生物人教版選修3檢測(cè):專(zhuān)題1 1.1 DNA重組技術(shù)的基本工具 Word版含解析
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1、 專(zhuān)題1 基因工程 1.1 DNA重組技術(shù)的基本工具 一、選擇題 題型一 對(duì)基因工程的誕生及概念的理解 1.科學(xué)家將發(fā)光基因?qū)霟煵菁?xì)胞內(nèi),培育出了發(fā)光的煙草,以下有關(guān)該過(guò)程中應(yīng)用的技術(shù),敘述正確的是( ) A.該技術(shù)是在細(xì)胞水平上進(jìn)行設(shè)計(jì)和施工的 B.該技術(shù)的操作環(huán)境是在生物體內(nèi) C.該技術(shù)的原理是基因突變 D.該技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)是定向產(chǎn)生人類(lèi)需要的生物類(lèi)型 答案 D 解析 基因工程是指按照人們的愿望,進(jìn)行嚴(yán)格的設(shè)計(jì),并通過(guò)體外DNA重組和轉(zhuǎn)基因等技術(shù),賦予生物以新的遺傳特性,從而創(chuàng)造出更符合人們需要的新
2、的生物類(lèi)型和生物產(chǎn)品,D正確;該技術(shù)是基因工程技術(shù),是在DNA分子水平上進(jìn)行設(shè)計(jì)和施工的,A錯(cuò)誤;該技術(shù)的操作環(huán)境是在生物體外,B錯(cuò)誤;基因工程的生物學(xué)原理是基因重組,C錯(cuò)誤。 2.下列敘述符合基因工程概念的是( ) A.在細(xì)胞內(nèi)直接將目的基因與宿主細(xì)胞的遺傳物質(zhì)進(jìn)行重組,賦予生物新的遺傳特性 B.將人的干擾素基因重組到質(zhì)粒后導(dǎo)入大腸桿菌,獲得能產(chǎn)生人的干擾素的菌株 C.用紫外線照射青霉菌,使其DNA發(fā)生改變,通過(guò)篩選獲得青霉素高產(chǎn)菌株 D.自然界中天然存在的噬菌體自行感染細(xì)菌后其DNA整合到細(xì)菌DNA上 答案 B 解析 基因工程不能在生物細(xì)胞內(nèi)直接將目的基因與宿主細(xì)胞的遺傳物
3、質(zhì)進(jìn)行重組,不符合基因工程的概念,A錯(cuò)誤;將人的干擾素基因重組到質(zhì)粒后導(dǎo)入大腸桿菌,獲得能產(chǎn)生人的干擾素的菌株,符合基因工程的概念,B正確;用紫外線照射青霉菌,使其DNA發(fā)生改變,通過(guò)篩選獲得青霉素高產(chǎn)菌株,屬于誘變育種,不符合基因工程的概念,C錯(cuò)誤;基因工程是通過(guò)體外DNA重組和轉(zhuǎn)基因等技術(shù),賦予生物新的遺傳特性,噬菌體自行感染細(xì)菌并將自身DNA導(dǎo)入細(xì)菌細(xì)胞不符合基因工程的概念,D錯(cuò)誤。 題型二 限制酶來(lái)源及作用 3.下列有關(guān)基因工程中限制酶的描述,正確的是( ) A.限制酶只能識(shí)別6個(gè)或8個(gè)脫氧核苷酸組成的序列 B.限制酶的活性受溫度的影響 C.限制酶能識(shí)別和切割RNA和D
