滅菌、干熱滅菌和灼燒滅菌三種。采用干熱滅菌的通常有玻璃器皿和金屬用具。(3)平板劃線法接種過(guò)程中需在接種前、每次劃線后對(duì)接種環(huán)進(jìn)行灼燒滅菌。圖中共接種5個(gè)區(qū)域,故接種環(huán)至少需要進(jìn)行6次灼燒滅菌處理。微生物培養(yǎng)過(guò)程中,易產(chǎn)生冷凝水,為防止水珠滴在培養(yǎng)基表面造成污染,培養(yǎng)時(shí)需將平板倒置。(4)用稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)活菌數(shù)目時(shí),要以菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)的記錄為最終結(jié)果,這樣可以防止因遺漏而導(dǎo)致統(tǒng)計(jì)結(jié)果偏小。 答案:(1)瓊脂 前 (2)玻璃器皿和金屬用具 (3)6 倒置 避免培養(yǎng)基被污染和防止培養(yǎng)基水分過(guò)快揮發(fā) (4)菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)的記錄 3.臨床使用抗生素前,有時(shí)需要做細(xì)菌耐藥實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)時(shí),首先要從病人身上獲取少量樣本,然后按照一定的實(shí)驗(yàn)步驟操作,以確定某致病菌對(duì)不同抗生素的敏感性?;卮鹣铝袉?wèn)題: (1)為了從樣本中獲取致病菌單菌落,可用________法或________法將樣本接種于固體培養(yǎng)基表面,經(jīng)過(guò)選擇培養(yǎng)、鑒別等步驟獲得。 (2)取該單菌落適當(dāng)稀釋?zhuān)胈_______法接種于固體培養(yǎng)基表面,在37 ℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h,使其均勻生長(zhǎng),布滿平板。 (3)為了檢測(cè)該致病菌對(duì)于抗生素的敏感性,將分別含有A、B、C、D四種抗生素的濾紙片均勻置于該平板上的不同位置,培養(yǎng)一段時(shí)間后,含A的濾紙片周?chē)霈F(xiàn)透明圈,說(shuō)明該致病菌對(duì)抗生素A________;含B的濾紙片周?chē)鷽](méi)有出現(xiàn)透明圈,說(shuō)明該致病菌對(duì)抗生素B________;含C的濾紙片周?chē)耐该魅Ρ群珹的小,說(shuō)明____________________;含D的濾紙片周?chē)耐该魅σ脖群珹的小,且透明圈中出現(xiàn)了一個(gè)菌落,在排除雜菌污染的情況下,此菌落很可能是抗生素D的________。 (4)根據(jù)上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果,為達(dá)到抗菌目的,最好應(yīng)選用抗生素________。 解析:(1)實(shí)驗(yàn)室中對(duì)微生物純化培養(yǎng)時(shí),常用的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法。(2)若讓已經(jīng)獲得的單個(gè)菌落在固體培養(yǎng)基上大量且均勻繁殖,常用玻璃涂布器把稀釋的菌液均勻涂滿整個(gè)平板。(3)對(duì)某種抗生素越敏感的致病菌,在該抗生素存在的范圍內(nèi),越不易生存,形成的透明圈就越大。但是,如果在透明圈中還有菌落生存,則說(shuō)明這個(gè)菌落的細(xì)菌耐藥性很強(qiáng)。(4)通過(guò)(3)可知,在應(yīng)用時(shí),要想殺死某致病菌,就得選擇能使該致病菌大量死亡,即產(chǎn)生的透明圈大的那種抗生素。 答案:(1)平板劃線 稀釋涂布平板 (2)稀釋涂布平板 (3)敏感 不敏感 該致病菌對(duì)C的敏感性比對(duì)A的弱 耐藥菌 (4)A 4.(2018吉林長(zhǎng)春模擬)下面是篩選抗鏈霉素大腸桿菌的實(shí)驗(yàn)步驟及相關(guān)圖解。 實(shí)驗(yàn)步驟: ①把大量對(duì)鏈霉素敏感的大腸桿菌接種在不含鏈霉素的培養(yǎng)基1的表面,進(jìn)行培養(yǎng)。 ②待其長(zhǎng)出密集的小菌落后,用影印法接種到不含鏈霉素的培養(yǎng)基2上,隨即再影印到含有鏈霉素的培養(yǎng)基3上,進(jìn)行培養(yǎng)。 ③在培養(yǎng)基3上出現(xiàn)了個(gè)別抗鏈霉素的菌落,將其挑選出。 請(qǐng)回答下列問(wèn)題: (1)配制培養(yǎng)基時(shí)除了滿足基本的營(yíng)養(yǎng)條件外,還需滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、________、________的要求。 (2)從功能上看,含有鏈霉素的培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基。若在培養(yǎng)基中加入伊紅和美藍(lán),則培養(yǎng)皿中長(zhǎng)出的菌落顏色為_(kāi)_______。由圖可知,1號(hào)培養(yǎng)基接種的方法為_(kāi)___________。 (3)對(duì)培養(yǎng)基2和3進(jìn)行比較,在培養(yǎng)基2上找到與3上相應(yīng)的菌落,挑取其中一個(gè)菌落接種到________(填“含鏈霉素”或“不含鏈霉素”)的培養(yǎng)基上,如果有較多的菌落出現(xiàn),則說(shuō)明該抗性基因突變發(fā)生在該菌接觸鏈霉素之________(填“前”或“后”)。 (4)培養(yǎng)基3中的菌落比1、2中的菌落少很多,這說(shuō)明基因突變具有________的特點(diǎn)。 解析:(1)配制培養(yǎng)基時(shí)在提供幾種基本營(yíng)養(yǎng)條件的基礎(chǔ)上,還需滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。(2)鏈霉素是抗生素,對(duì)大腸桿菌具有選擇作用。在伊紅和美藍(lán)培養(yǎng)基上,大腸桿菌菌落顏色為黑色。由題圖可知,1號(hào)培養(yǎng)基接種的方法為稀釋涂布平板法。(3)培養(yǎng)基2和培養(yǎng)基3上相同的菌落,是具有相同性狀的大腸桿菌形成的,將培養(yǎng)基2中一個(gè)相應(yīng)菌落接種到含鏈霉素的培養(yǎng)基上,若出現(xiàn)較多的菌落,則說(shuō)明該抗性基因突變發(fā)生在該菌接觸鏈霉素之前。(4)抗鏈霉素性狀是大腸桿菌基因突變后獲得的性狀,3號(hào)培養(yǎng)皿中的菌落比1號(hào)、2號(hào)中的菌落少很多,這說(shuō)明基因突變頻率很低。 答案:(1)pH 氧氣 (2)選擇 黑色 稀釋涂布平板法 (3)含鏈霉素 前 (4)低頻性 5.(2018河北邯鄲一模)某化工廠的污水池中含有一種有害的難以降解的有機(jī)化合物A。研究人員用化合物A、磷酸鹽、鎂鹽以及微量元素配制的培養(yǎng)基,成功篩選到能高效降解化合物A的細(xì)菌(目的菌)。實(shí)驗(yàn)的主要步驟如圖所示。請(qǐng)分析回答下列問(wèn)題: (1)培養(yǎng)基中加入化合物A的目的是________________,這種培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基。 (2)“目的菌”生長(zhǎng)所需的氮源和碳源是來(lái)自培養(yǎng)基中的________。實(shí)驗(yàn)需要振蕩培養(yǎng),由此推測(cè)“目的菌”的代謝類(lèi)型是____________。 (3)在上述實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程中,獲得純凈“目的菌”的關(guān)鍵是________________。 (4)轉(zhuǎn)為固體培養(yǎng)基時(shí),常采用平板劃線的方法進(jìn)行接種,此過(guò)程中所用的接種工具是________,操作時(shí)采用的滅菌方法是________。 (5)實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,使用過(guò)的培養(yǎng)基應(yīng)該進(jìn)行滅菌處理才能倒掉,這樣做的目的是________________________________________________________________________。 (6)某同學(xué)計(jì)劃統(tǒng)計(jì)污水池中“目的菌”的總數(shù),他選用104、105、106稀釋液進(jìn)行平板劃線,每種稀釋液都設(shè)置了3個(gè)培養(yǎng)皿,從設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)的角度看,還應(yīng)設(shè)置的一組對(duì)照實(shí)驗(yàn)是_________________________,此對(duì)照實(shí)驗(yàn)的目的是______________________________。 解析:(1)該實(shí)驗(yàn)的目的是篩選“目的菌”,故培養(yǎng)基中添加的化合物A起選擇作用。(2)微生物正常生長(zhǎng)需要碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽等,由培養(yǎng)基中添加的物質(zhì)種類(lèi)知:化合物A應(yīng)該給微生物生長(zhǎng)提供碳源、氮源。培養(yǎng)過(guò)程需振蕩,說(shuō)明目的菌是需氧型微生物。(6)統(tǒng)計(jì)污水池中的“目的菌”時(shí)應(yīng)設(shè)置空白對(duì)照,以用于檢驗(yàn)培養(yǎng)基是否滅菌嚴(yán)格。 答案:(1)篩選目的菌 選擇 (2)化合物A 異養(yǎng)需氧型 (3)防止外來(lái)雜菌污染 (4)接種環(huán) 灼燒滅菌 (5)防止造成環(huán)境污染 (6)不接種的空白培養(yǎng)基 檢驗(yàn)培養(yǎng)基滅菌是否合格- 1.請(qǐng)仔細(xì)閱讀文檔,確保文檔完整性,對(duì)于不預(yù)覽、不比對(duì)內(nèi)容而直接下載帶來(lái)的問(wèn)題本站不予受理。
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