即墨實(shí)驗(yàn)高中高二生物導(dǎo)學(xué)案-專題一基因工程 11DNA重組技術(shù)的基本工具
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1、 編號(hào)10 即墨實(shí)驗(yàn)高中高二生物導(dǎo)學(xué)案 編寫人:朱士軍 審核人:顧玉良 編寫時(shí)間:2011-2-20 課題 專題一基因工程 1.1 DNA重組技術(shù)的基本工具 考點(diǎn)解讀 ①簡(jiǎn)單描述基因工程的概念及目的。 ②說出DNA重組技術(shù)的三個(gè)工具及各工具的特點(diǎn)和用途。 ③利用DNA重組技術(shù)的工具解答有關(guān)題目。 學(xué)習(xí)重點(diǎn) DNA重組技術(shù)的三個(gè)工具及各工具的特點(diǎn)和用途 學(xué)習(xí)難點(diǎn) 基因工程載體需要具備的條件 課時(shí) 4課時(shí) 課型 新授課 【知識(shí)回顧】 DNA分子的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)是什么? 噬菌體侵染細(xì)菌的實(shí)驗(yàn) 原核生物的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)是什么? 【知識(shí)點(diǎn)一】基因工程的概念?注
2、意:對(duì)本概念應(yīng)從以下幾個(gè)方面理解: 操作環(huán)境 操作對(duì)象 操作水平 基本過程 結(jié)果 例1.(2005高考廣東)以下有關(guān)基因工程的敘述,正確的是 ( ) A、基因工程是細(xì)胞水平上的生物工程 B、基因工程的產(chǎn)物對(duì)人類都是有益的 C、基因工程產(chǎn)生的變異屬于人工誘變 D、基因工程育種的優(yōu)點(diǎn)之一是目的性強(qiáng) 點(diǎn)評(píng):正確理解基因工程的概念是解題的關(guān)鍵。 【知識(shí)點(diǎn)二】基因工程的三個(gè)基本工具: 1.限制性核酸內(nèi)切酶---“分子手術(shù)刀”來源:
3、 1) 功能: 2) 切割方式: 2.DNA連接酶——“分子縫合針” 1) 分類: 和 2) 作用及作用部位:
4、 3.基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體——“分子運(yùn)輸車” 1)分子運(yùn)載車的分類:常用的是 其他載體 2)運(yùn)載體使用的目的: 3)作為運(yùn)載體必須具備的條件:①
5、 ② ③ ④ 逆向思維:假如運(yùn)載體不具備這些條件會(huì)怎樣? 【討論與研究】注意:你知道DNA水解酶、DNA解旋酶、DNA連接酶、DNA聚合酶的區(qū)別嗎? (1)DNA水解酶:能夠?qū)NA水解成四種脫氧核苷酸,徹底水解成膦酸、脫氧核糖和含氮堿基 (2
6、)DNA解旋酶:能夠?qū)NA或DNA的某一段解成兩條長(zhǎng)鏈,作用的部位是堿基和堿基之間的氫鍵。注意:使DNA解成兩條長(zhǎng)鏈的方法除用解旋酶以外,在適當(dāng)?shù)母邷兀ㄈ?4℃)、重金屬鹽的作用下,也可使DNA解旋。 (3)DNA聚合酶:能將單個(gè)的核苷酸通過磷酸二酯鍵連接成DNA長(zhǎng)鏈。 (4)DNA連接酶:是通過磷酸二酯鍵連接雙鏈DNA的缺口。 注意比較DNA聚合酶和DNA連接酶的異同點(diǎn)。 例2.下列關(guān)于限制酶的說法不正確的是( ) A.限制酶廣泛存在于各種生物中,微生物中很少分布 B.一種限制酶只能識(shí)別一種特定的核苷酸序列 C.不同的限制酶切割DNA的切點(diǎn)不同 D.限制酶的作
7、用是用來提取目的基因 點(diǎn)評(píng):考察有關(guān)限制酶的題目,主要是考察限制酶的特點(diǎn),這一點(diǎn)一定要牢記。 例3.在基因工程中用來完成基因的剪接的工具是( ) A.限制酶和連接酶 B.限制酶和水解酶 C.限制酶和運(yùn)載體 D連接酶和運(yùn)載體 點(diǎn)評(píng):本題注意審題,剪接是既剪又接。 例4.有關(guān)基因工程的敘述正確的是( ) A.限制酶只在獲取目的基因時(shí)才用 B.重組質(zhì)粒的形成是在細(xì)胞內(nèi)完成的 C.質(zhì)粒都可以作為運(yùn)載體 D.蛋白質(zhì)的氨基酸排列順序可以為合成目的基因提供線索 點(diǎn)評(píng):解答本題時(shí)要綜合考慮基因工程的基本工具的特點(diǎn)、條件、適用范圍。 例5.