4、NA D.限制酶只能從原核生物中提取 答案 B 解析 限制酶能夠識(shí)別并切割雙鏈DNA分子上特定的核苷酸序列,大多數(shù)限制酶能夠識(shí)別由6個(gè)核苷酸組成的序列,少數(shù)可以識(shí)別由4、5或者8個(gè)核苷酸組成的序列,A、C錯(cuò)誤;限制酶的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì),活性受溫度影響,B正確;限制酶主要是從原核生物中分離純化出來(lái)的,在真核生物細(xì)胞內(nèi)也可能存在,例如酵母菌,D錯(cuò)誤。 4.下列關(guān)于限制性核酸內(nèi)切酶的說(shuō)法錯(cuò)誤的是( ) A.限制性核酸內(nèi)切酶主要是從微生物細(xì)胞中分離純化的 B.限制性核酸內(nèi)切酶不能將目的基因連接到不同的載體上 C.一種限制性核酸內(nèi)切酶只能識(shí)別一種特定的核苷酸 D.限制性核酸內(nèi)切酶既可切
5、割鏈狀DNA也可切割環(huán)狀DNA 答案 C 解析 限制性核酸內(nèi)切酶主要是從原核生物中分離純化出來(lái)的,A正確;把目的基因連接到載體上使用的酶是DNA連接酶,B正確;通常一種限制性核酸內(nèi)切酶只能識(shí)別一種特定的核苷酸序列,而非核苷酸,C錯(cuò)誤。 5.限制酶是一種核酸切割酶,可辨識(shí)并切割DNA分子上特定的核苷酸序列。如圖所示為四種限制酶BamHⅠ、EcoRⅠ、HindⅢ以及BglⅡ的識(shí)別序列。箭頭表示每一種限制酶的特定切割部位,其中哪兩種限制酶所切割出來(lái)的DNA片段末端可以互補(bǔ)黏合并且正確的末端互補(bǔ)序列是( ) A.BamHⅠ和EcoRⅠ;末端互補(bǔ)序列—AATT— B.BamHⅠ和Hind
6、Ⅲ;末端互補(bǔ)序列—GATC— C.EcoRⅠ和HindⅢ;末端互補(bǔ)序列—AATT— D.BamHⅠ和BglⅡ;末端互補(bǔ)序列—GATC— 答案 D 解析 限制酶BamHⅠ與BglⅡ雖然識(shí)別的核苷酸序列不同,但切割后露出的黏性末端相同,故兩種末端序列可以互補(bǔ)黏合。 題型三 DNA連接酶分類(lèi)及作用 6.“分子縫合針”——DNA連接酶“縫合”的部位是( ) A.堿基對(duì)之間的氫鍵 B.堿基與脫氧核糖 C.雙鏈DNA片段間的磷酸二酯鍵 D.脫氧核糖與脫氧核糖 答案 C 解析 相鄰的兩個(gè)脫氧核苷酸之間由磷酸和脫氧核糖形成的磷酸二酯鍵連接,DNA連接酶連接的是此化學(xué)鍵。 7.下
7、列有關(guān)DNA連接酶的說(shuō)法,錯(cuò)誤的是( ) A.DNA連接酶可以將限制酶切開(kāi)的雙鏈DNA片段“縫合”起來(lái) B.DNA連接酶根據(jù)功能可以分為E·coli DNA連接酶和T4 DNA連接酶 C.DNA連接酶能將雙鏈DNA片段互補(bǔ)的黏性末端之間連接起來(lái),而不能在雙鏈DNA片段平末端進(jìn)行連接 D.DNA連接酶最初是從原核細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)的 答案 C 解析 DNA連接酶分為E·coli DNA連接酶和T4 DNA連接酶,這兩種酶都能將雙鏈DNA片段互補(bǔ)的黏性末端連接起來(lái),其中T4 DNA連接酶還可以連接平末端,C錯(cuò)誤。 8.在基因工程操作過(guò)程中,E·coli DNA連接酶的作用是( ) A.
8、將任意兩個(gè)DNA分子連接起來(lái) B.連接具有相同黏性末端的DNA分子,包括DNA分子的基本骨架和堿基對(duì)之間的氫鍵 C.只連接具有相同黏性末端的DNA分子的基本骨架,即磷酸二酯鍵 D.只連接具有相同黏性末端的DNA分子堿基對(duì)之間的氫鍵 答案 C 解析 E·coli DNA連接酶能將雙鏈DNA片段互補(bǔ)的黏性末端連接起來(lái),恢復(fù)被限制酶切開(kāi)的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵,故A、B、D錯(cuò)誤,C正確。 題型四 載體的功能和特點(diǎn) 9.基因工程載體必須具備的條件中,錯(cuò)誤的是( ) A.能在受體細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存 B.具有多個(gè)限制酶切點(diǎn),以便與外源基因連接 C.能進(jìn)入受體細(xì)胞中并控制其新
9、陳代謝過(guò)程 D.在限制酶切點(diǎn)外必須含有標(biāo)記基因,便于篩選 答案 C 解析 作為基因工程的載體必須能夠在受體細(xì)胞內(nèi)復(fù)制并穩(wěn)定保存,有一個(gè)至多個(gè)限制酶的切點(diǎn),具有某些標(biāo)記基因,A、B、D正確;載體進(jìn)入受體細(xì)胞后不能影響受體細(xì)胞正常的代謝活動(dòng),C錯(cuò)誤。 10.下列關(guān)于質(zhì)粒的敘述,正確的是( ) A.質(zhì)粒是廣泛存在于細(xì)菌細(xì)胞中的一種顆粒狀細(xì)胞器 B.質(zhì)粒是細(xì)胞質(zhì)中能夠自主復(fù)制的小型環(huán)狀DNA分子 C.質(zhì)粒上有細(xì)菌生活所必需的全部基因 D.質(zhì)粒的復(fù)制過(guò)程一定是在宿主細(xì)胞外獨(dú)立進(jìn)行的 答案 B 解析 質(zhì)粒是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、獨(dú)立于細(xì)菌擬核DNA之外,并具有自我復(fù)制能力的很小的雙鏈
10、環(huán)狀DNA分子,細(xì)菌為原核生物,沒(méi)有細(xì)胞器,A錯(cuò)誤,B正確;細(xì)菌生活所必需的基因分布在擬核DNA上,質(zhì)粒上也有基因,如標(biāo)記基因,但不是必需基因,C錯(cuò)誤;質(zhì)粒進(jìn)入受體細(xì)胞后,在細(xì)胞中進(jìn)行自我復(fù)制,或整合到受體細(xì)胞染色體DNA上,隨染色體DNA進(jìn)行同步復(fù)制,D錯(cuò)誤。 11.質(zhì)粒之所以能作為基因工程的載體,是由于它( ) A.含蛋白質(zhì),從而能完成生命活動(dòng) B.能夠自我復(fù)制 C.是RNA,能夠指導(dǎo)蛋白質(zhì)的合成 D.具有環(huán)狀結(jié)構(gòu),能夠攜帶目的基因 答案 B 解析 質(zhì)粒是一種小型環(huán)狀DNA分子,不含蛋白質(zhì),A、C錯(cuò)誤;質(zhì)粒在受體細(xì)胞中能夠自我復(fù)制,從而保持連續(xù)性,B正確;質(zhì)粒具有環(huán)狀結(jié)構(gòu),
11、但不是作為基因工程載體的必備條件,D錯(cuò)誤。 12.限制酶MunⅠ和限制酶EcoRⅠ的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)分別是—C↓AATTG—和—G↓AATTC—。如圖表示四種質(zhì)粒和含目的基因的DNA片段,其中,箭頭所指部位為限制酶的識(shí)別位點(diǎn),質(zhì)粒的陰影部分表示標(biāo)記基因。適于作為圖示目的基因載體的質(zhì)粒是( ) 答案 A 解析 用限制酶EcoRⅠ切割含目的基因的DNA片段,可以獲得目的基因,產(chǎn)生的黏性末端為—AATT—。用限制酶MunⅠ切割A(yù)項(xiàng)中質(zhì)粒后,不會(huì)破壞標(biāo)記基因,而且還能產(chǎn)生與目的基因兩側(cè)黏性末端相同的末端,適于作為目的基因的載體,A正確;B項(xiàng)中的質(zhì)粒沒(méi)有標(biāo)記基因,不適于作為目的基因的載體,