8、下列哪項(xiàng)通常不被用作基因工程的運(yùn)載體( ) A.細(xì)菌質(zhì)粒 B.噬菌體 C.動(dòng)植物病毒 D.細(xì)菌核區(qū)的DNA 點(diǎn)評(píng):牢記作為運(yùn)載體必須具備的3個(gè)條件是解答本題的關(guān)鍵。 例6.不屬于質(zhì)粒被選為基因運(yùn)載體的理由是( ) A.能復(fù)制 B.有多個(gè)限制酶切點(diǎn) C.具有標(biāo)記基因 D.它是環(huán)狀DNA 【考點(diǎn)三】限制酶所識(shí)別序列的特點(diǎn) 例7.下圖表示限制酶切割某DNA的過程,從圖中可知,該限制酶能識(shí)別的堿基序列及切點(diǎn)是( ) A.CTTAAG,切點(diǎn)在C和T之間 B.CTTAAG,切點(diǎn)在G和A之間 C.GAATTC,切點(diǎn)在G和A之間
9、D.CTTAAC,切點(diǎn)在C和T之間 【走近高考】 (10浙江卷)2.在用基因工程技術(shù)構(gòu)建抗除草劑的轉(zhuǎn)基因煙草過程中,下列操作錯(cuò)誤的是( ) A.用限制性核酸內(nèi)切酶切割煙草茶葉病毒的核酸 B.用DNA連接酶連接經(jīng)切割的抗除草劑基因和載體 C.將重組DNA分子導(dǎo)入原生質(zhì)體 D.用含除草劑的培養(yǎng)基篩選轉(zhuǎn)基因煙草細(xì)胞 【課堂練習(xí)】 1.在基因工程中,科學(xué)家所用的“剪刀”、“針線”和“載體”分別是指( ) A.大腸桿菌病毒、質(zhì)粒、DNA連接酶 B.噬菌體、質(zhì)粒、DNA連接酶 C.DNA限制酶、RNA連接酶、質(zhì)粒 D.DNA限制酶、DNA連接酶、質(zhì)粒
10、2.不屬于質(zhì)粒被選為基因運(yùn)載體的理由是 ( ) A.能復(fù)制 B.有多個(gè)限制酶切點(diǎn) C.具有標(biāo)記基因 D.它是環(huán)狀DNA 3.下列四條DNA分子,彼此間間具有粘性末端的一組是 ( ) T A G G C C A T T A C C G G T A ① ② ③ ④ A.①② B.②③
11、 C.③④ D.②④ 4.質(zhì)粒是基因工程中最常用的運(yùn)載體,它的主要特點(diǎn)是 ①能自主復(fù)制 ②不能自主復(fù)制 ③結(jié)構(gòu)很小 ④蛋白質(zhì) ⑤環(huán)狀RNA ⑥環(huán)狀DNA ⑦能“友好”地“借居” A.①③⑤⑦ B.①④⑥ C.①③⑥⑦ D.②③⑥⑦ 5.有關(guān)基因工程的敘述中,錯(cuò)誤的是 ( ) A.DNA連接酶將黏性未端的堿基對(duì)連接起來 B.限制性內(nèi)切酶用于目的基因的獲得 C.目的基因須由載體導(dǎo)入受體細(xì)胞 D.人工合成目的基因不用限制性內(nèi)切酶 6.實(shí)施基因工程第一步的一種方法是把所需的基因從供體細(xì)胞內(nèi)分離出來,這要利用限性 內(nèi)切酶。一種限制性內(nèi)切酶能
12、識(shí)別DNA子中的GAATTC順序,切點(diǎn)在G和A之間, 這是應(yīng)用了酶的(?。? A.高效性 B.專一性 C.多樣性 D.催化活性受外界條件影響 7.人們常選用的細(xì)菌質(zhì)粒分子往往帶有一個(gè)抗菌素抗性基因,該抗性基因的主要作用是 A . 提高受體細(xì)胞在自然環(huán)境中的耐藥性B. 有利于對(duì)目的基因是否導(dǎo)入進(jìn)行檢測(cè) C. 增加質(zhì)粒分子的分子量 D.便于與外源基因連接 8.下列屬于基因運(yùn)載體所必須具有的條件是(多選) ( ) A