12、B錯(cuò)誤;C項(xiàng)、D項(xiàng)中的質(zhì)粒含有標(biāo)記基因,但用限制酶切割后會(huì)被破壞,因此不適于作為目的基因的載體,C、D錯(cuò)誤。 二、非選擇題 13.下列是基因工程的有關(guān)問(wèn)題,請(qǐng)回答: (1)限制性核酸內(nèi)切酶可以識(shí)別雙鏈DNA分子中的特定核苷酸序列,并可以使每條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的______________(填化學(xué)鍵名稱(chēng))斷裂,形成的末端總體可分為兩種類(lèi)型,分別是____________________。 (2)目的基因和載體重組時(shí)需要的工具酶是______________,與限制性核酸內(nèi)切酶相比,它對(duì)所重組的DNA兩端堿基序列________(填“有”或“無(wú)”)專(zhuān)一性要求。 (
13、3)如圖表示的是構(gòu)建表達(dá)載體時(shí)的某種質(zhì)粒與目的基因。已知限制酶Ⅰ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是—G↓GATCC—,限制酶Ⅱ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是—↓GATC—。 分析可知,最好選擇限制酶________切割質(zhì)粒,限制酶________切割目的基因所在的DNA片段,這樣做的好處分別是___________________________ _____________________________________________、 ________________________________________________________________________。 答案 (1)磷酸二酯鍵 黏
14、性末端和平末端 (2)DNA連接酶 無(wú) (3)Ⅰ?、颉∠拗泼涪袂懈钯|(zhì)粒不會(huì)把兩個(gè)標(biāo)記基因都破壞 目的基因兩端均有限制酶Ⅱ的識(shí)別序列 解析 (1)限制性核酸內(nèi)切酶作用的化學(xué)鍵是磷酸二酯鍵。限制性核酸內(nèi)切酶切割DNA分子后形成平末端或黏性末端。 (2)DNA連接酶能將雙鏈DNA片段“縫合”起來(lái),恢復(fù)被限制酶切開(kāi)的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵,對(duì)所重組的DNA兩端的堿基序列無(wú)專(zhuān)一性。 (3)限制酶Ⅰ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是—G↓GATCC—,限制酶Ⅱ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是—↓GATC—,目的基因的兩端皆有限制酶Ⅱ的識(shí)別序列,用限制酶Ⅰ切割質(zhì)粒只會(huì)破壞一個(gè)標(biāo)記基因,用限制酶Ⅱ切割質(zhì)粒則會(huì)將兩個(gè)標(biāo)記基因全部
15、破壞。 14.啤酒酵母菌是啤酒生產(chǎn)上常用的典型的發(fā)酵酵母菌,除用于釀造啤酒及其他的飲料酒外,還可發(fā)酵面包,菌體維生素、蛋白質(zhì)含量高,可作食用、藥用和飼料。科學(xué)家將大麥細(xì)胞的LTP1基因植入啤酒酵母菌中,獲得的啤酒酵母菌種可產(chǎn)生LTP1蛋白,并釀出泡沫豐富的啤酒?;镜牟僮鬟^(guò)程如下: (1)該技術(shù)定向改變了啤酒酵母菌的性狀,這在可遺傳變異的來(lái)源中屬于________。 (2)為了將LTP1基因?qū)虢湍妇?xì)胞內(nèi),所用的載體是________。 (3)要使載體與LTP1基因連接,首先應(yīng)使用________進(jìn)行切割。假如載體被切割后,得到的分子末端序列為,則能與該載體連接的目的基因分子末端
16、有(多選)________,其中與是同一種限制酶切割的是________。 A. B. C. D. (4)將LTP1基因片段與載體“縫合”起來(lái),需要________酶,常用的有________________、__________________,它們連接的化學(xué)鍵是____________,其中能“縫合”兩個(gè)雙鏈DNA片段的平末端的酶是____________。 答案 (1)基因重組 (2)(大腸桿菌的)質(zhì)粒 (3)限制酶 ABC A (4)DNA連接 E·coli DNA連接酶 T4DNA連接酶 磷酸二酯鍵 T4DNA連接酶 解析 (1)由圖可知該技術(shù)屬于基因工程,該變異
17、屬于基因重組。 (2)據(jù)圖可以看出,載體為大腸桿菌的質(zhì)粒。 (3)與具有相同黏性末端的是A、B、C,它們能相互連接,其中A與是由同一種限制酶切割的。 (4)將LTP1基因片段與載體“縫合”起來(lái)需要的酶是DNA連接酶,常用的有E·coli DNA連接酶、T4DNA連接酶,它們連接的化學(xué)鍵是磷酸二酯鍵,而起到“縫合”平末端作用的連接酶是T4DNA連接酶。 一、選擇題 1.下列有關(guān)基因工程誕生的說(shuō)法,不正確的是( ) A.基因工程是在生物化學(xué)、分子生物學(xué)和微生物學(xué)等學(xué)科的基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的 B.工具酶和載體的發(fā)現(xiàn)使基因工程的實(shí)施成為可能 C.遺傳密碼的破譯為基因的分離和合成等