13、、具有某些標(biāo)志基因 B、具有環(huán)狀的DNA分子 C、能夠在宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制 D、具有多種限制性內(nèi)切酶 9.下列哪些可作為基因工程技術(shù)中常用的基因運(yùn)載工具(多選) ( ) A.大腸桿菌 B. 質(zhì)粒 C.動(dòng)物病毒 D. 線粒體 10.在重組DNA技術(shù)中,不常用到的酶是 A、限制性內(nèi)切酶?? B、DNA聚合酶 C、DNA連接酶??????? ?? D、反轉(zhuǎn)錄酶 11.多數(shù)限制性核酸內(nèi)切酶切割后的DNA末端為 A、平頭末端?? B、3突出末端?? C、5突
14、出末端?? D、粘性末端?? 12.在基因工程中通常所使用的質(zhì)粒是 A、細(xì)菌的染色體DNA?? B、細(xì)菌染色體外的DNA C、病毒染色體DNA??? D、噬菌體DNA 13.(2006深圳一模考題)研究人員想將生長(zhǎng)激素基因通過質(zhì)粒介導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞內(nèi),以表達(dá)產(chǎn)生生長(zhǎng)激素。已知質(zhì)粒中存在兩個(gè)抗性基因:A是抗鏈霉素基因,B是抗氨芐青霉素基因,且目的基因不插入到基因A、B中,而大腸桿菌不帶任何抗性基因,則篩選獲得“工程菌”的培養(yǎng)基中的抗抗生素首先應(yīng)該 A、僅有鏈霉素 ?? B、僅有氨芐青霉素 C、同時(shí)有鏈霉素和
15、氨芐青霉素??? D、無鏈霉素和氨芐青霉素 14.(05全國(guó)Ⅰ)鐮刀型細(xì)胞貧血癥的病因是血紅蛋白基因的堿基序列發(fā)生了改變。檢測(cè)這種堿基序列改變必須使用的酶是 A. 解旋酶 B. DNA連接酶 C. 限制性內(nèi)切酶 D、RNA聚合酶 15.(05天津理綜)限制性內(nèi)切酶Ⅰ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是—G↓GATCC—,限制性內(nèi)切酶Ⅱ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是—↓GATC—。在質(zhì)粒上有酶Ⅰ的一個(gè)切點(diǎn),在目的基因的兩側(cè)各有一個(gè)酶Ⅱ的切點(diǎn)。 (1)請(qǐng)畫出質(zhì)粒被限制酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端。 (2)請(qǐng)畫出目的基因兩側(cè)被限制酶Ⅱ切割后所形成的黏性末端。
16、 (3)在DNA連接酶作用下,上述兩種不同限制酶切割后形成的黏性末端能否連接?為什么? 1、1 DNA重組技術(shù)的基本工具 例題1D例題2 A 例題3A 例題4D 例題5D 例題6 D 例題7 C 走近高考A 課堂練習(xí)1、D 2、D 3、D 4、【解析】 質(zhì)粒是細(xì)胞染色體外能夠自主復(fù)制的很小的環(huán)狀的DNA分子,它能“友好”地“借居”在宿主細(xì)胞中。【答案】C 5、A 6、B 7、B 8、AC 9、BC 10、 11、D 12、B 13、C 14、C 15、(1) (2) (3)可以連接。因?yàn)橛蓛煞N不同限制酶切割后形成的黏性末端是相同的(或是可以互補(bǔ)的)
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