18、提供了理論依據(jù) D.基因工程必須在同物種間進(jìn)行 答案 D 解析 基因工程可在不同物種間進(jìn)行,它可打破生殖隔離的界限,定向改造生物的遺傳性狀,D錯(cuò)誤。 2.下列有關(guān)限制性核酸內(nèi)切酶的敘述中正確的是( ) A.用限制酶切割一個(gè)DNA分子中部,獲得一個(gè)目的基因時(shí),被水解的磷酸二酯鍵有2個(gè) B.限制性核酸內(nèi)切酶識(shí)別序列越短,則該序列在DNA中出現(xiàn)的幾率就越大 C.—CATG↓—和—G↓GATCC—序列被限制性核酸內(nèi)切酶切出的黏性末端游離堿基數(shù)不同 D.只有用相同的限制性核酸內(nèi)切酶處理含目的基因的DNA片段和質(zhì)粒,才能形成重組質(zhì)粒 答案 B 解析 用限制性核酸內(nèi)切酶切割一個(gè)DNA分
19、子中部,獲得一個(gè)目的基因時(shí),需要切割目的基因的兩側(cè),因此要斷裂4個(gè)磷酸二酯鍵,A錯(cuò)誤;限制性核酸內(nèi)切酶識(shí)別序列越短,則該序列在DNA中出現(xiàn)的幾率就越大,B正確;—CATG↓—和—G↓GATCC—序列被限制酶切出的黏性末端游離堿基數(shù)均為四個(gè),C錯(cuò)誤;不同的限制性核酸內(nèi)切酶切割也可能形成相同的末端序列,因此不同限制酶處理含目的基因的DNA片段和質(zhì)粒,也能形成重組質(zhì)粒,D錯(cuò)誤。 3.下列說(shuō)法中,正確的是( ) A.DNA連接酶最初是從人體細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)的 B.限制酶的識(shí)別序列一定是GAATTC C.利用載體在宿主細(xì)胞內(nèi)對(duì)目的基因進(jìn)行大量復(fù)制的過(guò)程可稱(chēng)為“克隆” D.限制酶能識(shí)別雙鏈DNA分子
20、的某種特定的核苷酸序列,并使鏈間的氫鍵斷裂 答案 C 解析 DNA連接酶最初是從原核細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)的,A錯(cuò)誤;限制酶有多種,每種限制酶都能識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列,并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂,因此不是所有限制酶的識(shí)別序列都是GAATTC,B、D錯(cuò)誤;利用載體在宿主細(xì)胞內(nèi)對(duì)目的基因進(jìn)行大量復(fù)制的過(guò)程可稱(chēng)為分子水平上的“克隆”,C正確。 4.下列關(guān)于DNA連接酶作用的敘述,正確的是( ) A.不能將單個(gè)核苷酸加到某DNA片段末端 B.一種DNA連接酶只能連接某一特定序列的DNA片段 C.連接兩條DNA鏈上堿基之間的氫鍵 D.只能將雙鏈DNA片
21、段互補(bǔ)的黏性末端之間連接起來(lái),而不能將雙鏈DNA片段平末端之間進(jìn)行連接 答案 A 解析 DNA連接酶的作用是連接兩個(gè)DNA片段,形成磷酸二酯鍵,A正確,C錯(cuò)誤;DNA連接酶對(duì)所重組的DNA兩端堿基序列無(wú)專(zhuān)一性要求,B錯(cuò)誤;T4DNA連接酶既可以連接DNA片段互補(bǔ)的黏性末端,也可以連接平末端,但連接平末端的效率比較低,D錯(cuò)誤。 5.如圖所示DNA分子的某一片段,其中①②③分別表示某種酶的作用部位,則相應(yīng)的酶依次是( ) A.DNA連接酶、限制性核酸內(nèi)切酶、解旋酶 B.限制性核酸內(nèi)切酶、解旋酶、DNA連接酶 C.解旋酶、限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶 D.限制性核酸內(nèi)切酶、DN
22、A連接酶、解旋酶 答案 C 解析 使氫鍵斷裂的酶是解旋酶,限制性核酸內(nèi)切酶使相鄰兩個(gè)脫氧核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂,連接DNA片段之間的磷酸二酯鍵的酶是DNA連接酶。 6.下列有關(guān)酶的敘述,正確的是( ) A.同種限制酶既可以切割目的基因所在片段又可以切割質(zhì)粒,因此不具備專(zhuān)一性 B.RNA聚合酶和DNA聚合酶都可以催化遺傳信息的轉(zhuǎn)錄 C.限制酶不能切割煙草花葉病毒的核酸 D.DNA連接酶可催化脫氧核苷酸鏈間形成氫鍵 答案 C 解析 一種限制酶只能識(shí)別一種特定的核苷酸序列,并在特定的位點(diǎn)上切割DNA分子,因此具有專(zhuān)一性,A錯(cuò)誤;DNA聚合酶不能催化遺傳信息的轉(zhuǎn)錄,B錯(cuò)誤;煙草
23、花葉病毒的核酸為RNA,不能用限制酶切割,C正確;DNA連接酶可催化DNA片段間的磷酸二酯鍵的形成,D錯(cuò)誤。 7.下列有關(guān)基因工程的敘述正確的是( ) A.DNA連接酶的作用是使互補(bǔ)的黏性末端之間發(fā)生堿基A與T,C與G之間的連接 B.基因工程中使用的載體最常見(jiàn)的是大腸桿菌 C.載體上的抗性基因有利于篩選含重組DNA的細(xì)胞并可促進(jìn)目的基因的表達(dá) D.基因工程造成的變異,實(shí)質(zhì)上相當(dāng)于人為的基因重組,但卻產(chǎn)生了定向變異 答案 D 解析 DNA連接酶連接的是磷酸二酯鍵,A錯(cuò)誤;基因工程中使用的載體最常見(jiàn)的是質(zhì)粒,B錯(cuò)誤;載體上的抗性基因有利于篩選含重組DNA的細(xì)胞,但不能促進(jìn)目的基因的
24、表達(dá),C錯(cuò)誤;基因工程能按照人們的意愿定向改造生物的性狀,其原理是基因重組,D正確。 8.對(duì)如圖所示黏性末端的說(shuō)法正確的是( ) A.甲、乙、丙黏性末端是由兩種限制性核酸內(nèi)切酶作用產(chǎn)生的 B.圖乙中的酶切位點(diǎn)在A與G之間 C.如果甲中的G突變?yōu)锳,則該限制性核酸內(nèi)切酶不能識(shí)別該切割位點(diǎn) D.構(gòu)建基因表達(dá)載體所用限制酶和DNA連接酶分別作用于a處和b處 答案 C 解析 根據(jù)圖示結(jié)果可知,切割甲的限制酶的識(shí)別序列是—GAATTC—,切割乙的限制酶的識(shí)別序列是—CAATTG—,切割丙的限制酶的識(shí)別序列是—CTTAAG—,故甲、乙、丙三個(gè)黏性末端是由三種限制酶切割產(chǎn)生的,A錯(cuò)誤;圖
25、乙中的酶切位點(diǎn)在A與C之間,而不是A與G之間,B錯(cuò)誤;限制酶能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列,如果甲中的G發(fā)生突變,則限制酶不能識(shí)別該切割位點(diǎn),C正確;構(gòu)建基因表達(dá)載體所用的限制酶和DNA連接酶的作用位點(diǎn)均是磷酸二酯鍵,b處為氫鍵,D錯(cuò)誤。 二、非選擇題 9.下圖表示兩種限制酶識(shí)別DNA分子的特定序列,并在特定位點(diǎn)對(duì)DNA分子進(jìn)行切割的示意圖,請(qǐng)回答以下問(wèn)題: (1)圖中甲和乙代表___________________________________ _____________________________________。 (2)EcoRⅠ、HpaⅠ代表______
26、_______________________________________ _________________。 (3)圖中甲和乙經(jīng)過(guò)相應(yīng)操作均形成兩個(gè)片段,切口的類(lèi)型分別為_(kāi)_______、________。甲中限制酶的切點(diǎn)是________之間,乙中限制酶的切點(diǎn)是________之間。 (4)由圖解可以看出,限制酶的作用特點(diǎn)是__________________________________________________________________________________________________________________________________
27、____________________________。 (5)如果甲中G堿基發(fā)生基因突變,可能發(fā)生的情況是____________________。 答案 (1)有特定脫氧核苷酸序列的DNA片段 (2)兩種不同的限制酶(或限制性核酸內(nèi)切酶) (3)黏性末端 平末端 G、A T、A (4)能識(shí)別雙鏈DNA分子的特定脫氧核苷酸序列,并從特定的位點(diǎn)將DNA分子切開(kāi) (5)限制酶不能識(shí)別切割位點(diǎn) 10.下表中列出了幾種限制酶識(shí)別序列及其切割位點(diǎn),圖1、圖2中箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn),請(qǐng)回答下列問(wèn)題: (1)一個(gè)圖1所示的質(zhì)粒分子經(jīng)SmaⅠ切割前后,分別含有_____
28、___、________個(gè)游離的磷酸基團(tuán)。 (2)若對(duì)圖中質(zhì)粒進(jìn)行改造,插入的SmaⅠ酶切位點(diǎn)越多,質(zhì)粒的熱穩(wěn)定性越________。 (3)要用圖1中的質(zhì)粒和圖2中外源DNA構(gòu)建重組質(zhì)粒,不能使用SmaⅠ切割,原因是__________________________________________________________ ______________________________________________________________________________________。 (4)圖1中的質(zhì)粒本質(zhì)為_(kāi)___________,具有____________能力
29、,是基因工程中________的載體。除質(zhì)粒外,基因工程中還可以用____________、__________________等作為載體。 (5)為了獲取重組質(zhì)粒,將切割后的質(zhì)粒與目的基因片段混合,并加入________酶。 答案 (1)0 2 (2)高 (3)SmaⅠ會(huì)破壞質(zhì)粒的抗性基因、外源DNA中的目的基因 (4)環(huán)狀DNA分子 自我復(fù)制 最常用 λ噬菌體衍生物 動(dòng)植物病毒 (5)DNA連接 解析 (1)質(zhì)粒被切割前為環(huán)狀DNA分子,所有磷酸基團(tuán)均參與形成磷酸二酯鍵,故不含游離的磷酸基團(tuán)。從圖1可以看出質(zhì)粒上只含有一個(gè)SmaⅠ的切割位點(diǎn),因此質(zhì)粒變成線性DNA分子,含2個(gè)游離的磷
30、酸基團(tuán)。 (2)由題目可知SmaⅠ識(shí)別的DNA序列只有G和C,而G和C之間形成3個(gè)氫鍵,所以插入的SmaⅠ酶切位點(diǎn)越多,質(zhì)粒的熱穩(wěn)定性越高。 (3)質(zhì)粒中的抗生素抗性基因?yàn)闃?biāo)記基因,由圖1、圖2知標(biāo)記基因和外源DNA中的目的基因中均含有SmaⅠ酶的識(shí)別序列,都可以被SmaⅠ酶切割。 (4)質(zhì)粒本質(zhì)為環(huán)狀DNA分子,在受體細(xì)胞中可以自我復(fù)制,是基因工程中最常用的載體,除質(zhì)粒外,基因工程中還可以用λ噬菌體衍生物、動(dòng)植物病毒等作為載體。 (5)將切割后的質(zhì)粒和目的基因連接成重組質(zhì)粒,需要DNA連接酶進(jìn)行連接。 11.如圖為大腸桿菌及質(zhì)粒載體的結(jié)構(gòu)模式圖,據(jù)圖回答下列問(wèn)題。 (1)a代
31、表的物質(zhì)和質(zhì)粒的化學(xué)本質(zhì)都是____________,二者還具有其他共同點(diǎn),如①______________________,②________________(寫(xiě)出兩條即可)。 (2)若質(zhì)粒DNA分子的切割末端為,則與之連接的目的基因切割末端應(yīng)為_(kāi)_______________;可使用____________把質(zhì)粒和目的基因連接在一起。 (3)氨芐青霉素抗性基因在質(zhì)粒DNA上稱(chēng)為_(kāi)_______,其作用是________________________________________________________________________。 (4)下列常在基因工程中用作載體的是
32、( ) A.蘇云金芽孢桿菌的抗蟲(chóng)基因 B.土壤農(nóng)桿菌中的RNA分子 C.大腸桿菌的質(zhì)粒 D.動(dòng)物細(xì)胞的染色體 答案 (1)DNA ①能夠自我復(fù)制?、诰哂羞z傳效應(yīng) (2) DNA連接酶 (3)標(biāo)記基因 供重組DNA的鑒定和選擇 (4)C 解析 (1)a代表的物質(zhì)是擬核中的DNA分子,質(zhì)粒是細(xì)胞質(zhì)中的DNA分子,二者都是環(huán)狀DNA分子、能夠自我復(fù)制、具有遺傳效應(yīng)、也都具有雙螺旋結(jié)構(gòu)等。 (2)根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則,目的基因的切割末端應(yīng)為;將目的基因與質(zhì)粒連接需要用到DNA連接酶。 (3)質(zhì)粒上的氨芐青霉素抗性基因是標(biāo)記基因,可以用于鑒定和篩選含目的基因(重組DNA)的細(xì)胞。 (4)大腸桿菌的質(zhì)粒是基因工程中常用的載體。
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